阴沟肠杆菌β-内酰胺酶的检测与分型

目的：了解该地区临床细菌感染分离的标本中阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药性以及细菌产β-内酰胺酶的类型。方法在该地区医院通过细菌培养分离阴沟肠杆菌88例，用纸片扩散法进行药敏测定；通过改良三维实验检测临床耐药菌高产β-内酰胺酶及其分型。结果在研究菌株中，有17例菌株单产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），占19．32％。有20例菌株单产AmpC酶，占22．73％。有5例菌株同时产AmpC酶和ESBLs ，占5．68％。有47例菌株AmpC酶和ESBLs均不产生，占52．27％。结论该地区临床分离的阴沟肠杆菌存在普遍耐药，将近一半的耐药菌产AmpC酶或/和ESBLs ，尚有52．27％的菌产生其他β-内酰胺酶。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药机制研究

目的了解阴沟肠杆菌临床分离株AmpC酶和ESBLs的产生情况并分析其耐药特性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用改良的酶提出物三维试验法对186株阴沟肠杆菌进行AmpC酶和ESBLs检测,用K-B法对14种常用抗菌药物进行药物敏感试验。结果186株阴沟肠杆菌中,产AmpC酶的菌株63株,占33．9％;产ESBI_s的菌株有28株,占15．1％;同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有18株,占9．7％。药敏结果显示,186株阴沟肠杆菌对头孢唑林、氨苄西林、头孢西丁等抗菌药物的耐药率较高,对亚胺培南、舒普深的耐药率较低。结论阴沟肠杆菌已呈现出多重耐药性,其耐药机制较为复杂,可表现为阻遏高产AmpC酶、产ESBLs,也可表现为同时产AmpC酶和ESBLs等多种耐药表型。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的明确阴沟肠杆菌产头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,分析细菌产酶与药物耐药间的关系,指导临床合理用药。方法非重复阴沟肠杆菌共174株采用Microscan walkaway-40SI全自动细菌鉴定与药敏分析仪进行细菌鉴定及药敏试验;采用多底物协同-拮抗法(MSSAT)检测ESBLs和AmpC酶。结果 174株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶92株(52.87%),其中高诱导型25株,部分去阻遏型33株,完全去阻遏型22株;同时产AmpC酶和ESBLs 54株(31.03%);单产ESBLs 1株(0.57%);AmpC酶和ESBLs均不产有27株(15.52%);阴沟肠杆菌产酶株的耐药率明显高于不产酶株的耐药率(P0.05),同时产AmpC酶和ESBLs菌株的耐药率高于单产AmpC酶株的耐药率(P0.05);产AmpC酶和ESBLs菌株对头孢曲松、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率均高于92.0%,对氨曲南耐药率高达88.9%,对阿米卡星耐药率较低(14.8%),对亚胺培南耐药率为0%。结论阴沟肠杆菌以产AmpC酶为主,单产ESBLs菌株少,同时产AmpC酶和ESBLs的菌株对三代头孢菌素、单环类、青霉素类具有高度耐药性,对碳青霉烯类药物敏感;碳青霉烯类抗菌药物依然是治疗多重耐药阴沟肠杆菌感染的首选。     

产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的 分析产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β lactamases,ESBLs）及AmpC酶的阴沟肠杆菌的分布情况及耐药特征.方法 选择49株阴沟肠杆菌,采用纸片扩散法进行药物敏感试验,按美国临床实验室标准化协会推荐的确证试验检测产ESBLs阳性菌株;头孢西丁纸片扩散法初步筛选产AmpC酶阳性菌株,采用PCR检测AmpC酶基因.结果 抗生素敏感试验结果显示阴沟肠杆菌对头孢西丁、替卡西林/克拉维酸、头孢曲松、氨曲南的耐药率均达79.6％以上,对美罗培南敏感率较高,达91.8％.49株阴沟肠杆菌中对头孢西丁耐药的菌株46株（93.9％）;产ESBLs菌株29株（59.2％）,PCR 扩增产AmpC酶的阴沟肠杆菌36株（73.5％）,同时产两种酶的菌株为13株（26.5％）.结论 产ESBLs 及AmpC酶阴沟肠杆菌普遍且耐药现象严重.     

临床分离阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶及其基因分析

目的探讨临床分离阴沟肠杆菌对β内酰胺类抗生素的耐药性及其机制。方法采用κ—B法药敏试验检测临床分离阴沟肠杆菌耐药表型；双纸片确认试验和增效试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）或／和高产AmpC酶菌株；PCR方法检测TEM-1、SHV-1、CTX—M型ESBLs编码基因，PCR产物直接测序分析其基因亚型。结果（1）被检菌株对IPM、AK、FEP、CIP耐药率分别是0．0％、14.1％、31.5％、48.4％；对其他常用β-内酰胺类抗生素、CN、SXT等耐药率在50.0％～90.0％以上；（2）88．1％菌株高产AmpC酶或／和产ESBLs；高产AmpC酶、单产ESBLs、同时产AmpC酶和ESBLs的菌株检出率分别为27.38％、16.67％、44.05％。60.70％菌株产ESBLs。（3）TEM-1、SHV-1、CTX-M1组ESBLs编码基因检出率分别为75.00％、23.44％、77.27％。（4）基因序列分析显示存在SHV-12、CTX-M 3.9a、14、22等ESBLs编码基因，以SHV-12、CTX—M14、22为主。结论临床分离阴沟肠杆菌多重耐药严重，对β内酰胺类抗生素的耐药机制复杂，ESBLs编码基因亚型以SHV-12、CTX—M14、22为主。     

产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌的耐药特性及其产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况。方法对2005年4月-2007年7月的各类标本进行阴沟肠杆菌的分离培养,用VITEK32全自动微生物分析系统进行细菌鉴定及药敏试验。ESBLs检测采用NCCLS纸片确证试验,用酶提取三维试验检测AmpC酶。结果在63株阴沟肠杆菌中,20．6％的菌株单产AmpC酶;38．1％的菌株单产ESBLs;9．5％的菌株同时产生AmpC酶和ESBLs;31．8％的菌株均不产AmpC酶和ESBLs。产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同时产生AmpC酶和ESBLs的菌株中尤为严重。结论本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。产AmpC酶及ESBLs的细菌耐药性不完全相同,产酶类型不同,需选用不同类型的抗菌药物。     

阴沟肠杆菌ESBLs、AmpC酶和AmpC酶基因型的检测及耐药性分析

目的探讨阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶的产生情况、AmpC酶的耐药基因型及对常用抗菌药物的耐药特征,为临床治疗提供选药参考。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和K-B纸片法测定药敏结果;采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并通过酶粗提物头孢西丁三维试验、接合试验、PCR测序等实验分析该菌株的基因型。结果 157株阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶总检出率分别为31.21%和32.48%,其中,单产AmpC酶、同产AmpC酶+ESBLs、单产ESBLs检出率分别为17.20%、7.64%和23.57%;AmpC酶阳性菌株的耐药基因型:30株为DHA型,9株为CIT型。产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重,产与非产AmpC酶(和)ESBLs菌株对亚胺培南的敏感率几乎达100%。结论台州地区阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高,AmpC酶以DHA-1基因型为主。产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药,限制β-内酰胺类抗菌药物的应用是减少产酶株流行的重要措施。     

多重耐药阴沟肠杆菌的耐药性及分子流行病学研究

目的掌握阴沟肠杆菌的耐药谱及分子流行病学特征。方法耐药谱选用改良K-B法,基因分型采用随机扩增多态DNA(RAPD)法。结果48株阴沟肠杆菌中ESBLs检出率为35.4%,未发现亚胺培南耐药株,产ESBLs和不产ESBLs菌株间的耐药率存在显著性差异。RAPD基因分型得的遗传聚类图,可分为四类,1、2、5、6号标本为同一聚类群。结论阴沟肠杆菌有很高的耐药性,阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南,其次为阿米卡星和环丙沙星。RAPD技术对阴沟肠杆菌感染同源性分析是一个有效的方法。     

阴沟肠杆菌临床感染分布特征及耐药性分析

目的了解川北地区阴沟肠杆菌的临床分布特征及耐药情况。方法回顾性分析临床分离59株阴沟肠杆菌的临床感染分布情况,琼脂稀释法进行药敏试验,改良三维试验检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和产AmpCβ-内酰胺酶(AmpC),敏感、中介、耐药的判定采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)2006年公布的标准。结果 59株阴沟肠杆菌在痰液和尿液标本、重症监护病房和呼吸科检出率高,且全部菌株除对亚胺培南耐药率极低外(3.39%),对其他11种抗菌药物的耐药率均大于20%;59株细菌中,检出产ESBLs和AmpC共计34株,单产ESBLs、同时产AmpC和ESBLs、单产AmpC菌株检出率分别为30.5%、8.47%、18.65%,ESBLs阳性菌株的检出率为38.97%,且ESBLs阳性菌株对除亚胺培南之外的其他11种抗菌药物显示了极高耐药率(44.45%~100%)。结论川北地区阴沟肠杆菌以引起危重患者的呼吸道和泌尿道感染为主,阴沟肠杆菌具有较高的ESBLs检出率,且多重耐药严重。     

多重耐药阴沟肠杆菌的耐药性及分子流行病学研究

目的掌握阴沟肠杆菌的耐药谱及分子流行病学特征.方法耐药谱选用改良K-B法,基因分型采用随机扩增多态DNA(RAPD)法.结果48株阴沟肠杆菌中ESBLs检出率为35.4%,未发现亚胺培南耐药株,产ESBLs和不产ESBLs菌株间的耐药率存在显著性差异.RAPD基因分型得的遗传聚类图,可分为四类,1、2、5、6号标本为同一聚类群.结论阴沟肠杆菌有很高的耐药性,阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南,其次为阿米卡星和环丙沙星.RAPD技术对阴沟肠杆菌感染同源性分析是一个有效的方法.     

陕西某院产β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的分析陕西中医学院第二附属医院阴沟肠杆菌的流行现状与耐药性,为临床合理用药提供依据。方法收集2011年10月至2014年10月该院分离的142株阴沟肠杆菌,通过改良三维试验检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和β-内酰胺酶(AmpC),使用纸片扩散(K-B)法进行药敏试验。结果 142株阴沟肠杆菌中,产ESBLs或AmpC酶共74株(52.11%),其中单产ESBLs的48株(33.80%),单产AmpC酶的18株(12.68%),同时产2种酶的8株(5.63%)。检出阴沟肠杆菌较高的科室为ICU和妇科,构成比分别为38.03%、23.94%,痰液和尿液检出菌株构成比分别为54.93%、25.35%。药敏结果显示,产ESBLs或AmpC阴沟肠杆菌对亚胺培南100.0%敏感,对其他12种抗菌药均产生不同程度的耐药。结论产ESBLs或AmpC阴沟肠杆菌对二、三代头孢菌素高度耐药,重症患者可首选碳青霉烯类药物,轻、中度患者可依据药敏结果选择头霉素类、β-内酰胺类/AmpC抑制剂,加强耐药菌株的监测,积极控制院内感染是目前控制含耐药基因菌株产生和传播的有效方法。     

佳木斯地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌质粒介导头孢菌素酶、超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的 了解佳木斯地区临床分离的大肠埃希菌和阴沟肠杆菌中质粒介导头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)流行情况及主要的基因型别.方法 127株临床分离无重复大肠埃希菌81株与阴沟肠杆菌46株,采用酶提取物三维实验检测产AmpC酶和ESBLs菌株,聚合酶链反应(PCR)扩增质粒型AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型.结果 46株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占21.7％、28.3％、6.5％;81株大肠埃希菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占19.8％、38.3％、9.9％.大肠埃希菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.阴沟肠杆菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.结论 CTX-M型和DHA-1型分别是本地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌ESBLs和质粒介导AmpC酶的主要流行基因型.     

阴沟肠杆菌产超广谱β内酰胺酶的研究

目的了解我院2004年110月临床分离的83株阴沟肠杆菌中产ESBLs的情况，并对1株多重耐药菌株进行耐药机制研究。方法采用改良双纸片法（MDDT）进行ESBLs的初筛。以8对ESBLs引物（CTX—M，CTX-M-1，CTX-M-2，CTX-M-9，SHV，TEM，VEB，PER型）进行PCR扩增，对其中1株菌株（37号菌株）的扩增产物进行序列分析。结果MDDT初筛结果证明有43株菌产ESBLs，41株菌多种ESBLs引物均有扩增产物，序列分析表明37号阴沟肠杆菌携带的ESBLs为CTX-M-9，CTX-M-1样，SHV型。结论产多种ESBLs是引起该株阴沟肠杆菌对第三代头孢菌素耐药的重要原因。     

阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的了解本地区阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌AmpC酶和ESBLs的流行分布及对临床常用抗菌药物的耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法阴沟肠杆菌和奇异变形杆菌的鉴定及药敏使用西门子MicroScan WALKAWAY96全自动细菌鉴定及药敏分析系统进行,采用酶提取物三维试验方法检测AmpC酶,使用表型确证试验纸片扩散法测定ESBLs。结果 76株阴沟肠杆菌中,产AmpC酶菌株为15株(19.74%),产ESBLs菌株为24株(31.58%),同时产两种酶的菌株为11株(14.47%)。43株奇异变形杆菌中,产AmpC酶菌株为7株(16.28%),产ESBLs菌株为18株(41.86%),同时产两种酶的菌株为6株(13.95%)。对其药敏结果分析显示产AmpC酶和ESBLs的菌株耐药性明显高于不产酶菌株。结论产AmpC酶和ESBLs是阴沟肠杆菌和奇异变形杆菌产生耐药的重要机制,碳青霉烯类药物是治疗这两种细菌感染的首选药物。     

下呼吸道感染细菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测

目的：了解临床下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检出情况。方法：通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株；采用美国国家临床实验室标准委员会(NC—CLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株。结果：从临床下呼吸道标本分离对第一、二代及一种以上第三代头孢菌素耐药的226株常见革兰阴性杆菌，包括阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中，分别检出单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs及单产ESBLs细菌34株、15株、109株，总检出率分别为15．0％、6．6％、48．2％。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高，为57．9％；ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高，其次为大肠埃希菌，分别为78．5％、77．8％。结论：下呼吸道产AmpC酶和ESBLs细胞感染常见，前以阴沟肠杆菌为主，后多见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。     

头孢吡肟对阴沟肠杆菌的体外抗菌活性调查

目的 调查本地区阴沟肠杆菌对头孢吡肟的耐药情况。方法 使用5种底物的“双纸片协同试验”对47株阴沟肠杆菌进行超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)检测。体外药敏试验采用K－B法。实验数据处理使用WHONET－5软件。结果 29株非ESBLs产酶细菌对头孢吡肟的耐药率为0％;由于ESBLs的作用,本组产ESBLs阴沟肠杆菌样本头孢吡肟的耐药率为38．9％。结论 ESBLs是造成阴沟肠杆菌对头孢吡肟耐药的主要原因,该药在治疗阴沟肠杆菌感染时应以耐药机制检测结果为依据。     

多重耐药产PER-1型超广谱β内酰胺酶阴沟肠杆菌的研究

目的研究多重耐药阴沟肠杆菌017对β内酰胺类抗菌药物耐药的机制。方法使用双纸片扩散法和改良三相试验对阴沟肠杆菌017进行β内酰胺酶的表型检测，并用聚合酶链反应(PCR)扩增β内酰胺酶基因，对PCR产物进行测序确定基因型别。结果阴沟肠杆菌017经双纸片扩散法证实产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)，经三相试验证实该菌除了产ESBLs外，还同时产AmpC酶。PCR产物经测序长度为579bp，与GENEBANK的PAPER1A基因序列100％符合，确定为PER-1基因。结论阴沟肠杆菌017耐β内酰胺类抗菌药物的主要原因是PER-1型ESBLs和AmpC酶所致。     

产ESBLs及AmpC酶阴沟肠杆菌的检测及耐药性分析

目的调查该院阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)的情况,以及其对常用抗菌剂的耐药性,为临床用药治疗提供依据。方法采用法国生物梅里埃ATB分析仪进行细菌鉴定,K-B法做体外药敏实验,并同时进行AmpC酶及ESBLs的检测。结果 91株阴沟肠杆菌中共检出产酶菌株39株(42.8%),其中产AmpC酶21株(23.1%),产ESBLs 13株(14.3%),同时产AmpC酶及ESBLs 5株(5.5%)。产酶菌株感染分布以老年病科及ICU为主。药敏结果显示,阴沟肠杆菌对抗菌剂耐药性严重,除亚胺培南100.0%敏感外,产酶菌株对其他抗菌剂的耐药率明显高于非产酶菌株(P<0.05)。结论阴沟肠杆菌对常用抗菌剂具有较高耐药性,临床应合理使用抗菌剂,加强对阴沟肠杆菌耐药性监测,碳青霉烯类抗菌剂可作为阴沟肠杆菌严重感染的首选抗菌剂。     

多重PCR检测临床产ESBLs阴沟肠杆菌的耐药基因型研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阴沟肠杆菌的耐药性、阳性率及基因分布特点。方法改良双纸片法检测80株临床分离阴沟肠杆菌对14种抗生素的耐药性及ESBLs表型,多重PCR检测鉴定ESBLs基因型,DNA测序确认DNA序列。结果 80株阴沟肠杆菌中,29株检出ESBLs,阳性率36.3%。80株阴沟肠杆菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的阴沟肠杆菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢菌素类抗生素的耐药率高达96.1%。29株细菌所产ESBLs中,12株为TEM型,6株为SHV型,24株为CTX-M型。其中CTX-M-1组9株,CTX-M-9组15株,未检出CTX-M-2组及CTX-M-8/CTX-M-25组。结论阴沟肠杆菌ESBLs检出率较高,耐药显著。产ESBLs阴沟肠杆菌的主要基因型为CTX-M型。     

阴沟肠杆菌临床分离株armA基因分布与分子分型研究

目的调查某医院阴沟肠杆菌临床分离株的耐药性和arm A基因分布情况,探索arm A阳性菌株与耐药性的关系及其分子分型特征。方法采用微量肉汤稀释法对51株临床分离的阴沟肠杆菌进行药敏试验;荧光定量PCR方法检测16S rRNA甲基化基因arm A;脉冲场凝胶电泳试验(PFGE)分析arm A阳性菌株间的亲缘关系。结果阴沟肠杆菌临床分离株对阿米卡星和庆大霉素的耐药率分别为39.2%和54.9%,arm A基因阳性率为23.5%,arm A阳性菌株对阿米卡星和庆大霉素均耐药;12株携带arm A基因菌株主要分为5型,无明显优势菌株。结论产16S rRNA甲基化酶arm A的阴沟肠杆菌菌株对氨基糖苷类药物耐药,应加强对该基因监测,合理指导临床抗生素应用。