DNA疫苗递送系统研究进展

DNA疫苗是在基因治疗和转基因技术基础上产生的第三代疫苗,已成为当前疫苗研究领域的热点.因裸DNA疫苗直接接种存在诸多不足之处,故研制新的给药系统,保护DNA免受生物环境破坏,将其有效导人靶细胞,使之具有更强的免疫效能是研究的主要内容之一.目前研究较多的非病毒递送系统有脂质体、天然高分子载体、人工合成聚合物载体、减毒胞内菌等,其中分别以阳离子脂质体、壳聚糖、聚乙烯亚胺、伤寒沙门菌较为常用.现有研究结果 已显示出上述递送系统的巨大应用潜力,它们各自的优势必将对DNA疫苗的推广起到很好的促进作用.     

基于纳米递送系统的肿瘤免疫治疗研究进展

近年来,肿瘤免疫治疗发展迅速,相较于其他传统肿瘤治疗方法具有显著优势.肿瘤免疫治疗是通过调动或激发机体自身的免疫功能,从而抑制和杀伤肿瘤细胞.随着纳米技术的发展,生物纳米载体材料为疫苗的开发提供了全新的思路.纳米疫苗是基于纳米技术开发的治疗性或预防性疫苗,大多数肿瘤疫苗包括诱导免疫应答的外源性抗原、递送抗原的载体以及增强免疫原性并加速和延长肿瘤疫苗效果的佐剂.纳米递送载体具有良好的生物相容性和独特的理化性质,能够有效地递送各种抗原,通过调控抗原在抗原提呈细胞内的呈递途径,在激发机体的体液免疫基础上,可以进一步激活抗原特异性的细胞免疫反应.旨在对纳米递送体系在肿瘤疫苗研究中的应用作一综述.     

基因治疗中的核酸药物及非病毒递送载体的研究进展

基因治疗是针对基因异常相关疾病的终极治疗技术,各种具有不同机制的核酸药物的出现为基因治疗带来了更多的可能性。但是,由于存在体内稳定性差、难以高效进入靶细胞等问题,核酸药物需要载体的帮助而进入目标细胞并到达特定的胞内位置,因此,开发安全高效的核酸递送系统是基因治疗的基石。与病毒载体相比,非病毒载体具有更高的安全性,但转染效率较低。随着纳米技术的发展,非病毒载体的效率得到了显著的提升,进入临床研究的数量逐渐增多。本文简要介绍基因治疗中的核酸药物及其递送载体,对非病毒核酸药物递送技术的瓶颈及进展做综合评述。     

mRNA疫苗研究进展及挑战

相对于DNA疫苗,mRNA疫苗是一种比较安全的新型核酸疫苗。mRNA疫苗的分子设计及化学修饰的研究目前主要集中于增强其稳定性和降低其免疫原性。mRNA疫苗的传递主要包括脂质体、非脂质体、病毒、纳米颗粒等。新的传递方法也在不断产生。mRNA疫苗用于肿瘤、感染性疾病等的防治研究表明其具有良好的效果,有较好的应用前景。本文概述了mRNA疫苗近年来研究的新进展及其挑战,并对该领域的研究趋势进行了展望。     

信号响应性基因载体及其应用研究

获得合适的基因载体是基因治疗取得成功的关键因素之一。由于病毒载体存在安全隐患问题,人们致力于非病毒载体的研究,但其递送效果仍不理想。为了提高其基因递送效率,改善其靶向性及特异性,并调控其在体内及细胞内的动态,研发具有响应机体内外各种物理、化学及生物信号功能的非病毒载体,逐渐形成了一个重要的研究方向,受到学术界与产业界的极大关注。本文从信号的性质及来源上,将非病毒基因载体分为响应外部物理信号和响应内部化学与生物信号;从响应模式上,将其分为响应单一信号和响应多种信号。系统阐述了此类载体的结构特点、作用机理,并对其研究进展和实际应用进行了综合评述。     

siRNA非病毒纳米载体研究进展

当前,小分子干扰RNA的递送方式主要包括病毒载体载送、化学修饰载送、显微注射载送、非病毒纳米载体载送。非病毒纳米载体载送与其它载送方式相比具有简便、安全、易被患者接受等优点,但由于siRNA易水解以及被细胞摄取能力较差等原因,细胞呈递效率普遍较低。因此,近年来旨在优化siRNA、增加其应用范围而对其进行修饰的研究越来越多。本文就近期siRNA非病毒纳米载体研究进行综述,为其临床应用提供理论依据。     

抗体/腺病毒复合物为载体的基因定位递送

临床基因治疗方案中基因载体在疾病部位的靶向递送仍是急待解决的问题。本研究将腺病毒与一种生物素化的特异性抗腺病毒六邻体的多克隆IgG结合，固定于结合了亲和素的胶原蛋白膜上，成功获得腺病毒载体基因靶向定位递送体系。体外稳定性研究结果表明该体系中病毒载体可有效保持活性。通过这种特异性抗体偶联方式，将携带单纯疱疹胸苷激酶（HSVtk）编码基因片断的腺病毒结合在胶原膜上转染大鼠平滑肌细胞（A10），加入更昔洛韦（ganciclovir）后，只有生长在胶原膜上及膜邻近50μm内的细胞被杀死。在使用非特异性抗体的对照实验中，整个培养基范围内的细胞几乎全被杀死。以绿色荧光蛋白（GFP）为报告基因对猪的心肌进行转基因实验，结果显示注射特异性抗体偶联病毒的胶原凝胶比直接注射病毒悬液获得更高效的心室基因表达。所有研究结果表明，通过生物素和特异性抗体使病毒载体固定在胶原蛋白基质上，可达到有效的局部定位基因表达，避免向非病灶部位的扩散，是基因治疗中一种极具发展潜力的载体定位递送方法。     

聚乙二醇在非病毒转基因载体中的应用

非病毒转基因载体在基因治疗领域的应用日趋广泛,但目前开发的非病毒转基因载体直接体内应用由于存在诸多问题而受到限制。受药物和蛋白质聚乙二醇化后能增加目的药物和蛋白质稳定性,延长体内半衰期,降低毒副作用等效应的启发,近年有许多研究将聚乙二醇化应用于非病毒转基因载体,取得了一定的效果。     

通过电荷和脂肪酸修饰的细胞穿透肽可实现低毒而有效的体内基因传递

正基因疗法对细胞和组织中异常基因表达所致的疾病具有潜在的治疗作用。但无载体的游离核酸如质粒DNA(plasmid DNA,p DNA)容易被攻击、分解,直接给药效率不高,必须利用载体来传递。非病毒基因传递系统作为病毒传递的替代方式,在治疗异常基因表达相关疾病方面引起极大关注。尽管已有大量研究,但反映纳米颗粒递送载体在活体内使用的参数目前仍知之甚少,且传递效率一般和安全性低是需要解决的2个关键问题。细胞穿透肽(cell penetrating peptide,CPP)是用于递送     

以病毒样颗粒为平台的分子载体和疫苗设计

病毒样颗粒（vims-like particles，VIPs）在形态结构上类似于病毒，但不含病毒基因组。依据来源可分为源于病毒VLPs和人工VIPs。前者主要通过基因工程制备，后者由人工化学合成而来。VIPs的表面组分可进行灵活多样的修饰改造以满足不同需求；在适宜条件下VIPs可以包裹核酸或其它小分子物质。作为分子运载工具，VLPs可靶向性地递送基因、药物或其它小分子物质。VLPs具有独特的免疫学特性，不但能通过影响APC发挥佐剂效应，还可以作为其它佐剂、肽疫苗和核酸疫苗的整合平台设计多种形式的疫苗。VLPs在载体和疫苗设计中具有良好的应用前景。     

新型冠状病毒疫苗的研发进展及分析

随着新型冠状(简称:新冠)病毒疫情在全球愈演愈烈,越来越多的人们将疫情遏制的希望寄托于新冠病毒疫苗的研发。目前全球已经有多个研究团队,采用了不同的疫苗开发技术路线开展新冠病毒疫苗的研发。本文对目前不同路线新冠疫苗的开发与研究现状进行了综述和分析,同时也探讨了这些不同疫苗今后发展的可能性。     

新型冠状病毒疫苗及抗体药物研发进展EI北大核心CSCD

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情在全球的肆虐,不仅对公众的健康造成了重大威胁,也对全球卫生医疗系统和社会经济发展带来了巨大冲击。因此,加快疫苗和抗体药物的研发,为人们提供有效的保护和治疗措施,成为广大科学研究人员和医疗机构的首要任务。目前全球已有多款新冠疫苗和抗体药物进入临床研究或获批上市,本文对多款利用基因工程技术研发的基于S蛋白的新冠疫苗和抗体(包括亚单位疫苗、病毒载体疫苗、DNA疫苗、mRNA疫苗以及一些中和抗体药物)进行了简要阐述,同时也对疫苗和抗体药物的未来发展进行了探讨。     

基于汉坦病毒疫苗研究现状及效果的文献分析

为了解国内外关于汉坦病毒疫苗的相关研究现状及疫苗效果,本文检索1990年1月1日至2020年6月10日期间发表在中国知网和PubMed上的关于汉坦病毒疫苗的相关文献,并基于文献分析的方法了解当前关于汉坦病毒疫苗的研究现状及效果.本研究共纳入符合标准的362篇中英文文献,其中,102篇为关于汉坦病毒相关疫苗研究的实验研究,260篇为实施疫苗接种后的效果评价,含23篇为疫苗接种后发生严重不良反应的报道.结果 表明,目前关于汉坦病毒疫苗的研究主要在重组DNA疫苗的有效性及安全性评价以及重组疫苗中递送载体的发现方面;目前应用于中国的灭活疫苗主要以Ⅰ、Ⅱ型及双价灭活疫苗为主,且中短期免疫效果较好.重组DNA疫苗是当前汉坦病毒疫苗研究的热点,不同基因型汉坦病毒的疫苗研究对预防汉坦病毒相关疾病的暴发具有重要意义.疫苗接种一年后加强免疫可更有效地预防汉坦病毒的暴发,此外还应重视对重点地区16～60岁以外健康人群的疫苗接种覆盖.     

狂犬/丙型肝炎嵌合病毒的构建和拯救

目的 以狂犬病病毒为载体,构建表达丙型肝炎病毒包膜糖蛋白E1E2的狂犬/丙型肝炎嵌合病毒,为发展新型丙肝载体疫苗奠定基础.方法 在狂犬病病毒反向遗传系统CTN-GFP的基础上,通过传统分子克隆方法,将HCV E1E2基因分别克隆人复制型和复制缺陷型狂犬病病毒载体,构建狂犬/丙肝嵌合病毒CTN-HCV E1E2和CTNΔG-HCV E1E2.结果 免疫荧光（DFA）和反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）结果 显示嵌合病毒拯救成功,嵌合病毒能够再次感染正常细胞并且能够在mRNA水平检测到HCV E1E2基因的表达.结论 本研究成功构建了表达丙型肝炎病毒包膜糖蛋白E1E2的狂犬/丙肝嵌合病毒,提示以狂犬病病毒为载体发展新型丙肝载体疫苗在理论和技术上都是可行的.     

埃博拉病毒新型疫苗研究进展

埃博拉病毒是一种烈性致死病原体,它能引起人类和灵长类动物高死亡率的出血热.随着人们对埃博拉病毒分子生物学及病理学特征研究的深入,各种新型疫苗的产生为埃博拉病毒的控制和治疗带来了希望.本文就三大类新型疫苗(DNA疫苗、病毒载体疫苗和病毒样颗粒疫苗)的研究现状和应用前景进行综述.     

非病毒载体在siRNA体内递送中的应用

RNAi是一种由siRNA触发的特异基因沉默机制。自其发现以来,RNAi技术迅速发展为药物靶标确认和功能基因组学研究的新策略,并有望成为一种疾病基因治疗学方法。然而,由于siRNA体内不稳定的理化性质,递送siRNA成为RNAi发展的最大障碍。因此研发能够保护siRNA、促进细胞吸收、正确细胞定位和包内体逃逸,结合具有高生物相容性与减少非特异沉默和毒性反应的体内递送系统是RNAi成功用于临床治疗的关键。本文就体内非病毒载体方式递送siRNA的研究进展进行综述。     

甲型流感病毒核蛋白和基质蛋白2胞外域融合mRNA疫苗在小鼠体内的免疫应答研究

目的:基于脂质多聚复合物(lipopolyplex, LPP)递送平台和保守抗原开发的新型流感病毒mRNA疫苗在小鼠体内的免疫原性评价。方法:将4个拷贝的甲型流感病毒基质蛋白2胞外域(extracellular domain of matrix 2 protein,M2e)与核蛋白(nucleoprotein,NP)编...     

血友病A基因治疗载体研究现状

血友病A是X染色体隐性遗传出血性疾病.其发病原因是患者血液中先天缺乏凝血因子F Ⅷ.用于血友病A基因治疗研究的载体有病毒载体和非病毒载体,目前研究较多的是病毒载体,主要有逆转录病毒载体和慢病毒载体,腺病毒载体及腺相关病毒载体等.非病毒载体主要有质粒、脂质体、转座子等.文章拟对血友病A基因治疗各载体的特点和研究进展作一综...     

mRNA疫苗制备方法的优化及验证北大核心CSCD

目的筛选获得高效的mRNA疫苗制备方法,为mRNA疫苗研发提供参考。方法本研究使用了A、B、C三种不同的mRNA疫苗体外合成方法,比较筛选出最优方法并在小鼠体内进行了效果验证。结果3种方式合成的mRNA凝胶电泳条带清晰、完整,紫外分光光度法测定mRNA OD_(260nm)/OD_(280nm)均在1.9~2.0的范围之内,纯度较好。其中,C方法转录后mRNA的浓度最高且体外转录的eGFP mRNA转染细胞后,其表达量更高,持续时间更长。动物体内活体成像也表明,C方法转录的萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,Fluc)mRNA经脂质纳米颗粒递送可在动物体内高效表达,并且经该方法合成的登革病毒mRNA疫苗接种小鼠21 d后可产生体液免疫。结论通过对比筛选出的C方法为mRNA疫苗制备的最佳方法,可用于后续各类mRNA疫苗研发。     

丙型肝炎重组病毒载体疫苗的研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）是诱发丙肝的病原体,人类感染HCV后容易导致人类慢性肝炎、肝硬化或肝癌。HCV包膜糖蛋白的高变异性和体外细胞培养模型的缺乏制约了丙肝有效疫苗的研制。重组病毒载体疫苗是一项有前景的丙肝实验性疫苗,它可针对HCV产生有效的体液免疫与细胞免疫,现已成为丙肝疫苗研究领域的热点之一。本研究将对丙型肝炎重组病毒载体疫苗的研究进展进行综述。