基于vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR快速检测创伤弧菌的研究

目的建立基于溶细胞毒素基因vvhA检测创伤弧菌（Vibrio vulnificus）的TaqMan实时荧光定量PCR。方法采用Primer Express软件，设计位于vvhA基因序列保守区的PCR引物和TaqMan探针，建立检测创伤弧菌vvhA基因100bp扩增产物的TaqMan实时荧光定量PCR。采用基因克隆技术，构建作为阳性对照的pMD19-vvhA100重组质粒。以最低扩增循环数（Ct值）、荧光强度增加值（△Rn）为观察指标，对vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR条件进行优化。以不同浓度的创伤弧菌及其它8种细菌DNA和pMD19-vvhA100为模板，对vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR的特异性、敏感性和重复性进行验证。创伤弧菌经腹腔和皮下注射及灌胃感染ICR小鼠，验证vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR对感染小鼠血液、皮下感染组织和肠内容物的检测效果。结果所建立的vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR仅对创伤弧菌DNA或pMD19-vvhA100呈现阳性检测结果，其检测灵敏度可达0．01ng创伤弧菌DNA或10^3个拷贝的pMD19-vvhA100，不同浓度pMD19-vvhA100三次检测结果的SD≤0．79，对腹腔和皮下感染创伤弧菌的小鼠血液、皮下组织标本检测结果均为阳性。结论所建立的创伤弧菌vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR具有快速、稳定、敏感、特异等优点，适合用于临床实验室进行创伤弧菌引起的败血症和创口感染快速诊断。     

原发性创伤弧菌败血症的护理21例

创伤弧菌（vibrio vulnificus）为非霍乱弧菌，是嗜盐性海生革兰阴性杆菌属。患者感染后以下肢出血性大疱、蜂窝织炎为突出特征，起病急，病情进展快，病死率高，是一种致命的感染性疾病，其有效治疗方法值得进一步探讨。近几年来，本地区陆续有创伤弧菌败血症病例出现，现将我院1995-2004年救治的21例创伤弧菌败血症患者的护理报道如下。     

创伤弧菌脓毒症诊疗方案(草案)

1 概述 创伤弧菌脓毒症是由创伤弧菌引起的致命性疾病，绝大多数发病于慢性肝病患者生吃了贝壳类海鲜之后。创伤弧菌是一种自然生长在温暖海水中的革兰阴性条件致病菌，毒力较强，常寄生在海洋贝壳类生物中（如牡蛎、蚌等），并以此为媒介经消化道或肢体破损创口接触带菌海水感染人类而致病。创伤弧菌脓毒症临床上多表现为急性发热、寒战、休克和特征性下肢血性大疱样皮损、皮肤及肌肉坏死等，进展极为迅速，[第一段]     

创伤弧菌脓毒症诊疗方案(草案)

目的创伤弧菌脓毒症病情极为凶险，病死率超过50％。但由于病例分散，发病率低，目前国内外尚缺乏有循征依据的诊治方案或指南。方法基于本课题组经过近10年对创伤弧菌脓毒症动物实验及临床研究结果，并复习国内外文献，提出了《创伤弧菌脓毒症诊疗方案（草案）》，希望能有助于创伤弧菌脓毒症的诊断与治疗。结果在本方案中，我们提出：①创伤弧菌脓毒症早期临床诊断标准包括：患者4—11月急起发热，肢端特征性血性大疱样皮损、甚至大范围皮肤及肌肉坏死，迅速出现低血压或休克及多器官功能障碍综合征（MODS），有慢性肝病或长期嗜酒史以及近1～2周内有生食海鲜或接触带菌海水史等。②尽早、足量、联合应用三代头孢菌素及喹诺酮类药物疗效最佳。③早期对病变肢体进行外科干预及综合支持对症治疗有助于改善患者预后。结论本方案的推荐意见有助改善创伤弧菌脓毒症患者的预后，这只是初步的草案，有待进一步完善。     

腹泻样本中创伤弧菌的检测分析

目的 了解浙江省部分地区腹泻患者创伤弧菌的感染情况。 方法 对2010年6-10月采集的标本,经3%氯化钠碱性蛋白胨水于37 ℃增菌后,划线纤维二糖多粘菌素E平板于40 ℃培养18~24 h,挑取可疑菌落进行分子生物学鉴定。 结果 在144份腹泻患者粪便样本中检测分离到2株创伤弧菌,阳性率为1.39%(2/144);均为生物Ⅰ型,其基因型为vcgC/16S rRNA B型。药敏结果显示分离的创伤弧菌对氨基糖苷类抗生素耐药如阿米卡星、庆大霉素。 结论 在监测的腹泻样本中分离到具有较强致病能力的创伤弧菌,且氨基糖苷类抗生素耐药,应加强对海水产品和腹泻样本中创伤弧菌的检测及耐药分析,预防创伤弧菌的感染暴发。     

原发性创伤弧菌脓毒血症3例报道

创伤弧菌（vibrio vulnificus，Vv）为非霍乱弧菌，1970年Roland首先报道了由Vv感染引起小腿坏疽和内毒素性休克，已引起美国、韩国、日本等沿海国家的重视。截止2003年，我国报道原发性创伤弧菌败血症18例，1991年姜红报道1例，2003年孙氏报道17例，本病起病急，进展快，病死率高。作将2002至2005年我院收治的原发性创伤弧菌脓毒血症3例报道如下。     

多株创伤弧菌的基因分型和药敏试验

目的 了解海产品中分离的创伤弧菌的基因分子流行病学特征和药敏试验结果,为进一步研究创伤弧菌和临床用药提供依据。 方法 以聚合酶链反应(PCR)方法对海产品中分离的创伤弧菌进行核酸检测与基因型分型,用ATB细菌鉴定仪配套的药敏卡对创伤弧菌进行药敏试验。 结果 海产品中分离的创伤弧菌均为溶血素A基因(vvhA)核酸阳性,vcgC/E和16S rRNA A/B分型结果显示,共有5种基因型别,分别为CB型、CAB型、EA型、CA型和EAB型。共检测出1株BT2核酸阳性,1株SerE核酸阳性。药敏试验显示,该菌对氨基糖苷类和头孢菌素类抗生素有耐药株。 结论 海产品中的创伤弧菌基因型呈多样性,以CB型为主,EAB型和CAB型同为国内首次报道的基因型。应加强对海产品中创伤弧菌的监测和耐药分析,预防创伤弧菌感染的暴发。     

海鱼弧菌的分离鉴定

海鱼弧菌的分离鉴定王钦升，马红英，童维佳１９８１年ｌｏｖｅ首先报告海鱼弧菌（Ｖ．ｄａｍｓｅｌａ），生物学特性属典型的海洋弧菌，能致人伤口感染。１９９３年夏季我们从沿海地区急性腹泻病人粪便中分离到该菌。一、细菌的分离鉴定１．菌株特性病人粪便直接接种ＴＣ...     

副溶血性弧菌致病性及耐药性分析

目的了解宿州地区副溶血性弧菌的肠道感染情况。方法对两年中分离到的302株副溶血性弧菌进行溶血素和抗生素敏感性测定，并对患者的临床资料进行统计分析。结果两年中共检测急性腹泻患者的粪便标本3165份，检出副溶血性弧菌302株，检出率为9．5％。其中脲酶阳性48株，占副溶血性弧菌的15．9％。以7～9月副溶血性弧菌榆出最多（252株），占副溶血性弧菌总检出数的83．4％。对302株副溶血性弧菌溶血素检测结果表明，耐热溶血素（TDH）阳性213株，占70．5％；不耐热溶血素（TRH）阳性43株，占14．2％。副溶血性弧菌对痢特灵（FR）的耐药率为66．3％，其次是氨苄西林（AMP），为61％。结论脲酶阴性与阳性副溶血性弧菌均有较强的致病性。     

4株霍利斯弧菌感染的实验结果

霍利斯弧菌（vibrohollisae）是最近发现的一种新的病原性弧菌．国外关于本菌引起人类腹泻及其它感染的报道在逐渐增多[1，2]，但国内报道极少．作者从腹泻患者粪便中分离出4株霍利斯弧菌，对本菌进行了初步实验研究，现报告如下。l方法与结果1．1标本来源均为肠道门诊腹泻患者，男2例，女2例，所分离的4株霍利斯弧菌均来源于粪便标本。1．2分离经过我院肠道门诊急性腹泻患者粪便标本，按常规方法先用破性蛋白际水增茵6～8小时后，挑取表面培养物，划线接种于嗜盐琼脂平板，TCBS琼脂（硫代硫酸钠一拘模酸钠一胆盐一蔗糖）（上海市卫生防疫…     

创伤弧菌感染的流行病学及临床特点

创伤弧菌 (vibriovulnificus)为非霍乱弧菌 ,以前称贝内克菌属 (beneckeavulnifica) ,是嗜盐性海生G 杆菌属 ,Roland[1] 在1970年首先报道由创伤弧菌感染引起小腿坏疽和内毒素性休克。Hollis等[2 ] 在 1976年随后报道从血液中培养分离该细菌 ,并且鉴定为乳酸阴性嗜盐弧菌。 1979年Farmer[3] 将它再命名为创伤弧菌。从那时起 ,美国、荷兰、丹麦、西班牙、以色列、土耳其、我国台湾等一些沿海城市相继有创伤弧菌感染的临床报告。国外有关创伤弧菌感染的临床报道以及研究逐渐增多 ,然而 ,在国内大陆沿海关于创伤弧菌感染的病例报道十分罕见。…     

副溶血性弧菌引发食物中毒的检验分析

南江县曾发生一起由副溶血性弧菌（V．parahemolyticus）引起的重大食物中毒事件。接到报告后，立即组织科室人员分三组到医院和就餐现场进行调查采样。采用分离霍乱弧菌的方法，成功分离检出副溶血性弧菌。现就此事件的采样检验鉴定结果报告如下。     

抗菌药物对创伤弧菌脓毒症大鼠血清抗炎/促炎细胞因子的影响

创伤弧菌（vibrio vulnificus，VV）是一种嗜盐性革兰阴性（G^-）弧菌，广泛存在于海水及海产品中，适应于热带、亚热带环境，可引起人体严重感染、脓毒症等。以往临床观察发现，脓毒症及其引发的多器官功能障碍综合征（MODS）是VV脓毒症患者死亡的主要原因。大量激活的炎性细胞所释放的多种内源性介质参与了脓毒症炎症反应过程，包括促炎细胞因子和抗炎细胞因子。     

创伤弧菌脓毒症研究进展

创伤弧菌(vibrio vulnificus)为非霍乱弧菌，1970年Roland首先报道了由创伤弧菌感染引起小腿坏疽和内毒素性休克；在美国、丹麦、西班牙、以色列及我国台湾等一些沿海城市相继由创伤弧菌感染的临床报告；而国内1991年由姜红首先报道创伤弧菌败血症死亡1例；近来浙江省温州地区陆续有创伤弧菌败血症病例报告，大多因多器官功能障碍而死亡。可见创伤弧菌感染是一种少见而又致命性的重要疾病。     

146株弧菌的分离与鉴定

从１３１４例腹泻便标本中分离出弧菌属细菌１４６株,分离率为１１．１％,以致伤弧菌（４８株３２．９％）,副溶血弧菌（３７株２６．７％）和河弧菌（１５株１０．３％）为主。０－１群霍乱弧菌８株（５．５％）,经血清学鉴定均为小川型,患者呈散在发病。     

河弧菌生物学特性及菌型分布

河弧菌生物学特性及菌型分布尹振田，牟道群，王建芬１９９０年７～９月，我们对综合医院肠道门诊３９１份腹泻粪便，进行了致病性弧菌分离鉴定。共检出致病性弧菌７８株，其中河弧菌为优势菌占３８．４６％（３０／７８），并对该菌进行了血清学分型。报道如下。材料与方...     

192株致病性弧菌的鉴定与分析

１９２株致病性弧菌的鉴定与分析金保中，叶云凌，沈瑛，马红英，高峡（浙江省军区卫生防疫检验所，杭州３１０００８）１９９３年７月～１０月，为了解致病性弧菌引起腹泻的情况，在沿海某地对急性腹泻病人进行了致病性弧菌的分离检测，结果如下。１材料与方法１．１标本...     

弧菌科细菌分离鉴定

弧菌科细菌分离鉴定吴秋梅，谭力，高小平，崔娴维，杨书宁，李宝强我们对１９９３～１９９４年夏秋季我院肠道门诊５９４份急性感染性腹泻患者粪便标本进行了弧菌科细菌（３个菌属）的分离鉴定。报道如下：一、材料和方法１．标本来源：随机抽样５９４份本院肠道门诊急性...     

致病性弧菌感染情况调查

致病性弧菌感染情况调查任德生，瞿明芳，林建国，潘莉珍（苏州市卫生防疫站，江苏苏州２１５００３）为了解我市致病性弧菌引起腹泻的情况，我们于１９９２年６月～１０月对某医院急性腹泻就诊者进行致病性弧菌的分离检测，结果如下。１材料与方法１．１标本来源收集某医...     

创伤弧菌脓毒症患者的抢救与护理

创伤弧菌为嗜盐性海生G杆菌属，创伤弧菌脓毒症起病急、病情进展快、病死率高，我院1998年5月至2002年8月收住了创伤弧菌脓毒症患者12例，现报告如下。