丹参酮Ⅱ_A磺酸钠对氧反常心肌线粒体钙代谢的影响

本文观察心肌氧反常时线粒体钙代谢变化以及丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(DS-201)对其影响。健康雄性新西兰家兔28只,随机分为:正常对照组、缺氧组、氧反常组、DS-201氧反常组。以Langendorff     

山莨菪碱和异搏定对离体大鼠心脏“缺氧—复氧”损伤的防治作用比较

本文在离体大鼠心脏灌流模型上,比较山莨菪碱与异搏定对心脏缺氧—复氧损伤(氧反常)的防治作用,结果发现在缺氧期向灌流液中加入山莨菪碱(1.64×10~(-4)M),与异搏定(5×10~(-8)M)都能有效地减轻心脏缺氧—复氧损伤,表现为心功能的恢复,心肌酸中毒和细胞内乳酸脱氢酶的漏出,心肌组织脂质过氧化产物与钙含量增加的程度都有明显改善。然而在复氧灌流期应用异搏定并不能阻止氧反常的发生;但山莨菪碱在复氧期应用时,也能显著减轻氧反常损伤。结果提示山莨菪碱可能具有除钙拮抗作用以外的更广泛的抗缺氧—复氧损伤机制,值得进一步探讨。     

钙调素拮抗剂与钙通道阻滞剂对离体大鼠心脏钙反常损伤心肌保护作用的研究

目的:观察钙调素拮抗剂三氟拉嗪(TFP)及钙通道阻滞剂异博定(VP)对缺钙-复钙损伤心肌的保护作用。方法:应用TFP与VP对离体大鼠心脏进行灌流。检测心肌钙含量、灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)及心肌蛋白漏出量等指标。结果:TFP显著减少损伤心肌的钙含量、LDH及蛋白漏出量,与对照组相比差异显著(P＜0.01)。VP灌注组与对照组相比各项指标差异无显著(P＞0.05)。TFP与VP联合应用各项检测指标值明显低于单独应用TFP(P＜0.01)。结论:TFP有效减轻钙反常心肌损伤的程度;VP对钙反常心肌无保护作用。联合应用TFP与VP的心肌保护效果更佳。钙反常时Ca²⁺大量内流主要通过钙调素介导,但慢钙通道在钙超载形成过程中也可能起一定作用。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对人肾间质成纤维细胞体外增殖和形态的影响

目的探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinoneⅡ-A sulfonate,DS-201)对肾间质纤维化来源的人肾间质成纤维细胞(human renal interstitial fibroblast,HRIF)体外增殖和形态的影响。方法组织块体外培养HRIF,MTT比色法分别检测对照组及不同浓度DS-201组(0.5mg/ml、1.00mg/ml和2.00mg/ml)HRIF,在体外培养第1、3、5、7、9d的吸光光度值,并计算各实验组抑制率的均值(average of inhibition rate,IRA);倒置相差显微镜观察对照组及DS-201作用下HRIF形态的改变。结果随培养时间的延长和DS-201药物浓度的升高,IRA值升高。用药后HRIF形态由均一的梭形变成圆形或细长不规则条状。结论DS-201对HRIF体外增殖具有时间和浓度依赖性的抑制作用,并使体外培养的HRIF出现形态异常。     

丹参酮‖A磺酸钠对人肾间质成纤维细胞体外增殖和形态的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinone Ⅱ-A sulfonate,DS-201)对肾间质纤维化来源的人肾间质成纤维细胞(human renal interstitial fibroblast,HRIF)体外增殖和形态的影响.方法 组织块体外培养HRIF,MTT比色法分别检测对照组及不同浓度DS-201组(0.5mg/ml、1.00/mg/ml和2.00mg/ml)HRIF,在体外培养第1、3、5、7、9d的吸光光度值,并计算各实验组抑制率的均值(average of inhibition rate,IRA);倒置相差显微镜观察对照组及DS-201作用下HRIF形态的改变.结果 随培养时间的延长和DS-201药物浓度的升高,IRA值升高.用药后HRIF形态由均一的梭形变成圆形或细长不规则条状.结论 DS-201对HRIF体外增殖具有时间和浓度依赖性的抑制作用,并使体外培养的HRIF出现形态异常.     

钙敏感受体在黄芪注射液防治心肌损伤中的作用

目的研究黄芪注射液对心肌损伤大鼠钙敏感受体表达的影响及黄芪注射液可能的心肌保护作用机制。方法 40只大鼠随机分为4组:空白组、心肌损伤组、黄芪注射液组(20 mL/kg)、黄芪注射液(20 mL/kg)+钙敏感受体激动剂Cinacalcet(3.0 mg/kg)组。腹腔内注射5 mg/kg异丙肾上腺素,制备大鼠心肌损伤模型。Western blot方法检测各组大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达以及Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达;TUNEL染色法评价各组大鼠心肌细胞的凋亡;酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β、NF-κB的水平。结果黄芪注射液显著抑制了心肌损伤组大鼠钙敏感受体的表达(P0.01),促进了Bcl-2的表达(P0.01),降低了Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达(P0.01),降低了血清TNF-α、IL-1β和NF-κB的水平(P0.01);钙敏感受体激动剂Cinacalcet可以部分消除黄芪注射液对心肌损伤组大鼠的心肌保护作用。结论黄芪注射液对心肌损伤组大鼠的心肌保护作用可能与抑制钙敏感受体的表达、减少炎症反应、降低心肌细胞凋亡有关。     

氧反常心肌线粒体呼吸功能变化及丹参酮Ⅱ_A磺酸钠的影响

健康雄性新西兰家兔28只,随机分为四组:正常对照组,缺氧组、氧反常组、DS-201氧反常组。离体心脏灌流造成心肌缺氧、氧反常模型。分离心肌线粒体,分光光度法测定线粒体内膜呼吸酶——琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CCO)活力;氧电极法测定线粒体呼吸耗氧量,呼吸底物分别采用谷氨酸加苹果酸或琥珀酸。     

牛磺酸对大鼠异丙肾上腺素心肌损伤的保护作用

大鼠皮下注射异丙肾上腺素(40mg/kg/日)造成心肌损伤模型,发现心肌组织钙含量和心肌AGTⅡ水平显著增加,并伴有严重的心肌损伤。若同时注射牛磺酸(200mg/kg/日)或疏甲丙辅酸(1mg/kg/日)均可拮抗异丙肾上腺素引起的心肌钙增加及AGTⅡ水平升高,并可缓解心肌组织病理损伤。结果提示牛磺酸抑制心肌AGTⅡ可能是其拮抗异丙肾上腺素心肌损伤的重要机制之一。     

山莨菪碱对缺血心肌的保护作用

为探讨山莨菪碱(654-2)的细胞保护机制,本文采用离体大鼠心脏和离体成年大鼠心肌细胞缺氧—再给氧(A/R)模型,观察了654-2对细胞钙稳态的调节作用和心肌保护作用,并与异搏定比较。结果发现,再灌期应用654-2显著抑制心肌对~(45)Ca~(2+)的摄取(P<0.01)和心肌总钙含量的增加(P<0.05),减少组织蛋白漏出     

羽扇豆醇缓解氧化应激对心肌缺血再灌注大鼠心脏功能和心肌组织的保护作用

目的:探索羽扇豆醇对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠心脏功能、心肌损伤以及氧化应激的影响。方法:将SD雄性大鼠随机分为健康对照组(Ctrl)、模型组(I/R)、阳性对照组(Diltia 5 mg/kg)、羽扇豆醇组(Lupeol分别为10、20、50 mg/kg),药物连续灌胃1周后,健康对照组除外,余下各组均采取结扎左冠状动脉前降支方法制备大鼠MI/RI模型,观察各组大鼠心脏功能,HE染色观察心肌细胞结构变化,ELISA法检测心肌损伤标志物以及氧化应激相关因子水平,RT-PCR检测心肌组织中的Ki67、Survivin表达量,Western blot检测氧化应激相关蛋白水平。结果:与I/R组相比,Ctrl、Diltia、20 mg/kg Lupeol组、50 mg/kg Lupeol组的HR、LVSP、LVEF、FS、LVWT、心肌组织Ki67与Survivin mRNA含量、SOD与LDH活性、心肌组织Nrf1、PGC-1α及TFAM水平均增加(P0.05),CK-Mb、Mb、cTnI、心肌组织Caspase-3阳性率、TNF-α、IL-1β、iNOS、IL-6及MDA含量降低(P0.05)。HE染色结果显示I/R组的心肌纤维结构紊乱,损伤程度严重,20 mg/kg Lupeol组的心肌组织损伤较I/R模型组减轻。结论:羽扇豆醇降低MI/RI大鼠氧化应激及炎症反应,上调心肌组织Ki67、Survivin表达,降低Caspase-3阳性率,提高细胞能量代谢,对心脏功能及心肌组织有保护作用。     

丹参酮Ⅱ_A磺酸钠对再给氧损伤中心肌线粒体膜的保护作用

本文应用离体心脏灌流法造成兔心肌缺氧-再给氧损伤模型,分离心肌线粒体,观察线粒体膜磷脂含量、膜脂流动性变化;用硝酸镧示踪法电镜观察线粒体膜通透性变化;冷冻蚀刻法观察线粒体表面结构变化。并以丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(DS-201)作为心肌保护剂,观察其作用与效果。     

牛磺酸对大鼠心脏模拟缺血再灌注损伤的保护作用

在离体大鼠心脏模拟缺血再灌注(I/R)损伤的模型上观察了牛磺酸的心肌保护作用。实验结果发现预先给大鼠牛磺酸灌胃(300mg/kg)三日或再灌注同时给药(20mmol/L),对心肌均有保护作用,明显减少心肌细胞内的Mb、LDH的漏出,降低心肌MDA的生成,减轻细胞内钙的聚集,促进心肌ATP含量的恢复。在本实验条件下预防应用牛磺酸较再灌注的同时应用更为有效,表现为更大程度地减少LDH漏出,抑制心肌MDA生成和钙聚集。结果证明牛磺酸具有心肌保护作用,对于防治心肌I/R损伤可能具有临床应用价值。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对家兔缺血预处理心肌保护作用的影响

目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠对家兔缺血预处理心肌保护作用及血浆和心肌组织NO代谢产物含量的影响。方法家兔24只 ,随机分为心肌缺血再灌注组 (IR ,n=8)、缺血预处理组 (IPC,n=8)和丹参酮ⅡA磺酸钠联合缺血预处理组 (DS-201 IPC,n=8) ;TTC染色测定梗塞面积 ;HE染色病理组织学观察。采用硝酸还原酶法检测缺血前、缺血后30min和再灌注30min三个时点血浆及心肌组织NO代谢物含量。结果 (1)TTC染色称重结果显示 ,IPC组心肌梗死面积 (梗死区重量/缺血区重量为9.54±5.79)明显小于IR组 (梗死区重量/缺血区重量为35.48±3.84Δ ,P<0.05) ,DS201 IPC组心肌梗死面积 (梗死区重量/缺血区重量为5.66±1.6)明显小于IPC组心肌梗死面积 (P<0.05)。病理学检测显示 ,与IR组相比 ,IPC组组织损伤程度明显减轻。与IPC组相比 ,DS201 IPC组组织损伤程度明显减轻。 (2)缺血30min和再灌注30minIR组血浆NO代谢产物[缺血30min(11.2±3.9)μmol/L,再灌注30min(11.6±5.6)μmol/L]和心肌组织NO代谢产物[再灌注30min末(23.0±5.3)μmol/mg]显著低于缺血前[血浆NO代谢产物为(28.5±6.8)μmol/L,心肌组织NO代谢产物为(49±18.3)μmol/mg](P<0.05) ;缺血30min和再灌注30minIPC组血浆NO代谢产物[缺血30min(19.5±2.5)μmol/L,再灌注30min(1     

丹参在抗肝细胞坏死中的钙拮抗作用

本工作在大鼠口服CCL_4所致肝细胞坏死模型上,比较了丹参与钙拮抗剂异搏定和扩血管药酚妥拉明对肝坏死的保护作用。结果发现,CCl_4引起的肝组织坏死与肝组织钙含量呈正相关(r=0.887,P<0.01)。丹参和异搏定使肝组织坏死程度减轻,肝组织钙含量减少,血浆GPT活性下降,肝组织匀浆MDA含量降低,细胞色素P-450活性升高。酚妥拉明组与损伤对照组比较,各项指标无明显差异。上述结果提示,丹参的作用效果优于异搏定。丹参抗CCl_4所致的肝细胞坏死井非通过扩血管作用,而是发挥其钙拮抗作用实现的。     

利多卡因对脓毒症大鼠心肌损伤及Nrf2/HO-1通路的影响

目的:探究利多卡因对脓毒症大鼠心肌损伤及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1(Nrf2/HO-1通路的影响。方法:健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和利多卡因组,每组15只。模型组和利多卡因组采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症大鼠模型,假手术组大鼠仅打开腹腔而不进行盲肠结扎穿孔,造模后利多卡因组大鼠给予利多卡因10 mg/kg负荷剂量+10 mg·kg~(-1)·h~(-1)尾静脉输注3 h,假手术组和模型组输注等量生理盐水。采用ELISA法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肌红蛋白(Myo)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;TTC染色法检测各组大鼠心肌梗死面积,计算心肌梗死率;HE染色观察心肌损伤病理变化;生物化学法检测心肌组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;RT-qPCR和Western blot法分别检测心肌组织Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死率、血清中TNF-α、HMGB1、Myo和cTnI水平、心肌组织MDA含量及Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达量显著升高(P0.05),心肌组织SOD活性显著降低(P0.01),心肌组织出现严重病理损伤;与模型组比较,利多卡因组大鼠血清中TNF-α、HMGB1、Myo和cTnI水平、心肌梗死率及心肌组织MDA含量显著降低(P0.05),心肌组织SOD活性及Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白表达量显著升高(P0.01),心肌组织病理损伤减轻。结论:利多卡因可减轻脓毒症大鼠心肌损伤,其机制可能与促进心肌细胞Nrf2/HO-1通路激活,提高其抗氧化应激能力有关。     

薯蓣皂素对缺氧诱导的H9c2大鼠心肌细胞内质网应激损伤的保护作用

目的　探究薯蓣皂素 (Diosgenin, DG) 对缺氧诱导的大鼠心肌细胞H9c2损伤及心肌缺血再灌注 (Mycardial ischemia reperfusion, MI/R) 模型大鼠的保护作用及作用机制。 方法　将细胞分为H9c2组、低氧诱导 (Hypoxia)组、DG (10mg/L)、DG (20 mg/L)和DG (50 mg/L)组,缺氧诱导细胞损伤,并给予对应浓度的DG或溶媒处理,CCK8检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,Western blot检测C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白 (CCAAT/enhancer-binding protein (C/EBP) homologous protein, CHOP)、Caspase-12、DNA损伤诱导蛋白 (Growth arrest and DNA damage-inducible protein 34, GADD34) 和免疫球蛋白重链结合蛋白 (Immunoglobulin heavy-chain-binding protein, Bip)的表达,试剂盒检测上清液超氧化物歧化酶 (Superoxide dismutase, SOD) 和丙二醛 (Malondialdehyde, MDA) 浓度。复制大鼠MI/R模型,灌胃给予大鼠DG,检测大鼠心率和平均动脉压 (Mean artery pressure, MAP)。检测大鼠血清肌酸激酶(creatine kinase, CK)、SOD和MDA浓度,HE染色检测组织损伤,Western blot检测内质网应激相关蛋白表达。 结果　与H9c2组比较,Hypoxia组细胞增殖速度显著降低,细胞凋亡率明显升高;与Hypoxia组比较,DG (10, 20, 50 mg/L) 组细胞增殖速度明显升高,细胞凋亡率明显降低;同时, DG (10, 20, 50 mg/L)能显著减弱Hypoxia对CHOP、Caspase-12表达的诱导作用和对GADD34和BiP表达的抑制作用。此外,缺氧能显著升高上清液MDA浓度,降低SOD浓度;DG能明显减弱缺氧的作用。DG还能显著升高MI/R模型大鼠心肌功能,减轻心肌组织损伤,降低心肌组织CHOP和Caspase-12的表达,诱导GADD34和BiP的表达,降低血清MDA浓度,升高SOD浓度。 结论　DG能通过抑制内质网应激减轻缺氧诱导的心肌细胞损伤及MI/R模型大鼠心肌组织损伤。     

西洋参茎叶总皂苷通过抑制过度内质网应激减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤

 目的：观察西洋参茎叶总皂苷（PQS）对大鼠心肌缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）损伤的保护作用,并从内质网应激(ERS)的角度探讨其可能的分子机制。方法：采用SD大鼠心肌I/R模型,随机分为正常对照组、模型组与药物预处理组,检测血流动力学及血清心肌肌钙蛋白T（cTnT）含量,以氯化三苯基四氮唑（TTC）和伊文思蓝双染法检测心梗面积,采用HE染色和TUNEL法分别评估心肌病理损伤和心肌细胞凋亡程度,Western blotting法检测心肌组织凋亡调节因子以及内质网应激相关蛋白的表达。结果：与I/R组相比,PQS+I/R组平均动脉压降低32.0%（P<0.05）,左室±dp/dtmax分别升高64.0%和35.0%（P<0.05）,血清cTnT含量降低53.3%（P<0.05）,坏死面积/缺血面积(AN/AAR)百分比降低65.5%（P<0.05）,心肌细胞凋亡率降低54.9%（P<0.05）;心肌组织病理损伤程度减轻;抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高110.0%（P<0.05）,促凋亡蛋白Bax表达降低47.8%（P<0.05）,钙网蛋白(CRT)表达降低43.4%（P<0.05）,C/EBP同源蛋白（CHOP）和剪切后的caspase-12蛋白表达分别降低38.6%和23.7%（P<0.05）。结论：PQS可显著减轻大鼠心肌I/R损伤,其机制与降低I/R诱导的CRT过表达,抑制CHOP、caspase-12等内质网凋亡通路激活,从而抑制过度ERS介导的细胞凋亡有关。     

内源性碱性成纤维细胞生长因子是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子

目的:观察内、外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用.方法:在大鼠离体心脏I/R模型上分别给以bFGF和bFGF抗血清,以生理多导仪测定心率、±LV dp/dtmax及左心室终末舒张压(LVEDP)变化,并测定冠脉流量、冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、乳酸盐脱氢酶(LDH)活性以及心肌组织钙、丙二醛(MDA)、三磷酸腺苷(ATP)含量和蛋白激酶(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性.结果:I/R组心功能显著低于对照组,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、LDH活性及心肌MDA、钙含量显著升高,ATP含量显著降低(均P＜0.01).bFGF组±LV dp/dtmax较I/R组分别高42.8%和25.6%,LVEDP低40.0%,再灌末心率/预灌末心率(HRr/HRi)及冠脉流量的(B/A)分别高42.3%和20.3%,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量及LDH活性分别少28.8%、30.2%(均P＜0.01)和32.3%(P＜0.05),心肌MDA和钙含量分别少44.4%和35.6%,ATP含量高33.8%.心肌PKC、MAPK活性分别高41.3%和10.1%(均P＜0.01);bFGF抗血清组±LV dp/dtmax较I/R组分别低35.1%和38.1%,LVEDP高92.5%,HRr/HRi及冠脉流量的B/A分别少36.0%和45.4%,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白和LDH漏出分别多54.3%、96.2%和34.4%,心肌MDA和钙含量分别高23.6%和49.7%,ATP含量低27.8%,心肌PKC及MAPK活性分别低20.9%和7.7%(均P<0.01).结论:内源性bFGF是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子.     

福莫特罗对离体培养大鼠心肌组织损伤及合用布地奈德对其影响的探讨

目的:观察福莫特罗(FORM)对离体培养SD大鼠心肌组织的损伤作用及合用布地奈德(BUD)的影响,初步探讨FORM致心肌损伤的机制。方法:以0μmol/L、0.01μmol/L、0.05μmol/L、0.1μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、5μmol/L FORM单独及联合10μmol/L的BUD作用于成年SD大鼠离体心脏组织,并培养72 h。ELISA检测组织培养上清液中肌钙蛋白I(cTnI)和心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)含量,RT-PCR检测心脏组织糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β),Western blot检测肌浆网钙泵(SERCA2)、GSK-3β蛋白表达水平。结果:(1)组织培养上清液中,cTnI、H-FABP蛋白随着FORM浓度的升高而增加,除外高浓度的两组,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。与单独应用相应浓度的FORM比较,联用BUD后cTnI、H-FABP蛋白浓度降低(P<0.05)。(2)随着FORM浓度的升高,SERCA2蛋白表达降低(P<0.05),GSK-3β蛋白表达增高(P<0.05),但GSK-3βmRNA表达无统计学差异。结论:(1)FORM可致心肌损伤,且呈浓度依赖性,联合应用BUD对FORM所致的心肌损伤有保护作用。(2)FORM导致心肌组织损伤的机制与GSK-3β介导的SERCA2蛋白表达量降低有关。     

白藜芦醇对脓毒血症所诱导大鼠心肌损伤的保护作用及其机制研究

目的以脓毒血症诱导大鼠心肌损伤模型为切入点,从血流动力学、抗炎和抗氧化等多方面研究白藜芦醇对心肌损伤大鼠的保护作用机制。方法采用随机数字表法将60只大鼠在脓毒血症诱导大鼠心肌损伤模型后随机分为6组,即空白组、模型组、氨苄青霉素钠组(150 mg/kg)、白藜芦醇高剂量组(400 mg/kg),白藜芦醇中剂量组(200 mg/kg)、白藜芦醇低剂量组(50 mg/kg),每组10只。术后12 h开始给药并记录各组大鼠血流动力学参数检测心功能;HE染色法检测大鼠心肌病理情况;ELISA检测大鼠血清TNF-α、IL-6水平,心肌组织中心肌酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;Western blot法检测心肌组织中TGF-β1、TLR4和p65的表达。结果白藜芦醇中剂量组(200 mg/kg)与氨苄青霉素钠(150 mg/kg)疗效相当,可改善心脏血流动力学参数和心肌形态学变化,明显降低血清TNF-α、IL-6和心肌组织CK、LDH和MDA水平(P<0.01),而增加SOD水平(P<0.01),下调TGF-β1、TLR4和p65的表达蛋白表达。结论白藜芦醇对脓毒血症大鼠心肌损伤具有一定的治疗效果,其机制可能与其抗炎抗氧化抑制炎症信号通路相关。