急性冠状动脉综合征患者IL-10、IL-18、TNF-α水平检测及临床意义

急性冠状动脉综合征（ACS）是包括不稳定型心绞痛、急性心肌梗死和猝死等在内的一类疾病的总称，发生率近年来日趋增高。ACS的发生、发展是致炎因子与抗炎因子共同参与的病理生理过程。白细胞介素（IL）-10、白细胞介素（IL）-18和肿瘤坏死因子（TNF-α），前者是抗炎因子，后二者对加速粥样硬化（AS）起促进作用。     

炎症和急性冠状动脉综合征

急性冠状动脉 (冠脉 )综合征 ( ACS)包括不稳定型心绞痛 ( U A)、急性心肌梗死 ( AMI)和心源性猝死 ,其危害甚大。冠脉斑块破裂及随之发生的血小板聚集和血栓形成是动脉粥样硬化导致 ACS的最重要机制。有人提出炎症与 ACS密切相关 ,冠状动脉粥样硬化性心脏病 (冠心病 ) ,尤其是 ACS为一种炎症过程 ,故认为炎性因子 C反应蛋白 ( CRP)、白细胞介素 6 ( IL 6 )等为 ACS的危险因子 〔1〕。现就其作用综述如下。1　 ACS冠脉内局部炎症存在证据van der Wal等 〔2〕研究死于 AMI患者的斑块 ,其中含有泡沫细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和…     

白细胞介素-10对急性肺损伤炎症/抗炎介质表达的影响

目的探讨白细胞介素-10(IL—10)对急性肺损伤(ALI)大鼠炎症介质／抗炎介质表达的影响。方法向气道内滴注内毒素(LPS，10mg／kg)建立大鼠ALI模型。54只雄性SD大鼠随机分为对照组、LPS损伤组、LPS加IL-10组，每组18只，各组又分为2、6和24h3个亚组，每个亚组各6只。按各时间点观察大鼠动脉血氧分压(PaO2)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类计数、肺系数、BALF总蛋白水平及肺病理，同时用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测肺组织中炎症介质／抗炎介质的表达。结果①LPS损伤组大鼠PaO2呈进行性降低；肺系数、BALF总蛋白水平及BALF中细胞总数均明显增加，分类以中性粒细胞为主；肺病理示肺内中性粒细胞大量浸润，伴出血、透明膜形成。LPS加IL-10组的各项指标均较LPS损伤组减轻。②LPS损伤组肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF—α)mRNA表达于2h达高峰，随后迅速下降；白细胞介素-1β(IL—1β)mRNA表达于2h显著升高，6h达高峰，随后迅速下降；IL-1受体拮抗剂(IL—1ra)mRNA表达6h开始升高，且为峰值。24h仍高于对照组。LPS加IL-10组肺组织TNF—αmRNA、IL-1βmRNA表达受抑，而IL—1ra mRNA表达不受影响。结论①ALI早期TNF—αmRNA、IL-1βmRNA表达明显增加，而IL—1ra mRNA表达滞后，提示在无外来干预情况下，ALI早期存在炎症介质／抗炎介质的失衡。②IL-10可明显抑制炎症介质表达，不影响抗炎介质表达，有利于重建炎症介质／抗炎介质平衡，减轻LPS所致ALI。     

地塞米松对SD大鼠肺炎克雷伯杆菌性重症肺炎模型血清白细胞介素-8、10的影响

目的:评价小剂量地塞米松(DXM)对SD大鼠肺炎克雷伯杆菌性重症肺炎白细胞介素(IL)-8、IL-10的影响。方法:54只清洁级SD大鼠随机分为3组(模型组、DXM组、对照组),36只采用气管穿刺注入感染法制作肺炎克雷伯杆菌性重症肺炎模型,按成人常用临床治疗剂量折算出大鼠的等效剂量,连续6d腹腔注射DXM,取材测定血清IL-8、IL-10。结果:模型组、DXM组感染症状明显重于对照组。接种后第6、8、10天,模型组大鼠血清IL-8水平均明显高于对照组(P<0.01),并且随时间延长而升高;DXM可降低血清IL-8水平,第8、10天DXM组与模型组差异有统计学意义(P<0.01)。接种后第6、8、10天,模型组大鼠血清IL-10水平均明显高于对照组(P<0.01),并且随时间延长而降低;DXM可使血清IL-10水平升高,第8、10天DXM组与模型组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:重症肺炎大鼠表达血清IL-8、IL-10水平明显升高,且IL-10水平先增加后下降,提示重症肺炎时存在炎症介质/抗炎介质失衡。DXM可显著抑制炎症介质表达,增加抗炎介质表达,DXM可能通过维持炎症介质/抗炎介质平衡而发挥对肺损伤的保护作用。     

慢性阻塞性肺病患者IL-21表达及其与其他细胞因子的相关性

目的探讨白细胞介素-21(IL-21)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)炎性反应中的作用。方法采用辅助性T细胞1/2/17(Th1/Th2/Th17)定量抗体芯片检测稳定期COPD组、健康吸烟组、健康无吸烟组研究对象的血清IL-21、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β1(TGF-β1)等细胞因子的表达水平,并同时检测各组的肺通气功能。结果稳定期COPD组患者IL-21的表达水平与IL-6、IL-10、TGF-β1呈显著正相关(r值分别为0.902、0.589、0.683,均P0.01);与IL-17也呈正相关(r=0.313,P0.05)。结论 IL-21在COPD的发病过程中起重要促炎作用,可作为一种有效治疗手段。     

乌司他丁调控重症脓毒症大鼠IL-10、TNF-α、IL-1 β水平的研究

目的:探讨乌司他丁(UTI)对细菌性重症脓毒症大鼠血清白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平的调控作用.方法:将SD大鼠经腹腔内注射创伤弧菌建立脓毒症模型,并随机分为3组:生理盐水对照组、氧氟沙星抗感染组、乌司他丁+氧氟沙星抗炎抗感染组,每组15只.15 h后取单侧颈总动、静脉血标本测定血清IL-10、TNF-α、IL-1β的水平.结果:合用乌司他丁的抗炎抗感染组较单纯氧氟沙星抗感染组及生理盐水对照组IL-10水平显著增高(P<0.01),而TNF-α、IL-1β水平则显著降低(P<0.01);IL-10与TNF-α、IL-1β水平呈线性负相关.结论:乌司他丁能上调脓毒症大鼠抗炎因子IL-10水平,并可下调炎症因子TNF-α、IL-1β,阻断炎症反应,改善预后.     

C-反应蛋白和急性冠脉综合征

急性冠状动脉综合征 (ACS)危害甚大。冠脉斑块破裂及随之发生的血小板聚集和血栓形成是动脉粥样硬化导致ACS的最重要的机制。如何早期预测斑块破裂是多年来悬而未解的问题 ,病理和临床大量研究显示 ,炎症与ACS密切相关 ,故有人提出冠心病 (尤其ACS)是一种炎症过程。认为炎性因子C -反应蛋白 (CRP) [1] 、白细胞介素 - 6 (IL - 6 )等为ACS的危险因子。1　CRP增高的临床意义CRP在正常情况下以微量形式 (正常值在 10mg/L以下 ,平均值约为 3 5mg/L)存在于健康人血清中 ,当机体有急性炎症、创伤和冠心病时此蛋白会明显升高。CRP浓度…     

IL-35在类风湿关节炎中抗炎促炎作用及与疾病指标的关系

<正>白细胞介素(IL)-35是最近新发现的细胞因子,属于IL-12细胞因子家族,近年来最新研究发现,IL-35的表达与类风湿关节炎(RA)的发生、发展具有密切联系。本综述重点阐述IL-35的组成,在RA中的抗炎、促炎作用及与疾病指标的关系。     

缺氧诱导因子-1α在重症急性胰腺炎患者中的表达及临床意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)早期诊断和病情严重程度判断中的意义.方法 选取20例SAP患者(SAP组)和20例健康志愿者(对照组),分离外周血白细胞并抽提总RNA,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HIF-1α mRNA的表达情况;同时应用ELISA方法测定血浆中HIF-1α和致炎因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β及抗炎因子IL-10、IL-4、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的变化,并将HIF-1α与致炎因子和抗炎因子的变化情况进行相关性分析.结果 SAP组外周血白细胞HIF-1α mRNA表达的阳性率明显高于对照组(P<0.05).SAP组血浆中HIF-1α水平较正常对照组显著升高(P<0.01),其水平与致炎因子的变化呈正相关,而与抗炎因子的变化呈负相关. 结论 HIF-1α在SAP患者血液中的表达增强,其水平与炎症反应严重程度呈正相关,提示HIF-1α可作为SAP诊断和病情严重程度的判断指标.     

IL-23单独或联合IL-2诱导人外周血单个核细胞对K562细胞杀伤效应的实验研究

本研究旨在探讨IL-23单独或联合IL-2诱导的人外周血单个核细胞（PBMNC）对白血病细胞的杀伤效应及作用机制.IL-23（50 ng/ml）单独或联合IL-2（100 U/ml）体外诱导正常人PBMNC 72 h,并与白血病细胞株K562共同培养.采用CCK-8法测定不同时间诱导后的PBMNC对K562细胞的杀伤效应;采用ELISA方法检测杀伤活性最大时细胞培养液中IFN-γ的水平;应用RQ-PCR法检测诱导后PBMNC的穿孔素、颗粒酶B的表达水平.结果表明,IL-23单独或联合IL-2作用后的PBMNC均对K562细胞有杀伤活性,随着时间延长,杀伤率明显增加,各个时间点比较,有显著性差异（P＜0.05）;各细胞因子组培养液中分泌IFN-γ水平均显著高于空白对照组（P＜0.05）,其中以IL-23联合IL-2组诱导PBMNC表达IFN-γ的水平最高,与其它两组比较,差异显著（P＜0.05）.各细胞因子组PBMNC的穿孔素、颗粒酶B mRNA的表达量均较对照组明显增加（P＜0.05）,且IL-23联合IL-2组的穿孔素、颗粒酶B mRNA表达量显著高于其他组（P＜0.05）.结论：IL-23能促进PBMNC对K562细胞的杀伤活性,与IL-2联合具有协同增强作用,并呈时间依赖性.IL-23作用于PBMNC后IFN-γ、穿孔素、颗粒酶B的表达均明显增加,且与IL-2具有协同作用.推测IL-23可能通过诱导PBMNC表达IFN-γ、穿孔素、颗粒酶B发挥抗白血病细胞作用.     

异种蛋白联合重组人粒／巨噬细胞集落刺激因子和卡介苗免疫调节效应的体外研究

本研究探讨异种蛋白neu-Fc协同重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及卡介苗(BCG)对Th1型和Th2型免疫应答的调节作用。通过基因工程技术将大鼠neu L2-S2功能域与人IgG Fc区编码序列融合,构建真核表达载体。在CHO细胞中获得稳定表达,应用rProtein A Sepharose Fast Flow亲和层析纯化neu-Fc融合蛋白,应用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白。Ficoll法分离人外周血单个核细胞(PBMNC),MTT法检测融合蛋白对PBMNC的促增殖作用。通过ELISA法检测IL-12和IL-10水平的变化。结果表明:PBMNC经MCF-7细胞上清诱导后,IL-12水平降低(p<0.05),IL-10水平显著升高(p<0.01)。10nmol/L neu-Fc对PBMNC具有显著的促增殖作用。与GM-CSF、BCG或者neu-Fc单独作用相比,neu-Fc与GM-CSF、BCG联合作用可显著上调IL-12表达,下调IL-10表达(p<0.01)。结论:neu-Fc具有很好的促增殖作用,GM-CSF和BCG协同neu-Fc能有效诱导Th1型细胞应答。     

内皮细胞及组织因子在GVHD中作用机制的初步研究

本研究检测人内皮细胞组织因子(TF)和IL-2的表达水平,以探讨使用免疫抑制剂后内皮细胞TF及IL-2表达水平的变化及内皮细胞损伤和TF异常表达在GVHD中的意义。体外混合人内皮细胞与异体人淋巴细胞及加入不同浓度的CsA共培养4-6小时后,用流式细胞术和RT-PCR检测内皮细胞中TF的表达水平,应用ELISA法检测上清中IL-2的水平。结果表明:体外混合人内皮细胞与异体人淋巴细胞共培养后,与未混合培养的相比内皮细胞表达TF增加(p0.01),并且在培养液中IL-2水平也相应增高(p0.01),在加入不同浓度的CsA之后,TFmRNA表达下降,相应的培养液中IL-2浓度也下降(p0.01)。结论:内皮细胞损伤与TF异常表达在骨髓移植后的GVHD中起关键的作用,其中受体的内皮细胞受到供体淋巴细胞刺激后高表达TF可能是GVHD发生、发展过程中的关键步骤。     

miR-155对脓毒症急性肺损伤肺泡巨噬细胞IL-6、IL-10及MIP-2的影响

目的探讨微小核糖核酸155（miR-155）对脓毒症急性肺损伤（ALI）肺泡巨噬细胞白介素（IL）-6、IL-10及巨噬细胞炎性蛋白2（MIP-2）的影响。 方法健康清洁C57BL/6雄性小鼠（6~8周,18~20 g）15只,随机分为对照组、脓毒症组和miR-155 antagomir 3组,每组5只,其中miR-155 antagomir组小鼠中将miR-155 antagomir试剂经尾静脉注射,对照组和脓毒症组小鼠注射等量0.9%NaCl,观察24 h后,脓毒症组和miR-155 antagomir组采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制备脓毒症ALI动物模型,对照组仅翻动盲肠进行对照,观察3组小鼠生命体征变化,模型制备6 h后,3组小鼠均取左肺下叶行苏木精-伊红（HE）方法进行染色,在光镜下观察肺病理形态变化,取右肺下叶检测干湿重比,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆IL-6、IL-10、MIP-2浓度。 结果HE染色结果表明：脓毒症组和miR-155 antagomir组小鼠肺内均出现肺泡结构破坏、炎症细胞浸润、间质增厚、出血,miR-155 antagomir组肺组织炎性表现较脓毒症组显著减轻。3组干湿重比结果显示：脓毒症组干湿重比［（0.16±0.01）%］明显低于对照组［（0.22±0.01）%］和miR-155 antagomir组［（0.19±0.01）%］,miR-155 antagomir组低于对照组,差异具有统计学意义（均P<0.05）。ELISA结果显示：脓毒症组的血浆IL-6浓度［（171.35±10.41）pg/ml］、MIP-2浓度［（299.71±19.82）pg/ml］显著高于对照组［（125.74±4.41）pg/ml;（214.00±14.93）pg/ml］和miR-155 antagomir组［（144.41±6.29）pg/ml;（270.38±11.96）pg/ml］,IL-10浓度［（283.58±19.90 ）pg/ml］显著低于对照组［（370.27±15.41）pg/ml］和miR-155 antagomir组［（333.30±16.49）pg/ml］,miR-155 antagomir组的血浆IL-6、MIP-2浓度高于对照组,IL-10浓度明显低于对照组,差异具有统计学意义（均P<0.05）。 结论脓毒症ALI时miR-155过度表达,过度表达的miR-155能促进肺泡巨噬细胞释放大量促炎因子而抑制抗炎因子的表达,引起促炎因子及抗炎因子失衡,发生不可控炎症反应,而miR-155 antagomir能够拮抗miR-155的表达,抑制肺泡巨噬细胞释放促炎因子IL-6及趋化因子MIP-2,上调抗炎因子IL-10的表达,进一步抑制中性粒细胞及肺泡巨噬细胞聚集,防止产生更多的炎症介质,有效控制肺部炎症反应的发生,对肺起到一定的保护作用。     

Superantigens from Staphylococcus aureus induce procoagulant activity and monocyte tissue factor expression in whole blood and mononuclear cells via IL-1β

Summary.  Background :  Staphylococcus aureus is one of the most common bacteria in human sepsis, a condition in which the activation of blood coagulation plays a critical pathophysiological role. During severe sepsis and septic shock microthrombi and multiorgan dysfunction are observed as a result of bacterial interference with the host defense and coagulation systems. Objectives : In the present study, staphylococcal superantigens were tested for their ability to induce procoagulant activity and tissue factor (TF) expression in human whole blood and in peripheral blood mononuclear cells. Methods and results : Determination of clotting time showed that enterotoxin A, B and toxic shock syndrome toxin 1 from S. aureus induce procoagulant activity in whole blood and in mononuclear cells. The procoagulant activity was dependent on the expression of TF in monocytes since antibodies to TF inhibited the effect of the toxins and TF was detected on the surface of monocytes by flow cytometry. In the supernatants from staphylococcal toxin-stimulated mononuclear cells, interleukin (IL)-1β was detected by ELISA. Furthermore, the increased procoagulant activity and TF expression in monocytes induced by the staphylococcal toxins were inhibited in the presence of IL-1 receptor antagonist, a natural inhibitor of IL-1β. Conclusions : The present study shows that superantigens from S. aureus activate the extrinsic coagulation pathway by inducing expression of TF in monocytes, and that the expression is mainly triggered by superantigen-induced IL-1β release.     

急性冠脉综合征患者血清IL-18和IL-10水平测定

[目的]检测急性冠脉综合征（ACS）患者IL-18与IL-10水平,探讨其与ACS的关系.[方法]采用酶联免疫吸附法测定75例ACS患者[包括35例急性心肌梗死患者（AMI组）和40例不稳定型心绞痛患者（UAP组）]、33例稳定型心绞痛患者（SAP组）和28例正常对照组血清IL-18和IL-10水平.[结果]IL-18水平AMI组明显高于UAP组（P＜0.05）、SAP组（P＜0.05）和对照组（P＜0.01）,UAP组高于SAP组和对照组（P＜0.01）,SAP组高于对照组（P＜0.01）.IL-10水平AMI组和UAP组显著低于SAP组（P＜0.05）和对照组（P＜0.01）.IL-18水平和IL-10水平为负相关关系（r＝-0.595,P＜0.001）.[结论]IL-18水平可反映动脉粥样硬化的稳定性,IL-18与IL-10水平呈负相关,炎性因子与抗炎因子的失衡可能在ACS的发生发展中起一定作用.     

急性白血病患者血浆TF、TFPI及IL-1β；动态变化分析

本研究旨在探讨血浆组织因子（TF）、组织因子途径抑制物（TFPI）和白介素-1β（IL-1β）在急性白血病（AL）患者病情进展、疗效观察及预后判断中的意义。用酶联免疫吸附方法（ELISA）测定20例健康体检者及24例AL患者化疗前血浆TF、TFPI、和IL-1β的含量，并测定初治AL患者在进行化疗第72小时、缓解3个阶段血浆TF、TFPI、和IL-1β的含量。结果表明：24例初治AL患者首次诱导化疗前血浆TF、TFPI、和IL-1β含量较正常对照组高，差异有显著性（P〈0．01）；化疗第72小时血浆TF和IL-1β含量明显高于首次诱导化疗前，有显著性差异（P〈0．05），但血浆TFPI与化疗前相比明显下降，也有显著性差异（P〈0．01）；24例初治AL患者16例缓解，缓解组血浆TF、TFPI和IL-1β含量降至正常，与正常对照组比无显著性差异（P〉0．05）。结论：TF、TFPI和IL-1β是判断急性白血病患者病情进展、疗效观察及预后的重要指标。     

IL-2、IL-7和IL-15联合对T细胞的体外扩增效应

为了建立一种快速有效的体外T细胞扩增方法,本研究比较了不同培养条件对T细胞增殖及其功能和特性的影响。取外周血T细胞,用自体的树突状细胞（DC）和EB病毒转化的B细胞进行周期性刺激,用细胞增殖试验、PI和AnnexinV双标记流式细胞术、Cr释放测定及ELISPOT试验分别测定不同培养条件下细胞的增殖程度、IFN-γ分泌细胞的频率、抗原特异性T细胞的杀伤活力、细胞的凋亡状态和分化能力。结果显示：T细胞在周期性刺激后,用CD3/28微珠的短期扩增效应最好,但多轮刺激后联合应用IL-2,IL-7和IL-15对细胞的扩增最强。Cr释放试验表明,CD3/28微珠扩增的T细胞不具有杀伤活力,高浓度IL-2诱导的T细胞杀伤活性最强,其次为联合应用IL-2,IL-7和IL-15。ELISPOT显示不同培养条件诱导出的分泌IFN-γ的T细胞频率从高到低依此为高浓度IL-2〉联合应用IL-2,IL-7和Il-15〉低浓度的IL-2〉CD3/28微珠。细胞表型分析显示高浓度IL-2和联合应用IL-2,IL-7和Il-15扩增的细胞含有较高比例的CD3＋CD8＋T细胞。对细胞的凋亡测定表明联合应用IL-2,IL-7和IL-15获得的T细胞的存活率最高,处于凋亡早期的细胞比例最低。细胞增殖试验显示联合应用IL-2,IL-7和IL-15扩增的细胞分化能力最强。结论：本研究建立了一种快速有效地体外扩增T细胞的方法,其中联合应用IL-2,IL-7和IL-15对T细胞的扩增最显著,获得的T细胞存活率最高,分化能力最强,该细胞同时也含有较高频率的IFN-γ分泌细胞且表现出较强的杀伤活力。     

糖胺聚糖对受刺激内皮细胞组织因子和凝血酶调节蛋白表达 …

目的 研究由玉足海参撮以的糖胺聚糖（ＧＡＧ）抗血栓形成作用的机制。方法 分别用１ｍｇ／Ｌ,５ｍｇ／Ｌ,１０ｍｇ／Ｌ的ＧＡＧ和５ｍｇ／Ｌ３肝素与经１ｍｇ／Ｌ细菌脂多糖（ＬＰＳ）诱导的人脐静脉内皮细胞孵育,６ｈ后观察内皮细胞的促凝活性,组织因子（ＴＦ）和凝血酶调节蛋白（ＴＭ）抗原的表达及ＴＦ和ＴＭ ｍＲＮＡ转录的变化。     

白细胞介素-6及其受体在子宫肌瘤的表达及意义

目的 研究白细胞介素-6(IL-6)与IL-6受体(IL-6R)在子宫肌瘤的表达及意义.方法 选择因子宫肌瘤行子宫全切除的患者20例,对于子宫肌瘤和同源正常子宫平滑肌,分别采用western blot和荧光定量PCR检测IL-6的表达;western blot和RT-PCR检测IL-6R的表达.结果 IL-6蛋白和mRNA在正常子宫平滑肌表达明显高于子宫肌瘤[(0.7996±0.0359)比(0.6904±0.0414)和(0.0470 ±0.0071)比(0.0283±0.0045)],差异均有统计学意义(P均＜0.05);而IL-6R蛋白和mRNA表达在肌瘤与平滑肌间差异无统计学意义[(0.7105±0.0520)比(0.6904±0.0532)和(0.6644±0.0537)比(0.6465±0.0501),P均＞0.05)].结论 子宫肌瘤局部IL-6低表达可能在一定程度上参与肌瘤的发病,而IL-6R未参与子宫肌瘤发病.