尖锐湿疣组织中生存素、环氧合酶-2和血管内皮生长因子的表达及其与血管生成的关系

目的 探讨生存素、环氧合酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)在尖锐湿疣组织中的表达及其与尖锐湿疣血管生成的关系.方法 应用免疫组化PowerVision法对60例尖锐湿疣组织、21例正常包皮组织中生存素、COX-2、VEGF蛋白进行检测,根据CD105阳性的血管内皮细胞计数来测定尖锐湿疣组织微血管密度(MVD).结果 生存素在尖锐湿疣组织中阳性表达率为56.67%,正常包皮组织中为9.52%;COX-2在尖锐湿疣组织中阳性表达率为63.33%,正常包皮组织中为0;两组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05).生存素、COX-2在两组的阳性表达强度比较差异均有统计学意义(P值均<0.05).VEGF在尖锐湿疣组织、正常包皮组织中阳性表达率均为100%,但两组阳性表达强度比较差异有统计学意义(P<0.05).尖锐湿疣组织的MVD值(16.38±5.46)明显高于正常包皮组(0.62±0.44),差异有统计学意义(P<0.05).在尖锐湿疣组织中,生存素、COX-2与VEGF蛋白表达两两之间,生存素与MVD,COX-2与MVD均呈显著正相关.结论 生存素、COX-2、VEGF在尖锐湿疣组织中表达程度均高于对照组.     

p16和Rb在宫颈尖锐湿疣和鳞癌中的表达

目的: 探讨p16、Rb蛋白在宫颈尖锐湿疣(CA)和鳞癌中的表达.方法: 应用免疫组化SP法检测40例宫颈鳞癌、40例宫颈CA组织中p16、Rb蛋白的表达,并与10例正常宫颈组织对照.结果: p16在宫颈鳞癌、宫颈CA和正常宫颈组织中的阳性表达率分别为90%、35%和30%,有显著性差异(P＜0.01);这种高表达与宫颈鳞癌的淋巴结转移呈正相关(P＜0.05).Rb在宫颈鳞癌、宫颈CA和正常宫颈组织中的阳性表达率分别为10%、20%和50%,宫颈鳞癌低于正常宫颈组织(P＜0.05).结论: p16的高表达可出现在宫颈鳞癌的早期,提示与细胞恶性转化有关.p16与Rb呈负相关,验证了两者在细胞周期调节中的负反馈学说.     

Foxp3在尖锐湿疣皮损中的表达及其意义

目的: 检测Foxp3在尖锐湿疣皮损中的表达及其意义.方法: 采用免疫组织化学EnVision法检测Foxp3在25例尖锐湿疣组织、14例正常包皮中的表达.结果: ①尖锐湿疣组织Foxp3淋巴细胞阳性率显著高于正常包皮组织(P＜0.01).②尖锐湿疣组织中Foxp3+淋巴细胞表达率与皮损大小(r=0.587,P＜0.01)、个数(r=0.469,P＜0.05)及病程(r=0.491,P＜0.05)呈正相关.结论: Foxp3+淋巴细胞可能在尖锐湿疣的免疫逃逸中发挥重要作用.     

尖锐湿疣组织及邻近组织中P16和Ki-67的表达

目的: 检测P16和Ki-67在尖锐湿疣组织、邻近外观正常组织中的表达.方法: 免疫组化SP法检测43例CA组织及其邻近外观正常组织中P16和Ki-67的表达,并以18例正常组织做对照.结果:在CA组织、邻近外观正常组织以及正常对照组织中,P16的阳性表达率分别为44.19%、16.28%、11.11%,CA组与后两组间差异均有统计学意义(P<0.01和P<0.05),后两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).Ki-67的阳性表达率分别为88.37%、27.91%、27.78%,CA组与后两组间差异均有统计学意义(P<0.01),后两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论: P16和Ki-67在CA组织中表达增高,导致细胞周期失控,并促使细胞异常增殖.     

皮肤鳞状细胞癌组织中垂体瘤转化基因和碱性成纤维细胞生长因子蛋白及mRNA的检测与分析

目的 探讨垂体瘤转化基因(PTTG)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在皮肤鳞状细胞癌(皮肤鳞癌)中的作用及其临床病理意义.方法 采用原位杂交及免疫组化的方法检测42例皮肤鳞癌组织及42例正常皮肤组织中PTTG、bFGF蛋白及mRNA的表达.结果 皮肤鳞癌组织中PTTG和bFGF蛋白(27/42、64.3％和31/42、73.8％)及mRNA(25/42、59.5％和29/42、75.0％)阳性表达率均显著高于正常皮肤组织蛋白(5/42、11.9％和9/42、21.4％)及mRNA表达(3/42、7.1％和7/42、16.7％),组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05):PTTG蛋白和mRNA与皮肤鳞癌的组织学分级密切相关(P＜ 0.05);PTTG与bFGF的蛋白及mRNA表达均呈正相关(P＜0.05).结论 PTTG和bFGF蛋白及mRNA表达率升高可能与皮肤鳞癌的发病相关.     

Livin和PCNA在尖锐湿疣组织中的表达和意义

目的：探讨凋亡抑制蛋白Livin和PCNA在尖锐湿疣组织中的表达和意义。方法：采用免疫组化SP法分别检测Livin和PCNA蛋白在48例尖锐湿疣组织和10例正常上皮组织中的表达。结果：尖锐湿疣组织中Livin和PCNA蛋白阳性表达率分别为81.25%、89.58%,对照组Livin和PCNA蛋白阳性表达率分别为30.00%、40.00%;尖锐湿疣组织中Livin和PCNA蛋白阳性表达强度多为（＋＋）～（＋＋＋）,对照组多在（-）～（＋＋）。两组Livin和PCNA阳性表达率及表达强度差异均具有统计学意义（P〈0.05）。尖锐湿疣组织中Livin和PCNA表达有相关性（r=0.37,P〈0.01）。结论：尖锐湿疣组织中存在Livin和PCNA高表达,Livin和PCNA的高表达可能对尖锐湿疣的发生发展有一定作用。     

XIAP和caspase-9在尖锐湿疣组织中的表达

目的：检测XIAP和caspase-9在CA组织中的表达。方法：采用免疫组化方法分别检测72例CA组织和20例正常包皮组织中XIAP和caspase-9蛋白的表达。结果：CA组织中XIAP蛋白的阳性表达率（56.94％）高于对照组（15.00％）,其差别有统计学意义（P＜0.05）;而caspase-9蛋白的阳性表达率（37.50％）较对照组（70.00％）低,其差别亦有统计学意义（P＜0.05）。两种蛋白在CA组织中的表达呈负相关(r=-0.83,P＜0.05)。结论：XIAP抑制caspase-9的活性和表达,两者共同参与CA的发病过程。     

尖锐湿疣角质形成细胞中陷窝蛋白1的表达与细胞增殖和凋亡的相关性

目的 探讨陷窝蛋白1在尖锐湿疣角质形成细胞中的表达及其与角质形成细胞增殖和凋亡的相关性.方法 免疫组化En Vision法和TUNEL技术检测40例尖锐湿疣皮损组织和10例健康人包皮组织中角质形成细胞陷窝蛋白1、增殖细胞核抗原的表达和细胞凋亡,计算陷窝蛋白1平均吸光度、增殖指数和凋亡指数,比较两组之间的差异,并分析尖锐湿疣组中陷窝蛋白1表达与增殖指数、凋亡指数的相关性.针对陷窝蛋白1基因设计3条siRNA,用脂质体转染法将siRNA导人HaCaT细胞,用荧光定量PCR方法筛选出于扰效果最佳的siRNA,转染HaCaT细胞为实验组,转染非特异序列的细胞为阴性对照组,未转染的细胞为空白对照组.Western印迹和免疫荧光检测转染48 h后陷窝蛋白1的表达水平;MTS法分别测定干扰陷窝蛋白1基因24、48、72 h后HaCaT细胞增殖的变化;流式细胞仪(FCM)检测干扰陷窝蛋白1基因48 h后HaCaT细胞的凋亡情况.结果 尖锐湿疣角质形成细胞中陷窝蛋白1的表达(0.042±0.021)显著低于正常包皮组织(0.181±0.075),差异有统计学意义(t=5.843,P＜0.001).尖锐湿疣皮损中角质形成细胞的增殖指数(65.63％±19.86％)和凋亡指数(24.12％±10.86％)均显著高于正常包皮组织(23.51％±4.00％,3.13％±1.12％),两组差异有统计学意义(t=12.440、11.970,均P＜ 0.001).尖锐湿疣组陷窝蛋白1表达与增殖指数呈显著负相关(r=-0.798,P＜0.05),与凋亡指数呈显著正相关(r=0.825,P＜ 0.05).荧光定量PCR显示siRNA-2在浓度25 nmol/L下抑制效果最佳.Western印迹和免疫荧光显示,转染siRNA 48 h后,实验组陷窝蛋白1的表达显著低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05).MTS结果显示,实验组细胞24、48和72 h时的A值分别为0.563±0.013、0.628±0.006和0.811±0.018,高于空白对照组(0.541±0.009、0.575±0.012和0.722±0.004)和阴性对照组(0.536±0.006、0.571±0.015和0.719±0.002),差异有统计学意义(均P＜0.05),空白对照组和阴性对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).实验组HaCaT细胞凋亡率为(8.90％±0.06％),低于空白对照组(20.59％±0.87％)和阴性对照组(20.64％±0.09％),差异有统计学意义(均P＜ 0.05),空白对照组和阴性对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 尖锐湿疣角质形成细胞中陷窝蛋白1表达下降,可能与角质形成细胞增殖加快、细胞凋亡减少有关.     

朗格汉斯细胞与尖锐湿疣的发病与复发机制的探讨

目的:探讨尖锐湿疣(CA)组织中朗格汉斯细胞(LC)的变化。方法:选取尖锐湿疣组30例,正常对照组10例,采用免疫组化法对尖锐湿疣组织和正常组织进行CD1a、S-100蛋白、HLA-DR检测,统计表达阳性的LC数量并观察其形态。结果:尖锐湿疣组织中的CD1a、S-100蛋白、HLA-DR阳性的LC表达均比正常组织降低。复发组与无复发组的表达也有差异。结论:尖锐湿疣组织中存在着LC的缺失和抗原提呈功能异常,这可能与尖锐湿疣的发病与复发有关。     

HPV6型E7在尖锐湿疣初发与复发组织中的表达

目的本研究旨在分析HPV6型早期蛋白E7在尖锐湿疣初发、复发与正常组织中的表达情况,以探讨早期蛋白E7在尖锐湿疣病情转归中的生物学意义。方法采用u ltrasensitiveTM s-p免疫组化法对56例初发尖锐湿疣患者的活检组织,35例复发尖锐湿疣患者的活检组织及27例正常宫颈上皮组织中的HPV6型E7蛋白的表达情况进行测定。结果56例初发尖锐湿疣患者HPV6型E7蛋白的阳性表达率为69.5%,35例复发性尖锐湿疣患者的活检组织中HPV6型E7蛋白的阳性表达率为71.4%,27例正常宫颈上皮组织中HPV6型E7蛋白的阳性表达率为0。尖锐湿疣患者初发与复发组织的HPV6型E7蛋白表达和正常宫颈上皮组织相比均有显著性差异(P<0.001)。结论HPV6型早期蛋白E7与尖锐湿疣的发生密切相关,在尖锐湿疣的发展中也起着重要的作用,与其复发存在一定的关系,但没有统计学意义。HPV6型早期蛋白E7与尖锐湿疣的病情转归的联系尚需进一步研究。