透明质酸钠预防骨关节炎时Ⅱ型胶原抗体水平的动态变化

背景研究表明透明质酸钠可作用于机体免疫系统,调节免疫细胞分泌细胞因子变化,从而抑制炎症,对治疗早期骨关节炎具有一定疗效.目的观察关节腔内注射透明质酸钠预防膝骨关节炎过程中对Ⅱ型胶原抗体水平的影响及其动态变化.设计随机对照观察.单位广州市红十字会医院创伤外科研究所.材料实验于2002-03/08在广州市创伤外科研究所动物及免疫室完成.选用成年新西兰大白兔12只.方法取12只成年新西兰兔制备Hulth膝骨关节炎动物模型,随机等分为两组,透明质酸钠组和生理盐水对照组.透明质酸钠组术后当时及每2周关节内注射10g/L透明质酸钠1 mL至12周;对照组注射生理盐水1 mL为对照.各组术前及术后每隔2周收集血清,建立间接夹心酶联免疫吸附法,检测Ⅱ型胶原抗体水平.主要观察指标对比分析不同时期实验组与生理盐水对照组预防兔膝骨关节炎血清Ⅱ型胶原抗体水平的动态变化及两组组内各时期Ⅱ型胶原水平与术前的比较.结果所有实验数据均来自12只新西兰大白兔实验结果统计数据.透明质酸钠组术后第6,10,12周Ⅱ型胶原抗体水平与术前比较均显著提高(P＜0.05);生理盐水对照组Ⅱ型胶原抗体水平第10周显著高于术前(P＜0.05);透明质酸钠组与生理盐水对照组同期比较Ⅱ型胶原抗体水平均无显著差异.结论骨关节炎使机体产生自身免疫,引起自身Ⅱ型胶原抗体水平增加.透明质酸钠能促进体液免疫应答,导致抗体水平进一步升高.提示注射透明质酸钠治疗膝骨关节炎时,应考虑其免疫调节作用.但值得一提的是,透明质酸钠为糖胺多糖本身不具备产生特异性Ⅱ型胶原抗体的免疫原性,它究竟通过何种途径调节体液免疫应答有待于进一步深入观察.     

Ⅱ型胶原预防和治疗骨关节炎的动物实验

目的：采用Hulth法对新西兰兔建立膝骨关节炎动物模型,以透明质酸钠及注射用生理盐水为对照,观察Ⅱ型胶原注射治疗兔膝关节炎的愈合效果.方法：实验于2002-02/2003-07在暨南大学医学院附属第四医院完成.取36只新西兰兔制备Hulth膝骨关节炎动物模型,随机等分为3组：实验组术前及术后每两周关节内注射1 mL 1%Ⅱ型胶原至12周.关节内注射透明质酸钠组和关节内注射生理盐水组分别于术前及术后每两周关节内注射1%透明质酸钠1 mL,生理盐水1 mL,以上各组于术后4,8,12周各处死动物4只,作标本手术显微镜观察和组织学检测.结果：①实验组与透明质酸钠组骨关节炎改变较生理盐水对照组明显减轻.②术后4周时,实验组软骨膜光滑,软骨细胞排列整齐,可见双核软骨细胞;关节内注射透明质酸钠组软骨膜也光滑,软骨细胞排列整齐;关节内注射生理盐水组软骨膜细胞增生,有裂隙,软骨层变薄,细胞排列不规则.术后8周时,实验组软骨膜细胞增生,有裂隙,软骨细胞层次减少,但排列尚规则;关节内注射透明质酸钠组的光镜改变基本与实验组相似;关节内注射生理盐水组出现软骨表面缺损及纤维化,软骨细胞层薄排列不规则.术后12周时,实验组、关节内注射透明质酸钠组的光镜改变与实验组术后8周时相似;关节内注射生理盐水组在其术后8周时光镜改变基础上有更广泛的软骨缺损,部分切片可见软骨下骨质暴露.结论：①Ⅱ型胶原与透明质酸钠匀能有效抑制骨关节炎.②外源性Ⅱ型胶原可以替代透明质酸钠应用于骨关节炎的防治.     

Ⅱ型胶原预防和治疗骨关节炎的动物实验

目的:采用H ulth法对新西兰兔建立膝骨关节炎动物模型,以透明质酸钠及注射用生理盐水为对照,观察Ⅱ型胶原注射治疗兔膝关节炎的愈合效果。方法:实验于2002-02/2003-07在暨南大学医学院附属第四医院完成。取36只新西兰兔制备Hulth膝骨关节炎动物模型,随机等分为3组:实验组术前及术后每两周关节内注射1m L1%Ⅱ型胶原至12周。关节内注射透明质酸钠组和关节内注射生理盐水组分别于术前及术后每两周关节内注射1%透明质酸钠1m L,生理盐水1m L,以上各组于术后4,8,12周各处死动物4只,作标本手术显微镜观察和组织学检测。结果:①实验组与透明质酸钠组骨关节炎改变较生理盐水对照组明显减轻。②术后4周时,实验组软骨膜光滑,软骨细胞排列整齐,可见双核软骨细胞;关节内注射透明质酸钠组软骨膜也光滑,软骨细胞排列整齐;关节内注射生理盐水组软骨膜细胞增生,有裂隙,软骨层变薄,细胞排列不规则。术后8周时,实验组软骨膜细胞增生,有裂隙,软骨细胞层次减少,但排列尚规则;关节内注射透明质酸钠组的光镜改变基本与实验组相似;关节内注射生理盐水组出现软骨表面缺损及纤维化,软骨细胞层薄排列不规则。术后12周时,实验组、关节内注射透明质酸钠组的光镜改变与实验组术后8周时相似;关节内注射生理盐水组在其术后8周时光镜改变基础上有更广泛的软骨缺损,部分切片可见软骨下骨质暴露。结论:①Ⅱ型胶原与透明质酸钠匀能有效抑制骨关节炎。②外源性Ⅱ型胶原可以替代透明质酸钠应用于骨关节炎的防治。     

Ⅱ型胶原注射骨关节炎时C-反应蛋白及类风湿因子的表达

背景：Ⅱ型胶原和硫酸软骨素是关节软骨的重要组成成分,不仅具有保护软骨的作用,还能抑制关节炎的病变。目的：通过检测类风湿因子和C-反应蛋白的表达评价Ⅱ型胶原及Ⅱ型胶原复合硫酸软骨素注射对骨性关节炎的疗效。方法：采用改良Hulth法制作大鼠膝关节骨性关节炎模型,造模后模型组关节腔注射生理盐水、透明质酸钠组给予透明质酸钠凝胶注射、Ⅱ型胶原组给予单纯Ⅱ型胶原注射、Ⅱ型胶原复合硫酸软骨素组给予Ⅱ型胶原复合硫酸软骨素注射治疗。各组动物于术后进行日常观察、称质量、血清抗体及组织病理检查。结果与结论：造模后模型组大鼠血类风湿因子和C-反应蛋白水平均有所升高,炎症加剧;而与模型组相比,各给药组大鼠类风湿因子和C-反应蛋白水平均有所下降,炎症有所减轻,其中Ⅱ型胶原复合硫酸软骨素组大鼠血清中类风湿因子水平显著下降（P〈0．01）。结果显示Ⅱ型胶原与透明质酸钠均具有预防和治疗骨关节炎的作用,能缓解骨关节炎病变,Ⅱ型胶原联合硫酸软骨素的疗效更明显。     

透明质酸钠对兔创伤性骨关节炎软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的干预

背景：各种关节损伤、关节手术后导致的创伤性骨关节炎较为常见，关节腔注射透明质酸钠已被视为一种治疗骨关节炎的有效手段。 目的：以前交叉韧带切断的方法建立兔创伤性骨关节炎模型，观察关节腔注射透明质酸钠对其关节软骨中诱导型一氧化氮合酶mRNA表达水平的影响。 设计：随机对照动物实验。 单位：武汉大学人民医院骨科。 材料：实验于2003—04／12在武汉大学人民医院骨科实验室完成。选取清洁级5-6月龄大耳白兔16只，随机数字表法分为透明质酸钠注射组、生理盐水对照组，8只／组。透明质酸钠（上海建华精细生物制品有限公司提供，国药准字2000第366095号）。 方法：①两组均建立创伤性骨关节炎模型。每只兔以氯胺酮1．0mg／kg体质量麻醉，单侧膝关节行前交叉韧带切断造模。（9术后第5周，透明质酸钠注射组患膝关节腔注射质量浓度为10g／L的透明质酸钠0．3mL，1次／周，连续5周。生理盐水对照组注射等量生理盐水。（3）术后10周处死，观察两组股骨内髁关节软骨的大体形态学（0分：关节面光滑，色泽正常；1分：关节面粗糙，有小的裂隙，色泽灰暗；2分：关节面糜烂，软骨缺损达软骨表层或中层；3分：关节面溃疡形成，缺损达软骨深层；4分：软骨剥脱，软骨下骨质暴露）和组织学病理变化，采用反转录聚合酶链反应方法检测软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达情况。 主要观察指标：（1）两组股骨髁关节面标本大体观察结果。（2）两组股骨内髁软骨光镜组织学观察结果。（3）两组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达。 结果：实验选取清洁级大耳白兔16只，全部进入结果分析。①两组股骨髁关节面标本大体观察结果：解剖显微镜下观察股骨髁关节面病理变化，透明质酸钠注射组软骨退变程度较生理盐水对照组明显减轻。（2）两组股骨内髁软骨光镜组织学观察结果：透明质酸钠注射组见软骨膜变性脱落，表层软骨细胞变性、坏死、排列紊乱，形成糜烂；生理盐水对照组见软骨细胞变性、坏死，排列紊乱，溃疡病变达软骨深层，并见新生的毛细血管和成纤维细胞增生，溃疡底部见纤维组织增生。（3）两组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达：透明质酸钠注射组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA表达量均值为1．09&;#177;0．18，生理盐水对照组的表达量均值为1．26&;#177;0．23，两组基本相似（P〉0．05）。 结论：关节腔注射透明质酸钠对早期骨关节炎软骨具有修复和保护作用，能有效减轻早期创伤性骨关节炎关节软骨的退变，对诱导型一氧化氮合酶的表达没有下调作用。     

兔骨关节炎滑膜组织血管内皮生长因子mRNA表达及透明质酸钠的影响

背景:骨关节炎的发病机制目前还未完全清楚,研究发现血管内皮生长因子参与骨关节炎的发生发展.目的:观察血管内皮生长因子在滑膜组织表达的改变及透明质酸钠对滑膜血管内皮生长因子基因表达的影响.方法:24只大耳白兔随机正常对照组、生理盐水组和透明质酸钠组行单膝前交叉韧带切断术,4周后生理盐水组关节腔注射生理盐水0.3 mL,透明质酸钠组注射等量的高分子量10 g/L透明质酸钠,1次/周,连续5周.第10周处死动物,比较各组股骨内髁关节软骨的大体变化,采用实时定量聚合酶链反应方法检测滑膜VEGF mRNA的表达水平.结果与结论:大体评分显示生理盐水组软骨退变的程度明显重于正常对照组和透明质酸钠组(P＜0.05);生理盐水组滑膜血管内皮生长因子mRNA表达较正常组显著下降(P＜0.05),透明质酸钠组滑膜血管内皮生长因子mRNA表达较生理盐水组有升高,但比正常对照组低(P＜0.05).结果表明,滑膜组织血管内皮生长因子表达下降可能参与透明质酸钠的发生发展,关节腔注射透明质酸钠对透明质酸钠滑膜组织血管内皮生长因子表达有上调作用,有利于滑膜组织修复,可能是其治疗透明质酸钠机制之一.     

透明质酸钠对兔创伤性骨关节炎软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的干预(英文)

背景:各种关节损伤、关节手术后导致的创伤性骨关节炎较为常见,关节腔注射透明质酸钠已被视为一种治疗骨关节炎的有效手段。目的:以前交叉韧带切断的方法建立兔创伤性骨关节炎模型,观察关节腔注射透明质酸钠对其关节软骨中诱导型一氧化氮合酶mRNA表达水平的影响。设计:随机对照动物实验。单位:武汉大学人民医院骨科。材料:实验于2003-04/12在武汉大学人民医院骨科实验室完成。选取清洁级5～6月龄大耳白兔16只,随机数字表法分为透明质酸钠注射组、生理盐水对照组,8只/组。透明质酸钠(上海建华精细生物制品有限公司提供,国药准字2000第366095号)。方法:①两组均建立创伤性骨关节炎模型。每只兔以氯胺酮1.0mg/kg体质量麻醉,单侧膝关节行前交叉韧带切断造模。②术后第5周,透明质酸钠注射组患膝关节腔注射质量浓度为10g/L的透明质酸钠0.3mL,1次/周,连续5周。生理盐水对照组注射等量生理盐水。③术后10周处死,观察两组股骨内髁关节软骨的大体形态学(0分:关节面光滑,色泽正常;1分:关节面粗糙,有小的裂隙,色泽灰暗;2分:关节面糜烂,软骨缺损达软骨表层或中层;3分:关节面溃疡形成,缺损达软骨深层;4分:软骨剥脱,软骨下骨质暴露)和组织学病理变化,采用反转录聚合酶链反应方法检测软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达情况。主要观察指标:①两组股骨髁关节面标本大体观察结果。②两组股骨内髁软骨光镜组织学观察结果。③两组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达。结果:实验选取清洁级大耳白兔16只,全部进入结果分析。①两组股骨髁关节面标本大体观察结果:解剖显微镜下观察股骨髁关节面病理变化,透明质酸钠注射组软骨退变程度较生理盐水对照组明显减轻。②两组股骨内髁软骨光镜组织学观察结果:透明质酸钠注射组见软骨膜变性脱落,表层软骨细胞变性、坏死、排列紊乱,形成糜烂;生理盐水对照组见软骨细胞变性、坏死,排列紊乱,溃疡病变达软骨深层,并见新生的毛细血管和成纤维细胞增生,溃疡底部见纤维组织增生。③两组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达:透明质酸钠注射组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA表达量均值为1.09±0.18,生理盐水对照组的表达量均值为1.26±0.23,两组基本相似(P>0.05)。结论:关节腔注射透明质酸钠对早期骨关节炎软骨具有修复和保护作用,能有效减轻早期创伤性骨关节炎关节软骨的退变,对诱导型一氧化氮合酶的表达没有下调作用。     

透明质酸钠对兔创伤性骨关节炎软骨诱导一氧化氮合酶mRNA表达的干预

背景各种关节损伤、关节手术后导致的创伤性骨关节炎较为常见,关节腔注射透明质酸钠已被视为一种治疗骨关节炎的有效手段.目的以前交叉韧带切断的方法建立兔创伤性骨关节炎模型,观察关节腔注射透明质酸钠对其关节软骨中诱导型一氧化氮合酶mRNA表达水平的影响.设计随机对照动物实验.单位武汉大学人民医院骨科.材料实验于2003-04/12在武汉大学人民医院骨科实验室完成.选取清洁级5～6月龄大耳白兔16只,随机数字表法分为透明质酸钠注射组、生理盐水对照组,8只/组.透明质酸钠(上海建华精细生物制品有限公司提供,国药准字2000第366095号).方法①两组均建立创伤性骨关节炎模型.每只兔以氯胺酮1.0 mg/kg体质量麻醉,单侧膝关节行前交叉韧带切断造模.②术后第5周,透明质酸钠注射组患膝关节腔注射质量浓度为10 g/L的透明质酸钠0.3 mL,1次/周,连续5周.生理盐水对照组注射等量生理盐水.③术后10周处死,观察两组股骨内髁关节软骨的大体形态学(0分关节面光滑,色泽正常;1分关节面粗糙,有小的裂隙,色泽灰暗;2分关节面糜烂,软骨缺损达软骨表层或中层;3分关节面溃疡形成,缺损达软骨深层;4分软骨剥脱,软骨下骨质暴露)和组织学病理变化,采用反转录聚合酶链反应方法检测软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达情况.主要观察指标①两组股骨髁关节面标本大体观察结果.②两组股骨内髁软骨光镜组织学观察结果.③两组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达.结果实验选取清洁级大耳白兔16只,全部进入结果分析.①两组股骨髁关节面标本大体观察结果解剖显微镜下观察股骨髁关节面病理变化,透明质酸钠注射组软骨退变程度较生理盐水对照组明显减轻.②两组股骨内髁软骨光镜组织学观察结果透明质酸钠注射组见软骨膜变性脱落,表层软骨细胞变性、坏死、排列紊乱,形成糜烂;生理盐水对照组见软骨细胞变性、坏死,排列紊乱,溃疡病变达软骨深层,并见新生的毛细血管和成纤维细胞增生,溃疡底部见纤维组织增生.③两组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达透明质酸钠注射组软骨诱导型一氧化氮合酶mRNA表达量均值为1.09±0.18,生理盐水对照组的表达量均值为1.26±0.23,两组基本相似(P＞0.05).结论关节腔注射透明质酸钠对早期骨关节炎软骨具有修复和保护作用,能有效减轻早期创伤性骨关节炎关节软骨的退变,对诱导型一氧化氮合酶的表达没有下调作用.     

膝关节腔内注射疗法对骨关节炎关节软骨影响的实验研究

目的：采用不同物质进行膝关节腔内注射以比较其对骨关节炎关节软骨的影响。方法：6月龄新西兰白兔12只，分实验组和对照组a,b，实验组采用石膏固定一侧膝关节的方法制作膝骨性关节炎的模型，模型建立后，去除固定，定期于膝关节腔内注射强的松龙注射液，透明质酸钠，医用氧气，丹参注射液，每周1次，共4次，通过光镜与电镜观察上述物质对骨关节炎关节软骨的影响，对照组a不做任何处理，对照组b仅做一侧膝关节固定，不行膝关节腔内注射。结果：透明质酸钠对退变的关节软骨有明显的修复作用，丹参注射液对关节软骨亦有一定的修复作用，而强的松龙及医用氧气对骨关节炎关节软骨未表现出有益的影响。结论：临床上在治疗骨性关节炎时，应考虑上述物质对关节软骨的影响。     

透明质酸钠预防兔膝关节固定后关节软骨退行性改变的作用

目的:多项研究成果已证明透明质酸钠在软骨修复及重建过程中具有重要作用。观察关节内注射透明质酸钠对兔膝关节固定后关节软骨退行性改变中的预防作用,并评估其效率。方法:实验于2004-10/2005-05在泰山医学院基础研究所完成。①实验分组:雄性新西兰大白兔24只,体质量2.5～3.0kg,随机分为生理盐水对照组和透明质酸治疗组,每组12只。②实验方法:透明质酸治疗组给予左膝关节内注射0.3mL透明质酸,1次/周,共行5次;生理盐水对照组给予左膝关节注射同等剂量生理盐水,1次/周,共行5次。各组均于初次注射后将左下肢给予石膏管型固定,膝部预留窗口以备下次注射。于末次注射1周后麻醉处死动物,采集左膝关节股骨髁关节软骨制成石蜡切片。同时采集右膝同部位软骨作为正常对照。③实验评估:普通光学显微镜下观察苏木精-伊红染色切片的形态变化;对甲苯胺蓝染色切片利用Image-ProPlus6.0图像分析系统进行平均染色灰度质分析;激光共聚焦显微镜分析免疫荧光标记的Ⅱ型胶原荧光强度。结果:纳入兔24只,均进入结果分析。透明质酸治疗组苏木精-伊红染色显示软骨层无变薄现象,软骨细胞同源细胞簇排列整齐,细胞大小均匀,细胞核染色均匀,潮线较为完整,无血管翳增生;生理盐水对照组苏木精-伊红染色显示软骨层变薄,细胞排列紊乱无规律,细胞大小不等,核染色浓淡不一,潮线不完整,血管翳有侵入软骨基底部的迹象。透明质酸治疗组软骨甲苯胺蓝染色灰度值及Ⅱ型胶原荧光强度均明显高于生理盐水对照组软骨(P<0.01),与正常软骨亦有显著差异(P<0.01)。结论:透明质酸能够有效地预防兔膝关节固定后的软骨退行性改变,但这种预防作用所产生的效果与正常软骨尚有差距。     

丹参和透明质酸钠恢复膝关节功能的对比研究

目的通过对丹参和透明质酸钠注射液关节腔内注射治疗膝骨关节炎临床疗效的比较,客观评价中药丹参治疗膝骨关节炎的疗效。方法将68例(85膝)膝骨关节炎患者,随机分为两组,分别在膝关节内注射丹参和透明质酸钠注射液,并在用药后5周和随后12个月内观察疗效。结果在治疗5周后两组在膝关节疼痛和功能等评分方面均有明显改善(P<0.05)。12个月随访期间,丹参组和透明质酸钠组分别有37膝(84.1%)和34膝(82.9%)一直未出现关节疼痛;两组分别有33膝(75.0%)和31膝(75.6%)未出现任何不适。在短期效果和疗效维持方面两组间差异无显著性意义(P>0.05)。结论两组在早期治疗膝骨关节炎方面同样有良好的疗效,且12月连续随访也有较好的疗效维持。丹参膝关节腔内注射治疗膝骨关节炎,具有安全、有效、方便和廉价的优点,值得临床推广应用。     

应用Ⅱ型胶原为载体的异种异体移植修复关节软骨缺损

背景已有用Ⅱ型胶原作为载体的软骨细胞移植的实验动物模型,Ⅱ型胶原是否引起实验性的关节炎或者发生由Ⅱ型胶原介导的细胞毒的反应尚未明确.目的检测用猪Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔的细胞免疫状态.设计以实验动物为研究对象,观察对比的探索性研究.单位一所市级医院创伤外科研究所.材料实验于1999-08/2000-02在广州红十字会医院创伤外科研究所完成.新西兰大白兔6只,雌雄不限,体质量2.0～3.0kg.方法用Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔60 d,定期抽取血浆检测抗Ⅱ型胶原抗体;第60天取兔的外周血淋巴细胞,取兔脾细胞、淋巴结分离淋巴细胞,进行体外2次Ⅱ型胶原刺激,检测由此引起的反应性的细胞增殖规律.随机分为两组,第1组加入不同浓度植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)作阳性对照,并测定非特异性免疫;第2组加入不同浓度Ⅱ型胶原,检测特异性免疫.主要观察指标①兔抗Ⅱ型胶原抗体含量检测.②正常兔与免疫兔脾淋巴细胞增殖试验比较.③正常兔和免疫兔淋巴结淋巴细胞增殖试验比较.④正常兔和免疫兔外周血淋巴细胞增殖试验比较.结果第21天抗体效价出现第1次高峰,再次注射抗原40 d后出现第2次高峰,维持20 d后逐渐下降,正常兔的淋巴细胞在PHA刺激下发生增殖,但对Ⅱ型胶原的第1次刺激不发生增殖,而免疫兔对PHA和Ⅱ型胶原的刺激均能发生显著的增殖,Ⅱ型胶原浓度为25 mg/L已有发生,在50mg/L出现高峰.结论异种Ⅱ型胶原在一定浓度下,可以引起免疫兔的抗Ⅱ型胶原抗体的升高,并可引起兔脾、外周血淋巴细胞增殖,在体内引起细胞免疫反应,且可引起移植免疫性关节炎.     

关节腔内注射透明质酸钠治疗膝骨关节炎的临床研究

目的：研究关节腔内注射透明质酸钠治疗膝关节骨关节炎的疗效。方法：46例膝关节骨关节炎患者,52个患膝经关节腔内注射透明质酸钠治疗,观察治疗前后的疗效和膝关节功能变化。结果：关节腔内注射透明质酸钠治疗膝关节骨关节炎总有效率为92.31%,患者膝关节功能明显改善。结论：关节腔内注射透明质酸钠是治疗膝关节骨关节炎的一种安全、有效的方法,具有较好临床应用价值。     

透明质酸钠不同给药途径干预早期骨关节炎兔软骨细胞的凋亡

目的:观察前交叉韧带横断造成兔早期骨关节炎软骨细胞凋亡的变化,以及应用关节内和静脉注射透明质酸钠对软骨细胞凋亡的影响。方法:实验于2006-04/09在华中科技大学同济医学院协和医院骨科实验室完成。共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成正常组、骨关节炎组、关节内注射透明质酸钠组、静脉注射透明质酸钠组,每组9只。正常组不做任何处理,作为对照;骨关节炎组仅行前交叉韧带横断术;关节内注射透明质酸钠组行前交叉韧带横断术后给予关节腔内注射透明质酸钠;静脉注射透明质酸钠组行前交叉韧带横断术后给予静脉内注射透明质酸钠。所有实验动物在术后8周处死。应用苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化,原位末端标记法标记凋亡细胞,在前交叉韧带横断术前、术后6,8周分别进行血液检测。观察各组动物的组织学检查、Mankin评分、凋亡指数和血液检测结果。结果:纳入新西兰兔36只,均进入结果分析。①所有动物的血液检查包括红细胞、白细胞、血小板计数以及血尿素氮、肌酐、电解质,结果均在正常范围内。②应用透明质酸钠干预的关节内注射透明质酸钠组和静脉注射透明质酸钠组与未用透明质酸钠干预的骨关节炎组相比较,前者组织病理学改变明显轻于后者。③骨关节炎组的Mankin评分与其他三组差异有显著性[(8.97±1.02),(0.00±0.00),(5.62±0.86),(6.13±0.64)分,P<0.05]。④各组均发现软骨细胞凋亡,并且骨关节炎组的凋亡指数显著高于其他三组[(27.38±3.46)%,(5.17±1.06)%,(12.47±2.13)%,(14.51±2.87)%,P<0.05],正常组的凋亡指数与其他三组差异有显著性意义(P<0.05)。结论:前交叉韧带横断所致兔早期骨关节炎的软骨细胞凋亡明显增加,关节内和静脉内注射透明质酸钠均能有效抑制其软骨细胞凋亡。     

透明质酸钠联合转化生长因子β1关节腔注射对兔膝骨关节软骨的保护效应

目的:观察联合应用转化生长因子β1和透明质酸钠对骨关节炎的治疗作用及其对关节软骨细胞基质金属蛋白酶3表达的影响。方法:实验于2006-03/08在东南大学临床医学院中心实验室完成。32只成年健康新西兰大白兔随机分为4组,模型组、透明质酸钠组、转化生长因子β1组、联合用药组,每组8只。参照Hulth法建立骨关节炎模型。按不同分组分别给予造模侧膝关节腔注射生理盐水、透明质酸钠、转化生长因子β1(50ng)及透明质酸钠和转化生长因子β1(含50ng转化生长因子β1)混合液各0.3mL,1次/周,共注射5周。于第16周麻醉状态处死动物,观察膝关节软骨退行性变情况,按Mankin评分标准评分并对软骨标本进行分级;并通过免疫组织化学检测关节软骨内基质金属蛋白酶3表达的变化。结果:32只白兔全部进入结果分析。①关节软骨组织形态学观察:透明质酸钠组、转化生长因子β1组、联合用药组和模型组各8例标本平均Mankin评分分别为10.38,10.13,6.50,12.38;统计分析表明:转化生长因子β1组、透明质酸钠组和联合用药组可降低软骨组织Mankin评分(P<0.01),其中以联合用药时Mankin评分降低最明显(P<0.05)。②软骨细胞中基质金属蛋白酶3的表达:转化生长因子β1组、联合用药组软骨细胞基质金属蛋白酶3阳性百分数低于模型组[(44.50±4.92)%,(26.38±4.78)%,(62.13±4.52)%,t=7.457,15.375,P<0.05),而透明质酸钠组软骨基质金属蛋白酶3表达阳性细胞数[(61.00±5.10)%]与模型组差异无显著性(P>0.05)。结论:关节腔内单独应用转化生长因子β1或与透明质酸钠联合应用可使基质金属蛋白酶3阳性表达的软骨细胞减少,表明可不同程度的减轻及延缓骨关节炎的形成和发展,以两者合用时效果最佳。     

应用Ⅱ型胶原为载体的异种异体移植修复关节软骨缺损

背景:已有用Ⅱ型胶原作为载体的软骨细胞移植的实验动物模型,Ⅱ型胶原是否引起实验性的关节炎或发生由Ⅱ型胶原介导的细胞毒的反应尚未明确.目的:检测用猪Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔的细胞免疫状态.设计:以实验动物为研究对象,观察对比的探索性研究.单位:一所市级医院创伤外科研究所.材料:实验于1999-08/2000-02在广州红十字会医院创伤外科研究所完成.新西兰大白兔6只,雌雄不限,体质量2.0～3.0kg.方法:用Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔60 d,定期抽取血浆检测抗Ⅱ型胶原抗体;第60天取兔的外周血淋巴细胞,取兔脾细胞、淋巴结分离淋巴细胞,进行体外2次Ⅱ型胶原刺激,检测由此引起的反应性的细胞增殖规律.随机分为两组,第1组加入不同浓度植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)作阳性对照,并测定非特异性免疫;第2组加入不同浓度Ⅱ型胶原,检测特异性免疫.主要观察指标:①兔抗Ⅱ型胶原抗体含量检测.②正常兔与免疫兔脾淋巴细胞增殖试验比较.③正常兔和免疫兔淋巴结淋巴细胞增殖试验比较.④正常兔和免疫兔外周血淋巴细胞增殖试验比较.结果:第21天抗体效价出现第1次高峰,再次注射抗原40 d后出现第2次高峰,维持20 d后逐渐下降,正常兔的淋巴细胞在PHA刺激下发生增殖,但对Ⅱ型胶原的第1次刺激不发生增殖,而免疫兔对PHA和Ⅱ型胶原的刺激均能发生显的增殖,Ⅱ型胶原浓度为25 mg/L已有发生,在50mg/L出现高峰.结论:异种Ⅱ型胶原在一定浓度下,可以引起免疫兔的抗Ⅱ型胶原抗体的升高,并可引起兔脾、外周血淋巴细胞增殖,在体内引起细胞免疫反应,且可引起移植免疫性关节炎.     

复方倍他米松联合透明质酸钠治疗膝骨关节炎45例体会

目的观察关节腔内注射复方倍他米松与透明质酸钠治疗膝骨性关节炎的效能。方法 45例关节腔积液膝骨性关节炎患者随机分为治疗组(30例)和对照组(15例)。治疗组采用复方倍他米松与透明质酸钠治疗膝骨关节炎,对照组单用透明质酸钠。观察两组临床疗效、VAS评分及不良反应发生情况。结果 2组治疗后1周、2周、4周、3个月的VAS评分均较治疗前明显降低,经比较差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,治疗组治疗后VAS评分降低的更加明显,经比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组总有效率达96.8%,明显高于对照组有效率(70%)(P<0.01)。结论对关节腔内有关节液的骨性关节炎联合治疗比单纯用透明质酸钠效果更好。     

氨基葡萄糖联合关节腔内注射透明质酸钠治疗膝骨关节炎的临床研究

分析氨基葡萄糖联合关节腔内注射透明质酸钠治疗膝骨关节炎的临床疗效。选取接治的168例膝骨关节炎患者,随机分为对照组和治疗组各84例。治疗组应用氨基葡萄糖联合关节腔内注射透明质酸钠治疗,对照组应用氨基葡萄糖治疗,比较两组疗效。治疗组总优良率为91.67%,治疗后VAS评分为(1.57±0.24)分,OA严重程度指数为(6.08±0.74)分,Womac骨性关节炎指数为(35.36±3.72)分,均优于对照组,差异均具统计学意义(P0.05)。氨基葡萄糖联合关节腔内注射透明质酸钠治疗膝骨关节炎的临床疗效显著,具有临床推广价值。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子关节腔注射预防骨关节炎软骨退行性变

目的:验证重组人酸性成纤维细胞生长因子关节腔内注射对兔实验性早中期骨关节炎软骨退行性变的防治作用。方法:实验于2005-10/2006-04在暨南大学附属第一医院中心实验室完成。选用健康新西兰大白兔30只,切断膝关节前、后交叉韧带建立兔骨关节炎模型后,按随机数字表法分为3组,空白组、透明质酸钠组和重组人酸性成纤维细胞生长因子组。重组人酸性成纤维细胞生长因子组术后第8周起于手术侧膝关节腔内注射人酸性成纤维细胞生长因子8000IU/(只·周),透明质酸钠组关节腔内注射透明质酸钠1mL/(只·周)。空白组不进行干预。术后第16周空气栓塞法处死动物,大体观察及手术显微镜下观察软骨表面分级;取股骨髁负重面软骨标本进行苏木精-伊红、沙黄染色及骨关节炎组织病理学评分(正常为0～1,重度为10分以上)、分级。结果:30只动物全部进入结果分析。①重组人酸性成纤维细胞生长因子组和透明质酸钠组标本股骨髁负重软骨有轻度粗糙,关节软骨可见浅表溃疡形成。空白组标本股骨髁负重面软骨有轻～中度溃疡形成。②3组动物关节软骨表面分级差异有显著性意义(χ2=22.97,P=0.000)。③3组动物骨关节炎软骨的组织病理学分级差异有显著性意义(χ2=16.84,P=0.005),透明质酸钠组和重组人酸性成纤维细胞生长因子组的骨关节炎组织病理学评分均显著低于空白组(P<0.05)。结论:关节腔注射重组人酸性成纤维细胞生长因子可以较好的延缓兔膝骨关节炎软骨退行性变和预防骨关节炎的发展。     

丹参和透明质酸钠恢复膝关节功能的对比研究

目的 通过对丹参和透明质酸钠注射液关节腔内治疗膝骨关节炎临床疗效的比较，客观评价中药丹参治疗膝骨关节炎的疗效。方法：将68例（85膝）膝骨关节炎患，随机分为两组，分别在膝关节内注射丹参和透明质酸钠注射液，并在用药后5间，丹参组和透明质酸钠组分别有37膝（84．1％）和34膝（82．9％）一直未出现关节疼痛；两组分别有33膝（75．0％）和31膝（75．6％）未出现任何不适，在短期效果和疗效维持方面两组间差异无显性意义（P＞0．05）。结论 两组在早期治疗膝骨关节炎方面同样有良好的疗效，且12月连续随访也有较好的疗效维持。丹参膝关节腔内注射治疗膝骨关节炎，具有安全，有效，方便和廉价的优点，值得临床推广应用。