lncRNA PCAT19靶向miR-769-5p促进口腔鳞癌HSC3细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨lncRNA PCAT19对口腔鳞癌HSC3细胞增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的分子机制。方法 收集45例口腔鳞癌患者癌组织和癌旁组织，qRT-PCR法检测组织中PCAT19和miR-769-5p表达。体外培养HSC3细胞，转染PCAT19小干扰RNA或miR-769-5p模拟物、或共转染PCAT19小干扰RNA与miR-769-5p抑制剂后，CCK-8法和单克隆实验检测细胞增殖；划痕实验检测细胞迁移；Transwell实验检测细胞侵袭；蛋白质印迹法检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验验证PCAT19和miR-769-5p的调控关系。结果 口腔鳞癌组织中PCAT19表达高于癌旁组织，miR-769-5p表达低于癌旁组织（P <0.05）。干扰PCAT19或过表达miR-769-5p后，HSC3细胞OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数、N-cadherin蛋白表达降低，E-cadherin蛋白表达升高（P <0.05）。PCAT19靶向负调控miR-769-5p。下调miR-769-5p逆转了干扰PCAT19对HSC3...     

PDCD4及CDKN1A/p21在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨PDCD4、CDKN1A/p21在喉鳞状细胞癌组织中的表达与相关病理参数间的关系及二者间的相关性。方法使用免疫组化法检测PDCD4及CDKN1A/p21蛋白在喉鳞癌及癌旁正常组织中的表达,结合患者性别、年龄、病理分期、淋巴结转移等情况进行χ2检验及Spearman秩相关检验。结果 PDCD4在喉鳞癌组织中阳性表达率为40.30%,癌旁正常组织中阳性表达率58.21%,差异有统计学意义(P<0.05);CDKN1A/p21在喉鳞癌组织中阳性表达率为37.31%,癌旁正常组织中阳性表达率55.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。喉鳞状细胞癌中PDCD4表达下调,与喉鳞癌分化程度、T分期相关(P<0.05);CDKN1A/p21表达下调,与喉鳞癌分化程度及淋巴转移相关(P<0.05)。PDCD4与CDKN1A/p21二者正相关(r=0.478,P=0.000)。结论 PDCD4与CDKN1A/p21与喉鳞癌发生及恶性发展密切相关,可作为喉鳞癌病理诊断、治疗和预后判断的一项指标。     

Rb2／pl30在食管鳞癌中的表达及其意义以及同Survivin相关性分析

目的研究Rb2／p130、Survivin在食管鳞癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组化法检测20例癌旁正常食管组织、62例食管鳞状细胞癌组织中Rb2／p130、Survivin的表达。结果在癌旁正常组织黏膜、食管鳞癌中，Rb2／p130的阳性表达率分别为90％（18／20）、43．5％（27／62）；Survivin分别为0、56．5％（35／62）；在不同分化程度的食管鳞癌中，Rb2／p130（x^2=14．982，P=0．001）、Survivin（x^2=9．685，P=0．006）表达强度的差异均有显著性；在不同临床分期的食管鳞癌中，Rb2／p130（x^2=7．655，P=0．022）、Survivin（0=11．041，P=0．004）表达强度的差异均有显著性；Rb2／p130（x^2=10．162，P=0．001）、Survivin（0=4．659，P=0．031）表达强度在淋巴结有转移组和淋巴结无转移组之间，差异亦均有显著性。癌细胞分化程度越低，临床分期越晚，淋巴结有转移，Survivin，Rb2／p130则表达显著减弱。两者的表达强度与食管鳞癌的肿瘤部位、肿瘤长度均无关；Spearman等级相关分析结果显示：Rb2／p130与Survivin之间的表达强度呈显著负相关（rs=-0．475，P〈0．001）。结论Rb2／p130低表达以及Survivin高表达，在食管癌的发生和发展中起着重要作用。     

p63基因在喉鳞癌中表达的意义

目的：探讨p63基因在喉鳞癌中表达的意义。方法：采用免疫组化法检测30例喉癌组织中p63的表达,另选16例癌旁组织和〗4例声带息肉作为对照。结果：p63基因蛋白表达的阳性率在正常组织、癌旁组织及喉鳞癌组织中逐渐增高。其在喉癌中表达的阳性率在细胞不同分化程度中的差异有统计学意义,低分化鳞癌的表达强度高于高分化鳞癌;在不同年龄、性别、肿瘤原发部位、临床分期、有无颈淋巴结转移方面无显著差异。结论：（1）p63在喉鳞癌中呈过度表达,并且是喉鳞癌发生中的早期事件;（2）p63与喉鳞癌的分化程度有关;（3）p63基因的表达在喉鳞癌进展的过程中无变化。     

转移性宫颈癌细胞衍生的外泌体miR-21-5p促进宫颈癌侵袭及转移

目的 探讨转移性宫颈癌组织的旁分泌作用对肿瘤细胞扩散的影响。方法 选择22例转移性宫颈鳞癌患者的手术标本（癌组织和癌旁组织）和血清标本,以及22名健康体检者的血清标本,采用逆转录-实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-21-5p在癌组织和癌旁组织中的表达水平;分别转染miR-21-5p模拟物/抑制剂到宫颈癌SiHa细胞,采用RT-qPCR、细胞集落形成实验、Transwell迁移实验、噻唑蓝（MTT）比色法、蛋白免疫印迹法、双荧光素酶报告分析差异;采用高速离心法提取血清外泌体;采用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术、蛋白免疫印迹法、透射电子显微镜（TEM）对外泌体进行表征鉴定;采用RT-qPCR 检测宫颈鳞癌患者和健康体检者血清外泌体中miR-21-5p的表达差异;采用受试者操作特征（ROC）曲线分析血清外泌体中miR-21-5p对肿瘤转移的诊断效能。结果 miR-21-5p在转移性宫颈鳞癌组织中表达上调;miR-21-5p过表达能促进宫颈鳞癌SiHa细胞集落形成以及细胞增殖与迁移（P均< 0.01）;双荧光素酶报告显示,miR-21-5p可以靶向快速发育生长因子同源蛋白2抗体（SPRY2）,对SPYR2的表达水平进行调控;miR-21-5p模拟物转染的SiHa细胞中,磷酸化丝裂原和应激激活的蛋白激酶、磷酸化核糖体S6蛋白激酶、磷酸化原癌基因C-RAF、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶和磷酸化MAPK蛋白的表达均上调（P均< 0.05）。miR-21-5p在宫颈鳞癌患者的血清外泌体中上调（P < 0.05）。血清外泌体评估宫颈癌转移的ROC曲线下面积为0.9375。结论 转移性宫颈鳞癌患者组织中miR-21-5p通过外泌体传递促进肿瘤转移,其机制可能与靶向SPRY2/细胞外调节蛋白激酶/MAPK信号通路有关。     

CCRL2、miR-211-5p在食管鳞癌组织中表达及临床意义

目的探讨趋化因子诱饵受体2(CCRL2)和微小RNA-211-5p(miR-211-5p)在食管鳞癌组织中的表达情况及其临床意义。方法选择2015年6月至2017年10月于本院行手术治疗的食管鳞癌患者83例,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测食管鳞癌组织与癌旁组织中CCRL2 mRNA、miR-211-5p的表达水平,免疫组织化学染色检测CCRL2蛋白的表达水平,Pearson法分析CCRL2 mRNA与miR-211-5p的相关性,并分析其与食管鳞癌患者临床病理参数及预后的关系。结果与癌旁组织比较,食管鳞癌组织CCRL2 mRNA(1.05±0.21 vs 2.68±0.52,P<0.001)的表达水平及蛋白质阳性率(24.10%vs 62.65%,P<0.001)均显著升高,而miR-211-5p的表达水平(1.01±0.18 vs 0.61±0.15,P<0.001)显著降低(P<0.05);食管鳞癌组织中CCRL2和miR-211-5p呈负相关(r=-0.713,P<0.001);CCRL2和miR-211-5p的表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴转移有关(P<0.05);食管鳞癌患者CCRL2阳性表达组的3年累积生存率显著低于CCRL2阴性表达组(30.84%vs 54.98%,P=0.011),而miR-211-5p高表达组的3年累积生存率显著高于miR-211-5p低表达组(58.72%vs 24.31%,P<0.001)。结论食管鳞癌组织中CCRL2呈高表达、miR-211-5p呈低表达,且均与患者预后有关,可作为食管鳞癌患者潜在的预后标志物。     

乳腺癌组织微小核糖核酸-485-3p、Xklp2靶蛋白表达水平及临床意义

目的 探讨乳腺癌组织微小核糖核酸-485-3p(miR-485-3p)、xklp2靶蛋白(TPX2)表达水平与患者预后的关系.方法 采用免疫组织化学法检测TPX2蛋白表达,采用实时荧光定聚合酶链反应检测miR-485-3p、TPX2 mRNA表达.采用Pearson检验分析乳腺癌组织中miR-485-3p表达与TPX2 mRNA表达的关系;随访5年,采用Kaplan-Meier法分析乳腺癌组织中miR-485-3p、TPX2蛋白表达与患者总生存率的关系,并用COX回归分析影响乳腺癌患者总生存的危险因素.结果 乳腺癌组织中TPX2蛋白阳性率、TPX2 mRNA表达水平均高于癌旁正常组织,miR-485-3p表达水平低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05).乳腺癌组织中miR-485-3p、TPX2蛋白表达与患者TNM分期、淋巴结转移、Ki-67表达有关(P＜0.05).乳腺癌组织中miR-485-3p表达与TPX2mRNA表达呈负相关(P＜0.05).miR-485-3p高表达者5年总生存率为77.78％,高于低表达者的52.94％,差异有统计学意义(P＜0.05);TPX2蛋白阴性者5年总生存率为84.00％,高于阳性者的60.00％,差异有统计学意义(P＜0.05).有淋巴结转移、miR-485-3p低表达、TPX2蛋白阳性是影响乳腺癌患者总生存的独立危险因素(P＜0.05).结论 在乳腺癌组织中,miR-485-3p低表达、TPX2高表达及二者呈负相关,均可作为判断乳腺癌患者的预后指标.     

miR-1225-5p靶向调控S100A9抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的探讨miR-1225-5p对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肝癌细胞系Huh7、MHCC97H和MHCCLM3及正常肝细胞系THLE-2中miR-1225-5p和S100钙结合蛋白A9(S100A9)mRNA表达水平。采用Western blot试验检测S100A9的表达水平。以Huh7细胞作为研究对象,分别转染miR-1225-5p模拟物(mimics)、S100A9的小干扰RNA至Huh7细胞,四甲基噻唑蓝染色法检测miR-1225-5p过表达或下调S100A9表达对Huh7细胞增殖的影响,Transwell检测miR-1225-5p过表达或下调S100A9表达对Huh7细胞迁移和侵袭的影响,Western blot试验检测miR-1225-5p过表达或下调S100A9表达对Huh7细胞细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、p27、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、MMP-14蛋白表达的影响。生物信息学软件预测S100A9的3′非翻译区中含有与miR-1225-5p互补的核苷酸序列,双荧光素酶报告基因试验验证miR-1225-5p与S100A9的靶向关系。结果与正常肝细胞THLE-2比较,肝癌细胞系Huh7、MHCC97H和MHCCLM3中miR-1225-5p表达水平均降低,差异均有统计学意义(P0.05),S100A9mRNA和S100A9表达水平均升高,差异均有统计学意义(P0.05)。过表达miR-1225-5p或下调S100A9表达均可抑制Huh7细胞增殖、迁移和侵袭,以及CyclinD1、MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达(P0.05),促进p21和p27蛋白的表达(P0.05)。miR-1225-5p在Huh7细胞中负调控S100A9表达,过表达S100A9逆转了miR-1225-5p过表达对Huh7细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-1225-5p过表达可能通过下调S100A9的表达抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

miR-30-5p和SOCS1在食管癌组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-30-5p和细胞因子信号传导抑制因子1(SOCS1)在食管癌组织中的表达及临床意义。方法选取2016年2月—2017年1月收治的食管癌85例,比较食管癌组织和癌旁组织中miR-30-5p及SOCS1 mRNA和蛋白表达,分析食管癌组织miR-30-5p和SOCS1 mRNA表达与食管癌患者临床病理特征关系,探讨食管癌组织中miR-30-5p和SOCS1 mRNA表达的相关性,预测食管癌组织中miR-30-5p和SOCS1 mRNA的结合位点,分析食管癌组织中miR-30-5p和SOCS1 mRNA不同表达与食管癌患者预后关系。结果食管癌组织中miR-30-5p相对表达量高于癌旁组织,SOCS1 mRNA相对表达量低于癌旁组织,SOCS1蛋白表达阳性率低于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.01)。食管癌患者不同病理分级、肿瘤分期和有无淋巴结转移食管癌组织miR-30-5p和SOCS1 mRNA表达差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。食管癌组织中miR-30-5p和SOCS1 mRNA表达呈明显负相关(P0.01)。SOCS1 mRNA序列3'非翻译区的285～292碱基位置处含有与miR-30-5p互补结合位点。3年总体生存率食管癌组织中miR-30-5p高表达患者低于低表达患者,SOCS1 mRNA高表达患者高于低表达患者,差异有统计学意义(P0.01)。结论食管癌组织中miR-30-5p表达升高,而SOCS1 mRNA和蛋白表达降低,其与食管癌患者病理分级、肿瘤分期、有无淋巴结转移及预后有关,共同促进食管癌恶性进展。     

Tiotidine and cimetidine--kinetics and dynamics

Tiotidine and cimetidine kinetics and dynamics were compared to assess mechanisms of the longer duration of effect of tiotidine in man. Both drugs has similar lag times for absorption. Tiotidine with a meal was more slowly absorbed than when fasting and was also more slowly absorbed than cimetidine with a meal. The elimination rates for both drugs did not differ; they were both approximately 2 to 3 hr. Oral doses of cimetidine achieved areas under the plasma concentration curve approximately three times that of tiotidine but these concentrations were only 1/10 as potent. The cimetidine concentration inducing 50% inhibition of food-stimulated gastric acid secretion was 0.41 +/- 0.04 whereas it was 0.04 +/- 0.003 microgram/ml for tiotidine. The effect of tiotidine lasted longer than that of cimetidine because the doses recommended for use in man resulted in higher concentrations in plasma relative to effective concentration than clinical doses of cimetidine.     

Anatomy and physiology of feeding and swallowing: normal and abnormal

Eating and swallowing are complex behaviors involving volitional and reflexive activities of more than 30 nerves and muscles. They have two crucial biologic features: food passage from the oral cavity to stomach and airway protection. The swallowing process is commonly divided into oral, pharyngeal, and esophageal stages, according to the location of the bolus. The movement of the food in the oral cavity and to the oropharynx differs depending on the type of food (eating solid food versus drinking liquid). Dysphagia can result from a wide variety of functional or structural deficits of the oral cavity, pharynx, larynx, or esophagus. The goal of dysphagia rehabilitation is to identify and treat abnormalities of feeding and swallowing while maintaining safe and efficient alimentation and hydration.