不育男性精子核成熟度的临床价值评估

目的评估精子核成熟度在男性不育症中的临床应用价值。方法收集80例患不育症的育龄期男性的精液标本,与40例配偶已自然受孕的正常男性精液标本进行对比研究,分析两组对象精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、精子核成熟度等指标之间的差异,评估精子核成熟度在男性不育症中的临床应用价值。结果不育组与正常生育组在年龄、身高、体重、精液体积、精液PH值、精子浓度、精子总活率和前向运动精子百分率等方面差异均无统计学意义(均P0.05),但不育组的正常形态精子百分率和精子核成熟度显著低于正常生育组,差异均具有统计学意义(均P0.01)。结论不育男性的精子核成熟度比正常男性低,在男性不育症的临床诊治中有一定的参考价值,值得推广应用。     

龙胆泻肝汤激活Bax/Caspase-3通路并诱导人角质形成细胞凋亡

目的：明确龙胆泻肝汤对人角质形成细胞株HaCaT细胞凋亡的影响。方法：Tunel法检测龙胆泻肝汤对HaCaT细胞凋亡的影响; DAPI染色后荧光显微镜观察HaCaT细胞凋亡形态变化; Western blot检测分析HaCaT细胞凋亡相关蛋白表达。结果：龙胆泻肝汤处理组HaCaT细胞形态发生了明显变化，凋亡比例明显高于未处理细胞组。龙胆泻肝汤作用于HaCaT细胞后活化的caspase-3和Bax的表达明显上调， Bcl-2蛋白表达下降。caspase-3特异性抑制剂Z-DEVD-FMK预处理后可降低龙胆泻肝汤诱导的细胞凋亡。结论：龙胆泻肝汤能明显诱导人角质形成细胞的凋亡，其机制可能与下调Bcl-2的表达，增高Bax和caspase-3的表达有关。     

从3例诊疗报告看精子形态学与生精细胞学检测在男科临床中的应用

近年来,精子形态学和生精细胞学检测越来越受到男科特别是生殖中心的重视,然而将未染色的精液进行形态学和细胞学分析,其对精子的畸形率及圆细胞的判断存在极大的误差。笔者通过将3例典型患者的精液染色后分析精子形态和生精细胞,做出新的病情诊断及治疗方案,从而探讨精子细胞学与生精细胞学检测在男科临床中的应用价值。     

圆头精子症患者的临床诊疗分析(附3例报告)

目的通过临床病例分析为圆头精子症的诊疗提供借鉴。方法选取2014年至2017年在北京大学第一医院就诊的3例圆头精子症患者作为研究对象。运用精子形态学染色、染色体核型分析、Y染色体微缺失分析、性激素测定等对圆头精子症患者进行临床分析。结果 3例患者精子形态学染色结果均显示精子顶体发育异常,均为圆头精子,顶体异常精子为100%。油镜观察发现,精子头部全部为圆形,无顶体,头核显示深色,充实,浓染。精液分析为弱精子症,核型和染色体均正常。激素正常。结论需重视精子形态学检测,圆头精子症患者除了圆头精子的典型特征外,精子活动力也值得关注,精液化验结果提示活动力各异。除此外无其他异常临床表型,需进一步进行基因突变分析以探讨病因及明确发生机制。     

生精细胞增殖、凋亡相关蛋白及通路的研究进展

男性在生殖过程中的主要作用是提供精子,研究男性生殖功能最关键的就是研究精子发生。精子发生指的是睾丸生精小管内的精原干细胞分化为成熟精子的一系列精密复杂的过程。在睾丸支持细胞、间质细胞、其他物质和因子的共同参与下,各级生精细胞经过连续不断地增殖、分裂和分化,以及圆形精子细胞的成熟和形态变化,最终形成精子释放到睾丸小管内。睾丸的血睾屏障等结构、生精细胞和支持细胞等细胞在精子发生过程中均起着重要作用,而酶、激素、信号因子等一系列因素也在这个过程中起重要的调节作用,影响精子质量和数量,从而影响生育能力。本文从分子生物学的层面,将精子发生过程中生精细胞增殖和凋亡的过程、相关因子及通路进行整理和综述,以期为相关研究提供依据。     

部分型圆头精子症患者精子形态、DNA碎片指数和精液常规参数分析

目的:对部分圆头精子症患者的精子形态、DNA碎片指数和精液常规参数进行分析,研究DNA碎片指数与其他指标之间的相关性。方法:将2016年1月~2017年1月在解放军第113医院泌尿外科生殖中心进行不育症检查的155例患者纳入研究。按照是否患有部分型圆头精子症将患者分为观察组和对照组,观察组83例患者,对照组72例患者。检测形态正常精子率、精子总数、精子前向活动率(progressive motility,PR)、非前向活动率(non-progressive motility,NP)、不活动率(Immotile,Im)、精子DNA碎片指数(DNA fragment index,DFI)和核精蛋白色霉素3(Chromomycin A3,CMA3)染色阳性率(%)。结果:两组患者相比,观察组患者形态正常精子率、PR和NP均低于对照组患者,其差异均具有统计学意义(均P0.05);观察组患者Im、DFI和CMA3阳性率均高于对照组患者,其差异均具有统计学意义(均P0.05)。观察组患者DFI与Im及CMA3之间均存在正相关关系(均P0.05);与形态正常精子率、PR、NP均呈负相关(均P0.05)。结论:DFI是反应部分型圆头精子症患者精子功能的重要标志物,与精子染色质异常密切相关。     

来氟米特对角质形成细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究来氟米特对角质形成细胞增殖及凋亡的影响。方法 以良性角质形成细胞株HaCaT为研究对象．用结晶紫染色及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化法反映细胞增殖变化；HE染色观察药物处理前后细胞形态变化：流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率变化。结果 μmol/L来氟米特处理HaCaT细胞，24h后表现出对上皮细胞增殖的抑制作用，PCNA阳性细胞开始减少。随着时间延长和药物剂量的加大．药物的抗增殖作用愈加明显，PCNA阳性细胞进一步减少，当药物浓度达到200μmol/L时，视野中未见PCNA阳性细胞。即药物对HaCaT细胞的抑制作用呈时间、剂量依赖关系。药物处理后，细胞变小或变圆，膜皱缩，核浓缩、深染，核分裂像减少。细胞S期比例增加，G2M期比例减少，G1期之前未见与药物剂量相关的凋亡峰。结论 来氟米特可抑制haCaT细胞增殖，对细胞凋亡影响不大。     

亚砷酸对角质形成细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究亚砷酸对不同角质形成细胞增殖及凋亡的影响。方法：以体外培养的角质形成细胞株为对象，不同浓度的亚砷酸处理细胞后，用MTT比色分析法反映细胞增殖变化，用光镜和电镜观察细胞形态，流式细胞仪测定细胞周期分布及凋亡峰的出现，Annexin-V染色荧光照相证实凋亡的发生。结果：0.5-10μmol/L亚砷酸对良性角质形成细胞株HaCaT细胞有明显抑制作用，并呈时间和剂量依赖关系，而该浓度砷剂对A431细胞无明显影响。光镜及HE染色后观察均显示随浓度升高、时间延长，凋亡细胞增多。高于上述范围HaCaT细胞变性死亡增多，流式细胞仪检测细胞周期分布变化，G2M期细胞比例及亚G1期凋亡明显升高，Annexin-V法显示有绿色荧光的阳性细胞。而A431细胞无明显形态和细胞周期分布变化。结论：一定浓度的亚砷酸可抑制HaCaT细胞增殖，并具有诱导凋亡作用，对皮肤鳞状细胞癌A431细胞无明显影响，提示良性表皮角质形成细胞株HaCaT对亚砷酸的处理比鳞状细胞癌A431细胞株更敏感。     

262例不同年龄段正常男性孕前精液质量分析

目的:了解目前柳州地区孕前不同年龄阶段正常男性精液质量现状。方法:针对2012年5月至2013年10月来我院孕前保健专科做正常孕前体检的262对准父母中自愿做孕前体检的男性,采用精液自动分析仪分析精液的密度、活力等。用巴氏染色分析精子正常形态。结果:本地区受检262名男性中,精液量平均2.5m L,PH平均值为7.4,精子平均密度50.5×106/m L,精子平均活率38.1%,精子平均活力30.5%,精子平均正常精子形态13.1%。根据年龄分段显示,精子密度和活力、活率无统计学差异,正常精子形态组有统计学差异。结论:在孕前保健中男性精液质量检查非常必要,特别是超过40岁的准夫妇,不但女性要加强孕前保健,男性的孕前保健也非常关键。     

甲磺酸伊马替尼对人黑素瘤M14细胞系凋亡的影响

目的 探讨甲磺酸伊马替尼对体外培养人黑素瘤M14细胞凋亡的影响。方法 Annexin-V/PI法和TUNEL法观察5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L三种浓度甲磺酸伊马替尼对M14细胞凋亡的诱导情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率变化,DAPI染色观察细胞凋亡形态变化,Western印迹分析检测bcl-2、bax蛋白的表达。结果 三种浓度甲磺酸伊马替尼均能不同程度的诱导M14细胞凋亡,细胞周期显示S期细胞和凋亡细胞比例高于和对照组（P ＜ 0.05）,G2/M期细胞比例下降（P ＜ 0.01）。Annexin-V/PI法检测示甲磺酸伊马替尼组早期凋亡率（Q4%）的升高（P ＜ 0.01）。TUNEL法检测凋亡阳性细胞的数目高于对照组（P ＜ 0.01）。经20 μmol/L甲磺酸伊马替尼作用后DAPI染色示凋亡细胞形态改变,同时Western印迹分析示bcl-2表达上调和bax表达下调。结论 甲磺酸伊马替尼能影响细胞周期进程,诱导M14细胞凋亡,可能与活化线粒体凋亡途径有关。     

男性性功能障碍导致不育的助孕治疗分析

目的：了解男性性功能障碍不育患者的辅助生殖技术助孕治疗状况。方法：选择近4年在我院因男性性功能障碍进行IUI和IVF—ET或ICSI治疗的18对不孕症夫妇做研究对象，统计他们的不孕因素、周期妊娠率和累积妊娠率。结果：IUI的周期妊娠率为18．2％，累积妊娠率为47．1％；IVF／ICSI的周期妊娠率为60．0％，累积妊娠率为75．0％。总体上，平均每对夫妇经历2．7周期的助孕治疗，获得累积临床妊娠率61．1％。结论：辅助生殖技术是解决性功能障碍患者的生育问题的快捷有效方法。     

Andrologie

Andrology deals with male infertility, erectile dysfunction, loss of libido, ejaculatory disorders, hypogonadism, delayed puberty, male contraception, gynecomastia and aspects of the aging male. New trends in reproductive medicine have influenced the evaluation of andrological patients in recent years. Even loss of ejaculated spermatozoa does not necessarily exclude paternity since testicular sperm extraction has been established in men with obstructive or non-obstructive azoospermia. The most important new aspect in andrology is the publication of the World Health Organization laboratory manual for semen analysis in 2010. Dramatic changes concerning sperm motility and morphology must now be considered for the interpretation of standard semen parameters.     

Erectile dysfunction and fertility related to cigarette smoking

Background Many comprehensive review articles on the adverse effects of cigarette smoking on health have been published, but relatively few have focused on the effect of smoking on erectile function and fertility. Data substantiating the damage caused by smoking to the reproductive system may be helpful in enhancing anti-smoking campaigns. Aim To critically review the literature on the effects of smoking on erectile function and fertility. Observations Whilst most of the studies were performed on groups of men with sexual and reproductive disorders and none included a control for alcohol consumption, it appears that the association between cigarette smoking and impotence is significant. The pathogenetic mechanism of smoking-induced erectile dysfunction is associated with vascular (arterial and venous) dysfunction. The biochemical defects remain to be determined. Endothelium-derived relaxing factor, nitric oxide, prostaglandin, prostacycline and thromboxane-changes may explain smoking-induced impotence. Studies concerning the endocrine profile showed elevated serum estradiol levels in smokers. The results of testosterone levels were contradictory. Mosl studies on the association between cigarette smoking and sperm density indicated a 13% to 17% decrease in smokers compared to nonsmokers. Cigarette smokers had also greater numbers of leukocytes in (he seminal fluid and lower sperm penetration assay scores. Although the studies conducted to date do not indicate lhat smoking among males is a risk factor for delayed or difficult conception, this might not be the case in men with marginal semen quality and other risk factors. Conclusions Cigarette smoking is associated with vascular (arterial and venous) impotence, elevated serum estradiol levels and lowered sperm density. These associations are of greater relevance in patients with pre-existing impaired function, as compared to healthy, potent and fertile individuals.     

睾丸精子卵母细胞浆内注射治疗梗阻性无精子症所致不育的临床体会

目的:探讨睾丸精子单精子卵母细胞浆内注射(ICSI)治疗梗阻性无精子症所致的男性不育的疗效,以完善辅助生殖技术。方法:选男性不育症夫妇905例分成两组:ICSI组和TESE+ICSI组。ICSI组自行排精后精液内可以找到正常形态活精子的少精症患者行ICSI治疗共863例,TESE+ICSI组经附睾抽吸取精失败而睾丸切开后可找到形态正常活精子的梗阻性无精子症患者用睾丸内精子行ICSI治疗共42例,两组患者的女方均给予超促排卵用药后获取卵母细胞。结果:ICSI组863周期,获得卵子9650个,其中成熟卵母细胞7879个,ICSI7879个,移植808个周期,妊娠256例,妊娠率为31·68%。TESE+ICSI组42周期,获得卵子567个,其中成熟卵母细胞479个,ICSI479个,移植42个周期,妊娠20例,妊娠率为47·60%。对两组的受精率、优质胚胎获得率、临床妊娠率进行比较及统计学分析,TESE+ICSI组的受精率稍低于ICSI组(P<0·05),而两组的优质胚胎获得率及临床妊娠率无显著差异(P>0·05)。结论:睾丸切开取精子进行ICSI治疗同样能够得到较高的受精率、优质胚胎获得率和临床妊娠率。     

精液外泌体在生殖系统中的研究进展

除了运输精子与卵子受精外,精浆(seminal plasma,SP)在生育过程中具有调节母胎免疫耐受、促进精卵结合、调控着床前胚胎发育及表观遗传等重要作用。外泌体(exosomes,Exos)为最新发现的细胞间通讯形式,可通过与靶细胞融合或传递其内载物参与许多生命活动。精液外泌体(seminal exosomes,SE)大量存在于SP中。研究表明,SE可广泛参与男性及女性生殖活动的调控,如精子完整性、精子获能、精子活力及母胎免疫等。因此,本文对SE在生殖系统中的研究做一综述,以期为男性不育、女性不孕的诊疗及辅助生殖技术的完善提供相应的理论依据。     

活性氧与精子DNA损伤的保护

适量的活性氧(reactive oxygen species,ROS)有利于精子的获能和顶体反应,高水平的活性氧会导致氧化应激.在氧化应激的作用下发生脂类氧化反应,精子DNA碱基对活性氧非常敏感,在脂类过氧化下会引起碱基修饰、DNA键断裂及染色质交联,使精子DNA受损.精子DNA损伤后会导致男性不育、反复自然流产、后代遗传风险和辅助生殖技术治疗的失败.因此,对精子DNA损伤的预防和干预就显得尤为重要.     

解脲支原体感染泌尿生殖器与射出精液细胞凋亡的关系研究

目的：了解解脲支原体(UU)感染泌尿生殖器后是否会引起射出精液细胞的异常凋亡，精液细胞凋亡与精液质量的关系，感染部位及炎症程度与精液细胞凋亡的关系。进而分析解脲支原体感染泌尿生殖器后所致的射出精液细胞凋亡与男性不育的关系如何?探讨射出精液细胞凋亡增高是否解脲支原体感染泌尿生殖器后引起男性不育的一个机制环节。方法：用TUNEL法(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口荧光素末端标记法)及流式细胞仪检测19例泌尿生殖器UU感染的射出精液细胞凋亡率。结果：解脲支原体感染组中，不育患(UUif)的射出精液细胞凋亡率明显高于生育力正常(UUf)。精子活动度和精子细胞数均与射出精液细胞凋亡率呈负相关。解脲支原体感染组(UU )的凋亡率比正常对照组(UU-)高。解脲支原体感染组中，前列腺炎组(UUp)的射出精液细胞凋亡率比单纯尿道炎组(UUur)高。结论：男性不育与射出精液细胞凋亡有关，后与精液质量下降有关。解脲支原体感染泌尿生殖器后引起射出精液细胞凋亡可能是UU感染所致男性不育的一个发病机制环节，UU所致的射出精液细胞凋亡可能通过改变精液质量从而引起男性不育。     

Einfluss von Lebensstil und Umweltfaktoren auf die reproduktive Gesundheit des Mannes

The identification of potential environmental hazards may be clinically relevant in the diagnosis of male infertility. Knowledge about these factors will improve prevention of fertility disorders. Apart from drugs or factors related to lifestyle such as alcohol and tobacco smoke, various environmental and occupational agents, both chemical and physical, may impair male reproductive function. Reproductive toxicity may evolve at the hypothalamic-pituitary, testicular, or post-testicular level; endpoints comprise deterioration of spermatogenesis and sperm function as well as endocrine disorders and sexual dysfunction. With regard to the complex regulation of the male reproductive system, the available information concerning single exogenous factors and their mechanisms of action in humans is limited. This is also due to the fact that extrapolation of results obtained from experimental animal or in vitro studies remains difficult. Nevertheless, the assessment of relevant exposure to reproductive toxicants should be carefully evaluated during diagnostic procedures of andrological patients.     

性科学研究进入微观世界——创建性科学第三个高潮“中医药时代”

阮芳赋教授预言:21世纪是华人性学研究的第三高峰。如何缔造和实现性学研究的第三高峰,是摆在面前的重要课题,笔者提出管窥之见,供参考。任何研究都不能离开研究的目标和主体,而性学的研究"人"是研究的对象和主体,我们必须了解并根据主体的条件、内涵、关系、需求和可能性进行研究,且必须尽可能搞清楚主体(躯体)的功能与能力,以及客体(自然环境)的关系,才有可能接近客观和真实的客观规律。笔者基于人体生殖生理学和生殖病理学提出了性学研究进入微观世界的一条途径和6个方面的说明:1.人体两个性腺轴-下丘脑-垂体-睾丸轴;颌下腺-睾丸轴;2.睾丸间质细胞与支持细胞功能与性功能关系;3.睾丸间质细胞、支持细胞和生殖细胞凋亡;4.环境污染对人类生殖健康的影响;5.支持细胞凋亡与支持细胞骨架脱落;6.精液中支持细胞凋亡与细胞骨架脱落的检查与分析等。从精液脱落细胞学和口腔颌下腺细胞学与激素水平结合关系,在显微镜下观察分析结果,藉以作为评价睾丸生殖功能与性功能的指标。并提出中医中药是我们国家的瑰宝,有着丰富的养生之道,我们应该采用现代的科学技术手段,严密科学设计,深入细致进行研究,挖掘这颗璀璨的明珠,为生殖健康与性健康服务,造福人类,创建世界"中医药(汉方)时代"性学研究的第三个高潮。     

生殖激素与男性不育症患者精子形态的相关性分析

目的：研究生殖激素与男性不育症患者精子形态,探讨两者的相关性。方法：对象为2008年8月至2012年我院600例男性不育症患者,根据正常形态精子所占比例大小分为三个组,每组200例。结果：三组患者血清游离睾酮（free testosteron,FT）水平与生物活性睾酮（bioavailable testosterone,Bio-T）水平,均只有在第1组与第3组之间存在统计学的差异。另外,血清FT、Bio-T水平与正常形态精子百分率之间均存在正相关（P〈0.05）。结论：男性不育症患者血清FT和Bio-T水平越高,则正常形态精子百分率越高,提示生殖激素与男性不育症患者精子形态存在着相关性。