灵芝孢子粉对癫痫大鼠皮质和海马区谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的调节

目的：观察使用灵芝孢子粉后，癫痫点燃大鼠模型皮质和海马区谷氨酸和1一氨基丁酸的含量及神经元形态学改变。 方法：实验于2005-08在佳木斯大学基础医学院完成。选择健康雄性wistar大鼠30只（鼠龄12周），随机分为3组，空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉组，每组10只。采用戊四氮腹腔注射制作大鼠慢性点燃模型，癫痫模型组采用戊四氮腹腔注射＋生理盐水灌胃；灵芝孢子粉组采用戊四氮腹腔注射＋灵芝孢子粉灌胃；空白对照组采用生理盐水腹腔注射＋生理盐水灌胃。腹腔注射剂量为35mg／kg，灌胃剂量为150mg／kg，1次／d，持续28d。每次注射后观察大鼠60min，记录癫痫发作情况。惊厥发作评分标准：0级，没有行为上的发作；Ⅰ级，节律性点头或头部颤搐；Ⅱ级，阵挛性咀嚼；Ⅲ级，头部颤搐加前肢阵挛性抽搐；Ⅳ级，袋鼠姿势（上身直立）；Ⅴ级，跌倒；Ⅵ级，强直性惊厥。凡显示连续5次Ⅱ级以上惊厥的大鼠为达到点燃标准。点燃后断头取脑，行免疫组化染色观察各指标含量变化及神经元形态学改变。显微镜观察显示棕黄色颗粒者为阳性。结果：实验过程中，无动物死亡，全部进入结果分析。①灵芝孢子粉组和癫痫模型组所有大鼠均有连续多次的Ⅲ～Ⅴ级癫痫发作，均达到癫痫模型点燃标准。②免疫组织化学染色后，空白对照组大脑皮质谷氨酸免疫反应阳性细胞密集分布于各层，海马谷氨酸免疫反应阳性细胞主要分布在海马回的锥体细胞层和齿状回的颗粒层。谷氨酸阳性神经元胞体呈圆形、椭圆形或不规则形，谷氨酸阳性反应产物为棕黄色，呈细颗粒状。癫痫模型组大脑皮质及海马谷氨酸免疫反应阳性细胞数比空白对照组明显增多，差异具有显著性[（206±41），（96±12）个／张，P〈0．05]；[（164±41），（69±14）个／张，P〈0．05]。灵芝孢子粉组大脑皮质及海马谷氨酸免疫反应阳性细胞比癫痫模型组数减少，差异具有显著性[（108±23），（206±41）个／张，P〈0．05]；[（100±12），（164±41）个／张，P〈0．05]。③免疫组织化学染色后空白对照组大脑皮质γ-氨基丁酸有较多分布，浅层尤为明显。大鼠海马回和齿状回均可见γ-氨基丁酸阳性细胞散在分布γ-氨基丁酸阳性神经元胞体呈圆形，胞浆均匀深染。癫痫模型组大脑皮质及海马γ-氨基丁酸免疫反应阳性细胞数比空白对照组明显减少，差异具有显著性[（69±16），（149±21）个／张，P〈0．05]；[（47±9），（108±10）个／张，P〈0．05]；灵芝孢子粉组大脑皮质及海马γ-氨基丁酸免疫反应阳性细胞比癫痫模型组数增多，差异具有显著性[（113±17）（69±16）个／张，P〈0．05]；[（80±11）（47±9），个／张，P〈0．05]。 结论：灵芝孢子粉能够有效降低皮质和海马区兴奋性氨基酸谷氨酸的含量，降低病变神经元兴奋性以达到抗癫痫作用。同时还能增强抑制性氨基酸氨基丁酸的表达，使神经元兴奋性减弱，抑制癫痫的发作，从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤，所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用。     

托吡酯对发育期大鼠癫痫模型脑神经元损伤的保护作用

目的:探讨托吡酯对发育期大鼠癫痫发作引起的脑神经元损伤的保护作用。方法:戊四氮点燃发育期大鼠癫痫模型,随机分为正常对照组、点燃模型组和托吡酯治疗组,每组27只,观察大鼠惊厥发作频率、发作程度、血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specificenolase,NSE)水平变化及海马区病理改变。结果:正常对照组大鼠无惊厥发作,血清NSE水平在正常范围,海马区无神经元死亡;点燃模型组大鼠惊厥出现时间早(第3天即有发作),发作程度重(第1周2级以上惊厥14只,并有3只死于惊厥),血清NSE水平犤第7,14,21天分别为(23.4±2.7),(33.4±7.8),(27.7±7.2)μg/L犦及海马区神经元死亡程度明显高于其他两组(F=1.710～5.255,P<0.05);托吡酯治疗组大鼠惊厥出现时间晚,发作程度轻(第1周2级以下轻度发作13只,2～4级中度发作4只,无重度发作),血清NSE水平犤第7,14,21天分别为(18.6±3.7),(14.9±3.7),(12.8±3.2)μg/L犦及海马区神经元死亡程度略高于正常对照组而低于点燃模型组(F=1.710～5.255,P<0.05)。结论:托吡酯对癫痫发作引起的脑神经元损伤有保护作用。     

颞叶癫痫患者脑海马硬化形成危险因素分析

目的:探讨颞叶癫痫患者脑海马硬化细胞脱失的亚群特点及影响海马硬化形成的危险因素。方法:以2001-10/2003-03在广东三九脑科医院住院颞叶癫痫患者15例为观察对象,其中8例海马硬化,7例非海马硬化,手术切除致痫灶,观察两患者组海马病理改变,以正常解剖海马为对照。比较两组手术前临床因素,并分析各临床因素(静止期、病程和最初突发损伤年龄)与海马硬化的关系。结果:按意向处理分析,17例均进入结果分析。①CA1区锥体细胞数:海马硬化组少于非海马硬化组,两组均少于对照组(6.85±2.68),(11.20±6.31),(24.30±2.21)个,F=59.794,P<0.001。②CA3区锥体细胞数:海马硬化组少于非海马硬化组,两组均少于对照组(6.38±2.70),(15.74±6.93),(28.20±1.81)个,F=91.440,P<0.001。③齿状回颗粒细胞数:海马硬化组少于非海马硬化组,两组均少于对照组(38.35±17.93),(100.03±67.77),(181.09±10.00)个,F=45.268,P<0.001。④门区神经元数量:海马硬化组少于非海马硬化组和对照组,后两组无差异(50.08±11.18),(86.60±23.99),(96.50±4.20),P<0.001。⑤齿状回颗粒细胞,门区神经元数量与最初的突发脑损伤发生年龄呈正相关(r=0.758,P=0.001;r=0.825,P<0.001)。结论:颞叶癫痫患者脑海马结构主要细胞脱失,门区神经元脱失是脑海马硬化的主要特点。脑海马硬化的形成与齿状回关系更为密切。生命早期突发脑损伤是脑海马硬化的可能成因。     

大鼠脑电图及大脑皮质和海马中谷氨酸脱氢酶活性的变化与不同时程急性惊厥的关系

目的:探讨不同时程急性惊厥大鼠脑电图及大脑皮质及海马中谷氨酸脱氢酶活性的变化与惊厥的关系。方法:实验于2004-10/12在河北医科大学基础医学研究所生物化学研究室完成。选用成年健康雄性SD大鼠26只,随机分为急性惊厥模型组(n=20),腹腔注射60mg/kg戊四氮致痫复制大鼠急性惊厥模型,造模后又分急性惊厥发作后0,4,24h和7d4个时程阶段组,每组5只。生理盐水对照组(n=6):腹腔注射等体积生理盐水。观察大鼠行为学表现及脑电图的变化,应用DGKC速率法检测大鼠皮质和海马中谷氨酸脱氢酶的活性。结果:①急性惊厥组大鼠注射戊四氮后5～15min均出现Ⅳ～Ⅴ级癫痫样发作,可持续达1h,之后在行为学上的表现逐渐安静和趋于正常。②生理盐水对照组大鼠脑电图为正常α节律,急性惊厥组大鼠脑电图呈现高幅棘-慢、尖-慢波以及多棘、多尖综合波。③谷氨酸脱氢酶活性:急性惊厥模型组大鼠大脑皮质及海马0h犤(21510.97±1040.86),(17542.51±1107.39)nkat/g犦,24h犤(12625.52±2066.04),(12091.08±709.74)nkat/g犦;7d犤(14253.18±1099.98),(13826.10±797.60)nkat/g犦,与生理盐水对照组相比,均显著降低犤(25246.99±2211.15)nkat/g,(21635.72±2154.54)nkat/g,P<0.05犦。急性惊厥后7d有所回升,但仍未回到正常水平。结论:戊四氮     

肿瘤坏死因子α在吗啡依赖和戒断大鼠海马Cal区的表达变化

目的探讨吗啡依赖和戒断大鼠海马CA1区肿瘤坏死因子α的表达变化.方法实验于2004-04/2005-03在泸州医学院组织胚胎学实验室完成.实验动物选择普通级两三月龄雄性SD大鼠24只.按随机数字法将实验动物分为4组对照组、吗啡依赖组和盐酸纳洛酮催促戒断1 h组和戒断3 h组(后两组合称戒断组),每组6只.采用剂量递增法建立吗啡依赖动物模型,用纳洛酮催促吗啡依赖动物戒断反应.具体方法为每天两次在大鼠背部皮下注射盐酸吗啡,首日10 mg/kg,隔日每次增加10 mg/kg,至第6天末次注射50 mg/kg.吗啡依赖组末次注射后6 h麻醉下灌注固定.盐酸纳洛酮催促戒断组大鼠于末次注射吗啡6 h后,以盐酸纳洛酮5 mg/kg皮下注射激发戒断症状,1 h.和3 h后,同吗啡依赖组处理实验动物.对照组大鼠按照同期平行对照的原则,以相同方式注射同体积的生理盐水.记录大鼠在正常及实验状态下的活动状况.同时取大鼠海马CA1区分别作苏木精-伊红和肿瘤坏死因子α免疫组织化学,测免疫反应阳性细胞的数量和吸光度.结果整个实验过程未出现大鼠异常死亡,吗啡注射的所有动物均成功建立吗啡依赖动物模型,全部进入结果分析.①海马形态改变吗啡依赖和戒断大鼠海马CA1区出现结构松散、神经元萎缩和坏死等改变.②肿瘤坏死因子α蛋白表达对照组大鼠海马CA1区肿瘤坏死因子α蛋白表达轻度阳性,吗啡依赖组和戒断组肿瘤坏死因子α阳性细胞数均增加,各组阳性细胞主要是胶质细胞和神经元.各组阳性细胞均数与对照组比较,差异均有统计学意义[(34.83±3.54),(17.50±2.88),P＜0.01];[(38.83±4.62),(17.50±2.88),P＜0.01];[(58.17±6.62),(17.50±2.88),P＜0.01].而吗啡依赖组与盐酸纳洛酮催促戒断3 h组差异无统计学意义[(34.83±3.54),(38.83±4.62),P＞0.05].吗啡依赖组和戒断组肿瘤坏死因子α阳性细胞吸光度增加,各组阳性细胞吸光度均数与对照组比较差异也均有统计学意义[(0.378 0±0.009 4),(0.310 8±0.001 0),P＜0.01];[(0.399 9±0.012 0),(0.310 8±0.001 0),P＜0.01];[(0.385 5±0.006 6),(0.3108±0.001 0),P＜0.01],吗啡依赖组与盐酸纳洛酮催促戒断3 h组比较差异无统计学意义[(0.378 0±0.009 4),(0.385 5±0.006 6),P＞0.05].盐酸纳洛酮催促戒断1 h组与戒断3 h组肿瘤坏死因子α阳性细胞吸光度差异有显著性[(0.399 9±0.012 0),(0.385 5±0.006 6),P＜0.05].结论肿瘤坏死因子α参与了吗啡依赖和戒断的病理生理过程,可能是药物依赖形成中的脑损伤初始因素之一.     

P-糖蛋白在戊四氮点燃小鼠大脑皮质内表达的研究

目的:观察戊四氮(PTZ)点燃小鼠大脑皮质内P-糖蛋白(PGP)的表达变化。方法:C57BL/6小鼠64只,随机分为对照组、1周组、2周组、1月组各16只,对照组腹腔注射等量生理盐水,其它各组腹腔注射40 mg/(kg.d)PTZ制备小鼠癫痫模型,分别于点燃后1周、2周、1月处死,采用RT-PCR法、免疫荧光组织化学法比较各组小鼠大脑皮质PGP mRNA及PGP蛋白的表达。结果:对照组的PGP mRNA与内参照光密度相对值为(0.68±0.05),1周组为(0.97±0.06),2周组为(1.25±0.09),1月组为(2.18±0.12),各组间差异有统计学意义(P<0.05);对照组的PGP阳性细胞数为(8.79±1.83)个,1周组为(14.83±1.45)个,2周组为(20.98±1.92)个,1月组为(39.84±2.07)个,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:腹腔注射PTZ导致小鼠出现癫痫发作,反复癫痫发作可引起小鼠大脑皮质PGP表达增加。     

红藻氨酸处理C57BL/6J小鼠癫痫发作后再次阈下注射形成敏感性的特性

目的:探讨红藻氨酸处理的C57BL/6J小鼠癫痫发作后癫痫发作敏感性能否形成及其机制。方法:实验于2004--03/06在大连医科大学生理学教研室进行。选用C57BL6J小鼠36只,实验分为盐水对照组(n=8)和红藻氨酸处理组(n=24),红藻氨酸处理组根据不同时间点又分为红藻氨酸处理后0.5h,2h,24h组,每组8只。盐水对照组为C57BL/6J小鼠颈部皮下注射0.2mL盐水,红藻氨酸处理组为C57BL/6J小鼠颈部皮下注射0.2mL惊厥剂量红藻氨酸(25mg/kg)诱导癫痫发作,分别在红藻氨酸处理后0.5,2,24h,用免疫组化技术检测海马内c-Jun免疫阳性神经元,作为神经元兴奋的形态功能指标来观察癫痫发作相关脑区的兴奋传递通路,同时检测海马门区γ-氨基丁酸免疫反应活性阳性神经元数目。红藻氨酸处理后7d,存活的C57BL/6J小鼠被给予皮下注射12.5mg/kg阈下剂量的红藻氨酸,以检测癫痫发作敏感性。结果:实验纳入36只C57BL/6J小鼠,中途有4只脱落,最终有32只进入结果分析。①惊厥剂量红藻氨酸诱发C57BL/6J小鼠(n=24)在30min内出现癫痫持续状态,并伴有全身强直阵挛性惊厥,其中4只在30min内死亡。②7d后阈下剂量未引起癫痫发作,即癫痫发作敏感性未形成。③脑内免疫组化显示,海马各部位γ-氨基丁酸免疫反应阳性神经元在检测各时间点内均未见任何脱失现象;与盐水对照组比较,红藻氨酸组诱发急性癫痫发作,红藻氨酸处理后,在海马齿状回颗粒细胞c-Jun免疫反应最早增强(P<0.05),CA3部位不增强,以CA1部位c-Jun免疫反应在24h显著性升高(P<0.001)。④与盐水对照组相比,惊厥剂量的红藻氨酸处理后0.5h,2h,24h,海马门区γ-氨基丁酸免疫阳性神经元的数目及染色程度未见明显改变(P>0.05)。结论:C57BL/6J小鼠具有对红藻氨酸引起癫痫急性发作的敏感,可能与CA1接受内嗅皮层海马穿通通路的直接投射有关,同时C57BL/6J小鼠海马对红藻氨酸引起的γ--氨基丁酸能神经元损伤不敏感,海马门区γ-氨基丁酸免疫反应阳性神经元的结构功能完整性可能在防止癫痫敏感性形成方面起着关键的作用。     

全脑缺血再灌注过程中人重组白细胞介素1受体拮抗剂对大鼠海马神经元代谢性谷氨酸受体5的影响

背景白细胞介素1受体拮抗因子能显著减轻神经元的损伤具有神经保护作用.谷氨酸通过激活多种谷氨酸受体导致兴奋毒性作用,同时也可以通过其某些受体发挥神经保护作用.但二者在脑缺血再灌注过程中的联系仍不十分明了.目的探讨脑缺血再灌注损伤过程中白细胞介素1受体拮抗因子对海马神经元的神经保护作用以及白细胞介素1受体拮抗因子与代谢性谷氨酸受体5之间的关系.设计完全随机对照实验.单位中国科学院武汉物理与数学研究所波谱与原子分子物理国家重点实验室,江汉大学医学与生命科学学院.材料实验于2004-05/2005-01在中国科学院武汉物理与数学研究所波谱学与原子分子物理国家重点实验室完成.选择正常健康纯化Wistar大鼠32只.方法32只大鼠按单纯随机抽样的方法分为正常组、假手术组、生理盐水组和实验组.正常组大鼠不做任何处理,假手术组大鼠仅在颈部前后方做组织分离、椎动脉暴露、颈总动脉游离手术,不结扎和夹闭双侧椎动脉和颈总动脉;生理盐水组大鼠椎动脉用电烧灼的方法永久性阻断,颈总动脉暂时性(20 min)夹闭,夹闭动脉期间内将2 μL生理盐水按0.4 μL/min的速度注入大鼠一侧(右侧)侧脑室,拔针前滞针5 min,然后松开颈总动脉的动脉夹再灌注2 h;实验组大鼠操作过程相同,仅将生理盐水换成等量的人重组白细胞介素1受体拮抗剂.然后采用苏木精-伊红染色方法对大鼠皮质区域的病理变化进行观察,免疫组织化学方法对海马神经元代谢性谷氨酸受体5免疫反应性进行观察.主要观察指标①各组大鼠脑皮质、海马的基本病理学变化.②各组大鼠脑缺血敏感区海马神经元代谢性谷氨酸受体5免疫反应变化.结果实验组和生理盐水组各有1只在进行缺血再灌注的过程中诱发惊厥被弃用,其余30只大鼠进入结果分析.①各组大鼠脑皮质、海马的基本病理学变化正常组、假手术组大鼠差异不明显,生理盐水组和实验组大鼠皮质、海马神经元变性,细胞周围水肿,神经元深染、核固缩或破裂.实验组神经元变性及水肿程度明显降低,深染、核固缩或破裂的神经元明显减少.②各组大鼠脑缺血敏感区海马神经元代谢性谷氨酸受体5免疫反应变化(用平均吸光度值表示)正常组与假手术组大鼠海马CA1,CA3区神经元代谢性谷氨酸受体5免疫反应呈强阳性[CA1区(0.54±0.12),(0.54±0.05);CA3区(0.57±0.02),(0.58±0.08),(P＞0.05)].生理盐水组、实验组大鼠海马CA1,CA3区神经元免疫反应较正常组和假手术组明显减弱[CA1区(0.30±0.03),(0.40±0.04);CA3区(0.30±0.04),(0.42±0.06),(P＜0.01)],实验组较生理盐水组明显增强(P＜0.05).结论白细胞介素1受体拮抗因子和代谢性谷氨酸受体5均参与大鼠脑缺血再灌注损伤的病理生理过程;白细胞介素1受体拮抗因子在大鼠脑缺血再灌注损伤的病理过程中,可能调节脑海马CA1,CA3区神经元的代谢性谷氨酸受体5的表达,实现其对海马的营养和保护作用;白细胞介素1家族中除了白细胞介素1受体拮抗因子以外,还存在其他的调节因素对神经元的代谢性谷氨酸受体5的表达进行调控.     

反复心理应激大鼠下丘脑及脑海马氨基酸含量变化及调肝方、健脾方、补肾方、人参总皂苷作用的比较

背景人体处于应激状态时,脑内的一些氨基酸作为神经递质对脑功能和心理行为具有重要的调节作用,传统中药治疗能够调整人体的应激状态.目的通过观察反复心理应激大鼠下丘脑和海马的谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺氨酸的含量变化,探讨调肝方、健脾方、补肾方及人参总皂苷对其影响.设计随机分组,对照观察实验.单位广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室.材料实验于2002-03/2003-01在广州中医药大学实验动物中心完成.选取Wistar大鼠60只,随机分为6组正常组,模型组,调肝组,补肾组,健脾组,人参总皂苷组,10只/组.调肝方药组成及剂量柴胡5 g,山栀5 g,白芍15 g,枸杞子15 g,枳壳6 g,干地黄18 g,石决明30 g.肾气丸组成及剂量干地黄30 g,山药15 g,山茱萸15 g,泽泻10 g,茯苓10 g,丹皮10 g,桂枝4 g,附子4 g.四君子汤组成及剂量党参20 g,白术15 g,茯苓15 g,炙甘草6 g.方法①常规煎煮取汁后调肝方药浓缩至含生药1.69g/mL,肾气丸浓缩至含生药1.76 g/mL,四君子汤浓缩至含生药1.01 g/mL,人参总皂苷配制成水溶液7 g/L.正常组及模型组灌服9.0 g/L氯化钠注射液2 mL,调肝组、补肾组、健脾组及人参总皂苷组均于限制制动刺激前1 h相应给予调肝方药、肾气丸煎剂、四君子汤煎剂及人参总皂苷溶液各2 mL灌胃.②除正常组外,其余各组均进行心理应激反应模型的复制.将大鼠置于限制制动筒内,通过移动插片而逐步缩小大鼠的活动空间,调节到其不产生强烈反抗的紧张程度,每天限制制动1次,每天限制制动时间不同,第1天为4 h,其后每次增加30～60 min,连续14 d.③将各组大鼠断头取全脑,采用OPA高效液相色谱分析法进行下丘脑和海马中谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、谷氨酸含量的检测.主要观察指标各组大鼠下丘脑与海马中谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺氨酸含量的变化.结果实验纳入大鼠60只,全部进入结果分析.①各组大鼠下丘脑与海马中谷氨酸含量的变化与正常组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(21.85±8.19),(15.76±1.80),(14.68±7.91),(21.46±5.45),(13.43±7.68)μmoL/g];与模型组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(11.04±3.65),(11.78±2.17),(18.67±2.98),(20.91±3.96),(17.71±1.83)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05].②各组大鼠下丘脑与海马中天冬氨酸含量的变化与模型组比较,健脾组和人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(8.65±1.18),(5.72±1.32),(4.67±1.88)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01],而健脾组、补肾组、人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(2.58±0.87),(3.93±0.49),(4.52±0.98),(3.83±0.41)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05].③各组大鼠下丘脑与海马中γ-氨基丁酸含量的变化与模型组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(20.92±4.96),(15.87±2.90),(13.84±2.63),(14.94±3.98),(10.94±3.68)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01],而海马中含量均明显升高[(4.12±1.66),(4.18±1.04),(6.67±1.29),(6.11±0.99),(6.37±0.78)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01].④各组大鼠下丘脑与海马中牛磺氨酸含量的变化与模型组比较,调肝组、健脾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(10.24±1.72),(7.82±1.14),(8.00±2.05),(6.42±3.17)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01],而健脾组和人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(12.61±3.51),(17.03±2.74),(18.04±2.14)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01].结论调肝方药的中枢作用部位可能主要在下丘脑,可能与下调氨基酸水平有关;而健脾、补肾方药及人参总皂苷的中枢作用部位可能包括海马和下丘脑,主要与上调氨基酸水平有关,通过增强海马对应激的整合作用,从而达到抗应激损伤的目的.     

托吡酯对发育期大鼠癫痫模型脑神经元损伤的保护作用

目的：探讨托吡酯对发育期大鼠癫痫发作引起的脑神经元损伤的保护作用。方法：戊四氮点燃发育期大鼠癫痫模型，随机分为正常对照组、点燃模型组和托吡酯治疗组，每组27只，观察大鼠惊厥发作频率、发作程度、血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)水平变化及海马区病理改变。结果：正常对照组大鼠无惊厥发作，血清NSE水平在正常范围，海马区无神经元死亡；点燃模型组大鼠惊厥出现时间早(第3天即有发作)，发作程度重(第1周2级以上惊厥14只，并有3只死于惊厥)，血清NSE水平[第7，14，21天分别为(23．4&;#177;2．7)，(33．4&;#177;7．8)，(27．7&;#177;7．2)μg／L]及海马区神经元死亡程度明显高于其他两组(F=1．710～5．255，P&;lt;0．05)；托吡酯治疗组大鼠惊厥出现时间晚，发作程度轻(第1周2级以下轻度发作13只，2～4级中度发作4只，无重度发作)，血清NSE水平【第7，14，21天分别为(18．6&;#177;3．7)，(14．9&;#177;3．7)，(12．8&;#177;3．2)μg／L]及海马区神经元死亡程度略高于正常对照组而低于点燃模型组(F=1．710～5．255，P&;lt;0．05)。结论：托吡酯对癫痫发作引起的脑神经元损伤有保护作用。     

Propionic acid and dipropylacetic acid in the urine of patients treated with dipropylacetic acid.

We report the gas Chromatographie estimation of propionic acid and dipropylacetic acid (an antiepileptic drug) in urine. The excretion of propionic acid in patients treated with dipropylacetic acid is comparable to the propionic acid excretion in vitamin B-12 anemia. The formation of propionic acid by degradation of dipropylacetic acid is discussed.     

Reactions of kynurenic acid with hypobromous acid and hypochlorous acid

Kynurenic acid, a tryptophan metabolite, acts as antagonist or agonist of several receptors. Hypobromous acid (HOBr) and hypochlorous acid (HOCl) are generated by eosinophils and neutrophils. At inflammation sites, kynurenic acid may encounter HOBr and HOCl to generate products. When kynurenic acid was incubated with HOBr under neutral conditions, kynurenic acid generated a single product almost exclusively. This was identified as 3-bromokynurenic acid. Kynurenic acid reacted with HOCl, generating two products. The major product was identified as 3-chlorokynurenic acid with its oxidative decarboxylation product, 3-chloro-4-hydroxy-2(1H)-quinolinone as a by-product. Free amino acids suppressed the reactions of kynurenic acid with HOBr and HOCl. Taurine suppressed the HOCl reaction but not the HOBr reaction. An eosinophil peroxidase system containing H₂O₂, NaCl, and NaBr reacted with kynurenic acid, generating 3-bromokynurenic acid under mildly acidic conditions. Although a myeloperoxidase system containing H₂O₂ and NaCl reacted with kynurenic acid to generate 3-chlorokynurenic acid under mildly acidic conditions, the product was altered to 3-bromokynurenic acid by addition of NaBr to the system. These results suggest that 3-bromokynurenic acid and 3-chlorokynurenic acid may be generated from kynurenic acid at inflammation sites in humans, although their formation will be suppressed by coexistent amino acids.     

Pharmacokinetics of nalidixinic acid and oxolinic acid in healthy women.

The pharmacokinetics of oral nalidixic acid (NA, 1 gm 4 times a day) and oxolinic acid (OA, 750 mg 2 times a day) administered for 7 days were studied in the same 10 healthy women on the first, third, and seventh days of the treatment. The peak concentrations of NA + OH-NA (hydroxynalidixinic acid) in serum at 2 to 3 hr were 34 mug/ml (total) and 23 mug/ml (unconjugated) on the first day and nearly two times higher on the third and seventh days; 82% to 85% of these amounts were NA. The protein-free fraction of NA + OH-NA was 8.8% to 18.3%. The total concentration of NA + OH-NA in urine was 1,220 to 2,700 mug/ml, the unconjugated concentration, 250 to 350 mug/ml, and the chemotherapeutically active concentration, 55 to 75 mug/ml. In steady state the 24-hr recovery of the total drug was 79% of the daily dose. The excretion rate in urine was 591 to 853 mg/6 hr. The OA concentration in serum was very low on the first day of the treatment, but increased to 4- to 5-fold on the third and seventh days: 6.2 to 6.4 mug/ml (total) and 3.3 to 3.6 mug/ml (unconjugated). The protein-free OA represented 19% to 23% of the total amount. The modest initial serum concentrations of OA were confirmed by the low urine concentrations on the first day. In steady state the OA concentration in urine was 570 mug/ml (total) and 35 mug/ml (unconjugated), and the 24-hr recovery, 49% and 3%, respectively. The microbiologic assay gave somewhat higher concentrations of the active drug than did the chemical assay. When taken with food, the excretion of OA in urine was retarded by 6 hr but the 48-hr recovery was not decreased.     

Maleic acid and succinic acid in fermented alcoholic beverages are the stimulants of gastric acid secretion

Alcoholic beverages produced by fermentation (e.g., beer and wine) are powerful stimulants of gastric acid output and gastrin release in humans. The aim of this study was to separate and specify the gastric acid stimulatory ingredients in alcoholic beverages produced by fermentation. Yeast-fermented glucose was used as a simple model of fermented alcoholic beverages; it was stepwise separated by different methods of liquid chromatography, and each separated solution was tested in human volunteers for its stimulatory action on gastric acid output and gastrin release. Five substances were detected by high-performance liquid chromatography and were analyzed by mass spectrometry and 1H-13C nuclear magnetic resonance spectroscopy. At the end of the separation process of the five identified substances, only the two dicarboxylic acids, maleic acid and succinic acid, had a significant (P < 0.05) stimulatory action on gastric acid output (76% and 70% of fermented glucose, respectively), but not on gastrin release. When given together, they increased gastric acid output by 100% of fermented glucose and by 95% of maximal acid output. We therefore conclude that maleic acid and succinic acid are the powerful stimulants of gastric acid output in fermented glucose and alcoholic beverages produced by fermentation, and that gastrin is not their mediator of action.