Forskolin调节DHA对APP/PS1转基因小鼠突触可塑性和认知功能的增强作用

目的研究Forskolin调节DHA对APP/PS1转基因小鼠突触可塑性和认知功能的影响。方法对7月龄APP/PS1小鼠给予DHA及DHA和forskolin联合进行治疗。30d后,通过行为学试验检测其认知功能;通过组织病理学试验检测脑内细胞密度及脑突触形成能力和突触标记物Synaptophysin的表达以及通过Western blotting检测脑内pCREB1蛋白含量。结果 8月龄APP/PS1小鼠海马区面积、细胞密度、Synaptophysin和脑内pCREB1蛋白均明显降低,行为学上出现了明显的认知功能障碍。单独给予DHA以及DHA和forskolin联合给药治疗后,APP/PS1小鼠海马区面积、细胞密度、Synaptophysin和脑内pCREB1蛋白均增加,认知功能障碍得到改善,并且联合给药组的效果更为显著,但是均未恢复至生理水平。结论 DHA和forskolin联合治疗后,forskolin增强DHA对APP/PS1转基因小鼠突触病理和认知障碍的治疗作用。     

AD转基因模型Tg2576鼠阳性子鼠的病理和认知行为变化

为探讨老年性痴呆(AD)转基因模型Tg2576(hAPPSWE)鼠阳性子一代鼠的病理和行为学变化,确定其是否具有亲代的性状,为AD研究提供理想的动物模型。本研究随机选取我室繁育并鉴定的子一代hAPPSWE基因阳性鼠(hAPPSWE+)和hAPPSWE基因阴性鼠(hAPPSWE-),分别在4、7、9月龄时经Y迷宫及15月龄时经水迷宫检测其行为学变化和脑内病理变化,并对皮质和海马的淀粉样斑块进行定量研究。结果显示:(1)4月龄和7月龄的子一代hAPPSWE+鼠的空间辨别学习记忆能力与hAPPSWE-鼠相比,差异无显著性(P>0.05),但9月龄时两者之间的差异有高度显著性(P<0.01);(2)在4月龄和7月龄的子一代hAPPSWE+鼠的脑组织切片上免疫组化染色未观察到淀粉样斑块,9月龄时均观察到明显的淀粉样斑块沉积,但hAP-PSWE-鼠无论在任何1个月龄均未观察到淀粉样斑块沉积;(3)定量结果显示9月龄的子一代hAPPSWE+鼠的皮层淀粉样斑块占整个皮层面积的0.21%,海马的淀粉样斑块占海马面积的0.14%,而15月龄时其淀粉样斑块的数量和面积增加明显,占整个皮层面积的4.26%,海马的淀粉样斑块占海马面积的2.51%。上述结果表明子一代hAPPSWE+鼠的行为学变化及脑内淀粉样斑块出现的时间、部位、类型与亲代一致。因此,子一代hAPPSWE+鼠和其亲代一样可用于AD研究,本实验的定量结果也为评价AD的干预治疗效果提供了参考数据。     

APP/PS1双转基因AD小鼠早期内质网应激诱导的凋亡

目的观察APP/PS1双转基因AD小鼠神经细胞凋亡,及内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白（GRP78）和内质网促凋亡因子半胱氨酸蛋白酶-12（Caspase-12）表达的改变,探讨APP/PS1双转基因AD小鼠早期内质网应激诱导的凋亡。方法选取5、7月龄的APP/PS1双转基因小鼠和同月龄同背景的野生型小鼠（WT）,分为5月龄WT组、5月龄APP/PS1组、7月龄WT组和7月龄APP/PS1组,每组6只,应用原位细胞凋亡检测法（TUNEL）检测凋亡细胞,免疫组织化学方法检测其脑内GRP78和Caspase-12的表达水平。结果 TUNEL检测凋亡率分别为7月龄APP/PS1鼠（35.0±6.31）%、5月龄APP/PS1鼠（9.0±2.78）%、7月龄WT鼠（4.0±1.89）%、5月龄WT鼠（4.0±1.83）%,其中7月龄APP/PS1鼠凋亡率显著升高（P〈0.05）;免疫组织化学检测GRP78阳性率分别为7月龄APP/PS1鼠（30.0±5.43）%、5月龄APP/PS1鼠（10.0±2.12）%、7月龄WT鼠（2.0±1.71）%、5月龄WT鼠（3.0±1.41）%,7月龄APP/PS1鼠GRP78表达明显升高（P〈0.05）;免疫组织化学检测Caspase-12阳性率分别为7月龄APP/PS1鼠（33.0±5.98）%、5月龄APP/PS1鼠（12.0±2.60）%、7月龄WT鼠（4.0±2.56）%、5月龄WT鼠（2.0±1.79）%,7月龄APP/PS1鼠Caspase-12表达明显升高（P〈0.05）。结论 7月龄的APP/PS1双转基因小鼠出现了内质网应激诱导的凋亡。本实验结果为临床AD早期预防和治疗提供了重要依据。     

EGFP示踪NSCs海马移植对APP/PS1转基因鼠认知功能及基底前脑胆碱能神经元的影响

目的观察神经干细胞(NSCs)移植对APP/PS1双转基因小鼠认知功能及基底前脑胆碱能神经元的影响,并探讨其可能机制。方法体外分离培养EGFP转基因小鼠胎脑来源NSCs,24只12月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分入实验组(Tg-NSCs组)和AD对照组(Tg-AD组),每组12只,12只同月龄雄性野生型小鼠作为正常对照组(WT组),Tg-NSCs组进行EGFP示踪NSCs移植,其余两组进行等量磷酸盐缓冲液注射,移植部位为双侧海马区。移植4周后采用Morris水迷宫检测三组小鼠学习记忆功能,免疫荧光组化法和Western blot检测基底前脑胆碱能神经元的变化情况;Q-PCR检测海马神经营养因子NGF、BDNF、NT3的mRNA水平的变化。结果①体外悬浮培养的神经球表达EGFP阳性,免疫荧光检测显示神经干细胞特异性标志物Nestin阳性。移植4周后,可见EGFP阳性NSCs在海马注射移植部位存活并向胼胝体,海马深部和齿状回迁移,基底前脑未见EGFP阳性细胞。②与Tg-AD组相比,Tg-NSCs组基底前脑ChAT神经元及蛋白水平均增加(P<0.05),但ChAT蛋白表达低于WT组水平(P<0.05)。③Tg-NSCs组海马区神经营养因子NGF、BDNF、NT3的mRNA表达增加,高于Tg-AD组(P<0.05),且与WT组相比差异无统计学意义(P>0.05)。④水迷宫结果显示Tg-NSCs组学习记忆功能改善优于Tg-AD组(P<0.05),但仍低于WT组水平(P<0.05)。结论 NSCs海马移植并不能对该转基因鼠基底前脑胆碱能神经元丢失产生直接的替代与补充,可能通过分泌神经营养因子对基底前脑胆碱能神经元起到保护作用,从而促进其认知功能的恢复。     

规律运动影响AD模型小鼠脑内单羧酸转运蛋白表达并改善认知功能

目的:通过对不同月龄段的AD模型小鼠进行长时间的规律有氧运动训练,来进一步阐述单羧酸转运蛋白(MCTs)在中枢的表达改变与AD模型小鼠认知功能的关系。方法:选择2、6、10月龄的AD模型小鼠(APP/PS1双转基因小鼠)和WT小鼠(C57BL/6J),给予8周的游泳训练至4、8、12月龄作为实验组。同时选择未进行游泳训练的4、8、12月龄AD模型小鼠和WT小鼠做为对照组。采用Morris水迷宫进行行为学检测(隐蔽平台实验和空间探索实验),采用Western Blot检测脑组织匀浆中MCT1、MCT2、MCT4蛋白表达水平,采用免疫组织化学染色方法观察其大脑皮层和海马区MCT1、MCT2、MCT4的表达情况。结果:(1)Morris水迷宫结果显示:在隐蔽平台实验中,经过8周游泳训练后的小鼠在前两天内较对照组相比平均逃避潜伏期和逃避路程明显降低,差异具有统计学意义(P0.05)。在空间探索实验中,实验组小鼠60 s内在目标象限停留的时间明显高于对照组小鼠(P0.05)。(2)Western Blot检测8月龄实验组和对照组小鼠脑组织匀浆MCTs的表达量,结果显示:游泳训练后实验组AD模型小鼠和WT小鼠MCTs表达量较未训练小鼠相比显著增加(P0.05)。(3)脑组织免疫组织化学染色结果显示:实验组中MCT1、MCT4在大脑皮层及海马区的表达较对照组升高(P0.05);而MCT2表达水平在两组中没有显著性差异(P0.05)。结论:长期的规律有氧运动增加了AD模型小鼠脑内不同亚型单羧酸转运蛋白的表达量,改善了中枢神经系统能量代谢状态,提高了认知功能。     

EPA对创伤性脑损伤APP/PS1转基因小鼠淀粉样肽沉积和认知功能的作用

目的探究二十碳五烯酸(EPA)对创伤性脑损伤APP/PS1转基因小鼠淀粉样肽沉积和认知功能障碍的作用。方法对3月龄APP/PS1小鼠施行创伤性脑损伤(TBI)手术并在手术当天即开始对其进行为期30天的EPA乙酯治疗(腹腔注射,1g/Kg/d)。TBI手术30天后(小鼠4月龄),通过HE染色和免疫组织化学检测小鼠脑内淀粉样肽(Aβ)负荷,通过Y-迷宫自发变更试验和高架十字迷宫试验检测小鼠认知功能状态。结果 TBI手术造成小鼠皮层明显空洞形成和组织缺损,4月龄APP/PS1/小鼠海马区开始出现Aβ斑块,TBI可显著加重APP/PS1小鼠海马区Aβ负荷,而EPA治疗后APP/PS1小鼠海马区Aβ负荷可恢复至生理水平。4月龄APP/PS1小鼠并未出现显著认知功能损害,TBI可使APP/PS1小鼠探索活跃度、空间工作记忆和危险识别能力明显降低,EPA治疗可恢复至未损伤小鼠同等水平。结论EPA治疗可降低创伤性脑损伤AD模型小鼠脑内淀粉样斑块沉积和改善认知功能障碍。     

海马区神经电信号相位同步化的初步研究

大脑各个区域的神经电活动存在各种不同频率的振荡,而theta节律振荡(5～10 Hz)是海马区神经活动具有代表性的特征.本文用海马区theta节律显著性检测和theta节律相位同步化的方法来分析多电极记录的神经元放电及其局部场电位信号,验证了theta节律成分的显著性和动物行为之间的关系,并首次研究了小鼠在不同行为状态下左右海马神经电活动之间的相位同步化的差异.     

Drebrin和SYP在APP/PS1转基因AD小鼠海马内的表达与认知障碍的关系

已知Alzheimer病(AD)患者脑内的主要病理变化之一是树突棘与突触的退化,而树突棘与突触的正常发育及病理改变均与树突棘肌动蛋白结合蛋白drebrin和突触前成分内突触素(synaptophysin,SYP)的表达水平密切相关。为探讨drebrin和SYP的表达与AD认知障碍之间的关系,本实验先采用Morris水迷宫法观测了6、9、12月龄APP/PS1转基因小鼠和同种野生型小鼠的学习记忆能力;再用Western blot法检测了其海马内drebrin和SYP蛋白表达水平。结果显示:9月龄APP/PS1转基因小鼠海马内drebrin蛋白的表达水平已有下降,其学习记忆能力也相应地降低,12月龄时二者下降明显;但作为突触前成分中的SYP蛋白表达水平的下降则较前二者的出现为迟。本结果提示,drebrin的表达下降在AD早期行为学改变的分子机制中发挥重要的作用,而SYP的表达下降则在drebrin下降之后参与AD的进一步发展。     

APP/PS1小鼠嗅球神经元的早期树突分支和长度及钾-氯离子共运转体2蛋白表达异常

目的 探讨嗅球(OB)神经元的形态和相关蛋白的变化，探讨导致阿尔茨海默病(AD)嗅觉功能障碍的原因。方法 采用高尔基-考克斯(Golgi-Cox)染色技术评估AD模型小鼠(APP/PS1小鼠)的OB和前梨状皮质(aPC)的神经元形态变化；使用Sholl分析对神经元的形态学进行测量；采用Western blotting检测蛋白质表达水平。结果 高尔基-考克斯染色结果显示，在3～5月龄，该模型鼠尚未表现出AD的病理特征及认知障碍时，OB已经发生神经元树突长度和分支数量的显著减少。Western blotting检测发现，对神经元形态和突触功能至关重要的钾-氯离子共转运体2(KCC2)蛋白表达在3～5月龄APP/PS1小鼠的OB中显著降低。结论 异常的神经元形态和KCC2信号途径改变可能是AD早期嗅觉功能障碍的基础；维持KCC2信号正常有望成为干预AD早期嗅觉异常的有效途径之一。     

Fmr1小鼠的跳台实验和海马哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的关系

目的观察Fmr1基因敲除(KO)小鼠跳台实验行为及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的变化,探讨mTOR与KO小鼠学习记忆能力的关系。方法利用PCR技术鉴定20只4周龄FVB近交系KO及20只野生型(WT)小鼠,随机分为行为学前WT组、行为学后WT组、行为学前KO组和行为学后KO组。通过避暗实验测试行为学WT及KO组小鼠的学习记忆能力,Western blot检测各组海马区p-mTOR及mTOR表达的变化。结果跳台实验第1天KO鼠的潜伏期较WT鼠短,错误次数较WT鼠多。跳台实验第2天KO鼠的潜伏期较WT鼠短,错误次数较WT鼠多。Western blot检测显示:KO鼠空白组mTOR表达较WT鼠空白组增高(P0.05);KO鼠空白组PmTOR与WT鼠空白组相比表达增高(P0.05)。结论 Fmrp对mTOR信号通路具有负性调节作用;Fmr1基因敲除小鼠学习记忆能力障碍与mTOR信号通路受损有关。     

法舒地尔通过促进APP/PS1双转基因小鼠神经再生改善认知功能

目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(fasudil)在治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型——淀粉样前体蛋白/早老素1双转基因(amyloid precursor protein/presenilin 1 double transgenic,APP/PS1 Tg)小鼠中促进神经再生并改善认知功能的作用。方法:将8月龄雄性APP/PS1 Tg小鼠作为AD模型,随机分为fasudil组(腹腔注射fasudil 25 mg·kg~(-1)·d~(-1))和生理盐水(normal saline,NS)组(腹腔注射等体积生理盐水),取同月龄同性别野生型(wild type,WT)小鼠为WT组,连续治疗2个月;应用Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)实验和SMART 3.0行为学记录系统检测、记录并分析各组小鼠空间认知功能;免疫荧光组织化学染色法检测小鼠脑内海马齿状回和CA3区及大脑皮层p-Tau、ChA T、BrdU和nestin的蛋白表达水平和分布;Western blot法检测小鼠脑组织p-APP(Thr668)和p-Tau的蛋白水平。结果:在MWM实验中,与WT组小鼠相比,NS组10月龄APP/PS1 Tg小鼠从入水点到达平台的时间增加,在平台所在象限活动时间占总活动时间的比例及在平台所在象限游泳距离占总路径的比例减少;而fasudil治疗明显拮抗上述行为学指标,改善APP/PS1 Tg小鼠认知功能。此外,与NS组小鼠相比,fasudil明显减少小鼠p-Tau蛋白水平,增加p-APP蛋白水平,使海马区胆碱能神经元数量增多,促进神经元的轴突再生,动员脑内海马齿状回颗粒下区和脑室下区的内源性神经干细胞增殖。结论:Fasudil通过促进APP/PS1 Tg小鼠中枢神经系统p-Tau蛋白水平下调,增加可溶性APP水平,促进胆碱能神经元再生,动员内源性神经干细胞增殖,从而改善APP/PS1双转基因小鼠空间认知功能。     

游泳运动对早期阿尔茨海默模型小鼠认知功能及海马突触可塑性的影响

目的评估游泳运动对早期阿尔茨海默模型小鼠认知功能及海马突触可塑性的影响。方法选取4～5月龄C57BL/6雄性小鼠和3xTg(APP/Tau/PS1三转基因)雄性小鼠各20只,分为4组(n=10),野生对照组(WT+C),野生游泳组(WT+S),3xTg对照组(Tg+C),3xTg游泳组(Tg+S)。对照组常规饲养,游泳组每日训练2次,每次10min,训练周期30日。利用经典Morris水迷宫实验(MWM)和旷场实验评估小鼠行为学差异,利用长时程增强(LTP)评估海马突触可塑性。结果 Tg+S组小鼠逃避潜伏期显著低于Tg+C组,在平台所在象限停留时间和移动距离显著高于Tg+C组;Tg+S组在高频刺激后30min内fEPSP的斜率显著高于Tg+C组。WT+C组和WT+S组在高频刺激后30min内fEPSP的斜率无显著差异(P0.05)。结论游泳运动改善早期阿尔茨海默模型小鼠的学习记忆能力和探索能力,与提高海马突触可塑性相关。     

骨髓基质细胞移植改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能

目的探究骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)移植治疗对APP/PS转基因的阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠认知功能障碍的改善作用。方法分离培养C57BL/6小鼠的BMSCs,诱导其分化为神经细胞,通过相差显微镜技术和免疫细胞化学荧光染色技术鉴定其表型与分化。通过显微注射技术,将绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,eGFP)转基因小鼠(生后3个月)来源的BMSCs注入APP/PS转基因小鼠(生后12个月)侧脑室内后,以荧光显微镜技术检测移植细胞的存活和整合情况,HE染色检测AD模型小鼠海马区萎缩的恢复程度并以Morris水迷宫试验与旷场试验检测移植治疗后小鼠认知功能障碍的改善情况。结果分离自C57BL/6小鼠的BMSCs在增殖培养基中贴壁生长,形态呈纺锤形,免疫表型CD271+/CD45-++,经神经分化诱导培养可形成β-tubulin-III神经元和GFAP星形胶质细胞。GFP转基因小鼠来源的BMSCs移植入APP/PS1转基因小鼠脑内可存活并与宿主海马区神经组织有效整合。移植治疗3周后宿主小鼠海马区面积显著增加(<0.001),水迷宫实验逃生潜伏期明显缩短(<0.01),旷场试验评分显著提高(<0.05)。结论骨髓基质细胞移植治疗可有效改善APP/PS1转基因的AD模型小鼠的认知功能障碍。     

神经节苷脂对APP/PSI双转基因AD小鼠海马caspase-3和iNOS表达的影响

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AIzheimer disease,AD)小鼠模型,观察神经节苷脂对AD小鼠学习记忆能力及海马caspase-3与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法 APP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和神经节苷脂(GM1)组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化方法Western blot方法检测各组小鼠海马caspase-3与iNOS的表达变化。结果 AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显低于对照组(P0.05),而GM1组小鼠明显高于AD模型组(P0.05)。AD模型组小鼠海马caspase-3与iNOS蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于GM1组小鼠和对照组小鼠(P0.05)。结论下调AD小鼠海马区caspase-3与iNOS的表达可能是GM1改善AD小鼠学习和记忆功能的机制之一。     

APP/PS1转基因小鼠海马内少突胶质细胞变化的体视学研究

目的:定量研究APP/PS1转基因小鼠海马内少突胶质细胞(OLG)的改变,探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)对OLG的影响。方法:随机选取10月龄雄性APP/PS1转基因小鼠(AD组)和10月龄同窝生雄性野生型小鼠(WT组)各13只,运用Morris水迷宫检测各组小鼠的空间学习和记忆能力;运用体视学方法计数各组小鼠海马CA1、CA2-3和齿状回(DG)内Olig2+细胞和2',3'-环核苷酸3'-磷酸二酯酶(CNPase)阳性细胞总数;体外培养小鼠少突胶质前体细胞(MOPC),给予Aβ1-42,运用real time RT-PCR和Western Blot检测OLG相关蛋白的表达水平和含量。结果:AD小鼠逃避潜伏期显著性长于WT小鼠(P<0.05),穿台次数显著性少于WT小鼠(P<0.05);AD小鼠海马各区Olig2+细胞总数均较WT小鼠显著性增加(P<0.05),且与逃避潜伏期呈正相关,与穿台次数呈负相关,而各区CNPase+细胞总数均较WT小鼠显著性减少(P<0.05),且与逃避潜伏期呈负相关;Aβ1-42干预后MOPC的NG2及CNPase的mRNA水平显著性降低(P<0.05),Olig2含量也显著性降低(P<0.05)。结论:APP/PS1转基因小鼠海马内存在成熟OLG丢失、少突胶质细胞系异常增殖;Aβ可能引起OLG损伤和发育异常;保护海马成熟OLG以及调控OLG发育可能是防治AD的有效策略。     

神经节苷脂对APP/PS1双转基因AD小鼠海马CREB表达的影响

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)小鼠模型,观察神经节苷脂(GM1)对AD小鼠学习记忆能力及海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(c AMP response element binding protein,CREB)表达的影响。方法 PP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和神经节苷脂组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化和Western blot方法检测各组小鼠海马CREB的表达变化。结果与对照组相比,AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显降低(0.05);相比于AD模型组小鼠,GM1组小鼠的学习和记忆成绩明显提高(0.05)。免疫组化和Western blot结果显示,GM1组小鼠和对照组小鼠海马CREB蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于AD模型组(0.05)。结论 GM1改善AD小鼠学习和记忆功能可能与上调AD小鼠海马区CREB的表达相关。     

APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的行为学及病理学特征研究

目的:探讨不同月龄APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠行为学及病理学的变化特征,为合理运用该模型研究阿尔茨海默病提供可靠依据。方法:采用旷场实验、新物体辨别实验、Y迷宫以及Morris水迷宫等行为学实验方法观察不同月龄的APP/PS1转基因小鼠的运动、新物体辨别以及学习记忆能力的变化;通过免疫组织化学方法检测不同月龄转基因小鼠脑内Aβ含量及星形胶质细胞数量等病理特征的变化。结果:APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠的运动能力随月龄增加逐渐下降,9月龄时对新物体的识别、工作记忆及空间学习记忆能力均出现明显损害。同时,该转基因小鼠的海马在6月龄时开始出现Aβ沉积和星形胶质细胞数量增加,9月龄时各种病理变化更为明显。结论:APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠在6月龄时开始出现脑内病理改变,9月龄时各种认知行为发生明显异常。提示该转基因小鼠脑内病理改变可能早于行为异常,因此可根据实验目的选取相应月龄的动物。     

神经节苷脂对APP/PSl双转基因AD小鼠海马PI3K表达的影响

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AIzheimer disease,AD)小鼠模型,观察神经节苷脂对AD小鼠学习记忆能力及海马磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)表达的影响。方法 APP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和神经节苷脂(GM1)组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化方法和Western blot方法检测各组小鼠海马PI3K的表达变化。结果与对照组相比,AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显降低(P0.05);相比于AD模型组小鼠,GM1组小鼠的学习和记忆成绩明显提高(P0.05)。免疫组化和Western blot结果显示,GM1组小鼠和对照组小鼠海马PI3K蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于AD模型组,P0.05。结论 AD小鼠海马区PI3K的表达上调可能是GM1改善AD小鼠学习和记忆功能的机制之一。     

基于齿状回神经元树突棘形态探讨ROCK2敲减改善APP/PS1小鼠认知功能的作用机制

目的：观察海马区敲减Rho相关激酶2(ROCK2)对阿尔茨海默病模型APPswe/PS1dE9(APP/PS1转基因小鼠的干预效果，并探索其对海马齿状回区神经元树突棘形态的影响及潜在机制。方法：选用雄性8月龄的C57BL/6及APP/PS1小鼠，随机分为4组，分别为野生型（WT）组（8只）、APP/PS1小鼠生理盐水（NS）组（8只）、APP/PS1小鼠敲减对照（shRNA）组（12只）和APP/PS1小鼠ROCK2敲减（shROCK2）组（12只）。通过腺相关病毒共转染shRNA的方法，下调APP/PS1转基因小鼠双侧海马区神经元ROCK2蛋白表达，实现海马区局部神经元ROCK2敲减。利用水迷宫和Y迷宫实验检测小鼠的认知功能；免疫荧光染色和Western blot检测AD相关病理改变；激光共聚焦和Imairs软件观察并分析海马齿状回区神经元的树突棘形态变化；Western blot检测海马组织中突触相关蛋白的表达水平。结果：水迷宫实验中，与WT组的小鼠相比，NS和shRNA组小鼠到达平台的时间、到达平台的距离及第一次进入平台所在象限的时间均显著增加（P<0.05或P<0....     

神经干细胞改善阿尔茨海默氏病转基因小鼠的学习和记忆能力

目的本研究将绿色荧光蛋白(green fluorecent protein,GFP)转基因小鼠神经干细胞(neural stemcells,NSCs)移植到阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease,AD)转基因小鼠海马中,探讨NSCs在AD治疗中的作用。方法 E14-17d的GFP转基因小鼠的NSCs被分离、培养并诱导分化为神经细胞,相差显微镜和免疫细胞化学染色检测NSCs的表型与分化情况。通过显微注射,将GFP转基因小鼠的NSCs移植到AD转基因小鼠海马内,并以Morris水迷宫实验和旷场试验检测宿主鼠学习记忆能力的改善程度。结果培养的NSCs具有自我增殖能力,并可分化为神经元和星形胶质细胞。NSCs移植后,表达GFP的神经干细胞有效整合至宿主小鼠的海马组织内,并使宿主小鼠的学习和记忆能力明显改善。结论神经干细胞移植可改善阿尔茨海默氏病转基因小鼠的学习和记忆能力。