葡萄籽提取物原花青素对UVA照射HaCaT细胞表达AQP3、Caspase-14和BH mRNA的影响

目的通过研究UVA照射前后及不同浓度葡萄籽提取物原花青素(grape-seed proanthocyanins extract,GSPE)干预的HaCaT细胞表达水通道蛋白3(AQP3)、半胱氨酸蛋白酶14(Caspase-14)和博来霉素水解酶(BH) mRNA的变化,探索GSPE是否能够修复长波紫外线引起的皮肤屏障损伤。方法实验分为五个组:空白对照组、单纯光照组(选取UVA的能量密度为25 J/cm~2)、照光联合不同浓度GSPE干预组(10、50、100μg/mL),采用RT-PCR法分别检测各组AQP3、Caspase-14和BH mRNA的表达量。结果 25 J/cm~2的UVA可以提高AQP3 mRNA表达量。GSPE药物浓度大于10μg/mL时,随药物浓度增加,可以逐渐降低光照后高表达的基因水平,并呈浓度依赖性。UVA可下调BH和Caspase-14 mRNA表达量,而GSPE可以提高光照后降低的基因表达量,且呈浓度依赖性,逐渐使其恢复正常。结论合适浓度的GSPE可以调节UVA对HaCaT细胞AQP3、Caspase-14和BH mRNA表达的影响,并使其趋于正常,推测其具有修复长波紫外线引起的皮肤屏障功能损伤的作用。     

他克莫司对UVA照射后HaCaT细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度他克莫司(TM)对不同强度长波紫外线(UVA)照射HaCaT细胞24h和48h后细胞增殖活性的影响。方法将培养的HaCaT细胞分别行2,4和8J/cm2的UVA照射,且照射前1h分别加入50,500和5000pg/mL的TM,对照组分别加入50,500和5000pg/mL的TM,但不行UVA照射。各剂量组分别照射24h和48h后在倒置相差显微镜下观察细胞的形态变化,MTT法检测细胞的增殖活性。结果HaCaT细胞经UVA照射24h后,细胞连接松散,细胞折光性较未照射组差,部分细胞死亡、脱壁;与未经UVA照射组相比,细胞增殖受到抑制(P<0.05),加入TM组无明显变化(P>0.05);照射48h后细胞虽有大量增殖,但体积较小;与未经UVA照射组相比,细胞增殖明显(P<0.05),加入TM组细胞增殖受到抑制(P<0.05)。结论TM可抑制UVA照射HaCaT细胞引起的过度增殖,对UVA照射后的HaCaT细胞有保护作用。     

茶多酚对长波紫外线诱导HaCaT细胞急性光损伤的防护作用

目的探讨茶多酚对长波紫外线(UVA)诱导HaCaT细胞急性光损伤的防护作用及其机制。方法用光学显微镜、MTT法检测UVA对细胞形态及增殖活性影响,构建UVA致HaCaT细胞急性光损伤模型;用MTT法检测茶多酚对细胞增殖活性影响,获得茶多酚对HaCaT细胞最适浓度;检测茶多酚处理前后细胞增殖活性(MTT法)、细胞膜损伤(LDH)情况;Western blot、RT-PCR检测茶多酚处理前后核因子NF-E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)蛋白胞内分布、Nrf2 mRNA及下游Ⅱ相解毒酶表达情况。结果 20 J/cm~2 UVA致HaCaT细胞形态学改变且抑制细胞增殖活性(0.11±0.50;P0.05),可用于构建UVA致HaCaT细胞急性光损伤模型;茶多酚剂量依赖性抑制细胞增殖活性,11μg/mL为本实验最适茶多酚浓度;相比对照组、UVA组的细胞增殖活性(1.043±0.203;0.113±0.050)和LDH(1.000±0.092;1.858±0.016),照射前加入茶多酚可显著提高细胞增殖活性(1.322±0.080;均P0.05)和减少LDH释放(0.500±0.079;均P0.05);Western blot、RT-PCR结果显示,茶多酚可显著增加核内Nrf2蛋白表达,上调Nrf2 mRNA(1.804±0.229)及下游Ⅱ相解毒酶SOD mRNA(1.172±0.148)、CAT mRNA(1.617±0.259)、GCLC mRNA(1.183±0.083)、GCLM mRNA(1.228±0.256)的表达。结论茶多酚可有效防护UVA诱导HaCaT细胞急性光损伤,且茶多酚可增加核内Nrf2蛋白及其mRNA和下游Ⅱ相解毒酶mRNA的表达,茶多酚的光防护作用可能与Nrf2信号通路有关。     

葡萄籽提取物原花青素对UVA照射HaCaT细胞表达VEGF及PEDF mRNA影响的研究

目的观察葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对长波紫外线(UVA)照射后HaCaT细胞血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)mRNA表达的影响,以探讨GSPE对主要的血管生成和抑制因子的影响,揭示其在光老化早期血管异常增生中的作用。方法以体外培养的HaCaT细胞为研究对象,实验分为空白对照组、单纯光照组(UVA的能量密度为25 J/cm2)、照光加不同浓度GSPE组(10、50、100μg/mL),采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法测定各组细胞中VEGF和PEDF的mRNA的表达量。结果①单纯光照组比空白对照组VEGF mRNA的表达量显著升高(P0.05);照光加GSPE各组比单纯光照组VEGF mRNA的表达量低(P0.05),且呈浓度依赖性。②单纯光照组比空白对照组PEDF mRNA的表达量显著降低(P0.05);照光加不同浓度GSPE各组比单纯光照组PEDF mRNA的表达量提高(P0.05),并逐渐接近正常水平。结论 GSPE可调节UVA照射后升高的VEGF mRNA和降低的PEDF mRNA的表达量,且呈浓度依赖性,最终使其接近正常水平。据此推测GSPE可以抑制UVA照射后引起的新生血管的形成,延缓光老化。     

长波紫外线照射对HaCaT细胞iNOS/NO表达的影响

目的 探讨不同剂量长波紫外线 （UVA） 照射HaCaT细胞后不同时间点诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）的表达情况。方法 1 J/cm2、5 J/cm2和10 J/cm2 UVA照射HaCaT细胞后继续培养24 h、48 h和72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;分别用RT-PCR、Western印迹和Griess法检测HaCaT细胞iNOS mRNA、蛋白及NO的表达。结果 所有UVA剂量组HaCaT细胞iNOSmRNA在光照后24 h有表达,48 h达高峰,72 h后下降,各时间点间表达量差异有统计学意义（P < 0.05）;1 J/cm2 UVA照射后3个时间点均未见iNOS蛋白表达,而5 J/cm2和10 J/cm2 UVA照射后iNOS蛋白在24 h增加,48 h达高峰且显著高于24 h（P < 0.05）,照射后72 h无iNOS蛋白表达。所有UVA剂量组HaCaT细胞NO表达量在24 h升高,48 h显著升高,72 h平稳升高,3个时间点NO表达量均比正常对照组明显增加（P < 0.05）。对照组HaCaT细胞无iNOS mRNA和蛋白表达,NO表达量低。结论 HaCaT细胞iNOS和NO的表达变化与UVA照射存在时间和剂量关系。     

不同剂量长波紫外线照射对HaCaT细胞增殖活力和自噬体表达瞬时影响的研究

目的:观察人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞接受不同剂量长波紫外线(UVA)照射后细胞增殖活力和自噬体表达水平的变化,并初步评估增殖活力损伤程度和自噬体表达水平之间的相关性。方法:将HaCaT细胞分为6组,分别为10 J/cm~2UVA对照组、10 J/cm~2 UVA照射组、25 J/cm~2 UVA对照组、25 J/cm~2 UVA照射组、50 J/cm~2 UVA对照组及50 J/cm~2 UVA照射组。照射结束后即刻进行噻唑蓝(MTT)实验或单丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色,全波长酶标仪下读取各孔A值,倒置荧光显微镜下随机选取视野,计数每视野下自噬体表达阴性细胞和阳性细胞数目。结果:经不同剂量UVA照射后,HaCaT细胞的增殖活力(A值)下降,呈剂量相关性。其中10、25及50 J/cm~2 UVA照射组(A值分别为1.179±0.007、0.791±0.015、0.522±0.046)两两之间以及与各自对照组(1.370±0.007、1.254±0.012、1.177±0.009)间差异均有统计学意义(P均0.01);10、25及50 J/cm~2 UVA照射后,HaCa T细胞MDC染色结果示自噬体表达阳性的细胞比率增加,且呈剂量相关性。50 J/cm~2 UVA照射组自噬体表达阳性率较其对照组显著上升(χ~2=11,P0.01)。结论:10~50 J/cm~2 UVA照射后,HaCaT细胞瞬时增殖活力降低及自噬体表达增加,且呈剂量依赖性。     

枸杞多糖通过调控α-MSH蛋白的表达抑制UVA诱导的细胞黑色素生成

 目的 探究枸杞多糖（LBP）对UVA诱导细胞黑色素生成的影响。 方法 用不同浓度LBP(0、20、50、100、200、300、400、500 μg/mL)处理HaCaT细胞和HEM细胞，采用CCK8法检测对细胞增殖的影响，筛选出适宜浓度的LBP进行后续实验。使用300 μg/mL LBP、20 μM N-1A处理被30 J/cm2 UVA照射的HaCaT细胞和HEM细胞，多巴氧化法测定细胞中tyrosinase活性、NaOH裂解法测定黑色素含量。通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测 LBP对细胞内α-MSH蛋白表达的调控，应用Western blot检测细胞黑色素生成相关蛋白MITF、tyrosinase、TRP1和TRP2的表达水平。 结果 CCK8实验结果提示，当LBP浓度等于300 μg/mL时，HaCaT细胞和HEM细胞的增殖无明显变化（t=1.89、0.07，P=0.107、0.947）。相较于UVA组， LBP在体外可以明显抑制UVA诱导的HEM细胞中tyrosinase活性（t=33.19，P=0.001）以及减低黑色素含量（t=7.13，P=0.019）；ELISA结果提示，UVA照射可以促进HaCaT细胞和HEM细胞的α-MSH蛋白分泌（t=-3.79、-3.41，P=0.043、0.046）， LBP能够抑制HaCaT细胞和HEM细胞中α-MSH的蛋白表达水平（t=3.75、3.41，P=0.044、0.048）；Western blot结果显示， LBP可显著下调UVA诱导的黑色素生成相关蛋白MITF、tyrosinase、TRP1和TRP2的表达。 结论 LBP可显著抑制UVA诱导的细胞黑色素生成，其机制可能通过调控HaCaT细胞和HEM细胞中α-MSH蛋白水平实现。     

白藜芦醇对UVA照射人角质形成细胞株的保护作用及机制探讨

目的 研究白藜芦醇对UVA照射后人角质形成细胞的保护作用及其机制。方法 5 J/cm2 UVA照射人角质形成细胞株HaCaT细胞后,立即予以0.01、0.1 mmol/L白藜芦醇干预,噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性,半定量RT-PCR和Western印迹方法检测细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA和蛋白的表达,电镜观察细胞形态学方面的改变。结果 UVA照射组HaCaT细胞的增殖活性（A490为0.542 ± 0.004）较未照射对照组（A490为0.889 ± 0.083）明显下降,iNOS mRNA和蛋白的表达水平（1.532 ± 0.041和1.331 ± 0.046）较未照射对照组显著增加,电镜下可见典型的凋亡细胞。HaCaT细胞经UVA照射加0.01、0.1 mmol/L白藜芦醇处理后,细胞的增殖活性升高,A490为分别为0.753 ± 0.435和0.892 ± 0.173,iNOS mRNA和蛋白的表达水平分别为0.853 ± 0.038/0.809 ± 0.018和0.392 ± 0.033/0.412 ± 0.026,与单独UVA照射组相比,差异均有统计学意义（P < 0.05）,而且0.1 mmol/L白藜芦醇组作用效果更明显。另外,电镜观察UVA + 白藜芦醇组未见凋亡细胞及明显的细胞坏死征象。结论 白藜芦醇对UVA照射损伤的HaCaT细胞有保护作用,其机制可能与白藜芦醇抑制UVA诱导的iNOS表达有关。     

葡萄籽提取物原花青素对长波紫外线诱导皮肤成纤维细胞表达TGF-βRⅡ与Smad7的影响

目的观察不同浓度葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对长波紫外线(UVA)诱导人皮肤成纤维细胞表达转化生长因子-β(TGF-β)Ⅱ型受体和Smad7蛋白的影响。方法本实验选用体外培养的人皮肤成纤维细胞株(HSFs)为研究对象,实验主要分3组,空白对照组,单纯光照组(UVA照射人皮肤成纤维细胞),照光加药组(UVA照射细胞后予不同浓度GSPE干预)。应用免疫细胞化学技术检测UVA照射前、后及不同浓度GSPE干预后对皮肤成纤维细胞TGF-βRⅡ和Smad7蛋白表达的情况。结果与空白对照组相比,单纯UVA光照组人皮肤成纤维细胞TGF-βRⅡ蛋白表达下降(P0.05),Smad7蛋白表达升高(P0.05);与单纯光照组相比,UVA照射后经25μg/m L、50μg/m L和100μg/m L浓度GSPE处理后,成纤维细胞TGF-βRⅡ蛋白表达水平均升高(P0.05),Smad7蛋白表达水平均下降(P0.05),且于50μg/m L和100μg/m L GSPE处理后,成纤维细胞TGF-βRⅡ和Smad7蛋白表达量均接近正常水平(P0.05)。结论适当浓度GSPE可通过显著上调TGF-βRⅡ蛋白水平以及下调Smad7蛋白水平的表达来对抗UVA抑制TGF-β/Smad信号通路的传导,进而减轻UVA所致细胞外基质的降解,延缓了皮肤光老化的进程。     

甘草次酸抑制表皮细胞生长因子对HaCaT细胞促增殖作用的机制研究

目的 探讨甘草次酸对表皮细胞生长因子（EGF）诱导的HaCaT细胞增殖的影响,并对其可能机制进行相关研究。方法 MTT法检测不同浓度EGF （0、1、5、10、25、50、100 ?滋g/L） 以及不同浓度甘草次酸（0、0.1、1、10、25、50、100 ?滋mol/L）对HaCaT细胞增殖的影响,25 ?滋mol/L甘草次酸、10 ?滋mol/L MEK1/2抑制剂 （U0126） 对25 ?滋g/L EGF促HaCaT细胞增殖的抑制作用。蛋白免疫印迹法检测25 ?滋g/L EGF对ERK1/2磷酸化的促进作用,25 ?滋mol/L甘草次酸、10 ?滋mol/L U0126对ERK1/2磷酸化的抑制作用,25 ?滋g/L EGF、25 ?滋mol/L甘草次酸、10 ?滋mol/L U0126分别或同时作用下HaCaT细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、Notch-1蛋白的表达情况。使用SPSS17.0统计软件对实验数据进行t检验、方差分析和相关分析。结果 EGF在0 ～ 100 ?滋g/L范围内促进HaCaT细胞增殖（r = 0.798,P ＜ 0.05）,在0 ～ 50 ?滋g/L 范围内与HaCaT细胞增殖呈线性相关（r = 0.859,P ＜ 0.05）。甘草次酸在10 ～ 100 ?滋mol/L范围内浓度依赖性地抑制HaCaT细胞增殖（r = －0.945,P ＜ 0.01）;25 ?滋mol/L甘草次酸明显抑制25 ?滋g/L EGF对HaCaT细胞的促增殖作用以及对ERK1/2的促磷酸化作用。同时,25 ?滋mol/L甘草次酸、10 ?滋mol/L U0126均抑制25 ?滋g/L EGF对HaCaT细胞PCNA、Notch-1蛋白的促表达作用。结论 甘草次酸可抑制EGF对HaCaT细胞的促增殖作用,其机制可能与甘草次酸抑制EGF对HaCaT细胞ERK1/2信号通路的激活有关。     

外阴Pinkus纤维上皮瘤

报告1例外阴Pinkus纤维上皮瘤。患者女，71岁。左大阴唇外侧斑块10余年。皮肤科检查见左大阴唇外侧一2cm&#215;2cm灰黑色浸润性斑块．质地中等，边缘清楚，表面散在红色点状糜烂面，无明显渗液。皮损组织病理检查：棘层下方大量基底样细胞增生．增生的细胞呈条索状嵌入真皮增生的纤维间质中，彼此吻合形成网状，基底细胞胞核大而深染，胞质少，呈嗜碱性，表皮基膜完整，真皮内有以淋巴细胞为主的大量炎性细胞浸润。诊断：外阴Pinkus纤维上皮瘤。     

红皮病120例病因分析

目的：探讨红皮病的病因及并发感染的情况。方法：回顾性分析120例红皮病患者的临床资料。结果：120例患者中73．3％红皮病继发于原有皮肤病，其他致病原因依次为药物过敏、肿瘤，部分原因不明。28．3％并发感染的红皮病患者中，41～60岁组和〉60岁年龄组的感染率高于≤40岁年龄组，差异有统计学意义（P均〈0．05）；血浆白蛋白降低组患者感染率高于血浆白蛋白正常组患者，差异亦有统计学意义（P〈0．01）。结论：红皮病病因多种多样，不能忽视非常见病因的存在。随着年龄的增长和血浆白蛋白的降低，红皮病患者的感染率增加，应注意皮肤护理及早期支持治疗。     

953株支原体药敏试验结果分析

目的：分析深圳地区支原体对抗生素的敏感性，为临床治疗提供实验室依据。方法：采用法国梅里埃液体培养法进行解脲脲原体和人型支原体培养鉴定及药物敏感试验。结果：953例支原体阳性标本中，Uu阳性635例、Mh阳性55例、Uu＋Mh合并阳性263例。单独解脲脲原体阳性者对环丙沙星耐药率最高为87％，而单独人型支原体阳性或两者混合感染者对红霉素耐药率最高，分别为94．6％和85.16％。结论：支原体的药物敏感度检测，对于掌握支原体的流行状况和耐药程度，临床选择用药有重要的参考意义。     

3种抗真菌药治疗甲真菌病疗效对比观察

应用伊曲康唑、特比萘芬、氟康唑３种不同抗真菌药物治疗１２０例甲真菌病患者,并作疗效对比观察,结果显示,３种药物均有较艰的抗真菌疗效,特比萘芬疗效优于伊曲康唑及氟康唑,伊曲康唑疗效优于所经康唑。３种药物近、中、远期临床治愈率及真菌学阴转率,复发率Ｐ值均〉０．０５,无统计学意义。     

天疱疮合并症的研究进展

天疱疮是一种以表皮内棘层松解为特征的自身免疫性大疱性皮肤病。天疱疮可以合并银屑病、神经系统疾病、血液系统疾病、其他自身免疫性疾病以及肿瘤等。近年来有关天疱疮合并症的报道越来越多,本文对天疱疮合并症的研究进展作一综述。     

银屑病并发症的研究进展

银屑病以及银屑病的治疗可能会导致多器官和系统损害，如：代谢综合征、心血管疾病、精神疾病、感染、肿瘤、消化系统疾病、肾脏疾病、关节炎等。本文对银屑病并发症的研究进展进行了综述。     

Spatial analysis of choice of place of delivery in Nigeria

ObjectiveAccess to quality healthcare during childbirth is a crucial factor for taming maternal and child mortality and morbidity. Increasing this access in developing countries depends on understanding the factors influencing maternal healthcare decision at a geographical location. This study analyzes spatial pattern in choice of place of delivery in Nigeria.MethodData analyzed came from Nigerian Demographic and Health Survey data set. The choice of place delivery was considered a multi-categorical response and a multinomial logistic regression model used to evaluate spatial variations in choosing a particular place to deliver against home delivery.ResultsResults show a north–south divide in choosing health facilities against homes for delivery. The likelihood of institutional delivery was significantly lower for women residing in Bayelsa and the majority of the states in northern Nigeria. As women advance in age, they have more likelihood of having institutional deliveries. Other contributing factors that favor institutional deliveries include use of antenatal care services, urban dwelling, mass media and parity.ConclusionUsage of mass media to campaign for institutional deliveries particularly in northern Nigeria, among younger women and those of higher parity; encouraging the use of antenatal services and even distribution of health facilities making them easily accessible to rural women are important for enhancing chances of institutional deliveries. Also, state-specific policies in this regard are indispensable.     

综合疗法治疗复发性念珠菌性包皮龟头炎

目的探讨口服氟康唑胶囊、外用曲安奈德益康唑乳膏联合包皮环切术防治复发性念珠菌包皮龟头炎的疗效。方法采用随机分组法,治疗组(46例)给予氟康唑胶囊200mg,1次/d,连服3d,外用曲安奈德益康唑乳膏,早、晚各1次,2周为1个疗程,炎症控制后行包皮环切术。对照组(40例)给予氟康唑胶囊连服6d,曲安奈德益康唑乳膏外用2周。治疗后2周及2,4和6个月时随访。结果 2周后,两组痊愈率分别为89.13%和85.00%,差异无统计学意义(P>0.05)。两组有效率分别为100.00%和95.00%,差异无统计学意义(P>0.05)。2,4,6个月治疗组复发率分别为4.88%,9.76%和9.76%,对照组复发率分别为23.53%,38.24%和50.00%,两组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论综合疗法治疗复发性念珠菌包皮龟头炎安全有效,并能有效减少复发。     

A review of the mechanisms of action of dimethylfumarate in the treatment of psoriasis

Fumaric acid esters (FAEs) such as dimethylfumarate (DMF) are used for the treatment of adults with moderate‐to‐severe psoriasis. The mode of action of FAEs is complex. Here, we provide a comprehensive review of the literature to describe the molecular mechanisms by which DMF and its active metabolite monomethylfumarate (MMF) exert their anti‐inflammatory and immune modulatory effects. MMF can bind to the hydroxy‐carboxylic acid receptor 2 (HCA2) on the cell surface and both DMF and MMF react with intracellular glutathione following cell penetration. DMF and to some extent also MMF modulate the activity of certain cellular signalling proteins such as the nuclear factor (erythroid‐derived 2)‐like 2 (Nrf2), nuclear factor kappa B (Nf‐κB) and the cellular concentration of cyclic adenosine monophosphate. Some studies show that DMF can also affect the hypoxia‐inducible factor 1‐alpha (HIF‐1α). These actions seem to be responsible for i) the downregulation of inflammatory cytokines and ii) an overall shift from a proinflammatory Th1/Th17 response to an anti‐inflammatory/regulatory Th2 response. Both steps are necessary for the amelioration of psoriatic inflammation, although additional mechanisms have been proposed. There is a growing body of evidence to support the notion that DMF/MMF may also exert effects on granulocytes and non‐immune cell lineages including keratinocytes and endothelial cells. A better understanding of the multiple molecular mechanisms involved in the cellular action of FAEs will help to adapt and further improve the use of such small molecules for the treatment of psoriasis and other chronic inflammatory diseases.     

泼尼松治疗麻风神经炎疗效评价

目的：评价泼尼松治疗麻风神经炎的疗效.方法：对麻风急性神经炎32例和无痛性神经炎28例,共60例患者给予泼尼松顿服治疗6个月,定期评价神经功能变化.结果：急性神经炎患者痊愈率65.3%,总有效率为95.7%;无痛性神经炎患者痊愈率35.1%,总有效率为78.4%.结论：泼尼松治疗对急性神经炎患者疗效显著,6个月内的无痛性神经炎患者也有较好的疗效,可作为治疗麻风神经炎首选药物.