猪大脑灰质组织提取液促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖

背景：有研究表明大鼠脑组织提取液能够促进大鼠成骨细胞和骨髓基质干细胞的增殖。目的：观察跨种属脑组织固有成分对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响。方法：提取猪和大鼠大脑灰质、白质、垂体、肢体肌肉组织,分别制成匀浆提取液,并设空白对照组,各组提取液分别用于培养大鼠成骨细胞。比较各种组织提取液对成骨细胞增殖的影响。结果与结论：与空白对照相比,猪和大鼠的大脑灰质、白质和垂体组织提取液均显著促进了成骨细胞的增殖（P〈0.05）,各组间比较显示猪和大鼠的大脑灰质较白质、垂体和肌肉组织提取液促进成骨细胞增殖的能力更加显著（P〈0.05）。结果证实,猪脑组织提取液能跨种属促进大鼠成骨细胞的增殖,其中以大脑灰质的促进作用最为显著。     

本期专题：影响体外培养成骨细胞增殖和蛋白表达的因素

1猪大脑灰质组织提取液促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖夏新雷（复旦大学附属华山医院骨科，上海市200040）推荐理由：研究表明脑损伤后脑组织突破固有的屏障释放入血液，通过循环起到改变骨代谢的作用。既往实验表明大鼠脑组织提取液能够促进大鼠戍骨细胞和骨髓基质干细胞的增殖，那么，这种促进作用是否跨种属存在呢？实验拟采用跨种属的哺乳类动物猪的不同部位脑组织提取液体外培养大鼠成骨细胞，结果证实，猪脑组织提取液能跨种属促进大鼠成骨细胞的增殖，其中以大脑灰质的促进作用最为显著。     

针刺预处理脑组织提取液对抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用(英文)

背景:根据中医“治未病”理论,近年来提出了针刺预处理扶正学说。目的:证实针刺预处理脑组织提取液的抗脑缺血再灌注损伤作用。设计:随机对照实验。单位:湖北中医学院针灸推拿研究所及解剖组胚教研室。材料:实验于2003-09/2004-07在湖北中医学院针灸推拿研究所完成;选用成年Wistar大鼠102只。20只用于脑组织提取液制备,82只用于后续实验。方法:以“肾俞”、“百会”穴针刺预处理大鼠,制备正常及针刺预处理脑组织提取液。82只大鼠随机分6组。空白对照组5只行空白对照,假手术对照组15只行假手术,脑缺血再灌注对照组16只行脑缺血再灌注造模,生理盐水对照组16只先行生理盐水腹腔注射,再行脑缺血再灌注造模,正常脑组织提取液对照组15只先行正常脑组织提取液腹腔注射,再行脑缺血再灌注造模,针刺预处理脑组织提取液组15只先行针刺预处理脑组织提取液腹腔注射,再行脑缺血再灌注造模。腹腔注射分别于脑缺血造模前2h和1h进行,每只大鼠共注射2次,1mL/次。上述除空白对照组外,其他各组大鼠分别于术后1,3,7d取材(即各分3小组:每小组5只)。各组动物分别于相应时间段取材,脑组织石蜡包埋切片,光镜下进行脑组织病理学观察,在400倍镜下进行存神经元计数,计数区域为各片顶皮质Ⅰ区Ⅴ层(内锥体层)。主要观察指标:①脑组织病理学观察。②脑顶皮质Ⅰ区Ⅴ层幸存神经元计数。结果:实验过程中共有2只动物死亡,脑缺血再灌注对照组和生理盐水对照组各1只,100只大鼠实验数据进入结果分析。①脑组织病理学观察结果:除空白对照组和假手术对照组外,其他各组各时间段脑片镜下均可见弥散性神经元缺血缺氧性病理改变,但均无灶性坏死区。②脑顶皮质Ⅰ区Ⅴ层幸存神经元计数:再灌注1d,脑缺血再灌注对照组幸存神经元密度较空白对照组显著降低犤(338.8±31.2),(753.4±60.8)个/mm2,F=129.36,P<0.05犦;再灌注3,7d神经元变性进一步加剧,但两者间无差异(F=1.76,P>0.05)。各时间段生理盐水对照组、正常脑组织提取液对照组与脑缺血再灌注对照组间的正常及针刺预处理脑组织提取液差异不显著(F=1.76,P>0.05)。在3个时间段针刺预处理脑组织提取液组幸存神经元密度均显著高于脑缺血再灌注对照组犤(438.1±41.0),(338.8±31.2)个/mm2;(296.4±27.1),(124.8±13.4)个/mm2;(269.5±30.4),(132.4±15.7)个/mm2,F=129.36,P<0.05犦。结论:以肾俞、百会穴针刺预处理脑组织提取液行大鼠腹腔注射,可使随后发生的脑缺血再灌注引起的神经元丢失数量显著减少,针刺预处理脑组织提取液已产生明显的对抗脑缺血再灌注损伤作用。     

大鼠成骨细胞增殖及护骨素蛋白含量与甲状旁腺激素的调节效应

目的探讨大鼠成骨细胞增殖及护骨素蛋白含量与甲状旁腺激素的调节效应。方法选取新生清洁级健康SD大鼠作为研究对象,对其颅骨成骨细胞进行分离、培养,使用含不同浓度甲状旁腺激素的培养液进行连续培养,分别采用四甲基偶氮唑盐比色法和蛋白免疫印迹杂交法对不同时间大鼠成骨细胞增殖情况及护骨素蛋白表达情况进行测定。结果随着培养时间延长,所有组别的成骨细胞吸光度值均呈不断增加的趋势,且同一时间点的吸光度值均显著高于空白对照组,比较差异有统计学医院(P0.05)。培养液中甲状旁腺激素的浓度为10-8mol/L条件下,各时点的吸光度最高。观察各组成骨细胞中护骨素的表达情况,可见,其与甲状旁腺激素浓度无显著相关性,但空白对照组中护骨素与actin信号比显著高于其他组别,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论甲状旁腺激素能刺激成骨细胞的增殖,并促进护骨素蛋白分泌水平下调。     

富血小板血浆对大鼠乳鼠颅骨成骨细胞增殖和分化的影响

目的:观察富血小板血浆对体外培养的SD大鼠乳鼠颅骨成骨细胞增殖和分化的影响,探讨富血小板血浆促进骨修复的细胞学机制及其有效浓度。方法:实验于2004-09/2006-10在河北医科大学第二医院外科实验室完成。①实验动物:出生24h内的SD乳鼠10只,体质量400～500g的健康雄性SD大鼠10只。②实验方法:取出生24h内的SD乳鼠颅骨进行成骨细胞分离与培养。从健康雄性SD大鼠腹主动脉抽血制备富血小板血浆。将体外培养并扩增的第3代SD大鼠乳鼠颅骨成骨细胞与不同浓度富血小板血浆复合培养。③实验分组:实验分为空白对照、12.5%富血小板血浆组、25%富血小板血浆组和50%富血小板血浆组。④实验评估:通过相差显微镜观察细胞生长情况,培养后1,3,5和7d应用四甲基偶氮唑盐法、碱性磷酸酶活性检测和钙结节染色检测成骨细胞的增殖和分化情况。结果:①各组细胞生长情况:相差显微镜下见富血小板血浆组细胞增殖旺盛,与空白对照组相比,富血小板血浆能明显促进成骨细胞的增殖,其作用随富血小板血浆浓度的增加而增强。其中,50%富血小板血浆组细胞增殖最为显著,且细胞达到汇合的时间也相应缩短。②成骨细胞增殖情况:在各时间段,各种浓度的富血小板血浆组中成骨细胞的增殖活性均高于空白对照组(P<0.05),且与富血小板血浆浓度成正比。50%富血小板血浆对成骨细胞增殖刺激作用最强,3,5和7d时与其他富血小板血浆组相比差异有显著性(P<0.05)。③各组细胞碱性磷酸酶活性检测结果:富血小板血浆组中成骨细胞的碱性磷酸酶活性均高于空白对照组(P<0.05),且与富血小板血浆浓度成正比。以50%富血小板血浆组的成骨细胞碱性磷酸酶活性最高,3,5和7d时均显著高于其他富血小板血浆组(P<0.05)。④钙结节茜素红染色结果:不同浓度的富血小板血浆组的矿化结节数量均显著高于空白对照组(P<0.05),其中50%富血小板血浆组的矿化结节数量最多,显著高于其他浓度的富血小板血浆组(P<0.05)。结论:富血小板血浆能明显促进体外培养的SD大鼠乳鼠颅骨成骨细胞增殖和分化,其作用效果与富血小板血浆的浓度成正比。     

成骨生长肽促进钛表面大鼠成骨细胞的增殖分化

背景:成骨生长肽具有促进多种基质细胞增殖活性,成骨活性,免疫原性低,自身调节极其敏感,提取制作工艺简单等众多优点。目的:体外观察成骨生长肽对大鼠颅盖骨来源成骨细胞在钛金属表面增殖分化的影响。方法:将体外培养的新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞以5×107L-1细胞浓度接种于6孔板中的纯钛试件表面,分别加入0(空白对照),10-10,10-9,10-8,10-7mol/L的成骨生长肽,干预1,3,5,7,9d后应用MTT法检测纯钛试件表面成骨细胞的增殖活性,应用酶联免疫法检测成骨细胞内碱性磷酸酶活性。结果与结论:与空白对照组比较,各浓度成骨生长肽组纯钛试件表面成骨细胞增殖活跃(P<0.05),且最佳作用浓度为10-9mol/L(P<0.05);各浓度成骨生长肽组细胞内碱性磷酸酶活性增强(P<0.05),且最佳作用浓度为10-8mol/L(P<0.05)。表明成骨生长肽可促进钛片表面成骨细胞的增殖活性,增强细胞内碱性磷酸酶活性。     

脉冲电磁场在成骨细胞-破骨细胞共育培养体系中的生物学作用

目的:探讨脉冲电磁场在成骨细胞-破骨细胞共育培养体系中对成骨细胞的影响。方法:实验于2004-03/09在江西博士生物制品公司细胞生物实验室完成。体外分离、培养1d龄SD乳鼠颅骨成骨细胞和四肢骨破骨细胞,利用共育培养板将二者培育在同一环境中;分处理组、空白对照组、阳性对照组3组。处理组共育培养体系施加50Hz,8Gs的脉冲电磁场,1h/d;空白对照组置于同样线圈下而不通以电流;阳性对照组加入成骨细胞促增殖剂氟化钠(1×10-5mol/L);处理7d后观察各组成骨细胞增殖、凋亡、碱性磷酸酶活性变化,处理15d后进行矿化结节测定。结果:①各组成骨细胞增殖情况:合成后期+合成期细胞比率处理组和阳性对照组明显高于空白对照组[(12.34±1.85)%,(14.10±1.40)%,(9.57±1.05)%,χ2=4.25,P<0.01];而处理组和阳性对照组之间差别不显著(P>0.05)。②细胞凋亡情况:处理组和阳性对照组明显低于空白对照组(0.0276±0.0059)%,(0.2853±0.0133)%,(0.0386±0.0031)%,χ2=3.86,P<0.01);而处理组和阳性组之间亦无显著差别(P>0.05)。③碱性磷酸酶活性:经脉冲电磁场作用以后,处理组培养上清碱性磷酸酶活性与空白对照组相比,有一定的升高[(3174±533),(3019±583)nkat/L,t=5.63,P<0.01],而与阳性组之间的差异无显著性意义(P>0.05)。④钙化结节结果:各组每40倍视野下矿化结节平均数量和单个结节平均面积亦均有显著的差异(χ2=3.45,t=6.33,P<0.01),其大小排序为:处理组>阳性组>空白对照组。结论:一定频率和强度的脉冲电磁场对体外共育培养的成骨细胞具有明显的促增殖、促分化及促矿化功能。①经脉冲电磁场作用以后,成骨细胞周期发生了改变,DNA合成和细胞分裂增加,促进了复合培养体系中成骨细胞的自然增殖,减少了成骨细胞的自然凋亡,其促增殖及降低细胞自然凋亡的效应同成骨细胞增殖促进剂氟化钠相当。②脉冲电磁场在促进成骨细胞由幼稚细胞向成熟分泌型细胞分化方面,有明显的促进作用。③经脉冲电磁场作用15d后,共育体系成骨细胞室矿化率增加,成骨细胞矿化功能得以提高,同其经脉冲电磁场作用以后分化加速相适应。     

大鼠成骨细胞增殖及护骨素蛋白含量与甲状旁腺激素的调节效应

目的:体外观察甲状旁腺激素对大鼠成骨细胞增殖和护骨素分泌的调节作用。方法:实验于2005-06/2006-05在四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室完成。采用酶消化法和骨组织块法联合分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞,间歇加药方法将不同浓度0,10-6,10-7,10-8,10-9mol/L甲状旁腺激素作用于大鼠成骨细胞(0mol/L作为空白对照组),经碱性磷酸酶染色及钙结节茜素红染色证实培养的成骨细胞后,采用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖能力,蛋白免疫印迹测定护骨素的分泌量。结果:①成骨细胞的形态变化:倒置相差显微镜下可见培养的成骨细胞呈短梭形、三角形和多边形。碱性磷酸酶染色光镜下可见成骨细胞胞浆中分布特征性蓝紫色细颗粒;成骨细胞的钙结节在镜下可见部分细胞聚集一起呈"集落状"生长。②成骨细胞增殖率:10-6～10-9mol/L浓度甲状旁腺激素对成骨细胞增殖均显示刺激作用,与空白对照组相比,差异显著(P<0.05),增殖率以10-8mol/L甲状旁腺激素组最高。③成骨细胞护骨素的表达:甲状旁腺激素下调成骨细胞中护骨素的分泌,与空白对照组相比,10-6mol/L甲状旁腺激素组抑制作用最明显(P<0.01),无显著剂量依赖性。结论:甲状旁腺激素对体外培养成骨细胞的增殖具有明显促进作用,通过下调成骨细胞中护骨素的分泌,促进破骨细胞生成、活化,促进骨吸收。     

芒果苷对大鼠成骨细胞增殖作用的影响★

背景：芒果苷以及含芒果苷植物提取物具有多方面生理和药理作用,但其是否促进成骨细胞增殖尚未见报道。目的：验证芒果苷对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖的影响。方法：取新生的SD大鼠的颅骨,二次酶消化法培养成骨细胞。应用MTT法及细胞周期的流式细胞仪检测,观察不同浓度的芒果苷对大鼠成骨细胞毒性,不同浓度的芒果苷对体外培养成骨细胞增殖的影响。结果与结论：在一定浓度范围内,不同浓度的芒果苷均可促进成骨细胞增殖、分化,并呈现出一定的量效、时效关系。芒果苷最佳促进增殖浓度为40μmol/L。药物作用时间48,72h,芒果苷20,40,80μmol/L组均有显著促进成骨细胞增殖的作用（P〈0.01或P〈0.05）。芒果苷浓度20,40,80μmol/L等各组细胞S期比值均较正常细胞显著增高,以芒果苷40μmol/L浓度组增高最显著（P〈0.05）。表明在一定浓度范围内,芒果苷具有促进体外成骨细胞增殖的作用。     

基底膜蛋白多糖对成骨细胞增殖及BMP-2分泌影响

目的研究基底膜蛋白多糖对成骨细胞增殖及其分泌骨形态发生蛋白2（BMP-2）的影响。方法体外培养大鼠成骨细胞,随机分为基底膜蛋白多糖抑制剂组（A组）、空白对照组（B组）、低氧状态下基底膜蛋白多糖抑制剂组（C组）、低氧状态下对照组（D组）。各组分别进行相应处理,培养24、48、72、96h。采用细胞增殖检测方法（CCK-8法）和ELISA法,检测并比较各组成骨细胞增殖和分泌BMP-2的变化。结果培养24、48h,A组与B组比较、C组与D组比较成骨细胞增殖活性均降低,差异有显著性（t=4.51~18.04,P〈0.05）;培养72h,各组差异无显著性（P〉0.05）。培养96h内,A组与B组比较、C组与D组比较成骨细胞分泌BMP-2降低,差异有显著性（t=6.61~30.50,P〈0.05）。结论在成骨细胞增殖早期基底膜蛋白多糖对成骨细胞增殖活性有显著影响,并对成骨细胞分泌BMP-2有促进作用。     

人工虎骨粉干预大鼠成骨细胞增殖和Ⅰ型胶原的表达

背景:人工虎骨粉主要用于骨质疏松症、骨折、类风湿关节炎等骨科疾病的治疗,并在临床中取得较好的疗效,但其成骨作用的药物机制尚未明确。目的:观察人工虎骨粉对大鼠成骨细胞增殖和Ⅰ型胶原表达的影响。方法:采用新生SD大鼠颅盖骨组织二次酶消化法培养原代成骨细胞,其中人工虎骨粉干预组细胞培养液的药物终质量浓度分别为10-4,10-5,10-6g/L。对照组给予不含人工虎骨粉的无血清DMEM细胞培养液。结果与结论:噻唑蓝比色法检测结果显示,人工虎骨粉可显著提高成骨细胞增殖活力(P<0.05),流式细胞仪检测结果显示,人工虎骨粉可提高S期和M/G2期细胞分布比例,并伴有G0/G1期细胞比例降低;RT-PCR和ELISA的检测结果显示,各质量浓度人工虎骨粉处理成骨细胞48h,均可以提高成骨细胞Ⅰ型胶原的表达(P<0.05)。结果表明人工虎骨粉对体外培养的大鼠原代成骨细胞具有促增殖作用并可以促进Ⅰ型胶原的合成和分泌。     

大鼠成骨细胞的原代培养和鉴定

背景：组织工程需要大量的种子细胞,成骨细胞已成为骨组织工程构建的重要种子细胞之一。但成骨细胞取材困难,获得的成骨细胞的纯度不一。目的：建立大鼠新生乳鼠颅骨来源成骨细胞的分离培养纯化方法,观察颅骨来源成骨细胞生物学特点。方法：采用二次酶消化法对SD大鼠乳鼠成骨细胞进行原代培养,扩增。通过差速贴壁法进行成骨细胞纯化。通过形态学、细胞碱性磷酸酶检测、茜素红染色、钙结节Vonkossa法染色、超微结构以及细胞增殖曲线,确定其增殖与成骨活性。结果与结论：二次酶消化法培养颅骨来源成骨细胞可获得原代细胞增殖,传代扩增细胞具有典型成骨细胞形态学和生物学活性。碱性磷酸酶、茜素红染色、钙结节Vonkossa法染色均呈阳性结果。超微结构显示为高分化功能活跃成骨细胞,细胞增殖曲线显示细胞生长活跃。提示,新生SD大鼠颅骨来源成骨细胞具有良好的增殖与成骨活性,能连续传代增殖,纯度高,细胞生物学特征稳定,适用于做体外实验研究。     

大鼠成骨细胞与壳聚糖／羟基磷灰石复合支架降解产物的生物相容性

背景：人们对壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架在体内的降解过程并非十分清楚,而且有关其降解产物对成骨细胞的影响研究也较少。目的：分析大鼠成骨细胞与壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架降解产物的生物相容性。方法：将培养的第2代大鼠成骨细胞分别在壳聚糖/羟基磷灰石复合支架降解产物浸提液和含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液中培养,培养第2,4,6,8,10天分别对两组细胞做MTT细胞计数,采用联合会推荐法测定细胞碱性磷酸酶活性,采用BCA蛋白定量法测定总蛋白。结果与结论：在壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架降解产物浸提液中培养的大鼠成骨细胞增殖速度、细胞碱性磷酸酶活性、细胞总蛋白合成及碱性磷酸酶与总蛋白的比值明显高于在体积分数为10%胎牛血清DMEM培养液中培养的细胞（P＜0.05）。表明壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架的降解产物不仅可促进大鼠成骨细胞的黏附、生长和增殖,还可增强其骨化功能,具有较好的生物相容性。     

磷酸三钙陶瓷和钙离子对成骨细胞生长的影响

背景磷酸三钙陶瓷人工骨的主要成分与骨基质中的无机成分相似,可作为填充材料为新骨形成提供支架,发挥骨传导作用.但单纯使用磷酸三钙不具有骨诱导能力,因此提高人工骨的骨诱导能力成为了人们研究的重点.目的观察鼠成骨细胞在体外与磷酸三钙陶瓷和钙离子混合培养时的生长情况,研究磷酸三钙和钙离子对成骨细胞的影响.设计完全随机对照的实验研究.地点和对象实验地点在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成,研究对象为新生大鼠颅骨成骨细胞.干预用酶消化法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,通过扫描电镜对生长于磷酸三钙陶瓷材料上的成骨细胞进行观察,利用[3H]-TdR掺入法检测磷酸三钙对成骨细胞的影响.用体外不同浓度的钙离子(2.5～10 mmol/L)作用于成骨细胞,通过增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫组化分析测定钙离子对成骨细胞增殖的影响.主要观察指标观察实验组和对照组中成骨细胞的生长情况.结果成骨细胞不仅很好地贴附于陶瓷表面,而且细胞的增殖活性未受到抑制.钙离子对体外培养的成骨细胞的增殖无负效影响.结论TCP陶瓷人工骨与成骨细胞有良好的生物相容性,对成骨细胞的生长有一定的促进作用.     

香烟提取物影响大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子的表达

背景：血管平滑肌细胞增殖是心血管系统组织变化的基础。目的：观察不同浓度香烟提取物对大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法：取第3代大鼠主动脉平滑肌细胞,分别用体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物进行干预。结果与结论：实时定量RT-PCR结果显示,体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物作用12h均可促进大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,以体积分数5%香烟提取物的作用最明显,且其刺激大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达在24h内呈时间依赖性。提示香烟提取物可上调大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,导致大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖。     

血小板衍化生长因子A基因转染成骨细胞生长特性的影响

背景:采用基因转染技术加强或改造种子细胞的功能是当今组织工程研究中的热点问题,用血小板衍化生长因子A转染成骨细胞用于牙周组织再生少见报道。目的:观察血小板衍化生长因子A基因转染成骨细胞后对其生长特性的影响。方法:构建血小板衍化生长因子A真核表达质粒,分离培养3T3细胞并进行不同方式的转染,RT-PCR检测血小板衍化生长因子A基因在成骨细胞中的表达;MTT法检测细胞的增殖活性;体外细胞划痕实验观察细胞的迁移情况。结果与结论:RT-PCR检测结果显示,血小板衍化生长因子A真核表达质粒转染的细胞表达量明显增加、生长、迁移速度明显增快(P<0.05)。说明脂质体介导血小板衍化生长因子A基因成功转染成骨细胞,并能促进细胞的增殖和迁移,为血小板衍化生长因子A基因在牙周组织中的治疗奠定基础。     

人工虎骨粉干预大鼠成骨细胞增殖和Ⅰ型胶原的表达

背景：人工虎骨粉主要用于骨质疏松症、骨折、类风湿关节炎等骨科疾病的治疗,并在临床中取得较好的疗效,但其成骨作用的药物机制尚未明确。目的：观察人工虎骨粉对大鼠成骨细胞增殖和Ⅰ型胶原表达的影响。方法：采用新生SD大鼠颅盖骨组织二次酶消化法培养原代成骨细胞,其中人工虎骨粉干预组细胞培养液的药物终质量浓度分别为10-4,10-5,10-6g/L。对照组给予不含人工虎骨粉的无血清DMEM细胞培养液。结果与结论：噻唑蓝比色法检测结果显示,人工虎骨粉可显著提高成骨细胞增殖活力（P〈0.05）,流式细胞仪检测结果显示,人工虎骨粉可提高S期和M/G2期细胞分布比例,并伴有G0/G1期细胞比例降低;RT-PCR和ELISA的检测结果显示,各质量浓度人工虎骨粉处理成骨细胞48h,均可以提高成骨细胞Ⅰ型胶原的表达（P〈0.05）。结果表明人工虎骨粉对体外培养的大鼠原代成骨细胞具有促增殖作用并可以促进Ⅰ型胶原的合成和分泌。     

胶原-纳米羟基磷灰石复合支架的细胞相容性

背景:观察成骨细胞在生物材料上的形态、增殖和分化等项目,可评估生物支架材料的生物相容性。目的:观察复合支架材料纳米羟基磷灰石/胶原对成骨细胞增殖、分化的影响。方法:取新生24h内Wistar大鼠的颅盖骨,采用改良胶原酶消化法进行成骨细胞原代培养,取第3代细胞与纳米羟基磷灰石/胶原支架或普通羟基磷灰石材料体外复合培养。培养3,6,9d后,观察材料周边的细胞形态及支架材料对细胞分化、增殖的影响。结果与结论:纳米羟基磷灰石/胶原材料较普通的羟基磷灰石材料更有利于成骨细胞的黏附、生长、分化、增殖,证实其生物相容性更好,有望成为一种新型的骨组织工程支架材料。     

香烟提取物影响大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子的表达

背景:血管平滑肌细胞增殖是心血管系统组织变化的基础。目的:观察不同浓度香烟提取物对大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法:取第3代大鼠主动脉平滑肌细胞,分别用体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物进行干预。结果与结论:实时定量RT-PCR结果显示,体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物作用12h均可促进大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,以体积分数5%香烟提取物的作用最明显,且其刺激大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达在24h内呈时间依赖性。提示香烟提取物可上调大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,导致大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖。