MEIA法检测HBsAg低浓度值复检结果的分析

目的探讨微粒子酶免疫测定法（MEIA）检测乙肝病毒表面抗原（HBsAg）时,对HBsAg低浓度值复检的重要性。方法采用美国雅培公司的AXSYM微粒子酶免疫仪测定血清HBsAg,对HBsAg初检浓度为2~20μg/L标本进行高速离心复检。结果 120份低浓度HBsAg初检S/N值结果为4.77±3.21,复检S/N值结果为2.74±3.56,经t检验,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论对低浓度HBsAg的标本进行高速离心复检可以有效减少假阳性率,复检是非常必要的。     

慢性HBV感染者低浓度HBsAg相关分子调查研究

目的 探讨低浓度HBsAg人群的分子生物学特征及流行病学意义.方法 采用PCR及基因测序的方法 对HBV慢性感染者136份低浓度HBsAg(低浓度HBsAg组)和44份高浓度HBsAg(高浓度HBsAg组)血清标本进行HBV DNA、酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YMDD)变异检测,并分别对浓缩法HBV DNA105拷贝/L的47份低浓度HBsAg和37份高浓度HBsAg血清标本进行基因型检测,以及对直接法HBV DNA10~5拷贝/L的14份低浓度HBsAg和29份高浓度HBsAg血清标本进行S基因序列、血清型进行检测分析,S基因序列采用BioEdit软件与中国株参照序列进行比对.结果低浓度HBsAg组HBV DNA阳性率、YMDD变异率和HBV DNA对数值分别为34.6%(47/136)、0(0/136)和6.5±1.4,高浓度HBsAg组分别为84.1%(37/44)、9.1%(4/44)和8.9±1.8,两组之间差异有统计学意义(浓缩法χ~2=30.8,P<0.05;直接法χ~2=53.5,P<0.05;YMDD变异率精确概率法,P=0.003;HBV DNA对数值t=6.5,P<0.05);47例低浓度HBsAg病例中分别检出B基因型16例、C基因型5例、未分型26例,14例血清型分别为adw 7例、ayw4例、adr2例、ayr 1例,在两组人群中基因型的分布差异有统计学意义(χ~2=13.5,P<0.05),血清型的分布差异无统计学意义(χ~2=4.7,P>0.05),S基因测序结果未发现S基因变异,但6处16例次存在核苷酸碱基差异而氨基酸同义的多态性特征.结论 低浓度HBsAg人群HBV DNA存在低复制现象,基因型、血清型分别以B型、adw/ayw为主,S基因呈多态性特征,低浓度HBsAg存在可能与HBV S基因特殊的分子生物学特征使HBsAg表达低下有关,或与患者感染HBV后机体免疫系统的个体反应导致低浓度HBsAg诱导机体免疫耐受有关.     

两种方法检测血清低水平乙肝病毒表面抗原比较

乙肝表面抗原（HBsAg）为乙肝病毒感染的最主要病原标志和直接证据之一，对以低水平存在的血清HBsAg进行有效检测，具有重要的临床和流行病学意义。不同人群血清HBsAg浓度可相差成千上万倍，低水平血清HBsAg人群不容忽视，提高HBsAg检测灵敏度，对经手术、输血等途径传播有重要意义。我们对低浓度HBsAg人群血清进行了乙肝病毒表面抗原二种检测方法的比较。结果如下。     

微粒子酶免疫技术在乙肝表面抗原假阴性检测中的应用

目的：探讨ELISA法检测出的HBeAb/HBcAb双阳和HBcAb单阳两种模式结果是否存在低浓度HBsAg而产生漏检现象。方法：运用微粒子酶免疫技术（microparticle enzyme immunoassay,MEIA）对2 500例ELISA法检测出的两种模式的HBsAg进行复检。结果：检出HBsAg比值S/N≥2的有550例,其中HBeAb/HBcAb双阳的有350例,HBcAb单阳的有220例。结论：ELISA法检测HBV时,低浓度的HBsAg存在漏检或误诊的现象,而用MEIA对其二种模式结果进行复检,可提高结果的可靠性和准确性,从而避免漏检和误诊的产生。     

两组不同浓度HBsAg感染者7项血清学乙肝标志物表现模式的比较及分析

目的 分析不同浓度HBsAg感染者血清学乙肝标志物表现模式,以揭示其在人群中的分布特征。方法 采用ELISA法在日常工作中共筛选到252份低浓度和387份高浓度HBsAg血清标本;并经MEIA确证后分别采用ELISA法和PCR法对其7项血清学乙肝标志物进行检测;为表达方便,设定血清学乙肝标志物检测项目第1－5项的排列分别为HBsAg、Anti-HBs、HBeAg、Anti-HBe、Anti-HBc-IgG,并以出现阳性项目的序号为该模式的代码。结果 高浓度HBsAg和低浓度HBsAg感染者在人群中的比例分别为10．2％和0．7％左右,低浓度HBsAg感染者占所有HBsAg阳性感染者的6．86％;高浓度和低浓度组血清学乙肝标志物的表现模式分别有10种和7种,各模式在两组间的检出率不完全相同（135、145、1345、P＜0．05;13、15、12345,P＞0．05）,且两组间各模式的Anti-HBc-IgM、HBV DNA检出率亦不心相同（135、145、P＜0．05;15、1235、1235、1345,P＞0．05）,但两组各模式均以145模式为最高（69．8％和55．0％）,其次为135和15模式（分别为16．7％、28．2％和6．7％、7．8％）;低浓度组中,约70％的145、15模式分布在（1．0－2．0）μg/L范围内,近65％的135模式分布在（2．0－5．0）μg/L范围内,其他模式（1、1235、125）及25％左右的145、15模式则分布在≤1.0μg/L以下。结论 低浓度和高浓度HBsAg感染者的血清学乙肝标志物表现模式在人群中具有不同的分布特征,低浓度HBsAg感染人群宜引起重视,应将包括Anti-HBc-IgG在内的乙肝标志物检测列为常规检查项目,对提高HBsAg检测灵敏度具有重要的流行病学意义。     

时间分辨免疫荧光法在低浓度范围HBsAg检测中的应用价值

目的 探讨时间分辨免疫荧光法(TRFIA)检测低浓度HBsAg的最佳阈值和诊断性能,及其与电化学发光法(ECL)定性结果的一致性.方法 选择TRFIA检测结果为HBsAg低浓度(0.16～5.0 μg/L)的标本499例,以ECL检测结果为乙型肝炎病毒(HBV)感染诊断依据,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析TRFIA检测低浓度HBsAg的最佳阈值和诊断性能,以Kappa检验分析TRFIA与ECL定性结果的一致性.结果 TRFIA诊断低浓度HBsAg的ROC曲线下面积为0.587；取最大Youden指数、最大阳性似然比、最低检出浓度对应的阈值及实际工作中使用的阈值时(分别为0.397、2.610、0.200、0.500 μg/L),诊断灵敏度分别是61.1％、9.1％、88.6％、45.7％,特异度分别是60.1％、96.7％、10.3％、66.7％,漏诊率分别是38.9％、90.9％、11.4％、54.3％,误诊率分别是39.9％、3.3％、89.7％、33.3％.以0.500 μg/L作为阈值时,TRFIA与ECL检测结果比较Kappa值为0.120,P＜0.05；以0.397 μg/L作为阈值时,Kappa值为0.202,P＜0.05.经ECL确认的176例(39.2％)低浓度HBsAg标本中,HBsAg＜0.2 μg/L者占11.9％(21/176)、0.2～0.5 μg/L者占42.6％ (75/176)、0.5～1.0μg/L者占19.9％(35/176)、1.0～5.0 μg/L者占25.6％(45/176).结论 应用TRFIA检测低浓度HBsAg标本时,各实验室应建立合适的诊断阈值；其与ECL检测结果的一致性一般,准确性低,需采用更灵敏的方法进行结果确认.     

血清中HBsAg浓度差异在乙型肝炎标志物模式分析中价值

目的分析不同浓度HBsAg血清中乙型肝炎标志物表现模式,以揭示其在人群中的分布特征。方法采用ELISA法与微粒子酶免疫分析技术(microparticle enzyme immunoassay,MEIA)测定5987例非肝炎流行区住院及门诊患者血清中HBsAg及其表面抗体(抗HBs)、乙肝e抗原及e抗体(HBeAg、抗HBe)和乙肝病毒核心抗体(抗HBc);根据定值参比血清和样本HBsAg荧光速率值/阴性对照荧光速率值之比(S/N值),再结合中和确证试验结果来确定HBsAg浓度,同时分析乙肝病毒血清学标志物模式;对低浓度(HBsAg≤1μg/L)再用PCR-ELISA法定量测定HBV DNA。结果:共检出HBsAg阳性784例,HBsAg浓度在5μg/L以上有636例,占HBsAg阳性81.1%;HBsAg浓度在2~5μg/L的有47例(5.99%);1~2μg/L的有69例(8.80%);1μg/L以下的有32例(4.08%)。尤其高浓度(HBsAg>5μg/L)和低浓度(HBsAg≤1μg/L)在人群中分布率分别为10.62%和0.53%;而中等浓度(1μg/L相似文献   

化学发光法对ELISA检测HBsAg“灰区”标本的再分析探讨

目的探讨用化学发光法对乙型病毒性肝炎患者,乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测灰区标本的再分析及其临床意义。方法用低浓度质控血清对两种ELISA试剂盒进行测试,同时对用ELISA法检测的80例患者HBsAg弱阳性标本用化学发光法定量复检。结果目前国内两种较好的ELISA试剂盒的A值都低于其cutoff值区域("灰区");化学发光法的阳性率与HBsAg阴性组差异有统计学意义。结论不顾及ELISA"灰区"的标本,就有一定的阳性标本漏检,对HBsAg弱阳性的研究和报道应引起临床医生的重视,对HBsAg弱阳性患者应定期随访。     

电化学法确认低浓度乙肝表面抗原的初步应用

目的利用罗氏试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)确认试剂对低浓度HBsAg标本进行确认试验,并做初步分析,以期对今后的检测工作有一定的指导价值。方法 168例Cutoff-指数(COI)在0.9～20.0血清样本来源于本院住院及门诊患者,经罗氏公司E170仪器对其检测并进行中和试验。结果 94例COI在0.9～5.0低含量HBsAg血清样本,经确认试验确认阳性率72.34%,阴性率26.60%,不确定率1.06%;受试者工作特征曲线(ROC)分析,当COI在4.18时,特异性可达到100%;乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)阳性组与阴性组的弱阳性组确认试验情况阳性率为45.71%和88.13%,两组比较,差异均有统计学意义(χ2=19.76,P<0.05)。结论如果条件允许,当HBsAg COI值0.9～5.0IU/L,尤其当同时抗-HBs阳性时应做确认试验。     

时间分辨荧光免疫技术在检测HBV血清学标志物中的应用

目的比较时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)和ELISA法在检测HBV血清学标志物的价值。方法分别采用TRFIA和ELISA法检测359例低浓度乙肝表面抗原(HBsAg)标本的HBV血清学标志物,比较两种方法的检测结果的差异。结果TRFIA法检测HBV血清学标志物的各项结果阳性率均高于ELISA法,HBsAg、乙肝e抗原(HBeAg)和乙肝核心抗体(HBcAb)阳性率结果差异有统计学意义(P<0.05),而乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗体(HBeAb)阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论与ELISA法相比,TRFIA在检测含有低浓度HBsAg标本时具有更高的灵敏度,具有良好的临床应用价值。     

三种方法检测低浓度乙肝表面抗原的比较与分析

目的：初步探讨三种方法对低浓度乙肝表面抗原（HBsAg）定性与定量检测的结果并进行对比分析。方法分别用酶联免疫吸附法（ELISA）、化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）与时间分辨荧光免疫法（TRFIA）测定2013年10月～2014年4月间于湖南旺旺医院就诊及体检的85例低浓度 HBsAg（ELISA法0.6＜S／CO≤3.0）标本,三种方法测定低浓度 HBsAg定性结果分为0.6＜S／CO≤1.0,0.6＜S／CO≤3.0两组采用检出阳性率进行χ2检验;HBsAg定量结果分为0.6＜S／CO≤1.0,1.0＜S／CO≤2.0,2.0＜S／CO≤3.0,0.6＜S／CO≤3.0四组采用配对样本t检验进行两两比较;HBsAg含量相关性采用相关系数t检验进行两两分析。结果①HBsAg检出阳性率0.6＜S／CO≤1.0组 CMIA法（64.0％）和TRFIA法（54.0％）两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.333,P＞0.05）,0.6＜S／CO≤3.0组 ELISA 法（70.6％）与CMIA法（89.4％）及TRFIA法（87.1％）之间差异有统计学意义（χ2值分别为9.412,6.907,P均＜0.05）,CMIA法和TR-FIA法两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.227,P＞0.05）。HBsAg检出阳性率 CMIA＞TRFIA＞ELISA。②HBsAg含量测定0.6＜S／CO≤1.0,1.0＜S／CO≤2.0,2.0＜S／CO≤3.0三组除在2.0＜S／CO≤3.0组 ELISA法与 CMIA法之间,ELISA法与TRFIA法之间差异均有统计学意义（t值1.743～3.671,P均＜0.05）,0.6＜S／CO≤3.0组三种方法之间差异均有统计学意义（t值分别为2.053,2.766,4.459,P均＜0.05）,总体含量CMIA＞TRFIA＞ELISA。③三种方法测定HBsAg含量之间均呈正相关关系（t值分别为2.928,2.939,60.915,P均＜0.05）,其中 CMIA法与 TRFIA法之间相关性最好（r＝0.989）。结论低浓度 HBsAg检测应首选 CMIA法,TRFIA法次之。对于 ELISA法检测低浓度 HBsAg标本应向临床建议用CMIA法或TRFIA法复查,避免漏检;并且不建议临床对不同方法测定定量或半定量结果间进行横     

添加样品和试剂后放置时间对酶免法检测HBsAg弱阳性标本结果的影响

影响酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒标志物(HBV—M)的因素比较多，特别是药物治疗患者和献血员的低浓度HBV—M.本研究对加样时间和试剂平衡进行实验分析，以进一步探讨ELISA检测弱阳性HBsAg的影响因素。     

胃癌肝肾转移伴HBV低浓度HBsAg感染1例的相关报道

中国乙型肝炎感染者多,其中存在一定比例的低浓度HBsAg感染者和感染早期的带毒者。低浓度HBsAg是以国家卫生部临床检验中心提供的低值定植血清(0.5、1.0、2.0、5.0 ng/L)来划分的,通常将血清中HBsAg浓度小于或等于5.0 ng/L定义为低浓度HBsAg。1临床资料     

不同方法检测乙型肝炎表面抗原弱阳性标本结果分析

乙型肝炎(简称乙肝)表面抗原(HBsAg)在我国人群中的携带率达9.09%.作为判断乙肝病毒(HBV)感染和诊断HBV感染的标志物,HBsAg在感染性疾病标本检测中应用最为广泛.随着各种免疫标记技术在临床中的应用,发现部分HBsAg低浓度水平表达,由于检测试剂的敏感性、特异性等指标的差异,导致不同检测方法结果有所差异,造成一定程度的误诊与漏检,甚至引起医疗纠纷.本文选用经我国药品监督管理局认可的3种试剂对弱阳性标本进行检测,并对其进行评价与分析.     

添加样品和试剂后放置时间对酶免法检测HBsAg弱阳性标本结果的影响

影响酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测乙型肝炎病毒标志物 (HBV M )的因素比较多[1] ,特别是药物治疗患者和献血员的低浓度HBV M。本研究对加样时间和试剂平衡进行实验分析 ,以进一步探讨ELISA检测弱阳性HB sAg的影响因素。一、材料和方法1.试剂　HBsAg检测试剂盒 (上海实业科华生     

电化学法确认低浓度乙肝表面抗原的应用研究

目的 利用罗氏试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）确认试剂对低浓度HBsAg标本进行确认试验,并做初步分析,以期对今后的检测工作有一定的指导价值。方法160例Cutoff指数（C01）在0．9—20．0血清样本来源于本院住院及门诊患者,经罗氏公司e601仪器对其检测并进行中和试验。结果90例COI在0．9～5．0低含量HBsAg血清样本,经确认试验确认阳性率66．7％,阴性率32．2％,不确定率1．1％;受试者工作特征曲线（ROC）分析,当COI在4．2时,特异性可达到100％;乙型肝炎病毒表面抗体（抗一HBs）阳性组与阴性组的弱阳性组确认试验情况阳性率为53．3％和83．3％,两组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论如果条件允许,当HBsAg的COI值0．9～5．0IU／L,尤其当同时抗-HBs阳性时应做确认试验。     

MEIA法测定乙肝病毒表面抗原的评价及临床应用

目的 对微粒子酶免疫测定法(MEIA法)检测乙肝病毒表面抗原进行方法学评价并研究低含量乙肝表面抗原人群阳性检出率。方法 采用美国雅培公司的AXSYM型化学发光仪对乙肝病毒表面抗原卫生部质控物、高浓度乙肝病毒表面抗原标本进行稀释测定，同时与ELISA法检测乙肝表面抗原进行比较；对低浓度(HBsAg≤1μg／L)的标本进行中和确证试验与采用PCR—ELISA法定量测定HBV DNA。结果 微粒子化学发光法检测乙肝病毒表面抗原具有较高灵敏度，达0．1μg／L；有较好的重复性和特异性；低浓度(HBsAg≤1μg／L)在人群中分布率为0．53％。结论 微粒子酶免疫法对提高低含量乙肝表面抗原阳性检出率具有重要意义。     

肇庆市中技学生HBsAg携带状况分析

目的 通过对青年学生的调查检测,了解目前乙型肝炎HBsAg阳性率与二十年前情况比较。方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HBsAg,记录结果作统计分析。结果 测得总体HBsAg的阳性率为18.87％,比广东省人群HBsAg阳性率17％略高,高于全国HbsAg10％。结论 总体上本市籍学生目前HBsAg阳性率与二十年前比较(19.2％)无明显下降,说明我市预防乙型肝炎未得到理想改善,必须加强防治,应普注乙湃疫苗预防。     

8种国产HBsAg试剂盒检测变异HBsAg的效果评价

目的：评价国内8种HBsAg诊断试剂检测体外表达的18种变异HBsAg的效果。方法：用8种ELISA试剂检测真核细胞表达的18种变异HBsAg的免疫反应性。结果：8种试剂盒检测变异HBsAg的能力不同,漏检率为16．7％～44.4％。K122I、T123N、C124R和G145R变异的HBsAg漏检率最高。结论：8种HBsAg检测试剂盒都不能很好地检出部分变异HBsAg,应改进试剂性能,提高对变异HBsAg的检出率。     

ELISA一步夹心法检测HBsAg假阴性原因分析

目的:探讨ELISA一步夹心法检测HBsAg假阴性的原因.方法:对ELISA一步夹心法检测HBeAg阳性、HBcAb阳性和HBsAg阴性的血清样品,用ELISA两步夹心法和将样品倍比系列稀释用ELISA一步夹心法检测HBsAg,并用化学发光免疫分析定量检测HBsAg.结果:在112 166份血样中,ELISA一步夹心法检测HBeAg阳性、HBcAb阳性、HBsAg阴性的标本9份,占0.008%;9份HBsAg阴性样品中,ELISA两步夹心法检测有1份阳性;同时经倍比系列稀释后用ELISA一步夹心法检测,在1∶327 68稀释后检出阳性1份,与ELISA两步夹心法检测HBsAg阳性为同一份血样,该标本经定量检测为HBsAg＞250 IU/mL,属钩状效应;其余8份样品经ELISA两步夹心法和一步夹心法检测均为阴性,而定量检测HBsAg其中1份样品为144.41 IU/mL,其余7份均在0.05～5 IU/mL之间.结论:ELISA一步夹心法检测高浓度HBsAg确有漏检现象,而低浓度HBsAg的漏检情况更为严重,建议使用灵敏度更高的试剂和方法来检测;中等浓度的HBsAg漏检应引起检测者及试剂厂家的关注.