电化学发光免疫分析法检测低值HBsAg与乙肝五项检测结果比较

目的比较电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测低值乙肝表面抗原(HBsAg)与酶联免疫吸附试验(ELISA)法乙肝五项[HBsAg、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的检测结果,为临床和科研提供一定的科学依据。方法根据ECLIA检测HBsAg的结果,将207例患者分为3组:A组,HBsAg为0.05~5.00IU/mL;B组,HBsAg为0.20~0.50IU/mL;C组,HBsAg为0.05~0.20IU/mL。采用ELISA法对3组进行HBsAg检测,对C组进行乙肝五项检测及6个月追踪HBsAg检测,对测定结果进行比较分析。结果A、B、C组ECLIA法和ELISA法测定HBsAg的阳性符合率分别为100.00%、98.08%、30.43%,C组显著低于A、B组,差异有统计学意义(P0.05)。对C组中ELISA法检测HBsAg为阴性,HBeAb、HBcAb同时阳性或HBcAb单项阳性的患者,进行6个月追踪检测,HBsAg阳性符合率提高至45.65%。结论 ECLIA法检测低值HBsAg的灵敏度明显高于ELISA法,能有效提高检测的准确性。     

液体芯片技术定量测定人体血清CEA、AFP、NSE和tPSA

目的 应用液体芯片技术,联合定量测定人体血清癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和前列腺特异性抗原（tPSA）,并对其临床应用进行评价.方法 制备交联微球以及生物素标记抗体,利用双抗体夹心法对60个血清样本进行测定,并将其结果与化学发光免疫分析法（CLIA）作比较.结果 同时检测CEA、AFP、tPSA、NSE的线性范围分别为0.078～200 ng/mL、0.030～30.3 ng/mL、0.007～7.5 ng/mL、0.146～75 ng/mL;最低检测限为26.0 pg/mL、19.7 pg/mL、4.9 pg/mL、73.2 pg/mL;批内精密度CV〈9.0%,批间精密度CV〈13.2%;检测结果与CLIA测值的相关系数r分别为0.986、0.979、0.964、0.958（P〈0.001）.结论 液体芯片技术是一种具有极大优势的新型检测技术.该技术打破传统测定技术每次只能测定一个指标的限制,并且具有高通量、高灵敏度、检测时间短、样本用量少等特点.     

电化学发光法和酶联免疫法检测低水平HBsAg

目的比较电化学发光免疫分析(electro-chemiluminescence immunoassay,ECLIA)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测低值乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的结果,为选择最佳临床检测策略提供依据。方法先以时间分辨免疫荧光(time resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)试剂盒进行血清标本HBsAg定量,再分别用ECLIA进口试剂盒、ELISA国产试剂盒做定性检测,并对结果进行统计分析。结果在348例TRFIA法检测乙肝病毒表面抗原浓度介于(0.5～1.0)ng/ml的临床标本中,ECLIA和ELISA 2种方法检测HB-sAg皆为阳性的有310例;电化学发光检测阳性有340例,ELISA检测阳性有312例,二者阳性符合率90.8%。对32例二者不符合的标本用时间分辨免疫荧光分析复查,ECLIA(+)ELISA(-)的30例TRFIA复检仍为阳性;ECLIA(-)ELISA(+)的2例TRFIA复检亦为阳性。ECLIA与ELISA在对低水平HBsAg的检出差异有统计学意义(χ2=22.781,P<0.01)。结论 ECLIA比ELISA的特异性好和敏感度高。在临床诊治与检测低水平的乙肝病毒携带者建议用具有更高灵敏度和特异性的方法。     

三种方法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的比较

目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、微粒子酶免分析(MEIA)、电化学发光免疫分析(ECLIA)三种方法检测乙型肝炎病毒核心抗体(抗HBc)的结果,探讨ELISA检测抗HBc结果的正确性。方法用ELISA筛选出100例抗HBc阳性标本和60例抗HBc阴性标本,分别用MEIA和ECLIA检测。将ELISA筛选出的100例抗HBc阳性标本1∶30稀释,再分别用ELISA、MEIA和ECLIA检测。结果(1)100例ELISA检测抗HBc阳性标本,MEIA、ECLIA检测阳性率100%;60例ELISA检测抗HBc阴性的标本,MEIA、ECLIA检测阳性率分别为60%、(36/60)、53%(32/60);MEIA和ECLIA检测抗HBc的结果与ELISA有显著性差异,P值均<0.05。(2)100例ELISA检测抗HBc阳性标本1∶30稀释后,ELISA、MEIA和ECLIA检测阳性率分别为38%、74%和68%。结论MEIA、ECLIA检测抗HBc的阳性率明显高于ELISA。100例ELISA检测抗HBc阳性标本1∶30稀释后用ELISA、MEIA和ECLIA检测,三者阳性率均下降。     

电化学发光免疫分析定量检测血清抗HBs的临床意义

目的探讨电化学发光免疫分析技术（ECLIA）定量检测乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）的临床意义。方法用ECLIA和酶联免疫吸附法（ELISA）对质控品和680例临床血清标本同时进行测定,对两种方法的结果经Х^2检验,进行比较分析。结果ECLIA检测灵敏度为2．0mIU／ml,,ELISA法灵敏度为20mIU／mL,两种检测方法检测103例正规乙肝疫苗接种患者抗-HBs的阳性检出率分别为ECLIA 83．5％、ELISA 60．1％;对已确诊肝炎患者577例的标本检测,ELISA法漏俭率为4．3蟛;对溶血标本的测定ECLIA法优于ELISA法。结论ECLIA是目前较好的定量检测抗-HBs的新技术,在乙型肝炎的诊断、疗效观察和预后判断等方面有重要的临床意义。     

电化学发光法检测单纯疱疹病毒2 IgG抗体应用评估

目的对电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测单纯疱疹病毒2(HSV-2)IgG抗体结果进行比较分析,评价ECLIA的性能及临床应用价值。方法应用罗氏诊断公司ECLIA与爱尔兰Trinity公司ELISA试剂分别检测400份血清标本中的HSV-2特异性IgG抗体,检测结果不一致的标本用欧蒙生物技术有限公司的抗HSV-2 IgG抗体检测试剂进行复核。结果 ELISA和ECLIA检测阳性率分别为39.0%、37.8%;以ELISA为参照,ECLIA假阴性率为1.3%,假阳性率为0.8%,相对敏感性为96.8%,相对特异性为98.8%,二者的符合率为98.0%。使用欧蒙生物技术有限公司试剂对13份检测结果不一致(包括2个不确定结果)的标本进行了复核,其中6份标本结果支持ECLIA,5份标本结果支持ELISA。结论 ECLIA和ELISA检测HSV-2 IgG抗体结果符合情况良好,罗氏"HSV-2 IgG抗体检测试剂(ECLIA)"是一种快速、准确、敏感性和特异性高的试剂,可以应用于临床。     

不同方法检测乙型肝炎血清标志物结果评价分析

目的 探讨胶体金标记免疫层析技术(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、电化学发光免疫分析(ECLIA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)、乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)等乙型肝炎病毒(HBV)血清学标志物结果的一致性.方法用GICA、ELISA、TRFIA、ECLIA分别检测145例HBV感染患者以及70例正常体检者的HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc,以ELISA为参考方法,评价GICA、ELISA、TRFIA等3种方法与ECLLA检测HBV血清学标志物结果之间的一致性.结果 GICA、ELISA、TRFIA等3种方法的检测结果与ECLIA的检测结果具有高度或者极强的一致性,TRFIA与ECLIA检测结果的一致性最佳,ELISA次之,GICA最差.结论 GICA、ELISA、TRFIA、ECLIA等4种方法检测HBV血清学标志物具有较好的一致性,TRFIA、ECLIA适用于HBV感染患者的疗效判断,ELISA适用于HBV感染患者的初筛.     

电化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附法检测人类免疫缺陷病毒抗体效果评价

目的探讨罗氏电化学发光免疫分析法（ECLIA）在检测抗人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体中的临床应用及意义。方法采用ECLIA法及酶联免疫吸附试验（ELISA）二种方法分别对同一血清标本检测抗HIV抗体，并进行比较。结果通过对初筛10260例（其中HIV感染者25例）HIV检测，ECLIA法临界值与ELISA法吸光度彬临界值（OD／CO），2种方法的阳性符合率为100％。ECLIA法特异性为100％，ELISA法特异性为93．5％。结论ECLIA法具有较好的特异度与灵敏度，且具快速、自动化程度高及可减少院内感染可在医院推广应用和临床研究。     

HBeAg定量与HBV-DNA定量的相关性及临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)量与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)定量的相关性及其临床意义。方法应用电化学发光免疫分析(ECLIA)法定量检测164例HBsAg阳性标本的HBeAg,应用荧光PCR(FQ-PCR)法定量检测相同标本的HBV-DNA。结果 HBeAg阴性组(COI1.0)的HBV-DNA定量明显小于HBeAg阳性组(COI1.0)(P0.05);当HBV-DNA在105～108copies/mL时,HBeAg与HBV-DNA呈正相关(r=0.896)。结论 HBeAg定量监测可为乙型肝炎的传染性识别、病毒复制水平判断及抗病毒治疗效果评价提供一个较为可靠的辅助指标。     

不同方法检测乙肝表面抗原的结果分析

目的分析酶联免疫吸附法(ELISA)和电化学发光免疫法((ECLIA)检测乙肝表面抗原(HBsAg)的结果及临床应用价值。方法收集经ELISA法检测过的120份临床患者的血清,其中包括:30份HBsAg阳性;30份HBsAg阴性但乙肝e抗体(eAb)和乙肝核心抗体(cAb)阳性;30份HBsAg阴性但cAb阳性;30份乙肝5项均阴性。对上述血清采用ECLIA进行HBsAg检测,并对检测结果进行比较分析。结果 30份经ELISA检测HBsAg阳性者经ECLIA检测均为阳性,其灵敏度达100.0%;30份经ELISA检测HBsAg阴性而eAb、cAb阳性者中,有4份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达13.3%;30份经ELISA检测HBsAg阴性而cAb阳性者中,有2份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达6.7%;30份血清经ELISA检测乙肝5项均阴性者中,有2份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达6.7%。结论 ECLIA法较ELISA法敏感性更高;对临床避免医院内有创检查、手术、输血等情况下的乙肝感染和传播等具有重要应用价值。     

Development and validation of an automated particle-enhanced nephelometric immunoassay method for the measurement of human plasma c1q

We have developed a sensitive immunoassay based on latex particle agglutination for measuring C1q concentrations in human plasma. In this simple and fast particle-enhanced immunoassay, we used carboxylated latex particles (diameter 210 nm) covalently coated with F(ab)₂ fragments of anti-C1q antibodies. These particles are incubated with diluted sample (400-fold) for 6 min at room temperature, with the resulting agglutination quantified by measuring the change of light-scatter produced. The assay has been automated on the Behring nephelometer analyzer with a sampling rate of 150 samples/hr. This assay generates a standard curve in the range of 24–775 mg/L, showing intraassay and interassay precision of <8% and <10%, respectively. Dilution linearity was validated throughout the dynamic range of the assay. There were no interferences from bilirubin, Intralipid, haemoglobin, and rheumatoid factor. Results obtained in 45 clinical samples correlated well with those obtained by a commercial radial immunodiffusion method (r=0.936), and with those obtained by the Behring immunoprecipitation nephelometric test (r=0.950). The mean concentration in plasma from healthy subjects was 180 mg/L and the reference interval was from 128 to 237 mg/L. This latex nephelometric procedure is a convenient method and an interesting alternative to other immunoassays for routine measurement of human C1q.     

罗氏 Cobas e601与雅培 Architect i2000检测乙肝表面抗原的比较

目的：比较罗氏电化学发光检测仪Cobas e601与雅培化学发光微粒子免疫分析仪Architect i2000检测乙肝表面抗原的结果。方法选取在雅培 i2000检测仪上检测乙肝表面抗原结果为有反应性,且定量结果小于250 IU/mL 的标本,同时在罗氏 e601进行检测,分析比较检测结果间的差别,并进行直线相关和回归分析。结果共检测46份临床标本,剔除1份两台仪器上检测结果反应性不符的标本外,其余结果具有很好的相关性。其中雅培检测值为0．05～1．00 IU/mL 的15份,两者的直线回归方程为Y ＝17．49X ＋0．843,相关系数 r＝0．979;1．1～10．00 IU/mL 的15份,两者的直线回归方程为Y ＝15．72X ＋21．06,相关系数 r＝0．952;11～250 IU/mL 的15份,两者的直线回归方程为Y ＝29．17X -129,相关系数 r＝1．000。结论两种方法的检测结果具有很好的相关性,并可以通过公式进行相互换算。     

酶增强免疫分析法与微粒子酶联免疫吸附法检测他克莫司药物浓度的结果对比研究

目的对酶增强免疫分析法（EMIT）与微粒子酶联免疫吸附法（MEIA）进行比对实验,评估SYVAViva-E临床化学分析仪（简称SYVA Viva-E）和Abbott IMX分析仪（简称Abbott IMX）2种检测系统测定他克莫司（FK506）药物浓度的一致性。方法将Tac/Csa CONTROL质控品分别用SYVA Viva-E（EMIT）和Abbott IMX（MEIA）进行批内、批间精密度测定。FK506的靶值（检测范围）：A1水平为4.3（2.1～6.5）ng/mL、A2水平为8.9（5.3～12.5）ng/mL、A3水平为18.0（14.0～22.0）ng/mL。将158份临床患者样本分为极低浓度（0.1～〈2.0 ng/mL）、低浓度（2.0～〈8.0 ng/mL）、中浓度（8.0～〈14.0 ng/mL）、高浓度（14.0～〈20.0 ng/mL）和极高浓度（20.0～24.0 ng/mL）5个组,用SYVA Viva-E和Abbott IMX平行测定FK506浓度,观察2种检测系统测定临床样本的相关性。结果当FK506浓度处于A1水平时,SYVA Viva-E的批内、批间精密度及检测结果均值均高于Abbott IMX（P〈0.05）;处于A2、A3水平时,2种检测系统批内、批间精密度及检测结果均值相近,差异无统计学意义（P〉0.05）。Abbott IMX的检测精密度优于SYVA Viva-E。当临床样本浓度〈8.0 ng/mL时,SYVAViva-E检测结果的均值比Abbott IMX约高1.0 ng/mL,二者比较差异有统计学意义（P〈0.01）,与测定质控品的结果一致;当样本浓度≥8.0 ng/mL时,SYVA Viva-E检测结果的均值与Abbott IMX相近,二者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。2种检测系统测定临床样本的总体相关性较好（r=0.977）,但SYVA Viva-E检测结果均略高于Abbott IMX。结论应用EMIT检测FK506时,其检测结果略高于MEIA,尤其在低浓度范围更加明显。2种检测系统在检测FK506浓度时可能存在系统偏差。     

7种半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测系统的分析性能评价

目的评估7种半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）检测系统的分析性能。方法应用美国临床实验室标准化协会（CLSI）系列文件评估5个颗粒增强免疫透射比浊（PETIA）检测系统和1个均相溶胶颗粒免疫法（SPIA）检测系统的精密度、正确度、空白限（LoB）、抗干扰性以及与SIEMENSBNⅡ颗粒增强免疫散射比浊（PE—NIA）检测系统（简称BNⅡ系统）的相关性和偏差。结果6个检测系统（以A—F表示）和BN1I系统在CysC浓度为0．8～5．0mg／L时的总批内变异系数（CV）均〈3．75％,总批间CV除E系统外均〈5％;正确度验证显示A—E系统和BNⅡ系统测定ERM—DA471的绝对偏倚分别为0．00、0．00、1．01、-0．01、-0．50和-0．35mg／L,相对偏倚分别为0％、0％、18．43％、-0．18％、-9．12％和-6．39％;测定CAP室间质评物显示仅D系统和BN1I系统较为理想。A～F系统及BNⅡ系统的LoB分别为0．00、0．00、0．31、0．01、0．10、0．06和〈0．05mg／L。干扰分析显示Hb≤13g／L、TG≤28mmol／L时,对A、B系统及BNⅡ系统无明显影响（干扰〈±10％）,其他系统均有不同程度干扰。相关分析显示A～F系统与BN1I系统相关性较好[相关系数（r）均〉0．975,P〈0．01]。偏差分析显示,A～F系统与BNII系统的平均偏差分别为－0．02、－0．10、－0．31、0．05、0．04、0．36mg／L。结论CysC各检测系统测定有证参考物质ERM—DA471的最大偏倚可达到lmg／L,最大相对偏倚为18．43％;其中PENIA在测定ERM—DA471和CAP室间质评物时结果低于PETIA;部分检测系统分析性能存在不足。     

Are immunoassays for digoxin reliable?

The specificity of radioimmunoassay and fluorescence polarization immunoassay procedures for the measurement of digoxin has been assessed. Many steroids and lipids have been found to interfere and give false positive results for digoxin under the conditions of the study. Caution is recommended in the interpretation of digoxin measurements made by immunoassay procedures.     

两种检测高值甲胎蛋白出现钩状效应的方法研究

目的：探讨高值甲胎蛋白出现钩状效应的情况以及钩状效应对实验结果产生的影响。方法取其中79例原发性肝癌患者的高值甲胎蛋白（＞105μg/L）标本进行倍比稀释,用电化学发光法（罗氏）和化学发光法（索灵）检测并观察是否会出现钩状效应,并对其结果进行比较分析。结果通过两种方法检测发现在甲胎蛋白浓度超过4×104μg/L 的标本中有可能出现钩状效应,且出现钩状效应的点均在最大检测范围之上（罗氏的有效线性范围0～1210μg/L;索灵有效线性范围0～1000μg/L）。同时,用两种方法验证在线性范围内的结果线性良好。结论电化学发光法和化学发光法检测高值甲胎蛋白均存在钩状效应,并且因出现钩状效应的点在最大检测范围之上,从而较好的避免了因钩状效应而导致异常低值结果。建议在用这两种方法检测甲胎蛋白时,对于出现超过有效线性范围的结果进行有效稀释;而对于线性范围内的结果均可视为试验的真实结果。     

Evaluation of the highly sensitive chemiluminescent enzyme immunoassay “Lumipulse HBsAg‐HQ” for hepatitis B virus screening

Background

Ongoing efforts in the development of HBsAg detection kits are focused on improving sensitivity and specificity. The purpose of this study was to evaluate an improved, highly sensitive quantitative assay, “Lumipulse HBsAg‐HQ”, a chemiluminescent enzyme immunoassay designed for a fully automated instrument, the “Lumipulse G1200”.

Methods

Serum samples for reproducibility, dilution, correlation, sensitivity, and specificity studies were obtained from patients at the Osaka University Hospital. Seroconversion and sensitivity panels were purchased from a commercial vender. Subtype, sensitivity panels, and HBsAg recombinant proteins with one or two amino acid substitutions were prepared in‐house.

Results

The coefficients of variation for the low, medium, and high concentration samples ranged from 1.93 to 2.55%. The HBsAg‐HQ reagent for dilution testing showed good linearity in the 0.005‐150 HBsAg IU/mL range and no prozone phenomenon. All 102 HBV carrier samples were positive by HBsAg‐HQ, while other commercial reagents showed one or more to be negative. In the seroconversion panel, the 14‐day blood sample was positive. The sensitivity against HBsAg‐HQ “ad” and “ay” subtypes was 0.025 ng/mL. Comparisons among the HBsAg‐HQ, HISCL, and Architect HBsAg reagents were performed using the Bland‐Altman plot. Specificity for 1000 seronegative individuals was 99.7%. HBsAg‐HQ detected 29 positive serum among 12 231 routinely obtained serum samples, which showed concentrations of 0.005‐0.05 HBsAg IU/mL.

Conclusions

According to these results, the Lumipulse HBsAg‐HQ assay, with a highly sensitive limit of detection of 0.005 IU/mL, may facilitate the development of a better management strategy for a considerable proportion of infected patients.

     

胰岛素化学发光法测定的建立与评价

目的：建立化学发光法测定胰岛素及临床糖尿病患者胰岛素治疗跟踪与稳定的可行性评估。方法：CLISA采用一步免疫分析夹心法与RIA的测定结果进行比较,并将该法运用于临床非胰岛素依赖型糖尿病进行观察。结果：CLISA测胰岛素的批内与批间的变异系数分别为4．8％和6．4％,平均回收率为98．6％,与RIA的相关系数0．8505（P＞0．05）。结论：CLISA法测胰岛素的各技术参数优于RIA法,能及时有效地满足糖尿病患者胰岛素治疗的临床需要。