SC-120全自动推片染色机在血细胞形态检查中的应用研究

目的分析SC-120全自动推片染色机在血涂片制备及血细胞染色中的效果,并对其在血细胞形态检查中的应用进行评价。方法选择体检健康者、贫血患者、白血病患者及儿科患者的血常规标本,采用SC-120全自动推片染色机和手工方法进行推片染色,由2名有细胞形态经验的检验人员进行血细胞形态检查,分析2种方法对细胞形态识别的影响。结果 SC-120全自动推片染色机的推片效果好,头体尾分明;红细胞、白细胞及血小板染色好,其正常及异常形态均易识别,不同人员识别的准确性及一致性较高。结论 SC-120全自动推片染色机在血涂片制备及血细胞染色的重复性和效果方面优于传统手工涂片染色,减少了推片及染色操作对细胞形态的影响,特别是淋巴细胞和红细胞形态的检验准确性高于传统手工方法,应作为常规推片染色方法用于临床实验室工作。     

Sysmex XN-9000全自动血细胞分析仪性能评价

目的对日本Sysmex公司XN-9000全自动血细胞分析仪(简称XN-9000分析仪)进行性能评价。方法参照多项国际、国内标准对分析仪进行性能评价。结果 XN-9000分析仪批内及批间精密度、携带污染率、线性范围和准确性均符合相关质量控制要求。白细胞分类结果与手工分类比较,中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞相关性较好,嗜碱性粒细胞相关性不太理想。结论 XN-9000分析仪是一种较理想的全自动血细胞分析仪,性能良好,可以满足临床检验工作及疾病诊治的需要。     

DI-60型全自动数字化细胞形态识别分析系统的临床应用

目的评估DI-60型全自动数字化细胞形态识别分析系统(简称DI-60系统)对外周血细胞的认知和分辨能力。方法对随机选取的322份血液标本采用SYSMEX XN-9000全自动血液细胞分析流水线检测后用SP-10自动涂片染色仪进行自动推片、染色,然后使用DI-60系统对已经染色好的血涂片进行血细胞预分析识别,再由有丰富形态学经验的主管技师对预分类的细胞进行复核。结果 DI-60系统对322份血液标本进行白细胞(WBC)预分类,共扫描记录了56 728个细胞及杂质,正确数为51 704个,正确率为91.14%,错误数为5 024,错误率为8.86%。结论 DI-60系统只能对WBC进行预分类,识别WBC分叶中性粒细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、大血小板、血小板聚集、涂抹细胞及人造细胞(杂质)等的正确率较高,均在95%以上,而对变异淋巴细胞、浆细胞等的识别正确率低,均在5%以下。     

XN-9000全自动血液细胞分析仪有核红细胞计数与手工方法验证的探讨

目的探讨日本Sysmex公司生产的XN-9000全自动血液细胞分析流水线有核红细胞(nucleated red blood cell,NRBC)计数,与手工方法进行比较,验证仪器计数结果的准确性。方法对60例全自动血液细胞分析流水线检测出NRBC大于1%的患者的血液标本,制作血液涂片染色后通过传统的显微镜手工方法镜检,验证仪器结果。结果 60例临床标本的NRBC与显微镜计数的结果比较,所有检测值的可信度分析均在可信范围内;相关性比较中,NRBC(%)在1~10和10两组的仪器与手工方法的相关系数(r)分别为0.972 1和0.996 2,差异均无统计学意义(P0.05)。结论无论NRBC值的高低,XN-9000全自动血液细胞分析流水线检测NRBC计数,与手工方法结果比较,均在可信范围内,相关性也较好。仪器检测的NRBC准确可靠,可应用于临床标本的检测。     

某ISO15189认可实验室中Sysmex HST-N302XE推片规则制订与评价

目的在该室Sysmex XE-2100血细胞分析仪已验证的单机模式复检规则基础上,结合国际血细胞复检规则41条,通过对实验数据进行分析,制定出适合该室Sysmex HST-N302XE血细胞分析流水线复检规则。方法将拟定的22条流水线复检规则导入HST-N302XE血细胞分析流水线操作电脑的Labman 4.2程序中,随机检测患者标本共500例,同时人工涂片做显微镜检查,包括细胞形态观察和人工白细胞分类,计算出真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率和涂片复检率。结果将人工显微镜镜检结果导入HST-N302XE血细胞分析流水线操作电脑的Labman 4.2程序中进行统计分析。自动推片率(复检率)为29.2%(146/500),真阳性率为13.0%(65/500),假阳性率为16.2%(81/500),真阴性率为69.2%(346/500),假阴性率为1.6%(8/500)。结论该室血细胞分析流水线HST-N302XE推片规则验证结果表明,假阴性率小于5%,复检率和假阳性率与文献报道基本一致,适用该室HST-N302XE血细胞分析流水线。流水线的应用能够使实验室在减少人力耗费的同时提高工作效率,保障检验质量。     

反应性淋巴细胞、白细胞分类及EB病毒与儿童传染性单核细胞增多症的关系

目的探讨儿童传染性单核细胞增多症反应性淋巴细胞增高(10%)与EB病毒衣壳蛋白Ig M(EBVCA-Ig M)抗体阳性率、白细胞(WBC)分类的关系,为临床诊断传染性单核细胞增多症提供实验室依据。方法采用双盲法分别镜检,判断反应性淋巴细胞。选取反应性淋巴细胞增高(10%)的患儿80例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测EBV-CA-Ig M抗体,采用XE-2100全自动血液分析仪进行WBC分类。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标诊断传染性单核细胞增多症的效能。结果反应性淋巴细胞10%的患儿中传染性单核细胞增多症占81.3%、细菌感染占18.7%;反应性淋巴细胞20%的患儿中传染性单核细胞增多症占100.0%。传染性单核细胞增多症患儿淋巴细胞百分比[(65.76±12.39)%]明显高于细菌感染患儿[(41.57±18.79)%](P0.05)。EBV-CA-Ig M抗体、反应性淋巴细胞、WBC总数、淋巴细胞百分比及单核细胞百分比诊断传染性单核细胞增多症的曲线下面积(AUC)分别为0.854、0.688、0.658、0.848、0.482。结论 EB病毒是引起传染性单核细胞增多症的病因,但部分患儿可出现EBV-CA-Ig M抗体阴性。传染性单核细胞增多症患儿淋巴细胞百分比明显增高。反应性淋巴细胞增高(20%)可用于筛查儿童传染性单核细胞增多症。     

恶性肿瘤类白血病反应的中毒性中性粒细胞的MAXM血液分析仪分析

目的探讨恶性肿瘤伴类白血病反应患者的中毒中性粒细胞是否被MAXM血细胞分析仪误认为嗜碱性粒细胞。方法MAXM血细胞分析仪进行白细胞计数和分类;瑞氏染色镜检白细胞分类;过氧化物酶染色区分中性粒细胞和嗜碱性粒细胞;碱性磷酸酶染色区分类白血病反应。结果26例恶性肿瘤患者用MAXM血细胞分析仪进行白细胞计数为:(28.6±5.7)×109/L;分类为:中性粒细胞49.9%±10.6%,淋巴细胞15.2%±4.3%,单核细胞2.2%±1.2%,嗜酸性粒细胞0.4%±0.3%,嗜碱性粒细胞32.3%±10.2%。镜检分类为:中性粒细胞85.6%±11.8%,淋巴细胞12.9%±5.1%,单核细胞1.5%±1.4%,嗜酸性粒细胞0%,嗜碱性粒细胞0%,其中中毒中性粒细胞为36.5%±7.6%。过氧化物酶染色阳性率为:89.6%±12.3%。中性粒细胞碱性磷酸酶阳性率为83.1%±12.5%,积分395±63。结论MAXM血细胞分析仪把类白血病中毒中性粒细胞误认为嗜碱性粒细胞。     

XN-9000血液分析流水线智能化管理系统的建立及其应用

血液分析流水线的应用为现代医学检验实验室的工作效率和服务质量的提高奠定了基础。四川大学华西医院实验医学科XN-9000血液分析流水线硬件上由Sysmex TS-10试管管理系统、XN-9000血液分析仪、SP-10全自动推片机和DI-60全自动细胞形态分析仪组成,依托医院信息管理系统(HIS)、实验室信息管理系统(LIS),借助轨道控制系统软件(Lasc)和数据处理、复检规则软件(Laboman)等软件功能,通过条形码技术、时间节点控制、内置复检规则、全自动推片染片阅片和报告审核系统的有机配合,建立了血液分析智能化管理系统。合理、有效地应用该管理系统是保障实验室工作繁而有序、忙而不乱的根本。     

UniCel DxH推染片一体机染色条件的设置及效果评价

目的探索UniCel DxH推染片一体机的最佳染色条件,并对染色效果进行评价。方法通过改变瑞氏-吉姆萨复合染液的染色时间、染液配比等方法获取推染片一体机的最佳染色条件,在显微镜下观察并评价不同方法制备的血涂片的染色效果。结果延长缓冲液的染色时间可增强血涂片的着色效果,再在缓冲液中加入5%~10%的染液后可进一步提高血涂片的染色效率,且对于血细胞形态的识别可以达到手工制片染色的效果。结论在适宜的染色条件下,UniCel DxH制备的血涂片基本可以达到与手工染色相同的效果,对血细胞异常形态的识别较准确,各实验室应建立适宜的最佳染色方案。     

ISO15189认可实验室中Sysmex XN-9000血细胞分析仪复检规则的制订及评价

目的建立适合该实验室中Sysmex XN-9000血细胞分析流水线的复检规则,保证检测结果的准确性。方法选取2017年1-2月住院、门诊及体检患者的全血标本2 250例,采用Sysmex XN-9000血细胞分析仪进行检测,以人工镜检为金标准,对自定义的26条复检规则进行验证评价,统计阳性预测值、阴性预测值、假阳性率、假阴性率和复检率等。结果将仪器报警信息与镜检结果进行比较,阳性预测值为91.59%,阴性预测值为98.64%,假阳性率为2.09%,假阴性率为1.02%,复检率为24.84%。结论制订的Sysmex XN-9000血细胞分析仪复检规则符合该实验室特点,提高了检测效率,防止了漏检和误检,具有临床指导意义。     

SYSMEX XN-1000全自动血液分析仪计数有核红细胞的准确性评价

目的探讨SYSMEX XN-1000全自动血液分析仪(简称XN-1000)计数有核红细胞(NRBC)的准确性。方法应用XN-1000对66例外周血标本进行NRBC检测,同时用流式细胞仪(FCM)和显微镜(镜检法)对同一份外周血的NRBC百分率进行计数。以镜检法为金标准,比较不同方法的计数结果。结果 XN-1000与镜检法检测NRBC有较好的相关性(r=0.927),但低于FCM与镜检法NRBC的相关性(r=0.956),XN-1000与FCM检测NRBC的相关性较高(r=0.994)。XN-1000、FCM计数结果与镜检法的结果间差异均无统计学意义(P0.05)。XN-1000检测NRBC%较FCM法有更高的诊断特异性(95.7%)。结论 XN-1000能快速、准确、有效地自动计数外周血NRBC。     

乙二胺四乙酸盐对肝素钠抗凝后血小板聚集的影响

目的 探讨乙二胺四乙酸盐（EDTA-K2）对肝素钠抗凝后血小板聚集的影响.方法 对38名血小板数量正常的体检者抽取静脉血标本,分别使用EDTA-K2、肝素钠抗凝20min、肝素钠抗凝20 min加入EDTA-K2、肝素钠抗凝60 min加入EDTA-K2的抗凝标本,进行计数及血涂片瑞氏染色观察.结果 肝素钠抗凝静脉血血小板计数结果为（93.7±32.18）× 109/L;EDTA-K2抗凝血血小板计数结果为（210＋58.39）×109/L.组间差异有统计学意义（t=16.74,P＜0.001）.肝素钠抗凝静脉血静置20min后加入EDTA-K2抗凝剂结果为（212.05 ＋60.20）× 109/L;与EDTA-K2抗凝血结果（210＋58.39）× 109/L比较,组间差异无统计学意义（t=1.844,B0.05）.肝素钠抗凝静脉血静置60 min后加入EDTA-K2抗凝剂结果为（56.74＋ 15.33）× 109/L,与EDTA-K2抗凝血结果（210t58.39）× 109/L比较,组间差异有统计学意义（t=22.88,P＜0.001）.结论 EDTA-K2钙离子螯合剂可可逆性地使初发聚集的血小板解聚.     

EDTA-K2对外周血异型淋巴细胞计数的影响

目的比较未抗凝外周血与不同时段乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝外周血中异型淋巴细胞计数的差异,探讨EDTA-K2对异型淋巴细胞计数的影响。方法分别对未抗凝外周血与EDTA-K2抗凝15、30、45min的外周血涂片,染色后计数100个淋巴细胞,并对其中的异型淋巴细胞进行分型计数。结果Ⅰ型异型淋巴细胞和Ⅲ型异型淋巴细胞未抗凝外周血与不同时段EDTA-K2抗凝外周血异淋计数,差异无统计学意义(P>0.05);Ⅱ型异型淋巴细胞未抗凝外周血与不同时段EDTA-K2抗凝外周血异淋计数,差异有统计学意义(P<0.05);不同时段异型淋巴细胞总数计数,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于Downey分型的异型淋巴细胞计数可以用EDTA-K2抗凝的外周血进行初步筛查,当Ⅱ型异型淋巴细胞较多时,则应用未抗凝外周血涂片、染色、镜检,以便确诊。     

Diagnostic value of an automatic hematology analyzer in patients with hematologic disorders

The Sysmex SE-9000 is a newly designed automatic hematology analyzer that provides complete blood counts and white-cell differential counts. Few reports in the literature, however, discuss the sensitivity and specificity of this type of automatic analyzer, especially in patients with hematologic illnesses. This study compared differences between hematologist assessments and measurements made by the SE-9000 analyzer of differential counts, immature granulocytes, atypical lymphocytes, nucleated red cells, and platelet counts. Significant differences were found between manual and apparatus counting of neutrophils, lymphocytes, and monocytes but not of eosinophils and basophils. Atypical lymphocytes and nucleated red cell could not be counted accurately, and when platelet counts fell below 20 x 10(9)/L, accurate assessments were not possible. We conclude that not even the Sysmex SE-9000 can provide unflawed results and any suspicious blood report should be rechecked by an experienced hematologist.     

Performance evaluation of the new measurement channels on the automated Sysmex XN-9000 hematology analyzer

BackgroundThe automated Sysmex XN-9000 hematology system has been designed to meet the throughput and efficiency requirements of high volume laboratories with predominantly abnormal samples. New measurement channels have been introduced namely the white cell nucleated (WNR), white cell differential (WDF), white cell precursor (WPC) and fluorescent platelet (PLT-F) channels.MethodsThe performance of the new measurement channels was evaluated with regards to precision, accuracy, linearity, carryover, throughput and stability. 275 slides were assessed for morphology flagging. Adult and pediatric samples with normal and abnormal hematology profiles were included.ResultsThe XN-9000 demonstrated acceptable imprecision, good linearity for high and low ranges and no carryover. The full blood count and reticulocyte on the XN-9000 correlated well with the reference ADVIA(2)120. The PLT-F (127 ± 84 × 10⁹/l) compared with the optical platelet count (131 ± 76 × 10⁹/l) (r = 0.97) and the imprecision was < 4% on thrombocytopenic samples. The low white blood cell (WBC) mode reported accurate differentials for samples with a WBC count < 0.5 × 10⁹/l (r = 0.93). The nucleated red blood cell count from the WNR (1.22 ± 3.96%) showed an excellent correlation with the manual method (1.12 ± 4.79%) (r = 0.99). The WPC channel showed 100% sensitivity for the detection of blasts and abnormal lymphocytes. Further, the WPC correctly suppressed the initial blast/abnormal lymphocyte flag in 34% of the reflexed samples.ConclusionThe XN-9000 showed enhanced analytical performance and workflow efficiency for a wide range of patient samples which can be attributed to the incorporation of new measurement channels.     

2型糖尿病患者外周血淋巴细胞氧化应激对淋巴细胞功能的影响

目的:探讨2型糖尿病患者外周血淋巴细胞氧化应激改变对淋巴细胞功能的影响。方法:纳入2型糖尿病患者29例(A组)和健康对照者31例(B组),分离各组样本外周血淋巴细胞,检测淋巴细胞内氧化型谷胱甘肽(GSSH)和还原型谷胱甘肽(GSH);作外周血淋巴细胞涂片,先以活性氧荧光染液处理涂片,观察荧光强度,继以糖原染色(PAS)计算外周血淋巴细胞阳性率;体外以植物血凝素(PHA)刺激分离得到的淋巴细胞并检测其增殖活性。结果:A组淋巴细胞GSSH/GSH为1.69±0.73,B组为1.14±0.63,两组比较有统计学差异(P<0.05)。A组淋巴细胞PAS阳性率为(31±9)%,B组为(25±7)%,两者有统计学差异(P<0.05)。在PHA刺激下淋巴细胞的增殖活性A组为0.61±0.21,B组0.37±0.10,两组比较有统计学差异(P<0.01)。结论:2型糖尿病患者外周血淋巴细胞GSSH/GSH比值增高和PAS阳性率较高与细胞内氧化应激有关;通过检测2型糖尿病患者糖化血红蛋白可间接反映淋巴细胞的转化活性。     

Sysmex血细胞分析仪白细胞分类计数校准方法的建立与验证

目的 对Sysmex五分类血细胞分析仪白细胞分类计数进行校准,并通过仪器之间比对验证,使检测结果准确可靠。方法 采用手工显微镜计数法作为白细胞分类计数参考方法对5份新鲜全血白细胞分类计数百分比进行定值,用定值新鲜全血对Sysmex XE-2100,XS-800i和 XN-20(A1)血细胞分析仪的分类系数进行校准,之后用20份新鲜全血进行仪器间比对实验。结果 各仪器白细胞分类计数结果均在手工显微镜白细胞分类计数结果95%可信区间内。与参比仪器XE-2100相比,XS-800i NEUT%,LYM%,MON%,EOS%和BASO%相关系数r分别为0.99,0.99,0.98,0.98和0.59; XN-20(A1)NEUT%,LYM%,MON%,EOS%和BASO%相关系数r分别为0.99,0.99,0.97,0.98和0.55; XS-800i和XN-20(A1)白细胞分类计数NEUT%,LYM%,MON%和EOS%均100%在可信区间之内,XS-800i白细胞分类计数BASO%结果95%在可信区间之内,XN-20(A1)白细胞分类计数BASO%结果90%在可信区间之内。结论 该校准验证方案及比对结果满足WS/T 246-2005《白细胞分类计数参考方法》各项指标要求。为了保证血细胞分析仪白细胞分类计数结果的准确性以及不同实验室间白细胞分类计数的结果互认,要定期对仪器白细胞分类计数结果与手工显微镜分类计数结果进行比对分析。     

抗凝剂EDTA-K_2致血小板假性减少探讨

目的探讨乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝剂对假性血小板减少(PTCP)的影响及解决方法。方法对10例PTCP患者及30名健康体检者在EDTA-K2抗凝静脉血放置1 h后,用全自动血液分析仪进行分析,同时用手工计数血小板(PLT)作为参考值,并以不加抗凝剂的指血直接稀释后在全自动血液分析仪上测定。结果EDTA-K2抗凝血PLT计数结果与手工法相比,差异有统计学意义(P<0.001);EDTA-K2抗凝PLT计数结果与不使用抗凝剂指血相比,差异有统计学意义(P<0.01);而手工法PLT计数结果与不使用抗凝剂指血结果相比,差异无统计学意义(P>0.05),患者加EDTA-K2抗凝血作涂片瑞-姬染色,发现血片中有大量PLT聚集,聚集的PLT大小不一、数量不等,而不加抗凝剂的患者指血,则无PLT聚集现象。结论EDTA-K2对PLT可产生聚集作用,引起PTCP。     

B细胞淋巴瘤主要组织相容性复合物Ⅱ类分子表达水平研究

目的 了解B细胞淋巴瘤淋巴组织和外周血淋巴细胞主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子表达情况.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western印迹法检测B细胞淋巴瘤组织MHCⅡmRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测外周血淋巴细胞MHCⅡ类分子荧光强度.结果 B细胞淋巴瘤组织MHCⅡmRNA和蛋白相对表达量分别为1.21±0.16和2.38±0.24,低于正常淋巴组织的7.68±0.48和17.31±1.08(P＜0.05),外周血淋巴细胞MHCⅡ类分子平均荧光强度也由对照组的438.00±46.00下降为235.00±23.00(P＜0.05).结论 B细胞淋巴瘤组织及外周血淋巴细胞MHCⅡ类分子表达下降,外周血淋巴细胞MHCⅡ类分子检测可辅助早期诊断B细胞淋巴瘤.