内侧隔核胆碱能神经元参与SNI神经病理性疼痛大鼠模式分离障碍

目的:研究部分神经损伤(spared nerve injury, SNI)神经病理性疼痛大鼠导致模式分离(pattern separation)障碍的机制。方法:实验分为两部分,第一部分实验大鼠分为两组:假手术(sham SNI)组、SNI组;第二部分实验大鼠分为两组:假损毁、SAP损毁。首先制作SNI神经病理性疼痛模型,之后用八臂迷宫进行模式分离实验来比较sham SNI和SNI实验组大鼠的空间认知水平。此外用SAP (192Ig G-saporin)的方式损毁内侧隔核(medial septum, MS)内的胆碱能神经元,用八臂迷宫来比较损毁组和对照组大鼠的模式分离变化。结果:SNI组大鼠在八臂迷宫中的正确率明显低于sham SNI组,并且SNI导致内侧隔核内的胆碱能神经元数目降低,而损毁MS内胆碱能神经元后大鼠八臂迷宫的正确率明显低于假损毁组。结论:SNI神经病理性疼痛导致模式分离障碍可能与内侧隔核中的胆碱能神经元有关。     

背根神经节血红素加氧酶1过表达缓解小鼠神经病理性疼痛

目的:探讨背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)的表达分布及在DRG中过表达HO-1对神经病理性疼痛的作用。方法:构建保留性坐骨神经损伤(spared nerve injury,SNI)诱导的神经病理性疼痛模型;行为学检测机械性触诱发痛;免疫荧光染色检测DRG中HO-1在神经元中表达和分布;免疫印迹检测DRG中HO-1表达。结果:免疫荧光染色显示DRG中HO-1阳性神经元在SNI后数量显著减少;DRG中HO-1阳性神经元主要是IB4阳性的小型神经元(<300μm2);连续5天腹腔注射原卟啉IX氯化钴(cobalt protoporphyrin-IX,CoPP)能增加神经病理性疼痛小鼠的机械缩足阈值;鞘内注射过表达HO-1的腺病毒相关病毒(adenovirus associated virus,AAV)能特异性浸染DRG神经元,并上调HO-1表达;同时能有效提高神经病理性疼痛小鼠的机械缩足阈值,此效应持续21天以上。结论:DRG中HO-1主要表达在IB4阳性的小型神经元;过表达DRG神经元中HO-1能有效缓解SNI诱导的神经病理性疼痛。     

次声作用对大鼠记忆功能及隔内侧核和斜角带核胆碱能神经元表达的影响

目的　探讨次声作用对大鼠记忆功能及斜角带核和隔内侧核胆碱能神经元表达的影响。方法　记忆保持SD大鼠接受16Hz,90dB或130dB次声照射,2h/次     

坐骨神经松扎致神经病理性疼痛诱导触液神经元ERK1/2蛋白的表达

目的:探讨远位触液神经元在坐骨神经松扎致神经病理性疼痛信息调控中的作用。方法:采用CB-HRP/pERK1/2双重标记技术,观察坐骨神经松扎致神经病理性疼痛大鼠远位触液神经元中ERK1/2样免疫反应蛋白(pERK1/2)表达的变化。结果:坐骨神经松扎致神经病理性疼痛刺激后,不仅热痛觉阈值显著下降,而且远位触液神经元内的ERK1/2蛋白活化表达的数量显著增加,与空白对照组比较有显著性差异。结论:远位触液神经元可能参与了机体对坐骨神经松扎致神经病理性疼痛的信息传递或调控。     

鞘内应用普瑞巴林对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其电生理学机制研究

目的:研究鞘内应用普瑞巴林(pregabalin,PGB),一种新型抗癫痫药,对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其可能的机制。方法:(1)雄性SD大鼠鞘内置管,手术成功后进行坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)手术。术后10 d用von Frey纤维丝测定机械痛敏,将筛选出造模成功的SNI神经病理性疼痛大鼠,按体重随机分为两组(n=10),通过鞘内插管分别鞘内给予(i.t.)普瑞巴林100μg/d或等体积的生理盐水(saline,NS)作阴性对照,连续3 d给药。在每次给药后24 h测定大鼠后爪的50%缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)及鞘内给药前后大鼠的运动功能。(2)通过在体细胞外记录的电生理学方法,观察脊髓背表面给予普瑞巴林100μg对SNI大鼠脊髓背角广动力范围,(wide dynamic range,WDR)神经元C纤维诱发放电的影响。结果:(1)与NS组相比,鞘内应用普瑞巴林100μg/d,连用3 d,能显著增加SNI大鼠术侧后爪的50%PWT,起到显著的镇痛作用(P<0.001,n=10),给药前后大鼠的运动功能没有明显改变(P>0.05,n=10)。(2)与NS组相比,脊髓背表面给予普瑞巴林100μg可以显著抑制SNI大鼠WDR神经元的C纤维诱发放电(P<0.001,n=9)。结论:鞘内应用普瑞巴林100μg/d可以对SNI大鼠产生显著的镇痛作用而不影响其运动功能,该机制可能与通过WDR神经元的C纤维诱发放电有关。     

电针改变CFA炎症痛大鼠前扣带回脑区神经元放电活动

目的:研究电针对炎症痛大鼠前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)神经元放电的影响。方法:实验大鼠分为4组:CFA炎症痛模型组加电针,CFA炎症痛模型组加假电针,对照组加电针,对照组加假电针。应用多通道在体记录技术,记录在电针前、后1 h内以及给予激光痛刺激前、后ACC神经元的放电,处理记录到的神经信号并进行统计分析。结果:电针后,CFA炎症痛组和对照组大鼠ACC神经元的平均放电率均增高,CFA炎症痛组大鼠ACC脑区内对激光痛刺激有反应的兴奋性神经元反应性降低。结论:电针激活炎症痛大鼠ACC脑区的神经元,但抑制ACC脑区内对痛刺激起兴奋性反应的神经元。推测电针通过调节ACC脑区神经元活动而镇痛。     

中药SSY-B2对大鼠穹窿伞切断后神经元和神经生长因子表达的影响

目的评价中药制剂SSY B2对神经元丧失及神经生长因子 (NGF)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为 6组 :假手术组、模型组、阳性对照药脑复康治疗组、SSY B2小剂量治疗组 ( 1 5 g生药 /kg) ,SSY B2中剂量治疗组 ( 3 g生药 /kg) ,SSY B2大剂量治疗组 ( 6g生药 /kg)。采用切断大鼠双侧隔海马穹窿伞的模型 ,术后给予药物治疗或灌水 6周 ,在大鼠行为学测试结束后 ,采用尼氏染色和免疫组织化学方法 ,对内侧隔区的神经元和不同脑区的NGF阳性神经元进行测量。结果模型组内侧隔区神经元数减少 ( 2 0 3 3± 14 0 1) ,SSY B2小剂量组 ( 5 9 13± 2 2 0 2 )、中剂量组 ( 5 0 60± 2 3 18)、大剂量组 ( 63 93± 18 3 5 )与模型组相比 ,P <0 0 0 5。模型组内侧隔核、海马齿状回多形层和内嗅皮层 /下托区的NGF阳性细胞与假手术组相比有所减少 (P >0 0 5 )。在内侧隔核 ,SSY B2各剂量均能明显促进NGF的表达 (均P <0 0 0 5 )。在海马齿状回多形层和内嗅皮层 /下托区 ,SSY B2小、中剂量均能促进NGF的表达 (P <0 0 5 )。结论SSY B2减少了大鼠内侧隔核神经元的丧失 ,这可能与此区NGF的表达增强有关 ;SSY B2使海马齿状回、下托和内嗅皮层NGF表达增强 ,有助于这些区域发挥一定的学习记忆代偿功能。     

胶质细胞MCP-1—JAK/STAT作用于神经元NMDAR参与神经病理性疼痛的研究进展

神经病理性疼痛是躯体感觉神经系统损伤或疾病而造成的疼痛,发病机制复杂。神经组织损伤后,胶质细胞活化,分泌炎症因子如IL-6和MCP-1等,作用于突触后神经元NMDAR,引起中枢敏化,最终导致神经病理性疼痛。但活化的胶质细胞分泌的炎症因子是通过何种机制激活神经元NMDAR,目前仍不清楚。而JAK/STAT信号通路能将胞外信号传递到核内,从而在胶质细胞的活化及其引起的神经病理性疼痛中发挥重要作用。因此本综述将简要介绍胶质细胞MCP-1—JAK/STAT信号转导与神经元NMDAR活化的联系及其参与神经病理性疼痛的形成和发展。     

α_2肾上腺素受体亚型对神经病理性疼痛大鼠镇痛作用的电生理研究

目的:研究α2肾上腺素受体(α2-adrenoceptors,α2-AR)不同亚型在神经病理性疼痛中的作用及其可能机制。方法:成年SD大鼠行保留性脊神经损伤手术(Spared Nerve Injury,SNI),术后14天测缩足阈值(Paw withdrawal threshold,PWT),以PWT≤4 g为造模成功。通过胞外电生理记录的方法,脊髓表面给予α2-AR三个不同亚型(α2A-AR,α2B-AR,α2C-AR)激动剂和拮抗剂,观察其对脊髓背角广动力范围神经元(wide-dynamic range neurons,WDR)诱发放电影响。通过连续鞘内给药方法,进一步验证α2-AR特定亚型激动剂对SNI大鼠50%PWT的影响。结果:(1)α2A-AR激动剂可以显著地抑制WDR神经元的诱发放电(P<0.01,n=10),而α2A-AR拮抗剂能够逆转这种作用。(2)α2B-AR拮抗剂、α2C-AR激动剂和α2C-AR拮抗剂对WDR神经元的诱发放电均无明显的影响(P>0.05,n=9)。(3)鞘内给予α2A-AR激动剂可以显著的提高SNI神经病理性痛大鼠50%PWT。结论:α2-AR激动剂在神经病理性疼痛大鼠脊髓水平的镇痛作用可能主要是通过激动α2A-AR而实现的。     

鞘内注射AIP对神经病理性痛大鼠的镇痛作用及脊髓背角神经元磷酸化CREB的影响

目的:探讨钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)在神经病理性疼痛中的作用。方法:坐骨神经选择性损伤(SNI)大鼠模型,随机分为4组(n=8):SNI组,Sham组,NS组,AIP组,后两组分别于术前20 min鞘内注射10μl的生理盐水或10%的AIP。于术后1d、2d、3d、4d、6d、8d、10d、14d测定大鼠机械缩足反射阈值(mechanical with-drawal threshold,MWT)。分别于术后1d、3d、7d取大鼠脊髓腰段,用免疫组织化学法(n=6)检测脊髓背角磷酸化pCaMKⅡ的表达;Western blot法(n=4)检测脊髓背角神经元细胞核内pCREB的表达。结果:术后1~3d AIP组大鼠MWT较NS组明显升高(P<0.01);术前鞘内注射AIP在术后1d、3d能够使脊髓背角pCaMKⅡ的表达减少,同时脊髓背角神经元细胞核内pCREB的表达也明显减少。结论:CaMKⅡ参与了神经病理性痛的形成,其作用部分通过CREB介导。     

CYTOCHROME OXIDASE IN NORMAL AND REGENERATING NEURONS

Manometric determinations of cytochrome oxidase activity were carried out on grey matter from the thalamus and anterior horn of cats and monkeys under various experimental conditions. The thalamus of the cat was studied following the degeneration of virtually all the thalamic neurons secondary to decortication. In comparing the deneuronated thalamus with the normal one, it was found that approximately 34 per cent of the cytochrome oxidase activity was contributed by the neurons and the balance by neuroglia and mesodermal tissues which on the operated side remained comparable to that of the normal side. Total activity of the normal thalamus averaged 5.52 units per mg. of dry weight where I unit is defined as the amount of cytochrome oxidase required to produce a net oxygen consumption of 10 c.mm. per hour under the specified conditions of the experiment. The grey matter of the anterior horns of the spinal cord was isolated by a special technique and its cytochrome oxidase activity was compared with anterior horns in which motoneurons had been stimulated to regenerative activity by section of peripheral nerves. Each animal was studied in relation to an anterior horn which was normal and one in which only the functional state of the motoneurons had been changed. Average normal levels of 2.23 units were found for cat anterior horn and 0.69 units for the monkey. Reductions of cytochrome oxidase activity in the range of 22 to 23 per cent were observed for both cat and monkey following nerve section. In the latter the time sequence was carefully studied in relation to the cytological cycle known as chromatolysis and a virus refractory state previously described by us. It was found that maximal reduction of cytochrome oxidase activity coincided with maximal refractoriness of the cells to poliomyelitis virus (30 to 70 days following nerve section). Neither of these states could be correlated in time with maximal chromatolysis (10 to 15 days).     

nesfatin-1对大鼠迷走复合体内葡萄糖感受神经元和胃扩张敏感神经元兴奋性的作用

目的观察nesfatin-1对大鼠迷走神经复合体（DVC）内胃扩张敏感神经元和葡萄糖感受神经元放电频率的调制作用,探讨其参与摄食调控的可能机制。方法采用多管玻璃微电极记录单个细胞单位放电的电生理学方法,观察大鼠DVC区微量注射nesfatin-1前后上述两种神经元放电频率的变化,以微量注射9 g/L NaCl作对照。结果在DVC中记录到经多管微电极给予葡萄糖的109个神经元,有46个神经元放电频率降低（鉴定为G-INH）;31个神经元放电频率升高（鉴定为G-EXC）;32个神经元对葡萄糖没有反应。在39个G-INH经多管微电极给予nesfatin-1,有33个神经元放电频率降低,1个神经元放电频率升高,5个神经元对nesfatin-1无反应。在26个G-EXC神经元中,有20个神经元放电频率升高,3个神经元放电频率降低,3个神经元对nesfatin-1无反应。对89个神经元进行胃扩张（GD）刺激,在DVC中记录到48个神经元被激活（鉴定为GD-EXC）,21个神经元被抑制（鉴定为GD-INH）,其余20个神经元对胃扩张无反应。在42个GD-EXC神经元中,32个神经元被nesfatin-1所兴奋,10个神经元对nesfatin-1无反应。在18个GD-INH神经元中,16个神经元被nesfatin-1所抑制,2个神经元无反应。上述两类神经元经多管微电极给予9 g/L NaCl,注射前后神经元放电频率的变化无统计学意义。结论 nesfatin-1能够调制DVC胃扩张敏感神经元和葡萄糖感受神经元的兴奋性,这可能是nesfatin-1抑制摄食的部分机制。     

大鼠丘脑中央下核神经元对针刺的反应

本文采用玻璃微电极细胞外记录的方法，观察了大鼠丘脑中央下核（Ｓｍ）神经元对针刺的的反应。对手针刺激反应的神经元一般地也对伤害性皮肤或肌肉刺激发生反应，提示针刺与伤害性机械刺激具有相同或相似的属性，Ｓｍ可能在针感形成及针刺镇痛的中枢机制中起重要作用。本研究为脊髓－Ｓｍ－ＶＬＯ－ＰＡＧ－脊髓痛调制负反馈环路参与针刺镇痛，尤其是细纤维镇痛的设想提供了支持。     

受损背根节A类神经元的阈下膜电位振荡

目的：研究慢性压迫大鼠背根神经节(dorsal root ganglion，DRG)神经元阈下膜电位振荡(subthreshold membrane potential oscillation，SMPO)的特征及其与异位自发放电的关系。方法：采用在体DRG神经元细胞内记录。结果：在慢性压迫的650例DRG神经元，93例A类神经元出现具有特定频率及幅值的SMPO。对其进行研究发现，异位自发放电起始于SMPO的上升相，SMPO的规则、梭形及不规则形式分别决定了异位自发放电的周期／整数倍、阵发及不规则放电模式。有SMPO的神经元，其兴奋性高于没有SMPO的神经元。此外，低浓度河豚毒可以阻断SMPO的产生，进而消除异位自发放电。结论：阈下膜电位振荡是产生异位自发放电的基础，反映了初级感觉神经元超兴奋的基本电生理变化。     

酪胺对小鼠三叉神经节神经元A型钾通道的影响

目的:探讨酪胺对小鼠三叉神经节神经元细胞膜电压依赖性钾通道电流及其兴奋性的影响。方法:急性分离小鼠三叉神经节神经元,采用全细胞膜片钳技术测定不同浓度酪胺(1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM)对瞬时外向型钾通道(A型钾电流,IA)以及延迟整流型钾通道(IDR)电流的影响,并观察0.1μM的酪胺对电压依赖性钠通道及钙通道的影响。结果:如下浓度的酪胺1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM对A型钾电流的抑制率分别为(48.21±11.72)%(32.25±2.07)%,(23.84±2.69)%,(16.26±2.72)%及(7.07±2.91)%;0.1μM酪胺对电压依赖性钠通道和延迟整流型钾电流无明显影响,仅对钙电流有轻度的抑制作用,抑制率为(11.34±4.97)%;0.1μM酪胺能增强小鼠三叉神经节神经元的放电频率。结论:酪胺呈浓度依赖性抑制A型钾电流;酪胺通过下调A型钾电流增强三叉神经节神经元的兴奋性,增加TGN(trigeminal ganglion neurons)的伤害性传导,从而降低痛阈,导致疼痛。     

大鼠受损背根节中型感觉神经元的温度敏感性

目的：观察大鼠损伤背根节（DRG）中型感觉神经元的热温度敏感性。方法：在急性离散的大鼠DRG中型神经元上,运用全细胞膜片钳技术,观察不同温度梯度刺激下受损DRG神经元的放电的特征。结果：大鼠损伤DRG中型神经元与热温度变化有一定的关系,它们根据放电模式可分为3型,其中62%（26/42）的中型神经元与热温度变化密切相关,随着温度的升高而引发的逐渐增强的膜电位去极化可引发频率由低到高的动作电位。随着温度的降低神经元又表现出频率由高到低的动作电位变化,放电后有规律的膜电位振荡,于较弱的超极化刺激可产生反跳动作电位,动作电位的幅值不一致。该类神经元具有电压依赖性。结论：大鼠受损DRG中型感觉神经元特别是紧张型放电的神经元对非伤害性刺激反应强烈,具有热温度敏感性。