山柰素等7种中药单体对酪氨酸酶的激活作用

目的:研究对酪氨酸酶有激活作用中药中的一些主要单体对酪氨酸酶激活率的影响,从而为色素减退或色素脱失性皮肤病的治疗提供天然化学药物。方法:选取7种中药单体,采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定酪氨酸酶活性。结果:柚皮素、愈创木酚、滨蒿内酯、7-甲氧基香豆素对酪氨酸酶具有轻度的激活作用(P<0.05),酪氨酸酶激活率均低于20%。0.5、1.0、2.0和4.0mmol/L山柰素对酪氨酸酶激活率呈剂量依赖性升高,2.0mmol/L山柰素对酪氨酸酶的激活率达110%。山柰素与8-甲氧沙林(8-MOP)浓度相同时其酪氨酸酶激活率明显高于8-MO(PP<0.01)。结论:山柰素对酪氨酸酶有明显的激活作用。     

蒺藜防白丸对体外培养黑素细胞生物学特性的影响

目的研究蒺藜防白丸对黑素细胞(melanocytes,MC)的形态、增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法采用倒置显微镜观察细胞形态,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定蒺藜防白丸对黑素细胞增殖的影响,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH法测定黑素含量。结果随着蒺藜防白丸浓度的升高,黑素细胞树突变粗短,且数量减少;低浓度(0.001~0.5mg/mL)的蒺藜防白丸对黑素细胞增殖影响不显著(P0.05),高浓度时(1mg/mL和5mg/mL)抑制作用明显(P0.05);低浓度的蒺藜防白丸可以提高酪氨酸酶活性,其中0.05mg/mL时酪氨酸酶活性最高(P0.05),然而当蒺藜防白丸浓度继续增大,则会对酪氨酸酶活性产生抑制作用;蒺藜防白丸对黑素细胞黑素合成也有类似的影响。结论蒺藜防白丸高浓度时抑制黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成;低浓度时促进酪氨酸酶活性及黑素合成。     

茶多酚、葛根黄酮对酪氨酸酶的抑制作用研究

目的:探讨茶多酚及葛根黄酮对蘑菇酪氨酸酶活性的影响。方法:采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定药物干预前后酪氨酸酶活性,求出酪氨酸酶抑制率。结果:茶多酚对酪氨酸酶具有明显的抑制作用。茶多酚在浓度为2mmolL时表现较强的酪氨酸酶抑制活性,较0.5mmolL氢醌强(P<0.05)。葛根黄酮在浓度为2mmolL时对酪氨酸酶的抑制作用较弱,低于0.5mmolL氢醌(P<0.05)。结论:茶多酚可以下调酪氨酸酶活性。     

5-甲氧补骨脂素对不同状态酪氨酸酶活性的影响

为观察5-甲氧补骨脂素(5-MOP)对不同状态蘑菇酪氨酸酶活性的影响,采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法检测5-甲氧补骨脂素对不同状态酪氨酸酶活性的作用.5-MOP剂量依赖性上调活化态-蘑菇酪氨酸酶和静息态-蘑菇酪氨酸酶的活性,对活化态-蘑菇酪氨酸酶的上调高于对静息态的.100 μM及500 μM的5-MOP对静息态-酪氨酸酶的激活率差异显著(P<0.05),而1 mM的5-MOP对静息态的激活率则有非常显著的差异(P<0.01).5-MOP随浓度增加,对黑素细胞的增殖率及酪氨酸酶激活率呈剂量-时间依赖性的上调,以72 h作用最强.与空白对照相比,差异均非常显著.通过观察5-MOP对不同状态蘑菇酷氨酸酶活性的影响,不仅为治疗白癜风等色素障碍性皮肤病,寻找新的酪氨酸酶的激活剂和抑制剂提供新的实验和理论依据,也为探索其发病机制提供了一些思路.     

47种中药对酪氨酸酶活性的影响及酶动力学的研究

目的:研究47种治疗白癜风常用中药对酪氨酸酶的影响。方法:通过体外实验观察中药乙醇提取物对酪氨酸酶的激活作用及对酶动力学的影响。结果:19种中药的乙醇提取物能显著激活酪氨酸酶的活性,其中鸡血藤、夏枯草、女贞子、薄荷、潼蒺藜、申姜、旱莲草、黄芩、泽兰、甘草和山(毛)慈姑对酪氨酸酶的激活作用均明显高于补骨脂素;中药对酪氨酸酶的激活作用表现为竞争性、非竞争性和混合性激活作用。结论:部分中药治疗白癜风有效与其激活酪氨酸酶有关,具有混合性激活作用的中药对酶活性影响较大。     

治疗白癜风复方中药体外对蘑菇酪氨酸酶活性的作用

为了研究复方中药对酪氨酸酶活性的影响，筛选有作用的中药方剂，为中药治疗白癜风提供实验依据，通过计算机排序选定应用频次较高的治疗白癜风中药复方５首，应用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定酪氨酸酶活性。结果白驳片、白癜风丸、柴胡疏肝汤、白蚀丸组酪氨酸酶活性增高，白癜风丸组方中药补骨脂、当归，地肤子，刺蒺藜对酪氨酸酶活性均有激活作用，其中补骨脂较高，刺蒺藜次之，当归，地肤子较弱。提示刺蒺藜次之，当归，地     

196味中药乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用

目的评估196味中药乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用。方法用多巴色素法测定对酪氨酸酶的抑制作用,底物为L-多巴,在475nm处测定透过率。结果通过筛选196味中药发现光果甘草、五倍子、蝉衣、牡丹皮、苦参、珍珠绣线菊、苍耳子、桑树根皮(鲜)、大黄(生)在高浓度(500μg/mL)时对酪氨酸酶的抑制作用超过浓度为1mmol/L的熊果苷的抑制作用(P<0.01),其中以光果甘草的抑制作用最强(高浓度时抑制率达98.3%);六月雪、泥湖菜、地骨皮、炒川断、天麻、连翘、茶条槭、甘草、败酱草、黄杨(干叶)、双花等11味在高浓度(500μg/mL)时与浓度为1mmol/L的熊果苷的抑制作用相当(P>0.05);茵陈、威灵仙、白芨、紫槿、大蓟、小构树、钩藤、玉竹、熟大黄、莪术、苍术、姜黄、黄芩、虎杖、豚草、狭叶山胡椒、决明子乙醇提取物对酪氨酸酶同时有抑制作用和激活作用。结论光果甘草、五倍子、蝉衣、牡丹皮、苦参、珍珠绣线菊、苍耳子、桑树根皮(鲜)、大黄(生)、六月雪、泥湖菜、地骨皮、炒川断、天麻、连翘、茶条槭(包括阴干组和新鲜组2种)、甘草、败酱草、黄杨(干叶)、双花等20味中药具有治疗因酪氨酸酶活性异常所致的色素增加性皮肤病的应用前景。     

白癜风丸及其组方中药对酪氨酸酶活性的影响

采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定白癜风丸及其组方中药对酪氨酸酶活性的影响。为筛选对治疗白癜风有作用的中药，为中药治疗白癜风提供实验依据。结果：白癜风丸及其组方中药补骨脂、当归、地肤子、刺蒺藜可使酪氨酸酶活性增高，其中补骨脂作用最强，刺蒺藜次之，当归、地肤子较弱。白癜风丸及其组方中药对酪氨酸酶活性均有激活作用。     

桃红四物汤对酪氨酸酶活性与黑素生成的影响

目的：观察桃红四物汤对酪氨酸酶活性与黑素生成的影响。方法：采用直接添加法和血清药理学方法，观察待测物对酪氨酸酶活性及黑素生成的影响；蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定酪氨酸酶活性，氢氧化钠溶解法检测黑素生成量。结果：桃红四物汤加减水煎剂和药物血清均有明显激活酪氨酸酶活性的作用，并呈剂量依赖性。水煎剂呈现明显的促黑素生成活性。结论：桃红四物汤加减在体内外均具有激活酪氨酸酶作用，且体外有促黑素生成活性。     

龙胆草在人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系中对酪氨酸酶活性及黑素生成影响

目的：探讨龙胆草对人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成的影响。方法：培养人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系,利用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法测定细胞活力,采用酶学方法测定酪氨酸酶活性,475nm比色法测定黑素含量。结果：0．1mg／mL、0．2mg／mL和0．5mg／mL龙胆草对于共培养细胞酪氨酸酶活性有较强的剂量相关性激活作用（P〈0．01）,0．2mg／mL及0．5mg／mL龙胆草与对于共培养细胞黑素生成有较强的剂量相关性激活作用（P〈0．01）。结论：龙胆草对于共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成有较强的剂量相关性激活作用。     

治疗黄褐斑的中药复方对酪氨酸酶活性的影响

目的 研究中药对酪氨酸酶活性的影响,筛选有治疗作用的中药方剂,为应用中药治疗色素障碍性皮肤病提供实验依据。方法 通过计算机排序选定5个应用频次较高的治疗黄褐斑的复方中药,采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定酪氨酸酶活性。结果 治疗黄褐斑中药复方中六味地黄丸、补中益气汤组酪氨酸酶活性降低(水提物P<0.05,醇提物P>0.05),逍遥丸、桃红四物汤增高(P<0.05,金匮肾气丸降低P>0.05)。六味地黄丸组方中药水提物熟地黄、牡丹皮组酪氨酸酶活性增高,茯苓、山药、山茱萸降低;醇提物中牡丹皮、泽泻增高,茯苓、山药、山茱萸降低。结论 六味地黄丸、补中益气汤使酪氨酸酶活性降低(水提物);六味地黄丸组方中药熟地黄、牡丹皮使酪氨酸酶活性增高,茯苓、山药、山茱萸使酪氨酸酶活性降低,泽泻组醇提物增高,水提物降低。     

六种中药复方乙醇提取物对酪氨酸酶激活作用及动物致色素作用的研究

目的探讨中医理法和实验药效的关系及其可能的作用机制,为临床治疗白癜风优化组方提供实验依据。方法离体实验为中药复方乙醇提取物对酪氨酸酶的影响;动物实验选用棕色豚鼠为模型,观察中药致色素作用。结果Ⅰ方、Ⅱ方、Ⅲ方、Ⅵ方对酪氨酸酶有激活作用(P<0.05);6种中药复方均使豚鼠表皮基底层中含黑素颗粒细胞增多(P<0.05);Ⅱ方、Ⅲ方、Ⅵ方中药使豚鼠表皮内Dopa阳性细胞增多(P<0.05)。结论对酪氨酸酶具有激活作用的中药组成复方并不一定对酪氨酸酶有激活作用;中药复方在离体和活体上的作用并不完全平行,提示中药对黑素生成的机理,不仅限于对酪氨酸酶的激活作用。     

常用中药对酪氨酸酶的激活作用

白癜风是一种色素代谢障碍性皮肤病,目前尚无十分有效的治疗方法。在黑素的生物合成过程中酪氨酸酶起了关键性的作用,提高酪氨酸酶活性,就能提高黑素的合成量[1]。本实验旨在通过研究常用中药对酪氨酸酶的作用,筛选出其中具有激活作用的药物,用于临床治疗,以期能提高中药对白癜风的治疗效果。一、材料和方法(一)材料:实验用中药48种,包括北柴胡、炒白蒺藜、制首乌、炒僵蚕、炒乌梢蛇、炒白术、炒白芍、炒青皮、熟地黄、补骨脂、丹参、潼蒺藜、蛇床子、马齿苋、北沙参、独活、川芎、当归、桃仁、红花、三七片、菟丝子、虎杖、麦冬、旱莲草、…     

胡椒碱等6种中药单体促进黑素瘤Cloudman S91细胞株黑素合成的研究

目的研究胡椒碱、原儿茶醛、白果内脂等6种中药单体对小鼠黑素瘤细胞黑素合成的影响,初步探讨不同的中药单体影响黑素合成的作用机制。方法培养的黑素瘤CloudmanS91细胞分别以系列浓度的6种中药单体作用72h,测定细胞黑素含量、酪氨酸酶活性并与体外蘑菇酪氨酸酶活性直接测定方法(多巴速率氧化法)测定的结果进行比较。结果6种单体均能促进CloudmanS91细胞的黑素量生成。胡椒碱、原儿茶醛、白果内脂在最佳促进浓度均较100μmol/L的8-甲氧补骨脂素作用明显(P<0.05),其中0.5mmol/L胡椒碱对黑素含量促进作用最为明显。在实验浓度(0.01～1.00mmol/L)胡椒碱可促进酪氨酸酶活性,体外可直接增加蘑菇酪氨酸酶的活性;原儿茶醛对酪氨酸酶活性无明显影响,体外可直接促进蘑菇酪氨酸酶的活性;白果内脂对酪氨酸酶活性起促进作用,体外对蘑菇酪氨酸酶的活性无影响。结论中药单体胡椒碱、原儿茶醛、白果内脂可明显促进黑素瘤细胞黑素的合成,原儿茶醛的作用可能不依赖于酪氨酸酶的活化作用。     

14种中药提取成分对酪氨酸酶活性的抑制作用

目的 寻找更合理的试管内分析方法研究药物对体外酪氨酸酶活性的调节,筛选对酪氨酸酶活性抑制作用显著的中药有效成分。方法 采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定酪氨酸酶活性,观察14种中药有效成分在试管内对酪氨酸酶系统的调节作用。结果 10种中药提取的成分在不同浓度对酪氨酸酶活性、黑素生成量上显示了剂量依赖性抑制。其中丁香酚、姜黄油、没食子酸、丁香酚和姜黄素复合物(1:1)以及前两者与蜕皮激素(ecdysone)的复合物(1:1:1)对酪氨酸酶抑制活性与单体化合物熊果甙比较差异有显著性(P<0.05);丁香酚、姜黄油对酪氨酸酶呈竞争性抑制,没食子酸呈反竞争性抑制。结论 丁香酚、姜黄素、没食子酸和其他中药有效成分对酪氨酸酶具有体外抑制作用。     

89味中药乙醇提取物对酪氨酸酶活性的上调作用

知治疗白殿风７４首方剂进行计算机拆方排序,选出高频次出现中药８９味,观察这些中药乙醇提取物对蘑菇酷氨酸酶和无细胞以素自动化生成黑素量的影响。结果显示有１９味中药以物在３个不同浓度对酪氨酸酶活性、黑素生成量呈剂量依赖性激活和上调,其中赤芍、川芎、黄芩、女贞子、乌梅和降香对酪氨酸酶活性激活率和单体化合物８－甲氧补骨脂素无统计学差异。进一步研究这些中药治疗白癜风的确切机制,评估其临床应用价值是必要的。     

中药单体芍药甙促进黑素合成的机制研究

目的:确定芍药甙(paeoniflorin)对促进黑素合成的作用.方法:MTT法测定芍药甙对黑素细胞增殖影响,多巴氧化法和NaOH法测定黑素细胞内酪氨酸酶活性和黑素合成, 定量定时RT-PCR和蛋白印迹法测定酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达.结果:100 μg/mL芍药甙对细胞的生长有抑制作用;5～10 μg/mL浓度可促进促黑素细胞的增殖;芍药甙增强酪氨酸酶的活性,增加黑素合成;上调TYR,TRP-1 mRNA表达.结论:芍药甙可促进黑素细胞增殖,通过上调酪氨酸酶的活性促进黑素合成.     

白芷对人黑素瘤细胞增殖及黑素生成的影响

探讨白芷对人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响.采用MTT法测定白芷对人A375黑素瘤细胞活力的影响,NaOH裂解法测定黑素合成,并与8-MOP的结果进行比较.结果显示,白芷浓度在0.1～10mg/mL对人A375黑素瘤细胞增殖无影响.1、2和5mg/mL白芷对于人A375黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素生成有剂量相关性激活作用,2mg/mL及5mg/mL白芷与对照组相比有显著性差异(P＜0.01).白芷对于培养的人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素生成有剂量相关性激活作用.     

复方甘草酸苷注射液对B16鼠黑素瘤细胞黑素生成的影响

目的：研究复方甘草酸苷注射液对B16鼠黑素瘤细胞黑素的影响及其机制。方法：通过CCK8、流式细胞术、NaOH裂解法、多巴氧化法和Western-blotting技术检测复方甘草酸苷对B16鼠黑素瘤细胞生长,黑素合成与转运及酪氨酸酶活性和蛋白含量的影响。结果：(1) 复方甘草酸苷注射液浓度低于30μl/ml,对B16鼠黑素瘤细胞生长无明显影响;浓度大于50μl/ml,细胞生长速率减慢;浓度达到500μl/ml,细胞生长明显受抑制。(2) 浓度在10μl/ml到200μl/ml之间,黑素的合成和酪氨酸酶的活性均增加。黑素的合成在复方甘草酸苷注射液浓度为50μl/ml时增加最明显;且酪氨酸酶活性呈浓度依赖性增加,在浓度为100μl/ml和150μl/ml时达到最高。结论：复方甘草酸苷注射液有促进黑素瘤细胞黑素的合成与转运及增加酪氨酸酶活性的作用。     

补骨脂注射液联合NB-UVB对人黑素瘤A375细胞增殖及黑素合成的影响

目的通过观察补骨脂注射液联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)对人黑素瘤A375细胞的增殖、黑素的合成以及酪氨酸酶活性的影响,探讨两者协同治疗白癜风的可能机制。方法选择一定浓度的补骨脂注射液(稀释后浓度为0.5%)联合一定剂量的NB-UVB(22m J/cm2)共同作用于人黑素瘤A375细胞后,通过MTT法观察其对人黑素瘤A375细胞细胞增殖的影响,Na OH裂解法测定黑素的含量,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性的变化。结果补骨脂注射液+NB-UVB组中A375细胞培养至48h,72h后检测到的细胞增殖情况与单一补骨脂注射液组、NB-UVB组及空白组相比较,差异有统计学意义(P0.05)。补骨脂注射液+NB-UVB组均显示可上调细胞内酪氨酸酶的活性及黑素的生成量,且与各实验干预组及空白组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论一定浓度的补骨脂注射液(稀释后浓度为0.5%)联合一定剂量的NB-UVB(22m J/cm2)可以协同促进人黑素瘤A375细胞的增殖,上调细胞酪氨酸酶活性,从而达到促进黑素合成的效果。