高效液相色谱测定复配消毒软膏中醋酸氯己定和苯扎氯铵的含量

摘要 目的 建立准确灵敏的高效液相色谱分析方法同时测定复配消毒软膏中醋酸氯己定和苯扎氯铵的含量。方法 以乙醇-乙酸水溶液为溶剂,超声提取样品中的醋酸氯己定和苯扎氯铵。采用Symmetry-C18色谱柱,乙腈-丁烷磺酸钠水溶液流动相,260 nm波长测定复配消毒软膏中醋酸氯己定和苯扎氯铵。结果 80%乙醇-2%乙酸水溶液超声能完全提取软膏样品中的醋酸氯己定和苯扎氯铵,采用丁烷磺酸钠离子对色谱法,复配消毒软膏样品中的醋酸氯己定和苯扎氯铵在C18色谱柱上得到基线分离,醋酸氯己定,C12-苯扎氯铵,C14-苯扎氯铵和C16-苯扎氯铵标准曲线的线性范围分别为5.0~200.0 mg/L,5.0~500.0 mg/L,10.0~1 000.0 mg/L,10.0~1 000.0 mg/L;检出限分别为1.0 mg/L,1.0 mg/L,2.0 mg/L和2.0 mg/L;检测结果的日内精密度小于2%,日间精密度小于3%;复配消毒软膏中醋酸氯己定和苯扎氯铵同时测定的加标回收率为92.1%~98.3%。结论 建立的离子对液相色谱法能够准确灵敏测定复配消毒软膏中醋酸氯己定和苯扎氯铵的含量,该方法线性范围宽,选择性强,具有良好的准确度和精密度。     

醋酸氯己定体外抗菌作用的实验观察

目的观察醋酸氯己定体外抗菌作用。方法采用肉汤稀释法,测定了醋酸氯己定对4种条件致病菌和一种厌氧菌的抗菌效果。结果醋酸氯己定对脆弱拟杆菌MIC为4μg/ml,MBC为8μg/ml;对产气荚膜梭菌的MIC为1μg/ml,MBC为2μg/ml。醋酸氯己定对金黄色葡萄球菌MIC为0.0625μg/ml,MBC为0.125μg/ml;对大肠埃希菌MIC为2μg/ml,MBC为4μg/ml;对铜绿假单胞菌MIC为4μg/ml,MBC为4μg/ml;奇异变形杆菌MIC为8μg/ml,MBC为8μg/ml。结论醋酸氯己定对常见条件致病菌和厌氧菌都有良好的体外抗菌作用。     

MRSA对6种消毒剂耐药性及相关抗性基因的比较研究

目的观察医院分离的2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和金黄色葡萄球菌标准株(ATCC 6538)对6种消毒剂的抗性与耐药基因变化。方法选择最小抑菌浓度(MIC)试验、悬液定量杀菌试验和耐消毒剂基因PCR检测。结果 MIC检测,医院分离的2株MRSA,对6种消毒剂的MIC,明显高于标准菌株。只有醋酸氯己定对MRSA-1的MIC值与标准菌株相同。PCR检测,2株MRSA均未携带耐消毒剂基因qacA/B。定量杀菌实验,苯扎氯铵、过氧乙酸、双癸基二甲基氯化铵对MRSA-1菌株的杀灭对数值低于标准菌株;苯扎氯铵、过氧乙酸、有效氯对MRSA-2菌株的杀灭对数值低于标准株。结论医院分离的2株MRSA对消毒剂的抗性普遍高于标准菌株,PCR检测未发现qacA/B基因。     

多重耐药鲍曼不动杆菌对氯己定醇手消毒剂的抗性研究

摘要 目的 研究多重耐药鲍曼不动杆菌对氯己定醇手消毒剂的抗性变化,为科学实施医院消毒提供依据。方法 采用最小抑菌浓度测试方法,检测2种氯己定醇消毒剂对临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌最小抑菌浓度(MIC),分析其抗性变化。结果 A、B 2种消毒剂含醋酸氯己定分别为1 750.00 mg/L和5 000.00 mg/L,含乙醇均为体积分数67.3%。以醋酸氯己定标示MIC值,消毒剂A对临床分离鲍曼不动杆菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌标准株的MIC值依次为43.75 mg/L、17.50 mg/L和29.20 mg/L;消毒剂B对上述3种细菌的MIC值依次为125.00 mg/L、50.00 mg/L和83.30 mg/L。结论 临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌对氯己定醇手消毒剂的耐受浓度明显高于大肠杆菌和铜绿假单胞菌标准菌株,提示其抗力有增强趋势。     

临床分离肺炎克雷伯杆菌对消毒剂耐药性观察

摘要 目的 观察临床分离的肺炎克雷伯杆菌对常用消毒剂的耐药情况及抗消毒剂基因携带状况。方法采用琼脂扩散法和聚合酶链反应法,对96株临床肺炎克雷伯杆菌抗消毒剂和抗性基因携带情况进行检测。结果3种季铵盐和三氯生对96株肺炎克雷伯杆菌的MIC值均高于标准菌株,氯己定对96株肺炎克雷伯菌中的93株MIC值高于标准株。临床分离的肺炎克雷伯菌qacEΔ1和qacE携带率均为76.0%;qacE-qacEΔ1携带率为70.8%。qacE、qacEΔ1和sugE(c)阳性菌株对三氯生、溴化铵、苯扎氯铵和醋酸氯己定等消毒剂抗性较阴性菌株强。结论该医院临床分离的肺炎克雷伯杆菌对3类低效消毒剂显示出抗力增强的趋势,消毒剂抗性基因携带率也比较高,提示慎用低效消毒剂消毒关键性物品。     

肺炎克雷伯杆菌临床分离株对5种常用消毒剂的抗性研究

摘要 目的 观察临床分离肺炎克雷伯杆菌对常用消毒剂的抗性及消毒剂抗性基因携带情况,分析消毒剂与抗菌药物间的交叉耐药性、消毒剂抗性基因和抗菌药物耐药的相关性。方法 采用微量肉汤稀释法和PCR技术,测定5种消毒剂对44株肺炎克雷伯杆菌的MIC值,并对qacE△1基因携带情况进行筛查。结果 44株肺炎克雷伯杆菌对醋酸氯己定和三氯生的MIC值均高于质控菌大肠杆菌(ATCC 25922),对抗菌药物交叉耐药率分别为55.6%和77.8%,对季铵盐类消毒剂抗性升高不明显。共筛查出22株携带qacE△1基因,不同医院检出率存在差异。qacE△1在抗菌药物耐药菌株中的检出率要高于敏感菌株,且抗菌药物耐药株与敏感株的qacE△1基因检出率存在地区差异。结论 肺炎克雷伯杆菌临床株对醋酸氯己定和三氯生具有更高的抗性,qacE△1基因的检出率存在地区差异性。长期不合理暴露于此两种消毒剂的菌株在持续的选择压力下可能增强消毒剂抗性和抗菌药物交叉耐药性。     

醋酸氯己定与替硝唑联合药敏试验观察

目的研究醋酸氯己定与替硝唑协同抗菌效果。方法采用棋盘方阵稀释法,对醋酸氯己定与替硝唑联合应用体外抗菌作用进行了观察。结果测定替硝唑和醋酸氯己定对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、产气荚膜梭菌和脆弱拟杆菌的MIC值,替硝唑分别为200、200、1、1μg/ml,醋酸氯己定分别为0.06、4、1、4μg/ml。替硝唑与醋酸氯己定联合应用对上述4种试验菌的MIC值与各自的单方相比较无变化,两药相加无相关作用,但相互也不干扰对方的抗菌作用。结论应用于创伤涂膜剂中的醋酸氯己定和替硝唑两种主要抗菌成分既无协同作用或相加作用,但也不互相干扰。     

铜绿假单胞菌抗药基因检测及其对消毒剂抗性研究

目的研究临床分离的铜绿假单胞菌携带的抗药基因情况及其与消毒剂的抗性关系和水平。方法采用PCR方法和肉汤稀释法分别检测临床分离铜绿假单胞菌qacE△1-SulI基因和对消毒剂抗性变化,并与铜绿假单胞菌标准菌株进行了平行比较。结果临床分离的6株铜绿假单胞菌中,有5株检出qacE△1-SulI基因阳性,抗药基因携带率达到83%以上。醋酸氯己定对6株临床分离铜绿假单胞菌的MIC值为7.8mg/L,与标准菌株相同;对氯间二甲苯酚对其中1株临床分离株的MIC高于标准菌株,但有2株低于标准株;苯扎溴铵对6株临床分离的铜绿假单胞MIC均低于标准株;聚维酮碘对5株qacE△1-SulI基因阳性菌株的MIC值与标准菌株相同,但抗药基因阴性菌株的MIC值低于标准株。结论临床分离的铜绿假单胞菌多数携带qacE△1-SulI基因,该抗药基因的携带与其对消毒剂的抗性有一定的相关性。     

单增李斯特菌动物源性食品分离株对苯扎氯铵的抗性及分子特征分析

目的了解不同血清型、ST型单增李斯特菌动物源性食品分离株对苯扎氯铵抗性及携带耐消毒剂基因情况。方法采用多重PCR结合血清凝集法对单增李斯特菌动物源性食品分离株进行血清分型,用多位点序列分型(MLST)技术进行分子分型,用平板法检测苯扎氯铵对单增李斯特菌的最小抑菌浓度(MIC),使用PCR检测其耐消毒剂相关基因qacH、bcrABC、MdrL、emrE。结果58株单增李斯特菌动物源性食品分离株包含4种血清分型,以1/2a血清型为主;可分为2个谱系,10个克隆群(CC),ST9、ST8、ST87为主要序列型;8株菌株的苯扎氯铵MIC为15μg/mL,其中6株为1/2a血清型,5株序列型为ST8。48株菌株的苯扎氯铵MIC为10μg/mL。75.86%菌株携带MdrL基因,1.72%菌株携带qacH基因。未检出耐消毒剂基因bcrABC、emrE。结论单增李斯特菌动物源性食品分离株对苯扎氯铵的敏感性下降,其中血清型1/2a、序列型ST8的单增李斯特菌对苯扎氯铵的MIC值更高。     

消毒剂诱导的铜绿假单胞菌对抗生素敏感性的变化及相关机制的探讨

目的探讨铜绿假单胞菌在体外经消毒剂诱导后,对抗生素最低抑菌浓度的变化,并对变化机制进行初步研究。方法收集临床上铜绿假单胞菌菌株68株,采用VITEK．2全自动细菌分析仪鉴定并进行药敏分析;琼脂二倍稀释法分别测定碘伏、戊二醛、氯己定对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度（MIC）;在低于MIC浓度下逐步诱导8次,微量稀释法测定诱导前后铜绿假单胞菌对12种抗生素的MIC,同时再将诱导后对抗生素MIC升高的菌株,接种在含有外排泵抑制剂PAβN的琼脂平板,测定其外排泵表型。结果68株铜绿假单胞菌经3种消毒剂诱导后共有6株铜绿假单胞菌对一种或多种抗生素的敏感性较诱导前有明显变化,对氟喹诺酮类、头孢类及碳氢酶烯类等多种抗生素MIC升高,碘伏及戊二醛诱导效果明显,两种消毒剂诱导后的5种菌株外排泵表型测定为阳性。结论消毒剂可以诱导某些铜绿假单胞菌对抗生素的敏感性发生变化,其中主动外排系统在诱导过程中起主要作用,应合理使用消毒剂,以降低耐药菌扩散及医院感染的发生。     

常用消毒剂对新发现腺病毒55型灭活效果研究

摘要 目的 <\b>观察常用消毒剂对我国新发现的腺病毒55型的灭活效果。方法 <\b>依照2002年版《消毒技术规范》进行病毒灭活试验。结果 <\b>用含有效氯400 mg/L的次氯酸钠消毒剂作用20 min,600 mg/L的过氧乙酸消毒剂作用20 min,含有效碘1 000 mg/L的碘伏溶液作用40 min,对腺病毒55型的灭活对数值均可达到4.00以上; 而2 000 mg/L醋酸氯己定和2 000 mg/L苯扎氯铵,作用15 min,灭活对数值分别为2.02与1.65。用含有效氯600 mg/L的次氯酸钠作用20 min,800 mg/L过氧乙酸作用20 min,有效碘浓度为1 500 mg/L碘伏作用60 min条件下,可以完全灭活测试浓度的腺病毒。结论 <\b>次氯酸钠、过氧乙酸和碘伏等高中效消毒剂可有效灭活腺病毒55型,而醋酸氯己定和苯扎氯铵等低效消毒剂不能完全灭话该病毒。     

鲍曼不动杆菌抗药基因检测及对消毒剂抗性研究

目的研究临床分离的鲍曼不动杆菌携带抗药基因qacE△1-sulI情况及对消毒剂抗性水平。方法采用PCR法和肉汤稀释法分别检测临床分离鲍曼不动杆菌qacE△1-sulI基因和对消毒剂抗性变化,并与大肠杆菌标准菌株进行比较。结果临床分离的7株鲍曼不动杆菌中,4株qacE△1-sulI基因阳性,3株阴性。醋酸氯己定对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为2mg/L~4mg/L,MBC值为4mg/L~125mg/L,均高于大肠杆菌标准株。对氯间二甲基苯酚对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为78mg/L~156mg/L;苯扎溴铵对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为9.8mg/L~19.5mg/L;聚维酮碘与聚醇醚碘对7株鲍曼不动杆菌的MIC值与标准菌株相同,分别为1000mg/L和500mg/L,均未超过标准菌株。结论鲍曼不动杆菌携带qacE△1-sulI基因携带率较高,抗药基因阳性的菌株对多数消毒剂耐受浓度增加。     

5种国产与进口E-test药敏条的一致性比较

目的 比较5种药物国产E-test药敏条(简称国产条)(青霉素、万古霉素、氯霉素、两性霉素B和氟康唑)与进口E-test药敏条(简称进口条)的一致性。方法 收集2014至2015年北京协和医院临床分离菌共294株,用E-test法测定其最低抑菌浓度(MIC)值,国产条与法国生物梅里埃公司进口条平行检测的MIC值超过|±1|个倍比稀释倍数(细菌)/|±2|个倍比稀释倍数(真菌)或体外敏感性判定结果不一致时,采用微量肉汤稀释法进行验证。结果 56株菌进行青霉素E-test药敏条检测,其中52株MIC值在|±1|个倍比稀释倍数范围内,4株菌MIC值超出此范围,经微量肉汤稀释法验证,有2株菌MIC值与进口条更接近;其中3株菌体外敏感性判读存在差异,且均为国产条较进口条敏感,经微量肉汤稀释法验证,有2株菌药敏结果与国产条一致。62株菌进行万古霉素E-test药敏条试验,其中完全一致16株(16/62,25.8%),|±0.5|个倍比稀释倍数43株(43/62,69.4%),|±1|个倍比稀释倍数2株(2/62,3.2%),仅1株菌MIC值超出|±1|个倍比稀释倍数(14W00916,粪肠球菌),经微量肉汤稀释法验证后,该菌MIC值介于进口条和国产条之间;62株菌体外敏感性判读与进口条100%一致。其余3种抗菌药物(氯霉素、两性霉素B、氟康唑)的基本一致(essential agreement,EA)率和分类一致(categorical agreement,CA)率均为100%。结论 5种国产条(青霉素、氯霉素、万古霉素、两性霉素B、氟康唑)所测定MIC值和体外敏感性判定结果准确可靠,与进口条一致性较好,可满足临床和实验室需求。     

消毒后消化内镜中分离的铜绿假单胞菌对消毒剂的抗性分析北大核心

目的研究消毒后消化内镜中分离出的铜绿假单胞菌对常用消毒剂的抗性。方法采用肉汤稀释法,测定了3种消毒剂对从消毒后消化内镜中分离的铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果经测定,常用戊二醛和万金医用器械消毒液对铜绿假单胞菌分离株和标准株之间的MIC、MBC值相差2倍。结论消毒后消化内镜中分离的铜绿假单胞菌对常用戊二醛和万金医用器械消毒液产生了一定的抗药性。     

消毒后消化内镜中分离的铜绿假单胞菌对消毒剂的抗性分析

目的研究消毒后消化内镜中分离出的铜绿假单胞菌对常用消毒剂的抗性。方法采用肉汤稀释法,测定了3种消毒剂对从消毒后消化内镜中分离的铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果经测定,常用戊二醛和万金医用器械消毒液对铜绿假单胞菌分离株和标准株之间的MIC、MBC值相差2倍。结论消毒后消化内镜中分离的铜绿假单胞菌对常用戊二醛和万金医用器械消毒液产生了一定的抗药性。     

两种临床分离细菌对醋酸氯己定抗力测定

目的研究医院临床分离致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对醋酸氯己定的抗性力水平。方法采用肉汤稀释法测定两种16株临床分离细菌对醋酸氯己定抗力水平,并同相应标准菌株作平行比较。结果大肠杆菌临床株对醋酸氯己定的MIC为1~2 mg/L,标准菌株对醋酸氯己定的MIC为2 mg/L;有3株大肠杆菌的MIC低于标准菌株。金黄色葡萄球菌临床株对醋酸氯己定的MIC为0.98~1.95 mg/L,标准株对醋酸氯己定的MIC为0.98mg/L;有2株临床株的MIC高于标准菌株。大肠杆菌临床株对醋酸氯己定的MBC为4~8 mg/L,标准菌株对醋酸氯己定的MBC为2 mg/L;大肠杆菌临床株的MBC均高于标准菌株。金黄色葡萄球菌临床株对醋酸氯己定的MBC为15.6~125 mg/L,标准菌株的MBC为62.5 mg/L;有3株金黄色葡萄球菌临床株MBC高于标准株。结论临床分离的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对醋酸氯己定抗力多数比标准株强,只有个别菌株低于标准株。     

一种泡沫型苯扎氯铵手消毒剂杀菌效果及毒性观察

摘要 目的 观察一种泡沫型苯扎氯铵手消毒剂的杀菌效果及评价其毒性。方法 采用悬液定量杀菌试验、现场试验和动物试验方法,对该消毒剂的杀菌效果和毒性进行研究。结果 该手消毒剂原液含苯扎氯铵1.35 g/L,pH值3.31;以该手消毒剂作用0.5 min,对悬液内大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭对数值均＞5.00,对白色念珠菌杀灭对数值＞4.00;对手上自然菌作用1.0 min的杀灭对数值平均值为1.65;该手消毒剂密封储存于37 ℃恒温恒湿箱内90 d后,苯扎氯铵含量下降率为2.96%;其原液急性经口毒性LD50＞5 000 mg/（kg·bw）,对家兔皮肤无刺激性,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性。结论 该泡沫型苯扎氯铵手消毒剂具有良好的杀菌效果与稳定性,属于实际无毒级、无致突变作用、无刺激性的消毒剂。     

甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌对万古霉素药物敏感性试验的方法学比较

目的比较不同药敏试验方法测定万古霉素对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)抗菌活性的影响。方法收集2013年临床分离的61株MRSA,采用微量肉汤稀释法、琼脂稀释法和E试验法对MRSA进行万古霉素药敏试验的测定。根据CLSI 2014年版标准进行结果判断。采用SPSS软件对3种药敏试验所得万古霉素最低抑菌浓度(MIC)值进行分析。结果MRSA对万古霉素的敏感率均为100%,未见万古霉素不敏感株。微量肉汤稀释法和琼脂稀释法测定万古霉素对MRSA的MIC50和MIC90值均为1 mg/L,采用E试验法测定的MIC50和MIC90值均为1.5 mg/L。3种药敏试验得到的MIC几何平均值分别为1.01(微量肉汤稀释法)、0.96(琼脂稀释法)和1.30(E试验法)。结论 3种药敏方法检测MRSA对万古霉素的敏感性结果虽一致,但由于万古霉素MIC值的细小差异在临床疗效上有着显著差异,故实验室为临床提供万古霉素药敏试验结果时,需要明确指出采用的具体药敏试验测定方法。     

反相高效液相色谱法应用于消毒剂中多种成分含量测定的研究

摘要 目的 研究反相高效液相色谱法能同时对不同消毒剂中的多种成分进行测定。方法 采用C18柱作为分离柱的反相高液相色谱法,通过梯度洗脱,对复方化学消毒剂中苄索氯铵、对氯间二甲苯酚、三氯生、氯己定、度米芬和5中长链及短链苯扎氯铵和氯化十六烷基吡啶等10种成分进行测定。结果 在本研究建立的条件下,10种消毒剂有效成分的峰面积与质量浓度的线性关系良好(r值＞0.999 5),低浓度加标回收率82.8%~113.9%,相对标准偏差（RSD）为1.1%~8.9%;高浓度加标回收率92.3%~107.5%,RSD为1.5%~5.4%。方法检出限为0.6 mg/L~10 mg/L,定量限为2 mg/L~30 mg/L。结论 本研究建立的反相高效液相色谱法操作方法简单,结果准确可靠。     

医院环境中分离致病菌对三种消毒剂的抗性研究

摘要 目的 研究医院环境表面分离的致病菌对常用消毒剂抗性变化情况,为科学使用化学消毒剂提供参考。方法采用稀释法和基因扩增技术,对医院环境中分离的致病菌抗消毒剂情况和抗性基因携带率进行检测与分析。结果苯扎溴铵对铜绿假单胞菌中的3株MIC和MBC值低于标准菌株;对3株肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌的MIC和MBC值高于标准菌株。葡萄糖酸氯己定对铜绿假单胞菌的MIC值和MIC值有2株高于标准株,有9株低于标准株;对肺炎克雷伯和鲍曼不动杆菌的MIC值和MBC值均与标准菌株相同。二氧化氯对铜绿假单胞菌中的MIC和MBC值有6株高于标准株,有2株低于标准株;对肺炎克雷伯菌的MIC和MBC值均低于标准菌株,对鲍曼不动杆菌的MIC、MBC值均高于标准菌株。医院分离的铜绿假单胞菌检出qacE△1-sul 1基因携带率为79.17%,其他两种致病菌均未检出携带抗性基因。结论医院物体表面分离的致病菌中仅少部分菌株对3种消毒剂产生了抗性,多数则比较敏感,对医院环境病原菌抗消毒剂情况予以关注非常必要。