基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2在糖尿病皮肤损伤修复过程中的动态变化

背景：创面愈合是个复杂而有序的生物学过程，近期研究表明慢性创面愈合延迟往往与一些特定的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase．MMP)表达失调有关。目的：研究活化的MMP(activ ematrix metallopmteinase，aMMP)-2及其组织抑制因子(tissue inhihitor of metallopmteinases，TIMPs)在糖尿病皮肤损伤修复过程中的动态变化。设计：随机对照实验研究。地点和对象：实验在上海市第二医科大学附属瑞金医院烧伤研究所完成。对象为SPF级Sprague-Dawley大鼠72只，体质量250g左右．雌雄不限，以链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤为模型，将伤后0，1，3，7，21d的组织标本进行组织块培养24h。主要观察指标：组织培养上清液中aMMP-2和TIMP-2的含量。结果：伤后糖尿病和正常鼠皮肤组织释放的aMMP-2和TIMP-2逐渐升高，糖尿病组未损伤组织释放的aMMP-2明显高于正常组(t=3．214，P&;lt;0．05)，伤后21dTIMP-2明显低于正常组(t=2．427．P&;lt;0．05)；正常组aMMP-2／TIMP-2比值基本稳定于一定的水平，而糖尿病组aMMP-2／TIMP-2比值逐渐下降，自伤后7d起，显著低于0时相点(t=10．019．P&;lt;0．01)。结论：糖尿病者在创伤前后皮肤组织中基质金属蛋白酶及其相关的生物活性物质的平衡均出现异常。     

基质金属蛋白酶-2及其抑制物-2在高氧致慢性肺疾病新生大鼠肺组织中的动态变化及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制物-2(TIMP-2)mRNA和蛋白在高氧致慢性肺疾病(CLD)新生大鼠肺组织中的动态表达规律以及在CLD发生中的作用和意义.方法 足月新生大鼠出生后12 h内分别持续吸入0.90～0.95的高氧或空气,于1、3、7、14和21 d取肺组织进行苏木素-伊红(HE)染色,辐射状肺泡计数(RAC);用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测肺组织MMP-2和TIMP-2的蛋白及mRNA表达.结果 病理观察高氧组早期炎症反应,7 d出现肺泡发育阻滞,最终纤维化;在7 d时高氧组RAC值较空气组降低(P＜0.05),14 d和21 d的差异更为显著(P均＜0.01);在高氧暴露3 d时,MMP-2的蛋白和mRNA表达均较空气组增强(P＜0.05和P＜0.01),14 d时MMP-2蛋白表达减弱(P＜0.05),而mRNA水平两组间差异无统计学意义;TIMP-2的蛋白和mRNA表达在两组中各时间点比较差异均无统计学意义.结论 高氧暴露后,肺组织中MMP-2/TIMP-2表达失衡,使细胞外基质降解异常,可能是高氧致肺早期炎性损伤和最终肺间质纤维化及发育障碍的机制之一.     

MMP-2和TIMP-2对结核性和恶性胸腔积液鉴别诊断价值

目的探讨胸腔积液中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）水平对结核性胸腔积液及恶性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法采用ELISA法，检测34例结核性胸腔积液、35例肺部肿瘤并胸腔积液病人胸腔积液中MMP-2和TIMP-2水平，并进行比较。结果恶性胸腔积液组MMP-2和TIMP-2水平均明显高于结核性胸腔积液组，差异有显著性（t=7．099、8．515，P〈0．01）。两组MMP-2／TIMP-2比值差异无显著性（P〉0．05）。诊断特异度与灵敏度TIMP-2均大于MMP-2。结论MMP2和TIMP2可以作为结核性胸腔积液和恶性胸腔积液的鉴别诊断标志。     

阿霉素肾病大鼠肾小管基质金属蛋白酶-2、金属蛋白酶抑制剂-2的免疫组织化学观察

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和金属蛋白酶抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)在阿霉素肾病大鼠肾小管中的作用。方法:采用大鼠尾静脉单剂量注射阿霉素7.5mg/kg建立阿霉素肾病模型,免疫组织化学检测正常对照组、肾病模型组肾组织MMP-2及TIMP-2的表达变化。结果:肾病模型组大鼠肾小管上皮细胞MMP-2和TIMP-2的表达明显下降,与正常对照组相比差异显著(P<0.01)。结论:MMP-2和TIMP-2在阿霉素肾病的发病过程中可能起重要的作用。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂TIMP-1在子宫颈鳞癌中的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶-9及其抑制剂TIMP-1在子宫颈鳞癌发生发展中的作用及关系.方法:采用免疫组化方法检查55例子宫颈鳞癌组织和55例正常子宫颈黏膜组织中基质金属蛋白酶-9及其抑制剂TIMP-1的表达情况.结果:基质金属蛋白酶-9及其抑制剂TIMP-1在子宫颈鳞癌及正常子宫颈黏膜组织中表达差异有统计学意义(P＜0.05),二者呈负相关.结论:基质金属蛋白酶-9及其抑制剂TIMP-1在子宫颈鳞癌的发生发展中起着重要作用.     

羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠肾小球中基质金属蛋白酶-2/组织金属蛋白酶抑制物-2及Ⅳ型胶原表达的影响

[目的]观察羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠肾小球基质金属蛋白酶-2/组织金属蛋白酶抑制剂-2以及Ⅳ型胶原表达的影响.[方法]采用单肾切除及单次腹腔注射1%STZ(65 mg/kg体重)制作大鼠DM模型,大鼠经羟苯磺酸钙或蒸馏水灌胃12周后,观察各组大鼠肾脏超微结构的改变以及BG、Upro、Cc 、BUN和肾重/体重的变化;免疫组化检查肾小球基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制剂以及Ⅳ型胶原表达的变化.[结果]12周时,糖尿病模型(DM)组与单肾切除对照组(NC)组相比,肾重/体重、BG、BUN、Cc及Upro显著增高(P＜0.05), 羟苯磺酸钙治疗组(DD组)与DM组相比,除Cc变化不明显外, 肾重/体重、BG、BUN及Upro均不同程度降低;电镜显示NC组大鼠肾小球细胞外基质与系膜细胞分布正常,毛细血管腔开放;DM组肾小球系膜区基质增多及系膜细胞增生,同时毛细血管部分塌陷,肾小囊部分粘连;DD组上述病理改变均有不同程度的减轻;肾脏免疫组织化学显示DD组MMP-2、TIMP-2和Col-Ⅳ明显低于DM组,但DD和DM组MMP-2、TIMP-2和Col-Ⅳ均显著高于NC组.[结论]羟苯磺酸钙能改善糖尿病大鼠肾功能,通过抑制Col-Ⅳ的过度积聚来改善糖尿病微血管病变,并且可能与抑制糖尿病大鼠肾脏TIMP-2表达有关.     

MMP-2、MMP-7及TIMP-2在子宫内膜癌中的表达和意义

目的:探讨子宫内膜癌(EC)组织中基质金属蛋白酶-2、-7(MMP-2、MMP-7)及其组织抑制剂-2(TIMP-2)的表达,分析其与子宫内膜癌侵袭、转移的关系.方法:选取64例子宫内膜癌为研究组,同期的子宫内膜增生组织20例、正常子宫内膜20例为对照组.用免疫组化法检测MMP-2、MMP-7、TIMP-2的表达.结果:MMP-2、MMP-7、TIMP-2在子宫内膜癌中阳性表达显著高于正常子宫内膜(P ＜ 0.05);MMP-2、MMP-7与手术-病理分期、肌层浸润深度、组织学分级及淋巴结的转移相关(P ＜ 0.05),TIMP-2仅与淋巴结有无转移有关(P ＜ 0.05);MMP-2、TIMP-2在子宫内膜癌中阳性表达显著高于增生组(P ＜ 0.05);MMP-7在子宫内膜癌中阳性表达与增生组比较无统计学意义(P ＞ 0.05).子宫内膜癌组织中TIMP-2与MMP-2、MMP-7的表达具有一致性(P ＜ 0.000).结论:子宫内膜癌中MMP-2、MMP-7与TIMP-2高表达,可能与EC的发生、浸润和转移相关.     

基质金属蛋白酶组织抑制因子-2在退变腰椎间盘髓核与纤维环组织的表达及意义

目的:测定基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)在退变椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞中的表达,探讨其在椎间盘退变中的意义.方法:选取腰椎间盘突出症患者手术摘除椎间盘标本30例,分离椎间盘标本髓核与纤维环组织,设为实验组.创伤致腰椎椎体骨折经手术摘除椎间盘组织标本10例作为对照组.采用免疫组织化学法检测两组椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞中TIMP-2的表达.结果:TIMP-2在椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞的表达中,实验组阳性率多于对照组(P＜0.01);在髓核细胞中的表达要强于纤维环,而且不同退变程度的表达也不同,TIMP-2在突出型中的表达较正常对照组组织标本中的表达增高(P＜0.01),TIMP-2在脱出型和游离型组织标本中的的表达较突出型有所增高(P＜0.01).结论:实验组椎间盘髓核与纤维环细胞中TIMP-2表达程度与椎间盘退变程度呈正相关;TIMP-2参与了人类腰椎间盘组织的退变过程,TIMP-2可能作为MMPs的一个重要调节因素,与MMPs相互协调.     

口腔疣状癌基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制因子-2的表达及其相关性的研究

目的:研究口腔疣状癌中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-2)的表达.探讨其在口腔疣状癌发生发展过程中的作用和意义.方法:取25例口腔疣状癌,10例正常口腔黏膜,25例口腔鳞癌(高、低分化鳞癌各为15、10例),应用免疫组织化学法检测上述标本中MMP-2、MMP-9及,TIMP-2的表达和分布.结果:正常口腔黏膜组织TIMP-2为阴性表达:MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为10.00%、20.00%.口腔疣状癌MMP-2阳性表达率为28.00%.MMP-9阳性表达率为44.00%,TIMP-2阳性表达率为72.00%.口腔疣状癌、口腔高分化鳞癌、口腔低分化鳞癌MMP-2、MMP-9、TIMP-2表达均高于正常口腔黏膜(P<0.05).结论:在口腔疣状癌,口腔高分化鳞癌、口腔低分化鳞癌中.MMP-2与MMP-9的阳性表达率呈正相关,与TIMP-2呈负相关;相关分析发现,MMP-2、MMP-9和TIMP-2的袁达两两相关,同时3者的表达可能单独或共同参与.     

同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1及金属蛋白酶组织抑制剂1的影响

背景:同型半胱氨酸已被证实是动脉粥样硬化发生的一个独立危险因素。目的:观察同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1及金属蛋白酶组织抑制剂1的分泌量和活性的影响。设计:自身对照观察。单位:吉林大学再生医学科学研究所病理室。材料:体外培养的鼠龄4～6周,体质量150g左右雄性Wistar大鼠的血管平滑肌细胞。大鼠由吉林大学白求恩医学部实验动物室提供。方法:实验于2001-05/2003-05在吉林大学再生医学科学研究所病理室完成。采用体外培养大鼠血管平滑肌细胞,分成5组,分别加入浓度为0(对照组),0.10,0.25,0.50和1.00mmol/L同型半胱氨酸作用48h,通过酶谱分析同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞细胞基质金属蛋白酶1活性的影响,Western blot技术和半定量RT-PCR方法观察细胞基质金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量及其mRNA的表达。主要观察指标:细胞基质金属蛋白酶1的活性,金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量及其mRNA的表达。结果:①金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量:半胱氨酸0.25,0.50和1.00mmol/L组金属蛋白酶1显著低于对照组(P<0.05～0.01);半胱氨酸0.10,0.25,0.50和1.00mmol/L组金属蛋白酶组织抑制剂1均高于对照组(P<0.05～0.01);②基质金属蛋白酶1活性随着半胱氨酸剂量增加而降低,0.50和1.00mmol/L组降低显著(P<0.01);③加入同型半胱氨酸4组金属蛋白酶1mRNA表达显著低于对照组(P<0.01)],半胱氨酸0.25mmol/L组金属蛋白酶组织抑制剂1mRNA高于对照组(P<0.05),0.50和1.00mmol/L组显著高于对照组(P<0.01))。结论:同型半胱氨酸通过抑制细胞基质金属蛋白酶1的分泌,抑制其酶活性,减少胶原降解而使胶原蓄积。提示同型半胱氨酸减少胶原降解可能是动脉粥样硬化的发病机制之一。     

糖尿病足溃疡创面感染患者MMP-2、TIMP-2、Smad3蛋白表达状况及其诊断价值分析

目的探究糖尿病足溃疡创面感染患者的基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶2抑制因子(TIMP-2)、Smad3蛋白的表达状况及其诊断价值。方法回顾性分析达州市中心医院于2017年3月至2018年9月收治的45例糖尿病足溃疡患者资料。将伴有溃疡创面感染的25例糖尿病足者作为观察组,其中单一细菌感染16例,混合细菌感染9例;Ⅱ级溃疡11例,Ⅲ级溃疡14例。其余20例未伴有溃疡创面感染的糖尿病足患者作为对照组。对比两组患者的MMP-2、TIMP-2、Smad3蛋白的表达状况,同时对观察组中不同感染类型、不同溃疡类型患者的MMP-2、TIMP-2、Smad3蛋白的表达状况进行比较。结果观察组患者溃疡创面的MMP-2、MMP-2/TIMP-2及Smad3水平均明显高于对照组,TIMP-2水平显著低于对照组差异有统计学意义(P <0.05)。不同感染类型和不同溃疡类型患者的TIMP-2水平比较无显著差异(P>0.05),混合感染患者溃疡创面的MMP-2、MMP-2/TIMP-2和Smad3水平均明显高于单一感染患者;Ⅲ级溃疡患者的MMP-2、MMP-2/TIMP-2和Smad3水平均明显高于Ⅱ级溃疡,差异有统计学意义(P <0.05)。结论糖尿病足溃疡创面感染患者的感染种类以及溃疡程度与MMP-2、TIMP2失衡以及Smad3蛋白异常表达明显相关。观察MMP-2、TIMP-2、Smad3蛋白水平变化对于糖尿病足溃疡创面感染患者的病情评估及其预后判断具有重要价值。     

糖尿病模型大鼠烫伤创面皮肤组织P物质和Bcl-2表达与龙血竭的干预

背景:研究证明龙血竭有促进创伤愈合、抗血小板聚集、抗炎镇痛、抗菌抗氧化等生物活性。目的:验证龙血竭在糖尿病大鼠烫伤皮肤组织愈合过程中对P物质和Bcl-2表达的影响。方法:Wistar大鼠112只,随机分为4组。龙血竭组、磺胺嘧啶银(SD-Ag)组、糖尿病对照组和正常对照组。其中前3组为糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,正常对照组为正常深Ⅱ度烫伤模型。结果与结论:烫伤后第7天开始创面愈合率龙血竭组、正常对照组高于SD-Ag组和糖尿病对照组(P<0.05),第21天龙血竭组创面愈合率明显高于SD-Ag组和糖尿病对照组(P<0.05),正常对照组最高。烫伤后第15天正常对照组P物质阳性表达水平最高,峰值显著高于其他3组,以后逐步减弱。龙血竭组、SD-Ag组和糖尿病对照组于烫伤后第21天阳性表达最强,且龙血竭组表达明显高于SD-Ag组和糖尿病对照组(P<0.05)。烫伤后第3天开始正常对照组Bcl-2阳性表达水平明显高于其他3组;于第15天各组阳性表达水平皆达到峰值,龙血竭组最高,明显高于SD-Ag组和糖尿病对照组(P<0.05),与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。说明龙血竭能通过参与调控P物质和Bcl-2的表达,有效地促进糖尿病烫伤创面的愈合。     

腺相关病毒介导转化生长因子β1和血管内皮生长因子联合转染促进糖尿病溃疡愈合的生物学效应

背景:糖尿病患者溃疡创面难愈合,目前认为是由糖尿病患者创面微循环障碍以及内源性生长因子含量降低等因素所造成。目的:观察腺相关病毒介导转化生长因子β1(AAV-TGFβ1)和血管内皮生长因子(AAV-VEGF)联合转基因治疗促进糖尿病皮肤溃疡愈合的生物学效应。设计:随机对照动物实验。单位:青岛大学医学院和青岛大学医学院附属医院。材料:实验于2004-07/2006-01在青岛大学医学院附属医院妇科实验室进行。选用成年健康大白兔24只,单纯随机分为联合转基因组和对照组各12只。方法:①采用耳缘静脉注入四氧嘧啶(130mg/kg)建立糖尿病模型,并通过手术方法建立溃疡创面。②联合转基因组创面局部浸润注射AAV-TGFβ1和AAV-VEGF(9×106/mL病毒颗粒);对照组注射生理盐水。主要观察指标:①术后1个月,通过聚合酶链反应检测愈合组织中转化生长因子β1和血管内皮生长因子基因的转录水平。②术后3周,用微循环显微镜计数创缘毛细血管密度值。③术后6个月通过蛋白凝胶电泳和半干电转移法对Ⅰ、Ⅲ型胶原进行分离及免疫印迹检测。④术后1d,1,2,3周,1,2,3,4,5,6个月时测定溃疡愈合组织中胶原含量。⑤术后观测创面愈合厚度、颜色、质地。结果:24只兔全部进入结果分析。①联合转基因组转化生长因子β1和血管内皮生长因子基因转录表达增多。②联合转基因组创缘毛细血管密度值高于对照组[(19.18±3.56),(6.43±1.52)个/mm2,P<0.05]。③联合转基因组愈合组织中胶原含量均增多(P<0.05),而且Ⅰ型和Ⅲ型胶原构成比中Ⅰ型胶原的比例增加。④在转染后1d,联合转基因组与对照组溃疡愈合组织中的胶原含量接近(P>0.05)。此后,联合转基因组胶原含量均高于对照组(P<0.05)。⑤对照组溃疡愈合明显滞后,愈合质量差。结论:AAV-TGFβ1和AAV-VEGF可联合高效转染糖尿病兔耳皮肤溃疡创面,可使溃疡组织中毛细血管密度明显增多,愈合组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原构成比中Ⅰ型胶原的比例明显提高,并有效地促进溃疡愈合。     

糖尿病足溃疡创面感染患者创面渗液基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-2抑制因子、Smad3蛋白检测的临床意义

目的探讨糖尿病足溃疡创面感染患者创面渗液基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-2抑制因子(TIMP-2)、Smad3蛋白检测的临床意义。方法选取广州市花都区人民医院2017年6月至2019年12月收治的60例糖尿病足溃疡创面感染患者作为研究组,另选取同期前来我院就诊的60例糖尿病足溃疡未伴创面感染患者作为对照组。两组均接受创面渗液MMP-2、TIMP-2、Smad3蛋白检测,记录并比较两组间、研究组内患者(单一致病菌感染者及混合致病菌感染者、治疗前及感染控制后)上述指标的检测结果。结果研究组MMP-2、Smad3蛋白水平显著高于对照组,研究组TIMP-2水平低于对照组(P<0.05)。研究组中单一致病菌感染者MMP-2、Smad3蛋白水平显著低于混合致病菌感染者,单一致病菌感染者TIMP-2水平高于混合致病菌感染者(P<0.05)。研究组经对症治疗感染控制后MMP-2、Smad3蛋白水平较治疗前显著下降,TIMP-2水平则有所上升(P<0.05)。结论糖尿病足溃疡患者检测溃疡创面MMP-2、TIMP-2、Smad3蛋白对溃疡创面感染的有一定的诊断价值。     

针刺对烧伤早期创面组织一氧化氮的影响

背景:一氧化氮在烧伤创面愈合过程起重要作用,针灸有消炎和免疫调节作用,但其作用机制是否对创面组织一氧化氮的影响有关还不清楚。目的:探讨针刺减轻烧伤创面早期进行性损害的机制。设计:双盲随机对照研究。地点和对象:实验在广州市红十字会医院烧伤整形科完成,对象为22只新西兰大白兔,体质量2.0～2.5kg,雌雄不限,由广东省实验动物中心提供。干预:建立兔深Ⅱ度烧伤模型,针刺双侧足三里穴。采用一氧化碳试剂盒(酶法)测定组织一氧化碳。主要观察指标:创面组织一氧化氮的含量。结果:兔深Ⅱ度烧伤早期组织中一氧化氮含量显著低于正常组织。正常组织,烫伤后1,3,5d创面组织一氧化氮分别为(4.76±1.31),(2.68±0.92),(2.07±0.81),(2.85±1.12)μmol/g。以伤后第3天最低(t=2.382,P<0.05);针刺治疗3d,创面组织一氧化氮为(3.05±1.16)μmol/g,明显提高(t=2.216,P<0.05)。但仍低于正常组(4.76±1.31)μmol/g(t=2.156,P<0.05)。结论:针刺能提高创面组织一氧化氮含量,可能是其减轻组织水肿和烧伤创面早期进行性损害重要因素。     

Increased matrix metalloproteinase-9 predicts poor wound healing in diabetic foot ulcers

OBJECTIVE—We studied the relationships of diabetic ulcer wound fluid matrix metalloproteinases (MMPs), tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs), and transforming growth factor-ß1 (TGF-ß1) with wound healing rate.RESEARCH DESIGN AND METHODS—The ulcers were cleansed to remove exudates, and wound fluids were collected for analysis of MMP-2 and -9, TIMP-1, and TGF-ß1.RESULTS—At presentation, MMP-9 and the MMP-9–to–TIMP-1 ratio correlated inversely with the wound healing rate at 28 days (P < 0.001). MMP-9 and the MMP-9–to–TIMP-1 ratio were lower in the 23 patients who achieved complete healing at 12 weeks versus the 39 who did not. The pro–MMP-9 concentration was predictive of healing within 12 weeks. Addition of cutoffs for TIMP-1 (>480 pg/ml) and TGF-ß (>115 pg/ml) further improved its predictive power (area under the curve 0.94).CONCLUSIONS—These findings suggest that a milieu with high MMP-9 may be indicative of inflammation and poor wound healing. Measurements of MMP-9, TIMP-1, and TGF-ß in wound fluid may help to identify ulcers at risk of poor healing.Diabetic foot ulcers often fail to heal, and the mechanism is not well explained (1). In previous studies of wounds, delayed healing is characterized by an increase in matrix metalloproteinases (MMPs), a decrease in the tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs), and a reduction in some growth factors, in particular, transforming growth factor-β (TGF-β) (2–9). Both MMPs and TIMPs are secreted by cells involved in wound healing, and their concentrations vary according to the phase of healing (4,6).Studies of diabetic foot ulcer wounds in humans are limited as a result of the difficulty of obtaining tissue samples. Wound fluid can be obtained noninvasively and could potentially overcome this problem. The clinical relevance of studying wound fluid is supported by our previous report that high bacterial count in diabetic wound fluid has a negative impact on wound healing (10). Therefore, the aim of this study was to measure MMP-9, MMP-2, TIMP-1, and TGF-β1 in wound fluid obtained from diabetic foot ulcers and to examine their relationships with wound healing.     

复合生物敷料人发角蛋白-胶原海绵-聚甲基丙烯酸羟乙酯对大鼠烧伤创面的治疗作用

背景:作者在对人发角蛋白的机制研究和临床应用中提出了一个伞新的组织工程学概念--在体,原位组织工程.在该理论的指导下,拟以人发角蚩白-胶原海绵为支架,复合一种可作为药物缓释载体的聚甲基丙烯酸羟乙酯,探讨其在体内原位诱导周围组织细胞构建真皮的可行性.目的:以人发角蛋白胶原海绵为敷料内层,复合包裹药物虎杖的聚甲基丙烯酸羟乙酯载体,制各一种双层复合生物材料,观察其对烧伤创面的促愈合作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-03/12在南方医科大学组胚教研室完成.材料:选用雄性SD大鼠15只制备烧伤动物模型,将模型鼠完全随机分为3组:实验组,阳性对照组及阴性对照组.方法:①将在体内具有慢、中、快3种吸收速度的人发角蛋白组分材料编织成网孔为1 mm×1 mm的网格,与从牛跟腱中抽提Ⅰ型胶原溶液混合后放入模具,经真空冷冻干燥后制成海绵状膜(作复合内层敷料).②用聚合法制备聚甲基丙烯酸羟乙酯,再与药物虎杖一同成膜,制备药物缓释载体膜(作复合外层敷料).③用SD大鼠制备深Ⅱ度烧伤动物模型,烧伤后3 d做清创处理,清创后实验组用与创面相同大小的人发角蛋白胶原海绵-聚甲基丙烯酸羟乙酯复合敷料覆盖创面,阳性对照组用戊二醛猪皮覆盖创面.阴性对照组为单纯无菌纱布覆盖.主要观察指标:①术后以创面完全上皮化为标准,记录创面愈合时间并分别计算7,14,21 d愈合率.②于覆敷料后1,2,4,6,8周切取整个刨面及其周围组织,光学显微镜观察肉牙组织生长情况和免疫组织化学染色观察新生组织中的胶原纤维和弹性纤维形态.结果:①实验组创面覆盖后渗出明显减少且保持一定湿度,而阳性对照组创面较干燥:实验组及阳性对照组的创面愈合时间较阴性对照组提前(P=0.000);创面在7,14,21 d的愈合率均较阴性对照组高(P=0.000),且实验组在14 d的愈合率较阳性对照组高(P＜0.05).②覆敷料后2周,光镜下观察可见创面肉芽组织中有较细小的胶原纤维填充创面.实验组较其他2组明显.胶原蛋白及弹性蛋白的免疫组织化学染色显示:第2周,实验组创面真皮基质中,Ⅰ型胶原呈棕黄色细密条带状;且有少量破染成棕黄色细丝状的弹性纤维,阳性对照组不明显,而阴性对照组中弹性蛋白无阳情表达.第8周,3组创面均愈合良好.实验组及阳性对照组胶原纤维束改造塑形,无瘢痕形成趋势.阴性对照组真皮层组织排列紊乱.结论:人发角蛋白-胶原海绵聚甲基内烯酸羟乙酯/虎杖复合生物敷料可促进深Ⅱ度烧伤实验大鼠创面的愈合.     

2型糖尿病大血管病变患者血清基质金属蛋白酶9及其抑制物1的测定

目的:探讨血清MMP-9及TIMP-1水平与糖尿病大血管病变的关系。方法:采用酶联免疫吸附法对30例正常对照者和54例2型糖尿病患者(其中无合并症糖尿病组29例,合并大血管并发症组25例)血清MMP-9及TIMP-1水平进行检测,分析其与大血管病变的关系。结果:2型DM血清MMP-9、TIMP-1水平与对照组比较显著升高,且随着大血管病变程度呈逐步升高趋势,MMP-9与FBG呈显著正相关(r=0.444,P<0.05),TIMP-1与UAER呈正相关(r=0.395,P<0.05)。结论:认为MMP-9、TIMP-1参与DM大血管病变的发生发展,检测其血清水平可反映DM血管病变的严重程度。     

糖尿病大鼠皮肤伤口愈合过程中结缔组织生长因子的表达

背景：结缔组织生长因子表达在糖尿病伤口愈合过程中的变化及意义少见报道。目的：观察链脲佐菌素诱导的糖尿病模型大鼠复合创伤修复过程中结缔组织生长因子表达的变化及意义。方法：将Wistar大鼠随机分成正常对照组和模型组,3周后将各组动物复合背部1.3cm2全厚皮切除形成伤口。结果与结论：链脲佐菌素诱发的糖尿病模型大鼠伤口愈合明显延迟,创伤后第4,8,12和16天创面愈合率明显低于正常对照组（P〈0.01）。术后第8天,糖尿病组大鼠肉芽组织成熟度和新生血管形成指标得分均低于正常对照组（P〈0.01）。正常对照组的结缔组织生长因子蛋白表达呈时间递增趋势,而糖尿病组的结缔组织生长因子表达在整个创面愈合过程的后期（第12天后）均明显低于正常对照组（P〈0.01）。结果提示,糖尿病大鼠皮肤伤口愈合后期创面组织结缔组织生长因子表达相对正常对照组减少可能是导致创面愈合迟缓的重要原因之一。