外用维A酸引起小鼠皮肤反应的研究

目的 观察在动物实验中外用0.1%全反式维A酸霜及其基质引起的皮肤反应。方法 小鼠背部每天分别外用0.1%全反式维A酸霜及其基质,连续使用30d,肉眼观察皮肤变化,并用生物学仪器进行红斑和皮屑检测。结果 外用0.1%全反式维A酸霜,肉眼观察第3天左右出现红斑、脱屑反应,第6天左右达高峰,第12天左右消失,继续用药至第30天,未见反应再现;仪器测得红斑值在第1天时已明显升高,第6天时达最高峰,并持续高峰状态至第9天,第11天时降至基本正常,至第30天,均维持在正常范围,皮屑指数在用药第3天时明显升高,第9天时达高峰,然后逐渐下降,第27天时降至正常。外用基质部位与用药前比无差异。结论 在动物实验中,外用0.1%全反式维A酸霜引起的皮肤反应在不停药的情况下,呈现“出现-高峰-消退”的一过性规律。维A酸皮肤反应与基质无关。     

全反式维A酸对内皮细胞迁移能力及明胶酶表达的影响

目的 研究全反式维A酸(All-trans retinoid,ATRA)对内皮细胞迁移能力及明胶酶表达的影响.方法 应用迁移实验研究了全反式维A酸对内皮细胞迁移能力的影响,应用半定量逆转录-聚合酶链反应及蛋白印迹检测了全反式维A酸对明胶酶表达的影响,同时应用明胶酶谱法观测了全反式维A酸对明胶酶活性的影响.结果 0.1μmol/L、1.0μmol/L、10.0μmol/L浓度的全反式维A酸可明显抑制佛波酯(PMA)诱导的内皮细胞迁移,抑制率分别为(44.68±7.79)%、(65.20±4.59)%及(78.37±2.58)%.同时全反式维A酸可影响明胶酶mRNA的转录进而下调其蛋白表达量及酶活性,此作用随浓度增高而增强,10.0μmol/L浓度的全反式维A酸对明胶酶AmRNA、蛋白表达量及酶活性的抑制率分别为(59.39±7.98)%、(78.40±3.23)%及(53.02±7.23)%,对明胶酶BmRNA、蛋白表达量及酶活性的抑制率分别为(65.23±3.62)%、(82.49±2.88)%及(47.32±7.72)%.结论 全反式维A酸可在体外抑制佛波酯诱导的内皮细胞迁移,此作用可能是通过其对明胶酶表达及活性的抑制来实现.     

连续外用维A酸皮肤刺激反应中的维A酸结合蛋白mRNA的表达

目的: 检测在连续外用维A酸引起的皮肤刺激反应中小鼠皮肤维A酸结合蛋白mRNA表达水平.方法: 连续外用0.1%维A酸和基质,用RT-PCR方法检测Balb/C小鼠皮肤中维A酸结合蛋白(CRABP I、CRABP II)mRNA的表达水平.结果: 外用0.1%维A酸霜,皮肤中CRABP II mRNA表达水平在用药第一天呈一过性升高.连续用药,CRABP II mRNA表达水平稳定升高而不受每天用药前后的影响,第6天达次高峰,第9天达高峰,第12天降至次高峰,一直到用药24天,均维持在次高峰水平.而CRABP I mRNA表达水平在用药期间未见改变.维A酸霜基质对这两种蛋白mRNA的表达没有影响.结论: 外用维A酸霜引起的一过性皮肤刺激反应可能是由CRABP II介导.     

治疗寻常痤疮几种常用外用制剂安全性评价

局部外用药物是治疗轻度寻常痤疮的首选方案,本文比较了采用药物局部斑贴实验进行了常用的外用药物局部刺激性的评价。结果所有药物均有不同程度的皮肤刺激性,就局部刺激性来说,1%克林霉素凝胶是较优秀的,0.1%阿达帕林凝胶以及0.05%维A酸霜均是有较弱的刺激性,程度基本一致,1%克林霉素&0.025%维A酸霜也具有很好的耐受性,5%过氧化苯甲酰刺激性较明显,但当加入3%红霉素时可减少其局部刺激性。     

特应性皮炎皮损微生物与外用药对比治疗研究

目的 研究特应性皮炎(AD)皮损微生物感染、金黄色葡萄球菌(金葡菌)耐药与外用药的疗效.方法 2001年11月至2002年3月在北京中日友好医院及北京市儿童医院皮肤科门诊,按照Hanifin-Rajka诊断标准,共诊断AD患者71例.治疗前后于皮损处取材进行真菌直接镜检、真菌培养、细菌培养及药敏试验,以SCORAD方法计分,将其中66例患者随机分成两组,分别采用1%硝酸益康唑+0.1%曲安奈德霜与0.1%丁酸氢化可的松软膏外用对比治疗AD患者.结果 AD患者以婴幼儿、儿童为主(≤12岁者占73.24%);皮损细菌培养阳性率为53.51%(金葡菌阳性率为35.21%),真菌阳性率为1.41%;药敏结果显示金葡菌对利福平、万古霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星、头孢唑啉、头孢呋辛等敏感性好;1%硝酸益康唑+0.1%曲安奈德霜与0.1%丁酸氢化可的松软膏外用治疗AD4周时,前者疗效优于后者(P<0.05),细菌阴转率前者高于后者(P<0.01).两组外用药治疗的患者均未见不良反应.结论 具有抗感染与抗炎双重作用的1%硝酸益康唑+0.1%曲安奈德霜治疗AD的疗效优于0.1%丁酸氢化可的松软膏.     

寻常型银屑病患者皮损中维A酸受体mRNA的表达

目的 探讨维A酸受体(RARγ/RXRα)mRNA在寻常型银屑病患者皮损中的表达。方法 应用RT-PCR方法检测20例寻常型银屑病患者皮损部位和10例正常人表皮中RARγ/RXRαmRNA的表达。结果 在寻常型银屑病患者皮损中,RXRαmRNA的表达水平为0.1976±0.0933,较正常对照组低(正常对照组为0.5867±0.0132),在统计学上差异有显着性(P<0.01);RARγmRNA在银屑病患者和正常人表皮中的表达水平分别为0.5037±0.0883和0.5624±0.0767,两者差异无显着性。结论 RXRαmRNA表达水平的降低可能和银屑病的发病有关。     

夫西地酸乳膏联合阿达帕林凝胶治疗寻常痤疮的临床观察

目的评价2%夫西地酸软膏联合0.1%阿达帕林凝胶治疗轻、中度寻常痤疮的临床疗效及安全性。方法寻常痤疮246例,随机分为3组,治疗组98例,采用2%夫西地酸软膏联合0.1%阿达帕林凝胶治疗;对照A组81例,采用1%克林霉素磷酸酯凝胶联合0.1%阿达帕林治疗;对照B组67例,单独使用0.1%阿达帕林凝胶治疗。均连用8周,分别在治疗后第2,4,8周末观察疗效并评价安全性。结果在治疗后第8周,治疗组有效率93.88%,与对照A组(81.48%)相比差异有统计学意义(P=0.010);治疗组Ⅲ级痤疮的有效率93.02%,与对照A组(69.70%)相比差异有统计学意义(P=0.007);疗程结束后,治疗组复发5例,复发率5.10%,远低于2个对照组。单独外用阿达帕林疗效均欠佳,且复发率较高。在治疗过程中,3组均未见明显不良反应。结论 2%夫西地酸软膏联合0.1%阿达帕林凝胶治疗轻、中度寻常痤疮具有疗效较好、复发率低、不良反应少等优点,是较理想的治疗方案。     

不同病程尖锐湿疣患者外周血Th细胞亚群的研究

目的 从辅助性T细胞(Th)极化情况,探讨不同病程尖锐湿疣患者的细胞免疫状态。方法 取肝素抗凝血,用密度梯度离心法分离出血浆和外周血单一核细胞(PBMC)进行细胞培养和免疫荧光染色:PHA和自身血浆刺激PBMC诱导T细胞极化,72h后收获细胞,分别标记抗CD4-PE与抗CCR5-FITC和抗CD4-FITC与抗CCR3-PE,最后利用流式细胞仪对标记细胞进行分析。结果 尖锐湿疣患者中,短病程组与长病程组Th1/Th2极化细胞百分率分别为(25.82±2.22)%/(14.80±1.14)%与(12.20±1.37)%/(13.74±0.99)%,两组极化细胞百分率分别与正常对照组比较差异均有显著性(P<0.05),短病程组Th1/Th2的比值为1.75±0.17,而长病程组为0.89±0.11。结论 短病程尖锐湿疣患者机体呈现Th1型反应,而长病程者则以Th2型反应为主,存在Th1型反应向Th2型反应切换的现象。     

外用维A酸治疗寻常痤疮的疗效和安全性的系统评价

目的 评价外用维A酸治疗寻常痤疮的疗效和安全性,并与外用硫磺制剂、过氧苯甲酰、抗生素比较。方法 用Cochrane协作网系统评价方法,选择有随机对照的临床试验做系统评价。结果 截止2002年,纳入15个临床试验2439例患者。有4个临床试验示外用维A酸疗效明显优于安慰剂[RR(相对危险度)=1.87,95%CI(可信区间)为1.13~3.11],尤其对非炎性皮损(RR=12.70,95%CI为4.09~39.40)。有3个临床试验示维A酸疗效优于硫磺制剂(RR=1.75,95%CI为1.42~2.16)。与过氧苯甲酰对照的7个临床试验以及与抗生素对照的3个临床试验尚不能下结论。所有临床试验示外用维A酸制剂后,可出现红斑、脱屑等局部不良反应,虽无证据显示其系统不良反应,但对孕妇须非常谨慎。结论 外用维A酸治疗寻常痤疮有效,并优于硫磺制剂,但尚无证据表明优于过氧苯甲酰或外用抗生素。有局部不良反应。需进行更多质量高、大样本的随机对照试验,以证实外用维A酸治疗寻常痤疮的作用和地位。     

他卡西醇联合单频准分子光治疗白癜风的对照研究

目的 评价和对比他卡西醇联合单频准分子光(MEL)308nm和单用单频准分子光治疗白癜风的疗效和安全性。方法 用单盲、自身对照的方法对38例白癜风患者的自身对称或相邻的皮损分别外用他卡西醇和安慰剂,两侧皮损每周照射1次MEL 308 nm,1月观察1次,拍照对比疗效。计算最初色素再生和显效时的照光次数和光的累积量。结果 对35例患者进行评价,联合治疗侧最初色素再生时的照光次数和光的累积量分别为(4.89±3.16)次和(4.27±3.59)J/cm²,单照光侧分别为(5.69±3.29)次和(5.36±4.12)J/cm²(P<0.05),显效的患者联合治疗侧为(7.79±4.70)次和(7.72±5.64)J/cm²,单照光侧为(8.4±3.92)次和(8.18±4.87)J/cm²(P>0.05)。联合治疗侧的显效率为45.7%,总有效率71.4%,单照光侧分别为25.7%和54.3%(P<0.05)。结论 单频准分子光治疗白癜风有效而且安全,联合他卡西醇外用可增强MEL 308 nm的疗效,提早色素再生的时间和减少照光的能量。     

尖锐湿疣患者外周血树突细胞亚群的检测

目的 检测尖锐湿疣患者外周血树突细胞(DC)亚群并探讨其意义。方法 采用免疫荧光三标记流式细胞仪检测25例尖锐湿疣患者外周血DC亚群(DC1/CD11c⁺和DC2/CD123⁺),并以26例正常人作为对照。结果 尖锐湿疣患者外周血CD123⁺DC百分数为(0.63±0.34)%比对照组(0.41±0.17)%明显增高(P<0.01)。长病程组及复发患者CD123⁺DC增高明显(均为P<0.01),而短病程组及初发患者则无明显改变(均为P>0.05)。尖锐湿疣患者组CD11c⁺DC百分数(1.40%±0.44%)与对照组(1.57%±0.78%)相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 尖锐湿疣患者外周血DC2亚群占优势,导致向Th2样免疫反应偏移,此可能与尖锐湿疣的复发和病程的长短有关。     

脂质体鬼臼毒素混悬液在大鼠表皮及真皮的分布规律初探

目的 探讨脂质体鬼臼毒素在大鼠皮肤各层的分布规律。方法 观察组大鼠涂抹0.5%脂质体鬼臼毒素混悬液,对照组涂抹0.5%鬼臼毒素酊剂,分别在涂药1、2、4、6、12及24h取皮肤标本,常规石蜡切片,采用激光共聚焦显微成像仪(CLSM)扫描,观察单位面积鬼臼毒素的荧光量。结果 鬼臼毒素24h荧光值曲线下面积(AUC),表皮层中观察组是对照组的1.5倍,真皮层中是2.3倍;对照组在涂药2h后,表皮和真皮的荧光量即达到峰值(分别为1585.52/μm²和2005.66/μm²),在4h后荧光量迅速降低;而观察组在4h前,表皮和真皮中的荧光量较低,6h后逐渐增高,在12h达峰值(分别为(750.28/μm²和1073.08/μm²)。结论 脂质体制剂使鬼臼毒素在皮肤中缓慢释放,并持续较长时间。     

高砷煤引起的砷中毒患者外周血红细胞血型糖蛋白A突变频率研究

目的 检测高砷煤引起的砷中毒患者外周血红细胞血型糖蛋白A(GPA)的突变频率.方法 分离、固定40例高砷煤引起的砷中毒患者外周血红细胞,与荧光素标记的单抗结合后,采用流式细胞仪进行GPA突变频率分析.结果 40例高砷煤引起的砷中毒患者外周血红细胞GPA突变频率:NN突变频率为(21.23±13.97)×10^-6,NO突变频率为(33.13±25.72)×10^-6,MM突变频率为(110.90±63.58)×10^-6,MO突变频率为(20.35±21.26)×10^-6,GPA的突变频率明显高于正常人群(P<0.01).肿瘤组:NN突变频率为(31.50±16.13)×10^-6,NO突变频率为(54.50±38.13)×10^-6,MM突变频率为(159.33±66.22)×10^-6,MO突变频率为(45.16±12.69)×10^-6,GPA的突变频率明显高于非肿瘤组(P<0.01).结论 砷中毒可导致人类外周血红细胞GPA的突变.提示GPA的突变频率值可作为一项检测有否砷中毒及病变程度的指标.     

成人正常皮肤CD68阳性单核-巨噬细胞分布的研究

目的 观察正常真皮内CD68阳性单核-巨噬细胞的分布、形态和密度。方法 正常成人8例,每例均取面部、躯干、四肢近端、四肢远端、手掌和足跖6个部位皮肤进行表皮铺片和纵行与水平连续切片。CD68单克隆抗体染色,观察单核-巨噬细胞的分布。结果 真皮浅层CD68阳性细胞可表现为树枝状及非树枝状,呈网状分布。真皮浅层CD68阳性细胞密度为:四肢远端(562±230)个/mm²,腹部(517±162)个/mm²,面部(509±235)个/mm²,手掌(507±192)个/mm²,四肢近端(472±138)个/mm²,足跖(361±78)个/mm²。真皮深层CD68阳性细胞密度低,多为树枝状,散在于胶原纤维间。结论 CD68阳性单核-巨噬细胞在真皮浅层形成较致密网状分布。提示单核-巨噬细胞在真皮内有明确的方向性,其防御的方向是穿透表皮进入真皮的入侵物。     

神经性皮炎皮损处神经纤维的数量及其与朗格汉斯细胞关系的研究

目的探讨神经性皮炎患者皮损处神经纤维的数量变化及其与朗格汉斯细胞接触的关系.方法用辣根过氧化物酶结合的链霉亲和素-生物素技术观察24例神经性皮炎患者皮损处神经纤维的表达及数量变化.用免疫荧光双标记及共聚焦激光扫描显微镜技术观察神经性皮炎患者皮损处神经纤维与朗格汉斯细胞接触数量关系.用实时定量PCR方法检测皮损处神经生长因子mRNA的表达情况.结果 神经性皮炎患者皮损处神经纤维长度显著增加,与皮损周边对照(t=6.90,P<0.001)及正常人对照(t=5.71,P<0.001)比较差异有统计学意义.皮损表皮内有神经纤维接触的朗格汉斯细胞占朗格汉斯细胞总数的百分数明显增多,与皮损周边对照(X²=43.91,P<0.001)及正常人对照(X²=46.11,P<0.001)比较差异有统计学意义.皮损处神经生长因子mRNA高表达,与皮损周边对照(t=3.25,P<0.01)及正常人对照(t=3.67,P<0.01)比较差异有统计学意义.结论 神经性皮炎患者皮损处存在高水平活性的NGF导致神经纤维增生.     

复发性生殖器疱疹患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的检测

目的 研究外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Treg细胞)表型和功能改变所致的细胞免疫抑制效应在复发性生殖器疱疹(RGH)发病机制中的作用.方法 采用免疫荧光标染技术,经流式细胞仪检测34例RGH患者和33例正常人外周血CD4⁺CD25⁺T细胞转录因子Foxp3及细胞毒T细胞相关抗原4(CTLA-4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关基因(GITR)、程序性死亡1(PD-1)等抑制性膜分子的表达水平.同时,用免疫磁珠细胞分选技术从外周血中分选出高纯度的CD4⁺CD25⁺T细胞,经体外刺激后分析胞内分泌白介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)阳性细胞数.结果 RGH患者外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞数量比正常人对照组显著增加(P<0.001),CD4⁺CD25⁺T细胞表面抑制性膜分子CTLA-4、GITR、PD-1表达明显增强(P分别<0.001、<0.001及<0.01),胞内IL-10和TGF-β阳性细胞增多(P值分别<0.01及<0.001).结论 单纯疱疹病毒感染可诱导CD4⁺CD25⁺Treg细胞活化增殖,高表达负性共刺激分子和分泌抑制性细胞因子,通过多种机制抑制机体的抗病毒免疫应答.     

HIV/AIDS患者口咽部念珠菌病与CD4+、CD8+T淋巴细胞分析

目的 研究HIV/AIDS患者的口咽部念珠菌病的发病特点,CD4⁺计数、CD8⁺计数、CD4⁺/CD8⁺比值的分布特点,以及抗真菌治疗的特点。方法 观察20例合并口咽部念珠菌病的HIV/AIDS患者和对照组口腔病损情况,病损部行真菌镜检和真菌培养,外周血流式细胞仪检测CD4⁺、CD8⁺计数。研究组和对照组伊曲康唑治疗第1周、第2周、疗程结束时、停药后两周真菌学疗效比较。结果 19例为白念珠菌感染,1例为近平滑念珠菌感染。20例艾滋病患者可见舌部感染6例,口腔侧壁感染14例。CD4⁺、CD8⁺计数和CD4⁺/CD8⁺比值分别在119.40±127.43、652.50±338.57和0.163±0.130范围。伊曲康唑治疗HIV/AIDS组第1周、第2周、疗程结束时、停药后两周真菌清除率分别为16.67%、50.00%、61.11%、66.67%。结论 HIV/AIDS患者口咽部念珠菌感染的最常见致病菌是白念珠菌,最常见靶部位是舌和口腔侧壁。HIV/AIDS患者的口咽部念珠菌病抗真菌疗效与免疫状态有关。     

血管内皮生长因子在扁平苔藓及银屑病皮损中的表达

目的探讨扁平苔藓及银屑病患者皮损表皮血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。方法用抗VEGF及CD34抗体行免疫组化染色,对扁平苔藓及银屑病皮损标本进行观察,计数表皮下方真皮的毛细血管密度。结果正常人表皮VEGF基本阴性,扁平苔藓及银屑病患者非病变部VEGF阴性,移行部表皮上层VEGF染色逐渐由弱到强,由间断到连续;病变部表皮VEGF阳性,以表皮上层细胞质的细颗粒状染色为主。CD34染色各部分真皮上层毛细血管密度为;扁平苔藓的非病变部(45.61±15.70)个/mm²、移行部(68.63±15.36)个/mm²、病变部(92.07±16.84)个/mm²;银屑病的非病变部(43.73±14.55)个/mm²、移行部(72.12±18.81)个/mm²、病变部(100.29±21.93)个/mm²,各病种三个部位之间比较差异均有统计学意义。结论扁平苔藓及银屑病皮损表皮分泌VEGF,并与真皮毛细血管增生扩张密切相关。     

Iontophoretic delivery of terbinafine in onychomycosis: a preliminary study

Background  Onychomycosis is a common disease; topical treatment is usually poorly effective, while systemic treatment is more effective but may be associated with side-effects. Iontophoretic drug delivery may improve drug penetration through the nail and lead to better therapeutic results.
Objectives  To evaluate the efficacy, safety and tolerability of topical treatments with terbinafine HCl delivered with or without an iontophoretic patch in patients with onychomycosis of the toenails.
Methods  Patients enrolled into the study were divided randomly into two groups. Group A was treated with terbinafine and an iontophoretic patch (at a constant current density of 100 μA cm⁻²). Group B was treated with terbinafine without iontophoresis. Treatment was overnight wear, every day, 5 days per week, for 4 weeks. Follow-up period was 8 weeks from the end of treatment.
Results  A significant clinical response was recorded in patients of group A (active group). The percentage of patients having healthy toenail growth of more than 1·5 mm at the end of treatment was 40% compared with 11% in patients treated with terbinafine without current (passive group). The percentage of patients having fungal elements (KOH) in nail specimens decreased significantly at 8 weeks following the completion of treatment: 16% in the active group vs. 53% in the passive group. Patients in the active group reported a tingling sensation that is expected when using an iontophoretic drug delivery treatment.
Conclusions  The delivery of terbinafine under an electrical current of 100 μA cm⁻² appears to be efficacious and safe and is well tolerated for the treatment of nail onychomycosis.