双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的 将双缩脲单试剂改为双试剂法，观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰。方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素．溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白。结果脂血标本对原法干扰十分明显，本法可完全消除脂血的干扰；总胆红素每增加50μmol／L，原法总蛋白增加0．4g／L，本法不受影响；溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响，1g／L血红蛋白对原法总蛋白增加2．85g／L。对本法总蛋白增加0．93g／L；外观正常标本二种方法无显著差异。结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上，消除了脂血、黄疸的干扰，明显减少溶血的影响，有利于自动生化仪的分析。     

双剂型双缩脲法测定血清总蛋白

目的为克服乳浊、黄疸、溶血对血清总蛋白测定的影响，将双缩脲法改为双剂型方法。方法第一试剂为不含硫酸铜的双缩脲空白试剂，第二试剂系将原双缩脲试剂中的硫酸铜增加一倍，二者等量混合即成原法试剂。选取乳浊、黄疸、溶血及外观正常标本用新法与原法同时在日立7060自动生化分析仪上测定总蛋白含量。结果血清总胆红素每增加100μmol／L，原法总蛋白增加0．7g／L，新法不受干扰；乳浊血清对原法结果影响十分明显，新法完全可排除乳浊干扰；标本溶血时，血红蛋白中的血红素与珠蛋白均对总蛋白测定结果造成明显影响，每1g／L血红蛋白可使原法总蛋白结果增加2．2g／L，可使新法增加0．8g／L；外观基本正常标本二法结果无显著差别。结论双剂型双缩脲法在不改变原法反应原理，保留原法优点的基础上，能克服黄疸、乳浊的干扰，明显减少溶血的干扰，而且适合于自动分析。     

改良双缩脲法测定血清总蛋白

目的研究建立改良双缩脲试剂二点速率法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法进行方法参数选择试验、方法学评价试验和方法间比较试验。结果改良试剂反应液吸收峰530～560nm,最大峰值540nm。在反应进行的初期,吸光度变化率与蛋白质浓度成正比,可用速率法测定,线性范围142g/L。高、低值血清的批内、批间、日间和总CV均<5%。回收率为98.6%～100%,平均99.3%。检测限0.4g/L。血红蛋白9.5g/L以下、胆红素370μmol/L以下、三酰甘油200.0mmol/L以下、葡聚糖30g/L以下无显著性干扰。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:y=2.7147+0.9658x,r=0.9633,P=0.000。配对t检验:t=0.907,P=0.370。测定高脂、黄疸、含葡聚糖标本两种方法间有非常显著性差异。结论采用改良法单试剂二点速率法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰。     

改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的研究与应用

目的研究建立改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的方法，以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法采用改良试剂，测定方法的精密度、回收率、检测限、线性范围、干扰试验，以确定所建立方法的基本性能；与Doumas法比较以确定方法的可靠性与消除干扰的效果。结果样品与试剂比例为5：220μl，线性范围达140g／L。回归方程：Y=484．0＋48．06X，r=0．9993。批内CV（20次）0．24％，日间CV（20d）1．07％。回收率95．6％～103％，平均99．5％。检测限2．36g／L。血红蛋白（Hb）2．1g／L以下，胆红素（Bil）148μmol／L以下，三酰甘油（TG）aS．2mmol／L以下，葡聚糖30g／L以下干扰不显著。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关，回归方程：Y=-2．4354＋1．0374X，r=0．9882。结果间差异无统计学意义，t=0．156，P=0．877。测定溶血、高脂、黄疸、含葡聚糖标本二种方法间差异有统计学意义。结论采用改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白，能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰，提高结果准确性。     

双试剂苦味酸法测定血清肌酐的改进

目的消除胆红素对碱性苦味酸法测定肌酐的负干扰。方法用双液体试剂中的RI液和标本进行反应，使胆红素氧化成胆绿素，再进行肌酐的测定，并与原法做对比。结果原法受胆红素的干扰，本法可有效消除胆红素的影响。结论双液体两步法消除了胆红素对肌酐测定的干扰。此方法操作简单，结果可靠，经济实用，适合推广。     

日立HITACHI 7180生化检测体系的抗干扰研究

目的基于该实验室检测体系日立HITACHI 7180生化仪,以及宁波美康和北京九强生化试剂进行抗干扰试验。方法试验以血红蛋白作为溶血干扰物质,甘油三月桂酸酯作为脂血干扰物质,胆红素作为黄疸干扰物质,分别配制干扰梯度浓度,加入混合血清进行仪器测试,基准组加入等量生理盐水,分析标本不同溶血、脂血、黄疸水平对各项生化指标的影响。结果溶血影响下,心肌酶类项目的血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)明显上升,干扰物在1g/L时分别有23.20%、16.96%、26.90%的正偏差,已超过可允许范围,其余项目影响在可允许范围内。脂血影响下,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)轻度下降,总蛋白(TP)、CK、CK-MB轻度上升,干扰物在12mmol/L时偏差超过可允许范围,其余项目影响在可允许范围内。黄疸影响下,血清CK-MB、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)轻度下降,干扰物在600μmol/L时偏差超过可允许范围,其余项目影响在可允许范围内。结论该研究检测体系的抗干扰能力符合要求,可为临床该3类标本的判断和处理提供依据。     

血清总蛋白双试剂双缩脲法消除脂浊和胆红素的干扰

建立血清总蛋白双试剂双缩脲自动分析法。以氢氧化钠和硫酸钠溶液作第一试剂 ,浓缩双缩脲试剂作第二试剂 ,在自动分析仪上用两点终点法测定。结果 ,在 0 6mol/L氢氧化钠中加入 7mmol/L的硫酸钠使脂浊血清的空白吸光度稳定 ,蛋白质与双缩脲双试剂的反应在 7分钟内完成 ;线性范围 0～ 140g/L ,平均回收率 99 8% ,低蛋白含量和正常蛋白含量的批内CV为 0 5 2 %和 0 40 % ,批间CV为 0 80 %和 0 77% ;双试剂法与参考方法比较 ,r =0 9984,Y=0 982 5X 0 783,t =0 5 2 2 ,P>0 5 ,n=90 ;脂肪乳糜、高胆红素、血红蛋白颜色对测定无干扰。结果表明 :双试剂法能去除样品中脂浊、高胆红素及血红蛋白的干扰 ,具有很好的准确度和精密度 ,适合在自动分析仪上使用。     

溶血和黄疸血清对甘油三酯检测结果干扰的探讨

目的 探讨溶血和黄疸血清对甘油三酯检测结果的干扰.方法 用全自动生化分析仪常规检测程序和改进检测程序分别对溶血标本（血红蛋白含量1g/L）和黄疸标本（总胆红素含量260umol/L）的血清进行测试.结果 常规检测程序溶血标本测得甘油三酯平均值比标准高出0.27mmol/L,黄疸标本测得甘油三酯平均值比标准高出0.28mmol/L,改进检测程序测得甘油三酯平均值不升高.结论 溶血和黄疸血清使甘油三酯检测结果升高,通过改进的检测程序,可以有效地消除血清对甘油三酯检验结果的影响.     

改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白对比分析

目的 探讨改良双缩脲双试剂法在全自动生化分析仪中直接测定脂浊标本血清总蛋白.方法 用酒石酸作为络合剂防止形成氢氧化铜沉淀,血清空白增加方法的敏感性而同时使脂血症对光普的最小干扰.结果 改良双缩脲双试剂法测定脂浊标本血清总蛋白与单试剂法测定结果差异有统计学意义(P<0.001).结论 改良双缩脲双试剂法能有效的清除脂肪的干扰,具有很好的准确度和精密度,适合于自动分析,提高工作效率.     

两种肌钙蛋白检测方法对脂血、黄疸和溶血的抗干扰评价

目的评价电化学发光法和免疫比浊法检测肌钙蛋白时对脂血、黄疸和溶血的影响。方法采用已知范围内的肌钙蛋白标本与不同浓度的脂血、黄疸和溶血标本以一定比例混合,用ROCH E601电化学发光免疫分析仪和贝克曼DXC800生化分析仪分别检测标本中的肌钙蛋白浓度,观察脂血、黄疸和溶血对肌钙蛋白检测结果的影响。结果以偏差小于10.00%为可接受标准,脂血小于4.45mmol/L对电化学发光法检测肌钙蛋白影响不大,而免疫比浊法在三酰甘油仅为1.03mmol/L时即有537.04%的偏差;而黄疸在376μmol/L时,电化学发光法检测肌钙蛋白的偏差小于10.00%,而免疫比浊法在总胆红素为0.76μmol/L时即有26.67%的偏差,远远小于说明书中1 020μmol/L的声明;溶血在血红蛋白低于10g/L时,电化学发光法检测肌钙蛋白没有偏差,而免疫比浊法在血红蛋白仅为1.5g/L时即有537.04%的负偏差,小于说明书4.5g/L的声明。结论在肌钙蛋白处于正常参考值范围内,脂血、黄疸和溶血对电化学发光方法检测结果影响较小,基本和说明书一致;而使用免疫比浊的检测方法,要尽量避免脂血、黄疸和溶血等因素干扰。     

对钒酸氧化法测定血清中胆红素的评价

目的:评价钒酸氧化法测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法:钒酸氧化法的精密度、准确度实验及其与重氨法相关和干扰因素实验。结果:批内CV总、直接胆红素分别为0.8％与1.3％。日间CV为1.8％与1.7％,平均回收总胆红素为101.1％,直接胆红素100.1％,与重氮试剂法相关(J-G法)总胆为y(本法)=1.015x(重氮法)-0.119,r=0.998,直接胆红素为y(本法)1.101x(重氮法)+0.81,r=0.952。相关良好,血红蛋白浓度和脂血分别高达3g/L和9.0mmol/L不干扰。结论:该法简单、快速、稳定,而且对溶血、乳糜等干扰因素的影响比重氮法小。     

对钒酸氧化法测定血清中胆红素的评价

目的 :评价钒酸氧化法测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法 :钒酸氧化法的精密度、准确度实验及其重氮法相关和干扰因素实验。结果 :批内 CV总、直接胆红素分别为 0 .8%与 1 .3%。日间 CV为1 .8%与 1 .7% ,平均回收总胆红素为 1 0 1 .1 % ,直接胆红素 1 0 0 .1 %。与重氮试剂法相关 ( J- G法 )总胆为 Y(本法 ) =1 .0 1 5X(重氮法 ) - 0 .1 1 9,r=0 .998,直接胆红素为 Y(本法 ) =1 .1 0 1 x(重氮法 ) 0 .81 ,r=0 .952。相关良好 ,血红蛋白浓度和脂血分别高达 3g/L和 9.0 mmol/L不干扰。结论 :该法简单、快速、稳定 ,而且对溶血、乳糜等干扰因素的影响比重氮法小     

血清葡萄糖氧化酶法新色原物的实验研究

目的以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)为新色原物,建立新的葡萄糖氧化酶(GOD)法检测血清葡萄糖。方法用HDAOS代替4-氯酚生成蓝色醌亚胺,测定波长为600 nm。采用本法、葡萄糖氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林-酚(GOD-PAP)法及高效液相色谱(HPLC)法同时测定脂血、溶血、黄疸及外观正常的血清各24份并比较结果,同时对本法进行方法学评价。结果在测定外观正常血清时,3种方法之间差异均无统计学意义(P>0.05);在测定脂血、溶血、黄疸血清时,本法葡萄糖测定结果与GOD-PAP法比较,差异有统计学意义(P<0.05);与HPLC法比较,差异无统计学意义(P>0.05)。本法批内、批间变异系数(CV)均<3.0%;与HPLC法呈良好相关性(r2=0.995 8);在5 min内均可达到反应终点;线性范围为0.20～28.00 mmol/L;血红蛋白<2.0 g/L、乳糜<2.2%、总胆红素<200μmol/L对本法的干扰误差<3%;参考范围为4.10～6.20 mmol/L(男)、4.04～6.15 mmol/L(女);最大吸收波长为595 nm。结论以HDAOS代替4-氯酚生成蓝色醌亚胺,能通过降低脂血、溶血、黄疸光谱吸收的方法消除脂血、溶血和黄疸的干扰,提高GOD法测定葡萄糖的准确性,其使用方法与原有GOD终点法相同。     

血清胆红素的双试剂二点法测定

我们应用目前临床上测定胆红素常用的单试剂法上机操作一段时间,常发现样品溶血或脂蚀等色泽度都严重影响结果的准确性,特别是血清严重脂浊时,所测得直接胆红素的值常比总胆红素的值要高,影响了临床判断。为了解决这些问题,我们结合仪器的特点Q’,简单的把单试剂法改为双试剂的二点祛来排除溶血及脂浊的干扰,效果明显。1材料和方法1．1试剂1．1．1试剂组成：总胆红素试剂（TB）：试剂A：对氨基苯磺酸5mmol／L,盐酸100mmol／L,表面活性剂1％;试剂B：亚硝酸钠72mmol／L。直接胆红素试剂（DB）：试剂A：对氨基苯磺酸29mmol／L,…     

钒酸氧化法测定血清总胆红素的方法学评价

目的对钒酸氧化法、二氯苯胺法和改良J-G法测定血清胆红素进行方法学评价,探讨溶血、脂血对钒酸氧化法测定血清胆红素的干扰影响。方法用钒酸氧化法测定血清总胆红素,按NCCLS评价方案系统评价其重复性、回收率、线性范围和溶血、脂血对血清胆红素测定的干扰影响,并与二氯苯胺法和改良J-G法测定血清总胆红素结果进行比较。结果钒酸氧化法与二氯苯胺法和改良J-G法有良好的相关性(Y1=1.06X-0.32,r=0.94;Y2=0.93X 3.26,r=0.98);钒酸氧化法测定总胆红素的线性可达684μmol/L,批内变异为1.25%,日间变异为3.14%,回收率为102.5%;血红蛋白和甘油三酯浓度分别达6.0g/L和8.0mmol/L,无明显干扰。结论钒酸氧化法测定血清胆红素不仅简单、快速、稳定,而且线性范围宽,能抵抗溶血、脂血干扰,值得推广应用。     

新型化学氧化法测定胆红素试剂的研制

目的 探讨建立一种新型化学氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素的新方法.方法 采用化学氧化法测定血清胆红素反应前后吸光度的变化,与标准品相比较,求得标本中总胆红素和直接胆红素的浓度.结果 TBIL精密度试验批内高低浓度CV值为0.65%-1.56%;DBIL为0.82%～1.93%.批问TBIL为3.5%、1.71%及1.24%;DBIL批间为4.38%、2.77%及1.60%.线性范围:TBIL可达686μmol/L:DBIL可达400μmol/L;总胆回收率101.8%～107.6%,平均104.5%.DBIL回收率为99.1%～100.5%,平均为100.2%.与其他相关试剂比较TBIL γ=0.9973～0.9992;DBIL γ=0.9962～0.9994.溶血、脂浊和维生素C干扰试验表明:标本中Hb小于2.7g/L,TG小于5.94mmol/L.VitC小于0.1g/L,对TBIL和DBIL的测定基本无干扰.结论 本试剂方法简便,结果准确、线性范围宽,试剂稳定,价格低廉.完全可用于检测临床标本.     

应用二点终点法消除乳糜血对血清总蛋白测定的干扰

目的建立双缩脲法双试剂测定血清总蛋白,以消除乳糜血在总蛋白测定中的干扰.方法以NaOH溶液作第一试剂,浓缩双缩脲试剂等其他试剂作第二试剂,在自动分析仪用终点法测定.结果乳糜血在0.6 mol/L NaOH溶液中吸光度稳定,线性范围为18.75～150 g/L,平均回收率98.86%,批内变异系数(CV)为1.23%、0.61%,批间CV 1.11%、0.68%,双试剂法与标化法比较,r=0.972 0,P<0.01.结论双试剂法可消除乳糜血在总蛋白测定中的干扰,且适用于自动分析仪.     

二甲亚砜双试剂法测定血清胆红素

血清标本的色泽及脂浊度对胆红素测定结果有较大干扰，用双试剂两点终点法是消除此类干扰的理想方法。二甲亚砜（ＤＭＳＯ）是胆红素的优良溶剂，可破坏非结合胆红素的氢键，加速胆红素与重氮试剂的反应。通过实验我们建立了双试剂测定血清胆红素的自动分析方法，具有除干扰能力强，重复性好，与改良Ｊ－Ｇ法有较好的一致性，试剂配制简单，稳定期长等优点，现介绍如下。１材料和方法１．１仪器日立７１７０全自动生化分析仪，ＵＶ－７５４分光光度计。１．２试剂配制１．２．１总胆红素（ＴＢ）测定试剂配制试剂Ｉ（Ｒ１）：量取ＤＭＳＯ …     

不受高脂血症影响的双缩脲试剂

历来所用的双缩脲试剂(BR),在遇到某些高脂血清时,因脂血增加540nm 处的内源性吸光度而产生正干扰.而这种干扰常用Chromy 报道的用丙酮处理脂血标本.鉴于处理脂血标本手续较烦,我们通过实验用KOH 代替NaOH,按Doumas 配方配制     

胆红素氧化酶消除血清肌酐测定中胆红素的干扰

为消除肌酐测定中血清胆红素干扰，采用由卫生部临床检验中心提供的高纯度胆红素氧化酶（ＢＯＸ）和苦味酸试剂，设计了在ＣＯＢＡＳＦＡＲＡ－Ⅱ型全自动生化分析上检测肌酐的新方法，仅需样品８μｌ，ＢＯＸ８μｌ，苦味酸试剂８０μｌ，在１９０秒钟就可完成反应，所得结果表明，用该法对７５份总胆红素在０～６１６μｍｏｌ／Ｌ的标本进行检测，可以有效的消除胆红素对肌酐测定时的干扰。而且结果准确可靠，回收试验，黄疸血清标本用原法回收率仅为４９％～７１％，而用本法回收率可达９４％～１０５％。本法的重复性也较好，批内变异系数（ＣＶ）为２．８％～１２．７％，批间ＣＶ为１４．０％。本法操作简单，标本也不需要作人工预处理，是肌酐测定消除胆红素干扰比较理想的方法。