胃癌组织中核因子-кB的活化及其临床意义

目的: 分析胃癌组织中核因子-кB(NF-кB)-p65成分的表达与临床病理特征的关系,从而探讨NF-кB在胃癌的发生、发展中的意义.方法: 收集1999年3月至2003年6月我院普外科手术切除并经病理组织学证实的胃癌标本92例,胃镜下活检的慢性胃炎标本50例.采用免疫组化SABC法检测组织标本中的NF-кB-p65,比较两组表达的差异及研究NF-кB与临床病理特征的关系.结果: 在92例胃癌标本中70例NF-кB-p65表达阳性(76.1%),可见明显的核移位现象,高于癌旁组织、炎症组织.癌旁组织、炎症组织阳性率分别为40.2%(37/92),54.0%(27/50).胃癌的病理分级低分化组的NF-кB-p65阳性表达率为63.3%(19/30),高中分化组阳性率为82.3%(51/62),两者差异有统计学意义(P<0.01).在胃癌中,年龄、性别、浸润深度、淋巴结有无转移等分组之间NF-кB-p65阳性率及DNA结合活性差异无统计学意义(P0.05).结论: NF-кB在胃癌组织中明显活化,与肿瘤的分化程度具有相关性.     

危重病患者外周血单个核细胞核因子-кB的活性与SOFA评分的关系

目的观察危重病患者外周血单个核细胞核因子-кB(NF-кB)的活性和序贯器官衰竭估计(SOFA)评分的变化,探讨NF-кB对危重病患者病情和预后的预测作用.方法将入住ICU的40例危重病患者分成多器官功能障碍综合征(MODS)组和非MODS组,存活组和死亡组;选择健康体检者20例作为对照组.检测他们外周血单个核细胞NF-кB的活性,并进行SOFA评分.结果危重病患者的NF-кB活性明显高于对照组(P＜0.01);NF-кB的活性和SOFA评分在MODS组和死亡组分别明显高于非MODS组和存活组(P＜0.01);NF-кB的活性和SOFA评分呈明显正相关(r=0.902,P＜0.01).结论外周血单个核细胞NF-кB的活性是判断危重病患者病情和预后的敏感指标.     

IKK/IкB/NF-кB信号通路阻断及临床应用

IKK/IκB/NF-κB是机体重要的信号转导通路，它参与机体众多基因转录的调控，其异常激活与机体许多疾病如肿瘤、变态反应性疾病、急慢性炎症性疾病等的发生及发展密切相关，因此通过阻断该信号通路有望治疗许多疾病，其临床应用前景十分宽广。     

PTEN、AKT2、NF-кB 在肺癌组织表达及临床意义

目的：探讨 PTEN、AKT2、NF-кB 在肺癌组织表达及临床意义。方法随机取62例肺癌组织作为肺癌组与20例肺癌远端（＞5 cm）肺组织为癌旁组,采用免疫组化法与 RT-PCR 方法检测组织中 PTEN、AKT2、NF-кB 蛋白的表达,并分析其相关性和临床意义。结果肺癌组织中 AKT2、NF-кB 的阳性表达率分别为57．89％和79．00％,显著高于癌旁组（15．00％和50．00％）;肺癌组 PTEN 阳性表达率为50．00％,显著低于正常组（90．00％）,差异有统计学意义（均 P ＜0.05）。RT-PCR 显示肺癌组织中 AKT2、NF-кB 的 mRNA 表达量显著高于癌旁组,而 PTEN 的 mRNA表达量显著低于正常组,组间比较差异有统计学意义（P ＜0．05）。PTEN 与 NF-кB 的表达在肺癌组织不同分化程度方面差异显著;PTEN、AKT2、NF-кB 的表达在不同的临床分期与有无淋巴结转移方面,差异有统计学意义（均 P ＜0．05）;PTEN、AKT2、NF-кB 的表达与患者的年龄、性别、组织学类型等无关（均 P ＞0．05）。肺癌组织中 PTEN 的表达与 AKT2、NF-кB 呈负相关（均 P ＜0．05）,而 AKT2与 NF-кB 呈正相关（均 P ＜0．05）。结论在肺癌组织中,PTEN呈低表达,AKT2、NF-кB 呈高表达,PTEN、AKT2、NF-кB 的表达与肺癌发生发展关系密切,可以作为临床诊治肺癌的重要参考指标。     

脂多糖对原代培养神经元核转录因子-кB表达的影响

目的:观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对新生大鼠原代培养皮层神经元的神经毒性以及核转录因子-кB(nuclear factor kappa B,NF-кB)表达的影响,探讨NF-кB的信号通路在LPS损伤神经元过程中所起的作用.方法:体外培养的新生SD大鼠皮层神经元.随机分为对照组、LPS组、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理后再加入LPS组,后两组均用LPS处理48 h.检测各组培养液中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的含量及观察各组神经元的存活率,使用RT-PCR法观察NF-кB的表达.结果:LPS作用后神经元存活率减少,LDH释放量及NF-кB的表达增加.经TPCK预处理的神经元LDH释放量及NF-кB的表达明显低于LPS组,而神经元存活率显著高于LPS组.结论:LPS能引起原代培养皮层神经元的损伤,而TPCK可明显减弱LPS对原代培养皮层神经元的损伤作用,提示NF-кB参与了LPS对原代培养皮层神经元的损伤作用.     

核转录因子-кB对过氧化物酶增殖体激活受体γ调控作用的体外研究

目的 观察脂多糖(LPS)作用下小鼠巨噬细胞(Ana-1)过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)的表达,并通过调控核转录因子-кB(NF-кB)表达观察PPART相应的变化情况.方法 将体外培养的Ana-1细胞按随机数字表法分为对照组,0.1 mg/L LPS作用1、2、4、8 h组,50 mg/L SN50作用4 h组(SN50组),NF-кB高表达质粒转染组.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PPARγ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测TNF-α蛋白表达.构建NF-кB高表达质粒,利用脂质体转染巨噬细胞并通过G418筛选出稳定表达株,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测LPS、SN50作用后及质粒转染后细胞核内PPARγ表达和NF-кB p65亚基核移位情况.结果 在致炎因子LPS作用下,PPARγ的mRNA和蛋白表达均下降.这一变化伴随p65核移位增加和炎症因子TNF-α的升高(P均＜0.05).成功构建了NF-кB p65亚基高表达质粒并将其转染到巨噬细胞中实现了p65高表达.LPS刺激和NF-кB p65亚基高表达质粒转染Ana-1细胞造成p65表达升高时,核内PPARγ表达减少(r=-0.913,P＜0.05);而使用NF-кB抑制剂SN50作用Ana-1细胞抑制p65表达后,核内PPARγ表达升高(r=-0.959,P＜0.05),二者具有良好的负相关性.结论 在LPS作用下,Ana-1细胞内PPARγ表达降低,而这一变化与NF-кB活化相关,调节NF-кB p65亚基表达,PPARγ会向p65改变的相反方向变化.     

NF-к B/Rel转录因子与白血病

NF-кB/Rel蛋白家族是一类参与炎症、免疫、应激、细胞生长及癌症发生等诸多生物学过程中基因调节的重要转录因子。已经发现许多癌症的发生与之相关。本文综述了NF-к B/Rel蛋白在白血病发生及治疗方面的研究进展。NF-кB是正常髓系骨髓细胞转化的调节因子。人类T细胞性白血病病毒Ⅰ型编码的Tax蛋白能通过激活NF-кB而参与人类成人T细胞白血病的发生。一些染色体易位可能影响NF-кB/IкB之间的平衡,从而参与白血病及淋巴瘤的发生。一系列与NF-кB/Rel转录因子相关的白血病化疗药物正在探索之中。     

促血小板生成素在小胶质细胞炎症模型中的表达及与NF-кB的关系

目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预小胶质细胞后细胞内NK-кB及促血小板生成素(thrombo-poietin,TPO)的分泌.方法 将BV2细胞分为6组:(1)空白12 h组;(2)LPS 0.5μg/ml 12 h组;(3)LPS 1μg/ml12 h组;(4)空白24 h组;(5)LPS 0.5μg/ml 24 h组;(6)LPS 1μg/ml 24 h组.采用ELISA法检测细胞内NF-кB和TPO的表达;实时荧光定量PCR法检测细胞内NF-кB及TPO mRNA的表达水平.结果 NF-кB和TPO的表达和mRNA均较空白组升高,且12 h组高于24 h组(P<0.05).TPO与NF-кB的表达呈显著的正相关(P<0.01).结论 LPS干预小胶质细胞后NF-кB和TPO表达升高,参与炎症、凋亡和神经元保护等多种调控机制.     

促红细胞生成素对大鼠急性脊髓损伤后后肢功能及NF-кB表达的影响

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠急性脊髓损伤后神经功能及NF-кB表达的影响,为临床治疗急性脊髓损伤提供实验依据.方法:应用斜板试验、BBB评分法、免疫组化方法对各组大鼠脊髓损伤后神经功能及脊髓组织内NF-кB在各个时点表达变化进行观察,并进行比较.结果:两治疗组大鼠神经功能较损伤组明显提高(P＜0.05),MP组较EPO组恢复缓慢(P＜0.05).EPO组有大量的NF-кB表达,与损伤组比较无明显差异,MP组NF-кB表达明显低于EPO组及损伤组(P＜0.05).结论:EPO对大鼠急性脊髓损伤后NF-кB表达无明显影响,对后肢体功能具有明显的改善作用,可有效促进神经功能恢复.     

电刺激小脑顶核对局灶脑缺血/再灌注后大鼠脑组织NF-кB、PPARγ、IкBα和COX-2 mRNA表达的影响

摘要 目的：观察电刺激小脑顶核（FNS）对大鼠局灶脑缺血/再灌注（I/R）大脑缺血侧皮质PPARγ、IкBα和NF-кB P65蛋白表达的变化,以及对下游炎症因子COX-2 mRNA表达的影响,探讨FNS对大鼠局灶脑缺血/再灌注后脑保护作用的机制。 方法：采用SD大鼠建立局灶I/R模型,随机分为6组。正常对照组（NC组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血再灌注后小脑顶核刺激组（FNS组）,根据再灌注时间不同分为7d和14d两个亚组。采用免疫组织化学法检测NF-κB P65蛋白表达,分别采用Western blotting和逆转录—聚合酶链反应法（RT-PCR）检测PPARγ、IкBα蛋白和COX-2 mRNA表达,同时检测各组脑梗死体积。 结果：免疫组织化学显示I/R 7d组和I/R 14d组NF-κB P65、PPARγ和IкBα蛋白较正常组显著增加（P＜0.05）,FNS组NF-κB P65蛋白表达显著低于相应I/R组（P＜0.05）,Western blotting检测显示FNS组PPARγ、IкBα蛋白表达明显高于相应正常组及I/R组（P＜0.05）,RT-PCR显示FNS组COX-2 mRNA表达较I/R组显著降低（P＜0.05）,而FNS组脑梗死体积较单纯I/R组明显减小（P＜0.05）。 结论：FNS可有效提高脑缺血/再灌注后PAARγ及IкBα表达,抑制由NF-κB P65调控的下游炎症因子COX-2 mRNA的表达,减轻脑梗死体积,这可能是FNS发挥中枢神经保护的机制之一。     

原花青素对急性脊髓损伤大鼠核因子-кB和白细胞介素-6 表达的影响

目的观察原花青素对脊髓损伤后大鼠核因子-кB (NF-кB)、白细胞介素-6 (IL-6)表达变化的影响。方法36 只健康成年Sprague-Dawley 大鼠均分为3 组：原花青素治疗组(A组)、甲基泼尼松龙治疗组(B 组)和对照组(C 组)。采用Allen 法复制大鼠T9急性脊髓损伤模型,于术后1 d、3 d 和7 d 对各组大鼠行后肢运动功能BBB评分和斜板试验;免疫组织化学染色检测脊髓NF-кB和IL-6 的表达。结果术后3 d、7 d,A组、B组大鼠BBB评分和斜板试验成绩均优于C组(P<0.05)。A组术后各时间点NF-кB表达均明显低于C组(P<0.01),B组术后3 d、7 d 的NF-кB表达强度明显低于C组(P<0.01)。术后各时间点,A、B两组IL-6 表达均低于C组(P<0.05)。结论原花青素可抑制脊髓损伤后大鼠脊髓组织NF-кB、IL-6 的表达,有效抑制炎症反应,从而促进大鼠后肢运动功能的恢复。     

小潮气量通气对机械通气导致肺损伤及多器官功能衰竭中核因子-кB活性的影响

目的探讨小潮气量通气对机械通气肺损伤导致多器官功能衰竭(MODS)的保护机制.方法选用24只新西兰兔,制作机械通气相关性肺损伤(VILI)模型,将动物随机分3组,即正常组、传统潮气量组及小潮气量组,在造模结束后6 h收集VILI的炎症反应标志物肺泡灌洗液(BALF)中的中性粒细胞计数及测定肺组织核蛋白核因子-кB(NF-кB)含量,VILI炎症损伤标志物BALF的蛋白含量、肺毛细血管通透指数、肺组织湿/干比和氧合指数,以及循环内皮细胞计数、肝肾功能等指标,同时检测外周血中NF-кB活性.结果根据参考文献建立VILI兔模型,与正常组相比,小潮气量组的BALF中中性粒细胞计数、肺组织核蛋白NF-кB含量、蛋白含量、肺毛细血管通透指数、肺组织湿/干比和氧合指数、循环内皮细胞计数、肝肾功能及外周血中NF-кB含量差异具有显著性(P＜0.05或P＜0.01).结论小潮气量可以降低VILI导致MODS的发生率,可能与小潮气量能够降低NF-кB通路活化有关.     

羟乙基淀粉对内毒素感染大鼠血浆细胞因子表达和单个核细胞NF-кB活性的影响

目的研究羟乙基淀粉溶液(HES 200/0.5)对内毒素腹腔感染大鼠炎症反应的影响,并探讨分子机制.方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素组(LPS 6 mg/kg)、LPS+HES组(HES 3.75、7.5、15、30 mL/kg)及HES对照组(30 mL/kg).分别于LPS注入后4 h检测血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)和细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子(CINC)浓度,2 h检测循环血单个核细胞核转录因子kappaB(NF-кB)水平.结果大鼠内毒素感染时血浆TNF-α和CINC浓度及单个核细胞NF-кB活性明显上升(P＜0.05).3.75和7.5 mL/kg HES能明显降低TNF-α和NF-кB水平(P＜0.05);3.75、7.5和15 mL/kg HES能明显降低CINC水平(P＜0.05).结论较低剂量HES具有抑制内毒素腹腔感染大鼠炎症反应的作用,这种作用的产生与其对NF-кB的抑制有关.HES对感染状态有保护作用.     

survivin mRNA和NF-кB mRNA在原发性肝癌中的表达及其意义──附30例检测结果

目的：探讨存活素信使核糖核酸（survivin mRNA）和核因子-кB信使核糖核酸（nuclearfactor-кB mRNA,NF-кB mRNA）在原发性肝细胞癌（肝癌）癌组织和相应癌旁组织中的表达及其意义。方法：收集肝癌病人的肝癌组织标本及癌旁组织标本各30份,肝血管瘤病人的瘤旁正常肝组织标本（对照组）10份,采用实时荧光定量逆转录PCR技术检测标本中的survivin mRNA和NF-кB mRNA的表达水平,以及研究两者在肝癌组织中的相关性。结果：肝癌癌组织中survivin mRNA的表达水平均高于癌旁组织和正常组织,差异均有统计学意义（P〈0.05-P〈0.01）,而在癌旁组织的表达水平与正常组织的表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。癌组织中NF-кB mRNA的表达均高于癌旁组织和正常组织,差异均有统计学意义（均为P〈0.05）,在正常肝组织、癌旁组织及癌组织中,该因子的表达呈逐渐升高的趋势。survivin mRNA和NF-кB mRNA在肝癌癌组织中的表达呈正相关（r=0.36,P〈0.05）。结论：survivin mRNA和NF-кB mRNA在肝癌癌组织中呈高表达,且两者在癌组织中的表达呈正相关,提示两者可能与肝癌的发生、发展有关。     

高浓度氧对成年大鼠肺组织NF-кB和IL-8表达的影响

目的通过观察不同持续时间高浓度吸氧对大鼠肺组织NF-кB和IL-8的影响,探讨高浓度氧所致肺组织损伤(HILI)的发生时间和机制。方法 40只成年雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为5组,即对照组(吸入空气)、吸氧48 h组、72 h组、96 h组和120 h组,吸入氧浓度均在95%以上。测定肺组织湿干重比值(W/D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数;采用免疫组织化学法检测肺组织NF-кB和IL-8的表达水平。结果随着高浓度氧暴露时间延长,肺组织W/D、肺组织NF-кB和IL-8蛋白表达水平及BALF中性粒细胞计数均逐渐增加,其中96 h组和120 h组增加最明显,与对照组、48 h组及72 h组比较均有统计学意义(均P<0.01),而对照组、48 h和72 h组之间,以及96 h组和120 h组之间各项指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析表明,肺组织NF-кB与IL-8蛋白表达水平之间呈正相关(r=0.856,P<0.001)。结论高浓度吸氧持续96 h以上即可引起肺组织损伤,其发生可能与高浓度氧激活肺组织细胞NF-кB,上调IL-8表达,导致中性粒细胞聚集、活化引起的炎症反应有关。     

脐血与成人外周血血浆对脂多糖诱导的血管内皮细胞TLR4/NF-кB表达的影响

目的:探讨脐血血浆与成人外周血血浆对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞TLR4/NF-кB表达的影响.方法:采集剖宫产分娩的足月健康孕妇脐血和健康成人外周血各20份,制备血浆.将体外培养的人脐静脉内皮细胞ECV304分为两组,(1)脐血组,加入1 μg/mL的LPS和10%的脐血血浆;(2)成人外周血组,加入1 μg/mL的LPS和10%的成人外周血血浆.逆转录-聚合酶链反应检测TLR4 mRNA的表达,免疫印迹法检测TLR4、IкBα蛋白的表达.结果:脐血组TLR4 mRNA及TLR4蛋白的表达量显著低于成人外周血组(P<0.01),脐血组IкBα的蛋白表达量显著高于成人外周血组(P<0.01).结论:脐血血浆抑制LPS诱导的内皮细胞TLR4/NF-кB活化,从而抑制其炎症反应.     

阿霉素对肝癌细胞核因子кB活化及细胞周期基因D1表达的影响

目的 探讨阿霉素诱导肝癌细胞凋亡过程中的表达及其对细胞周期的影响. 方法 体外培养人肝癌细胞椿BEL-7402,应用流式细胞术检测阿霉素对BEL-7402细胞周期和凋亡的影响;细胞免疫组织化学检测不同浓度阿霉素处理BEL-7402细胞后棱因子кB(NF-кB)p65亚基入核情况;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞周期基因D1(cyclin D1)表达的差异. 结果 阿霉素诱导BEL-7402细胞凋亡具有时效争量效关系,1、10、100 mg/L作用24小时后,其诱导细胞凋亡率分别为(13.80±1.20)%、(23.73±3.01)%和(30.02±3.85)%,与对照组(5.20±0.98)%相比差异有统计学意义(P<0.05);随着阿霉素用药浓度的增加,S期细胞比例和细胞增殖指数增加,NF-кBp65被激活并入核,其下游cyclin D1基因的表达逐渐增强. 结论 阿霉素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡的同时可激活NF-кB,其下游基因cyclin D1过度表达可能是促进细胞增殖、对抗细胞凋亡的重要因素之一.     

吡格列酮抑制实验鼠损伤血管的IL-1β和NF-кB表达及内膜增生研究

摘要：目的：观察吡格列酮对非糖尿病血管损伤模型鼠内膜增生反应、血管组织局部核因子kappa B(NF-кB)和外周血单个核细胞白介素-1β（IL-1β）表达的影响。方法：建立实验鼠颈总动脉通气—干燥法损伤模型，观察吡格列酮干预后实验大鼠颈总动脉血管内膜增生情况，并应用原位杂交技术分析NF-кB的表达和用半定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）的方法检测外周血单个核细胞IL-1βmRNA的表达。结果：两组损伤血管管腔均较对照侧显著狭窄；实验组和安慰组的对照侧血管均几乎未见NF-Kappa B P65mRNA表达，损伤侧血管在手术后1周见NF-Kappa B P65mRNA表达，且实验组与安慰组表达无显著性差异，第2周时两组均较第1周时表达更为显著（P<0.05），且安慰组相对实验组表达增加；吡格列酮干预后，实验组IL-1βmRNA的相对半定量值较安慰剂组差异具有显著性（P<0.05）。结论：1． 通气-干燥法血管损伤后外周血单个核细胞IL-1βmRNA表达及血管局部NF-кB原位表达增加、血管内膜面积增大。2. 外周血单个核细胞IL-1βmRNA和血管壁局部NF-кB表达水平与血管内膜面积存在正相关关系。3. 吡格列酮抑制损伤血管的内膜增生及NF-кB原位表达和外周血单个核细胞IL-1βmRNA的表达，且不依赖其代谢调节作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞NF—кBDNA结合活性测定及其临床意义

目的：观察系统性红斑狼疮（SLE）患者NF-кBDNA结合活性变化及其意义。方法：6例SLE患者，5例健康人作为对照，NF-кBDNA结合活性测定采用凝胶滞留电泳。结果：健康对照组5例外周血单个核细胞（PBMC）NF-кB凝胶滞留电泳均为阴性，6例SLE患者中5例阳性，1例阴性，以血清抗dsDNA抗体的滴度为指标，5例显著升高者的NF-кBDNA结合活性也显著升高，1例阴性，NF-кBDNA结合活性与抗dsDNA抗体的滴度呈显著正相关。结论：SLE的NF-кBDNA结合活性显著升高，且与病情活动性有关。     

恶性血液病细胞核因子кB活化及其机制研究进展

核因子kappaB(NF-κB)在炎症反应、免疫应答、胚胎发育、细胞增殖与凋亡、细胞周期调控以及肿瘤的发生与发展中起着非常重要的作用。近几年的研究显示,NF-κB与恶性血液病如白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤的发生关系密切。目前,恶性血液病细胞NF-κB的活化及其机制的研究已日益受到人们的关注,本文就近几年此方面的有关进展作简要的综述。