血培养阳性病原菌仪器报警时间分析

目的:分析血培养阳性病原菌仪器(BacT/Alert3D血培养仪)报警时间。方法:收集南京医科大学第一附属医院2010年血培养阳性的报警时间及相应的病原菌鉴定结果,计算各常见病原菌阳性报警的中位时间。结果:2010年标本中有419份阳性,革兰阳性细菌占56.8%,革兰阴性细菌占39.4%,真菌占3.8%。对血培养阳性仪器报警时间进行分析,≤12h、≤24h、≤48h报警的病原菌分别为154株(36.8%)、281株(67.1%)、373株(89.0%)。血培养阳性病原菌仪器报警中位时间分别为:肠杆菌科细菌(10.2h)、非发酵菌(12.2h)、链球菌属(15.0h)、肠球菌属(12.7h)、葡萄球菌(23.1h)、真菌(39.9h)。结论:血培养阳性报警时间从早到晚依次是:肠杆菌科细菌、非发酵菌属、肠球菌属、链球菌属、葡萄球菌属、真菌。引起血液系统感染的病原菌均在5d内得到仪器的阳性报警,大多数病原菌在2d内报警阳性。     

血培养阳性仪器报警时间分析

目的分析血培养阳性仪器报警时间与病原菌之间的关系。方法收集玉溪市人民医院2017年血培养阳性的报警时间及相应的病原菌鉴定结果,计算各类病原菌阳性报警的中位时间。结果共有876例阳性标本,革兰阳性菌占53.77%,革兰阴性菌占44.18%,真菌占1.03%,厌氧菌占1.03%。纳入统计分析769株,其中571例需氧培养阳性细菌分布和报警时间分析,≤12h、≤24h、≤48h的病原菌分布分别为153株(26.80%)、369株(64.62%)、493株(86.34%);仪器报警中位时间分别为肠杆菌科(11.52h)、链球菌(15.12h)、肠球菌(21.48h)、葡萄球菌(22.08h)、非发酵菌(35.76h)、革兰阳性杆菌(40.80h)、真菌(61.92h)、马耳他布鲁菌(72.84h)。475例厌氧培养阳性细菌分布和报警时间分析,≤12h、≤24h、≤48h的病原菌分布分别为185株(38.95%)、365株(76.84%)、440株(92.63%);仪器报警中位时间分别为肠杆菌科(10.80h)、链球菌(14.40h)、肠球菌(16.68h)、葡萄球菌(20.64h)、非发酵菌(26.88h)、革兰阳性杆菌(39.36h)、厌氧菌菌(72.72h)。结论除真菌、马耳他布鲁菌和厌氧菌由于其特殊的培养环境外,血培养需氧阳性和厌氧阳性报警时间从早到晚的顺序均为:肠杆菌科、链球菌、肠球菌、葡萄球菌、非发酵菌、革兰阳性杆菌。大多数病原菌在2d内得到阳性结果。应用全自动血培养仪同时做需氧厌氧配对培养能得到更高的阳性率,如只单纯做需氧或厌氧培养,均会导致部分菌的漏检。     

不同采血模式下血培养结果的分析

目的分析不同采血模式血培养的阳性率、病原菌分布及不同菌属细菌阳性报警时间的差异,以明确双套血培养法和阳性报警时间在鉴别血流感染和控制采血污染率中的意义。方法采用BacT/Alert 3D全自动血培养仪对2 849例血培养标本进行培养,阳性标本采用VITEK-2全自动细菌鉴定分析仪进行鉴定,以Excel对培养结果进行统计分析。结果共检出阳性标本333例289株病原菌,总阳性率为11.7%,其中双套采血法的阳性率为21.4%,显著高于单瓶和单套。不同采血模式下病原菌分布有显著区别,双套以肠杆菌科细菌为主,而单瓶和单套以凝固酶阴性葡萄球菌为主。95.5%的病原菌在72h内阳性报警,阳性报警中位数时间最短为肠杆菌科细菌,最长为布鲁菌属。12h内以肠杆菌科细菌为主要检出菌,12~48h以葡萄球菌为主。结论增加血培养采血套数可提高阳性率,降低漏检率,有助于污染菌的鉴别。不同种类微生物阳性报警时间差别可用于判断病原菌的类型并辅助判断污染菌,能为临床快速制订治疗方案提供依据。     

需氧血培养细菌种类及仪器报警时间分析

目的分析血培养阳性病原菌种类及仪器报警时间对快速鉴定病原菌的作用。方法收集BacT/Alert 3D120全自动血培养系统对2 473份血液培养的结果,分析血液标本在需氧瓶中生长细菌的种类及仪器报警时间。结果 2 473份血液标本中仪器报警阳性为226份（9.1%）;分离出细菌和真菌共232株,其中有6份阳性标本每份分离出2株细菌。革兰阳性细菌91株（39.2%）;革兰阴性细菌127株（54.8%）;念珠菌14株（6.0%）。仪器在24、48和72h内阳性报警率分别为73.9%、95.3%和97.6%。最快阳性检出病原菌为大肠埃希菌,时间为4.1h。肠杆菌科细菌、革兰阳性球菌、非发酵菌与念珠菌的阳性报警时间中位数分别为11.8、20.6、19.7与33.1h。肠杆菌科细菌组与非发酵菌组、革兰阳性球菌组、念珠菌组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,非发酵菌组与革兰阳性球菌组无统计学差异（P〉0.05）。结论不同菌属细菌的阳性报警时间有差异,仪器能在4d内对血液感染的常见细菌和念珠菌报警。     

血培养阳性病原菌报警时间的临床意义

目的分析血培养阳性病原菌阳性报警时间(TTP)的临床意义。方法对2013年3月至2015年2月Bact/Alert240检测出的血培养阳性标本致病菌种类和阳性报警时间进行回顾性研究分析。结果 5 408例血培养标本中Bact/Alert240报警692例,分离细菌683例,阳性率为12.6%;肠杆菌、葡萄球菌属、非发酵菌属、链球菌属、肠球菌属和真菌有着各自不同的阳性报警时间段。0~12h时间段内肠杆菌科大肠埃希菌为最主要的致病菌,占84.8%;12~24h时间段内葡萄球菌属为最主要的致病菌,占44.3%。结论通过Bact/Alert240的报警时间、革兰染色及镜下形态的观察,可初步判断病原菌的种类,第一时间指导临床医生准确而合理地选择抗菌药物。     

404例血培养阳性报警时间分析

目的：分析不同细菌在全自动血培养仪（BacT／Alert3D）中的血培养阳性报警时间（TTP，timeto—positivityofbloodculture）及其意义。方法：回顾性分析微生物实验室在2010年1月至2012年12月期间接收的7688瓶血培养标本，对404例阳性结果的阳性报警时间进行统计分析。结果：404例阳性分离株中，肠杆菌科细菌、肠球菌、非发酵菌、链球菌、葡萄球菌、假丝酵母菌和厌氧菌阳性报警时间中位数依次是：11．7h、13．3h、15．2h、16．8h、23．5h、29．6h和48h。90．6％的标本在48小时内即出现阳性报警。结论：大部分阳性分离茵可在全自动血培养仪（BacT／Alert3D）48小时内检出，阳性报警的快慢因菌种不同而存在差异。     

手工和全自动仪器血培养结果的分析

目的对手工法双相血培养瓶和BacT/Alert-3D240全自动血培养仪的检出结果作回顾性分析。方法对2011~2013年使用手工双向血培养瓶的615份血标本与2014年使用全自动血培养仪的1 062份血标本进行细菌阳性检出率、检出时间及检出种类的比较。结果 615例双向血培养瓶阳性48例,阳性率为7.8%,污染率0.98%,48h内肠杆菌科细菌检出率87.5%,葡萄球菌属细菌检出率83.3%。1 062例全自动血培养仪阳性99例分离出细菌,其中有临床意义的病原菌86株,阳性率为8.2%;污染菌8株,污染率0.75%;假阳性5株,为0.47%;48h内肠杆菌科细菌检出率95.5%,葡萄球菌属细菌检出率87%,链球菌检出率42.9%。结论 BacT/Alert-3D全自动血培养仪的阳性率稍高,并且检出时间短,细菌检出种类增多,提高了血培养送检数。     

不同种类微生物血培养阳性报警时间的临床意义探讨

目的探讨不同种类微生物在全自动血培养仪中阳性报警时间的临床意义。方法用BA全自动血培养仪检测我院2008年1月-2010年12月共计5516份血标本,观察细菌阳性检出率及报警时间。结果 5516份血标本中BA报警阳性819例,分离出细菌797株,阳性率为14.0%;肠杆菌科、葡萄球菌属、非发酵菌、链球菌属、肠球菌属和真菌各有不同的阳性报警时间,以肠杆菌科的阳性报警时间出现最早,与其他类型微生物比较差异有显著性（P〈0.05）,链球菌属除外。结论通过全自动血培养仪对微生物生长曲线的不同表达、阳性报警时间,根据微生物相对特有的生长特点,可初步判断微生物的生长和类型,第一时间指导临床医师准确、合理选择抗菌药物。     

血培养标本阳性报警时间分析

目的分析本院检验科血培养仪检测阳性标本报警时间,寻找缩短血培养阴性报告时间的方法。方法收集长治市人民医院2018年6月—2019年1月住院时间为8个月患者的4 318份血液培养标本,采用法国梅里埃Bact/Alert 3D 60全自动血培养仪培养,统计阳性标本,记录所有阳性标本的阳性报警时间(TTP)并计算中位值,统计病原菌的种类及构成比。结果血培养阳性标本共475份,阳性率为11.0%;其中革兰阳性(G+)菌112份(占23.6%),革兰阴性(G-)菌361份(占76.0%),真菌2份(占0.4%)。G+菌中,葡萄球菌89份(18.7%)〔包括凝固酶阳性葡萄球菌51份(10.7%)、凝固酶阴性葡萄球菌38份(8.0%)〕,中位时间36.00 h;肠球菌17份(3.6%),中位时间14.40 h;链球菌6份(1.3%),中位时间36.48 h。G-菌中,大肠杆菌163份(34.3%),中位时间11.04 h;肺炎克雷伯菌91份(19.2%),中位时间11.43 h;非发酵菌99份(20.8%),包括铜绿假单胞菌67份(14.1%)、鲍曼不动杆菌32份(6.7%),中位时间17.04 h;其他G-菌8份(1.7%),中位时间26.32 h。真菌2份(0.4%),中位时间55.20 h。TTP最早为0.4 h,最迟为86.4 h,97.68%病原菌在72 h内阳性报警,100%病原菌在96 h内阳性报警。结论血培养阳性病原菌TTP由快到慢依次为大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、肠球菌、非发酵菌、葡萄球菌、链球菌、真菌。所有病原菌均在4 d内报阳,因此考虑可将血培养阴性报告时间缩短为5 d,以节约医疗成本。     

马尔他布鲁氏菌病82例临床分析

目的总结马尔他布鲁氏菌病患者临床及实验室检查特征,为临床早期诊断及治疗提供参考。方法回顾性分析82例马尔他布鲁氏菌病患者临床资料,分析流行病学和实验室检查结果、治疗及转归情况。结果 82例中男59例,年龄(42.5±10.7)岁,55例有明确牛羊接触史;血液、脑脊液、心包液、关节积液和肾脏穿刺液标本培养均为阳性;28例阳性报警时间在48~72h,50例在72~96h,4例在96~120h,报警曲线表现为迟缓期较长,对数生长期短,稳定期较平坦;经全自动微生物鉴定系统鉴定均为马尔他布鲁氏菌;氧化酶、触酶、硝酸盐、脲酶检测均阳性,硫化氢阴性;82例中75例接受规范化治疗,随访6个月,74例预后良好,1例死亡。结论马尔他布鲁氏菌病流行病学与实验室检查有一定特征性,临床应综合患者病史、临床表现及实验室检查结果进行诊断。     

布鲁菌在Bact／Alert血培养仪上生长曲线特点

目的观察布鲁菌在Bact／Alert血培养仪上生长曲线特点,帮助预测该菌株生长,协助临床快速诊断布鲁菌病。方法对血培养阳性,经血清学检测布鲁菌凝集试验阳性确诊的15例布鲁菌病患者的流行病学、临床资料、实验室资料进行回顾分析。结果15例患者均有不规则发热、动物接触史。15例患者的血培养细菌生长曲线具有相同的特点：阳性报警时间72h左右,迟缓期较长,生长期较短,生长期对应的纵轴较短,稳定期平缓。结论布鲁菌病临床表现多样,临床医师对该病的认识不足容易误诊,因此对发热患者应重视血液病原学检验。实验室工作人员通过观察血培养细菌生长曲线有助于加快对该菌的预测。工作人员应增强自身防护意识,防止实验室感染。     

Use of real-time polymerase chain reaction for identification of methicillin-resistant Staphylococcus aureus directly from positive blood culture bottles

The utility of real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) testing for detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) directly from positive blood culture bottles was evaluated. One hundred forty-two blood cultures showing Gram-positive cocci in clusters were detected. Each blood culture sample was tested for the presence of MRSA by PCR analysis (SmartCycler) via detection of the mecA and orfX genes. In parallel, they were plated on standard media for identification and characterization. PCR analysis directly from the blood culture bottle required a total time of 120 min (45 min for preparation and 75 min for the reaction). By comparison, conventional laboratory procedures required between 48 and 72 h. The overall test accuracy was 97% with a high positive likelihood ratio and a low negative likelihood ratio.     

ESP全自动血培养仪的临床应用及评价

目的　评价ESP全自动血培养仪(简称ESP)临床应用情况。方法　用ESP检测2147份血标本,观 察其阳性检出率、检出时间,并对所检出细菌的种类及阳性率进行分析。结果　2147份血标本中ESP提示阳性 322例,分离出294株细菌,阳性率为13.7%,最快检出时间为2h,24h内检出的阳性数占60.5%,48h内检出 的阳性数占83.3%,72h检出的阳性数占99%。假阳性率为0.87%。未发现假阴性。结论　应用ESP有较高 阳性检出率,缩短了培养时间,增加了检出细菌的种类,结果快速、准确。     

59例人体血液及静脉导管培养葡萄球菌阳性病历污染率及临床意义

目的:调查研究对于血液或静脉导管培养葡萄球菌阳性、临床上使用抗生素的情况及其报警时间与葡萄球菌感染之间的关联,从而为临床治疗提供参考依据.方法:对北京协和医院2010年血液和静脉导管培养葡萄球菌阳性的59例住院病历进行系统回顾性分析.结果:59例血液及静脉导管培养葡萄球菌阳性,有7例(污染菌)未给予抗生素治疗,其余52例(污染菌和致病菌)都使用了抗生素,且大多数病人预后良好.污染菌与病原菌的报警时间有显著差异(P<0.05),污染菌报警时间长于病原菌.结论:葡萄球菌在血培养中的假阳性率比较高,尤其是凝固酶阴性葡萄球菌,因此采血培养标本时应严格规范操作以减少其污染,其阳性结果也应综合分析患者的临床症状、体征及实验室检查来判断是否为污染菌,以避免临床上不必要抗生素的滥用,从而也可防止葡萄球菌的高耐药率的问题.     

2009~2018年北京协和医院布鲁菌感染的临床与实验室特点分析

目的　分析布鲁菌感染的临床与实验室特点,为其临床诊治提供依据。方法　回顾性分析2009~2018 年北京 协和医院134 例布鲁菌感染患者的临床和实验室资料,对其流行病学特征（包括年龄、性别、接触史、时间分布）、临 床表现和疗效进行分析。结果　134 例患者中男性88 例,女性46 例,平均年龄48 岁（1~78 岁）。50% 患者有明确生 活在疫区、接触牲畜、生牛羊肉及食用未灭菌奶制品等方面接触史。布鲁菌感染临床表现前三位的症状和体征为发热（66 例）、关节痛和/ 或肌肉痛伴乏力（23 例）、心脏疾病（10 例）。布鲁菌感染急性期经规范治疗多可治愈,若治疗不 及时或不规范可转为慢性。206 例送检阳性标本,住院99 例、门诊62 例和急诊45 例。布鲁菌分离前三位的科室为感 染内科（49 例）、急诊科（34 例）和普通内科（11 例）。外周血送检比率最高,需氧血培养瓶阳性报警时间均值为 88.12h（2~481h）。其他培养阳性标本包括组织、骨髓、脑脊液、关节液和玻璃体等。布鲁菌培养与血清凝集实验结果 一致性高,两种方法均送检的有83 例,其中82 例两种方法均阳性,仅1 例培养阳性,血清凝集实验阴性。十年间布鲁 菌培养阳性分离率最高的年度是2015~2017 年,阳性分离率最高的季节是4 月至7 月。结论　布鲁菌感染的临床表现复杂, 分离出布鲁菌是确诊的依据之一,需要综合考虑患者的基本情况和药物的毒副作用选择药物。掌握布鲁菌感染的临床和 实验室特征十分重要。     

高浓度氧对成年大鼠肺组织NF-кB和IL-8表达的影响

目的通过观察不同持续时间高浓度吸氧对大鼠肺组织NF-кB和IL-8的影响,探讨高浓度氧所致肺组织损伤(HILI)的发生时间和机制。方法 40只成年雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为5组,即对照组(吸入空气)、吸氧48 h组、72 h组、96 h组和120 h组,吸入氧浓度均在95%以上。测定肺组织湿干重比值(W/D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数;采用免疫组织化学法检测肺组织NF-кB和IL-8的表达水平。结果随着高浓度氧暴露时间延长,肺组织W/D、肺组织NF-кB和IL-8蛋白表达水平及BALF中性粒细胞计数均逐渐增加,其中96 h组和120 h组增加最明显,与对照组、48 h组及72 h组比较均有统计学意义(均P<0.01),而对照组、48 h和72 h组之间,以及96 h组和120 h组之间各项指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析表明,肺组织NF-кB与IL-8蛋白表达水平之间呈正相关(r=0.856,P<0.001)。结论高浓度吸氧持续96 h以上即可引起肺组织损伤,其发生可能与高浓度氧激活肺组织细胞NF-кB,上调IL-8表达,导致中性粒细胞聚集、活化引起的炎症反应有关。     

Rapid detection of methicillin-susceptible and methicillin-resistant Staphylococcus aureus directly from positive BacT/Alert blood culture bottles using real-time polymerase chain reaction: evaluation and comparison of 4 DNA extraction methods

Although the introduction of automated blood culture systems has dramatically reduced laboratory personnel bench time, 48 to 72 h is still required for the identification of pathogens such as methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and methicillin-sensitive S. aureus (MSSA) and the accurate determination of antimicrobial sensitivities for prompt optimal patient therapy and infection control initiatives. The following 4 DNA blood culture extraction methods were compared: (a) organic, (b) differential centrifugation and lysis, (c) alkali wash/lysis, and (d) Qiagen lysis/filtration (QIAGEN, West Sussex, UK). The benzyl alcohol extraction method (a) was found to be the most optimal method having a reasonable extraction time of 1.8 h and 100% correlation with the "gold standard" laboratory culture. A "dual locus" real-time polymerase chain reaction (PCR) targeting the S. aureus-specific thermonuclease nuc gene and the staphylococcal methicillin resistance determinant mecA gene were used as a reliable indicator of the presence of MRSA. In conjunction with the DNA extraction method (a), detection time for MRSA/MSSA isolates from positive blood cultures was dramatically reduced from at least 24 to 48 h to approximately 3 h.     

携带人可溶性TRAIL基因的重组腺病毒在肺癌细胞中的转染效率及表达特性研究

目的研究重组腺病毒感染肺腺癌细胞A549的转染效率及重组腺病毒介导的人可溶性肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(hTRAIL95-281)基因的体外表达。方法用不同感染滴度(MOI)(0-10 000 VP/cell)的重组腺病毒Ad-CMV-EGFP转染A549细胞后48 h收集细胞,经流式细胞仪检测其转染效率,并在共聚焦荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用MOI为5 000 VP/cell的Ad-CMV-EGFP感染肿瘤细胞后不同时间(24 h、48 h、72 h和96 h)收集细胞,经流式细胞仪检测其转染效率;用重组腺病毒Ad-CMV-hTRAIL95-281感染293T细胞后不同时间收集培养物用ELISA方法检测上清中的TRAIL表达。结果重组腺病毒载体对A549细胞的转染效率和绿色荧光蛋白表达在一定范围内随着MOI的增加而增高,MOI为5 000 VP/cell时转染效率达峰值,MOI为10 000 VP/cell时转染效率反而降低。重组腺病毒转染A549细胞后72 h内转染效率随时间的变化而增高,峰值为98%,96 h有所降低(P0.05)。转染重组腺病毒Ad-CMV-hTRAIL95-281的293T细胞在转染后24 h表达量最高(P0.001),达到131.45 pg/ml,48 h时TRAIL蛋白表达量明显降低(P0.01),72小时也有继续降低的趋势。结论重组腺病毒在适宜的MOI值下,在A549细胞中96小时内均有较高的转染效率,且重组腺病毒介导的可溶性hTRAIL基因在体外能够有效表达。     

BaCT/Alert全自动血培养系统在儿科中的应用研究

目的评价BacT/A1ert连续监测血培养系统检出儿科常见血培养分离菌的孵育时间.方法分析BacT/Alert全自动血培养系统检出1 426份新生儿和小儿阳性血培养瓶败血症病原菌的检出时间特点.结果1 426份新生儿和小儿血培养标本被系统检出阳性培养瓶133份,分离阳性率9.33%,其中革兰阳性菌占75.8%、革兰阴性菌占21.9%、真菌占2.3%;133份阳性培养瓶被系统于12,24,36,48,72 h及96 h的检出率分别为10.4%,67.5%,85.4%,93.7%,96.7%和99.7%.结论BacT/AlerT全自动血培养系统可在48 h以内检出93.7%的儿科败血症重要病原菌,实验室可在系统监测2 d后发出血培养的一级报告,48 h系统监测结果为阴性的培养瓶可能培养出真菌、四联球菌、溶血巴斯德菌及某些认为是污染的革兰阳性杆菌,可将系统监测时间确定为5 d.