益气活血解毒方对小鼠Lewis肺癌生长转移及血管生成的作用

目的：研究益气活血解毒方对小鼠Lewis肺癌生长及自发性肺转移的作用并探讨其作用机制。方法:复制小鼠Lewis肺癌模型并随机分组,腹腔注射给药 10 d 后，观察抑瘤率，HE染色观察瘤组织病理学变化，免疫组化法检测瘤组织增殖细胞核抗原（PCNA）的表达；给药 20 d 后，观察肺转移瘤结节数、瘤组织微血管密度（MVD），免疫组化法和ELISA法分别检测瘤组织及血清血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果:益气活血解毒方能减少小鼠Lewis肺癌肿瘤重量和肺转移灶数，高低剂量(24 mg·kg^-1·d^-1,12 mg·kg^-1·d^-1)抑瘤率分别为48.29%、37.26%，肺转移结节数分别为1.67、3.50，对照组为6.44；并能抑制肿瘤细胞PCNA的表达，降低肿瘤组织微血管密度,抑制肿瘤细胞及血清中VEGF的表达。结论:益气活血解毒方能抑制小鼠Lewis肺癌的生长与转移,其机制可能与抑制VEGF表达,减少肿瘤血管生成有关。     

不同剂量左旋多巴对偏侧帕金森病大鼠行为学及多巴胺D2受体表达数的影响

目的：研究不同剂量左旋多巴对偏侧帕金森病大鼠行为学及多巴胺D₂受体表达数的影响，并对其相应机制进行探讨。方法：采用6-羟多巴胺（6-OHDA）制备偏侧PD大鼠模型，用免疫组化染色法检测PD模型大鼠分别给予左旋多巴不同剂量（10 mg·kg^-1·d^-1,50 mg·kg^-1·d^-1，100 mg·kg^-1·d^-1）腹腔注射15 d前后纹状体部位的多巴胺D₂受体表达数、观察大鼠行为学改变。结果：成功PD模型大鼠30 min旋转圈数与损毁侧及其健侧的D₂受体表达数增加百分数呈线性相关（r=0.927，P<0.01），大剂量左旋多巴干预后PD大鼠的旋转圈数明显少于对照组（P<0.05），且损毁侧纹状体多巴胺D₂受体表达数明显少于对照组（P<0.01）。结论：大剂量左旋多巴干预能明显改善PD大鼠的旋转行为，并使纹状体多巴胺D₂受体明显下调。     

水杨酸钠对豚鼠螺旋神经节NGB mRNA和蛋白表达的影响

目的： 观察水杨酸钠对豚鼠螺旋神经节NGB mRNA和蛋白表达的影响。方法: 48只成年健康豚鼠分4组进行，每组12只。A组：对照组；B组：水杨酸钠组Ⅰ（200 mg·kg^-1·d^-1）；C组：水杨酸钠组Ⅱ（300 mg·kg^-1·d^-1）；D组：水杨酸钠组Ⅲ（450 mg·kg^-1·d^-1）。各组均经腹腔注射给药，给药15d后处死检测；采用RT-PCR检测实验豚鼠螺旋神经节区NGB mRNA的表达；采用免疫组织化学染色分析NGB蛋白表达。结果: ①对照组豚鼠螺旋神经节区NGB mRNA表达明显高于3个水杨酸钠组（P<0.01）；3个水杨酸钠组NGB mRNA表达比较以D组表达最低，B组表达最高，C组与D组比较差异显著（P<0.05）。②免疫组织化学染色检测结果显示实验各组均表达NGB蛋白。A组NGB蛋白表达明显高于其它各组；3个水杨酸钠组以B组表达最高、D组表达最低。结论: 水杨酸钠可显著降低螺旋神经节神经元NGB mRNA和蛋白表达；水杨酸钠对螺旋神经节神经元NGB mRNA和蛋白表达是剂量依赖性的。     

吡格列酮对高脂血症大鼠血管内皮功能的保护作用

目的： 用1种PPARγ激动剂吡格列酮，观察其能否逆转高脂血症大鼠的内皮功能障碍。方法: 将36只健康雄性Wistar大鼠随机分为6组（每组6只）：正常对照组（control），高脂血症组（HC，即溶剂对照组）及吡格列酮1.5 mg·kg^-1·d^-1组、3 mg·kg-1·d-1组、10 mg·kg^-1·d^-1组、20 mg·kg^-1·d^-1组（HC＋PIO）。通过比较给予累积浓度的ACh（内皮依赖性舒血管物质）和酸化NaNO₂（非内皮依赖性舒血管物质）后血管的舒张程度来反映血管内皮功能；使用MS2000生理信号记录分析系统记录的参数（包括±dp/dt_max）来判定心脏功能。结果: （1）高脂血症可以导致严重的血管内皮舒张功能障碍，给予10^-9-10^-5 mol/L累积浓度的ACh后，高脂血症组血管张力与正常对照组相比有显著差异，血管最大舒张程度由99.78%±3.01%降低到50.51%±2.45%（P<0.01），而给予10^-8-10^-4 mol/L累积浓度的酸化NaNO₂后，2组间的血管张力无明显差别（P>0.05）；（2）吡格列酮可以剂量依赖性地减轻高脂血症引起的血管内皮舒张功能失调，且10 mg·kg^-1·d^-1剂量组作用最明显；（3）吡格列酮在减轻血管内皮舒张功能障碍的同时，也减轻了高脂血症大鼠心功能的损伤。结论: 吡格列酮可以直接减轻高脂血症引起的血管内皮功能障碍，从而可能会有效预防随后发生的动脉粥样硬化及缺血性心脏病。     

莫索尼定及贝那普利对肾脏致纤维化因子影响的对比研究

目的： 应用莫索尼定(moxonidine)及贝那普利(benazepril)干预阿霉素肾病（ADR）大鼠，比较二者对致纤维化生长因子的影响。方法： 大鼠右肾切除加尾静脉注射阿霉素复制肾病模型，随机分为模型组、莫索尼定组(1.5 mg·kg^-1·d^-1)、贝那普利组(10 mg·kg^-1·d^-1)、假手术对照组，每组10只。12周测蛋白尿、血压及血生化水平；显微镜下观察肾组织改变；免疫组化检测肾组织转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、 血小板源性生长因子（PDGF）、结缔组织生长因子（CTGF）蛋白表达；原位杂交测TGF-β₁ mRNA、PDGF mRNA表达。结果： 模型组大鼠尿蛋白、血压、血浆NE、AngⅡ水平、肾间质纤维化面积、肾小球体积、肾重/体重比值均显著高于对照组（P<0.01）；肾组织内TGF-β₁、PDGF、CTGF蛋白及TGF-β₁ mRNA、PDGF mRNA表达均显著高于对照组（P<0.01）；莫索尼定及贝那普利干预组，上述上调指标除血压无明显改变之外，其余都被显著抑制（P<0.01）。2种药物之间比较，贝那普利较莫索尼定更明显降低蛋白尿、血浆AngⅡ水平及下调PDGF及CTGF蛋白、PDGF mRNA表达；莫索尼定下调TGF-β₁ mRNA表达较贝那普利明显。结论： 莫索尼定及贝那普利通过抑制交感神经活性，调节致纤维化因子的表达而起肾保护作用。     

螺内酯、氯沙坦及两者合用对急性心肌梗死大鼠心肌胶原重建、醛固酮合成酶基因及胶原mRNA表达的影响

目的：对比螺内酯、氯沙坦及两者合用对急性心肌梗死(AMI) 大鼠左心室重构的影响。方法:通过结扎冠状动脉左前降支诱导大鼠心肌梗死，心肌梗死术后存活48 h的大鼠随机分成①假手术组（sham组）和心肌梗死组。心肌梗死组随机分为：②AMI对照组（AMI组，自来水2 mL/d灌胃）、③螺内酯组（螺内酯20 mg·kg^-1·d^-1灌胃）、④氯沙坦组（氯沙坦50 mg·kg^-1·d^-1灌胃）、⑤合用组（螺内酯20 mg·kg^-1·d^-1+氯沙坦50 mg·kg^-1·d^-1灌胃）。观察治疗后第2周、第6周心肌胶原各项指标、非梗死区心肌醛固酮合成酶（CYP11B₂）mRNA、Ⅰ型胶原mRNA及Ⅲ型胶原mRNA的含量。结果:AMI对照组非梗死区胶原含量、梗死区胶原含量、Ⅰ/Ⅲ胶原比值、PCNA阳性细胞数、CYP11B₂ mRNA水平、Ⅰ型胶原mRNA水平、Ⅲ型胶原mRNA水平均显著高于sham组（均P<0.01）。螺内酯组、氯沙坦组及合用组第2周、第6周以上各指标除梗死区胶原含量外均显著低于AMI对照组（均P<0.01）。氯沙坦组以上各指标在第2周、第6周与螺内酯组相比均无显著差异（均P>0.05）。合用组以上各指标除梗死区胶原含量外在第6周均显著低于螺内酯组及氯沙坦组（均P<0.01） 。结论：螺内酯、氯沙坦及其联合治疗均可显著降低非梗死区心肌胶原沉积及Ⅰ/Ⅲ型胶原比值，抑制胶原的增生，两种药物合用效果优于螺内酯或氯沙坦单用。     

黄芪水提物对阿霉素肾病大鼠ANP抵抗的改善作用及其机制研究

目的：研究黄芪水提物(ARE)对阿霉素肾病大鼠心房利钠肽(ANP)抵抗的影响，并探讨其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、阿霉素肾病模型组(ADR)、ADR＋黄芪水提物(2.5 g·kg^-1·d^-1)组及ADR＋苯那普利(10 mg·kg^-1·d^-1)组。用药6周后观察大鼠在2%体重生理盐水扩容情况下的利钠反应、血浆ANP的浓度、尿环鸟苷酸(cGMP)排泄量(U_cGMPV)、肾内髓组织磷酸二酯酶5(PDE5)活性及蛋白表达水平。结果:ADR大鼠扩容后，尽管血浆ANP水平较正常大鼠明显增加，其利钠反应和U_cGMPV却显著降低(P<0.01)。ARE能部分恢复大鼠扩容利钠反应，显著增加尿钠排泄量(U_NaV)及U_cGMPV (P<0.01)。ARE明显抑制肾内髓组织PDE5活性［(6.8±0.8）nmol·g^-1·min^-1 vs (9.9± 1.1）nmol·g^-1·min^-1，P<0.01］及蛋白表达 (1.0±0.1 vs 1.4±0.2, P<0.01)。结论:ARE能显著改善阿霉素肾病大鼠ANP抵抗，其机制可能与其抑制PDE5活性及蛋白表达有关。     

利福平对鱼藤酮处理的大鼠多巴胺神经元的保护作用

目的：观察利福平对鱼藤酮诱导帕金森病大鼠模型多巴胺神经元的保护作用以及对α-突触核蛋白形成和聚集的抑制作用。方法: 持续3周给SD大鼠背部皮下注射鱼藤酮（1.5 mg·kg^-1·d^-1）以诱导其黑质多巴胺神经元丢失的同时，应用利福平（30 mg·kg^-1·d^-1）灌胃给药，并通过对大鼠进行行为学、黑质病理学、TH和α-突触核蛋白的免疫活性以及蛋白量的表达情况等方面的检测以证明利福平对帕金森病动物模型多巴胺神经元具有保护作用，对α-突触核蛋白的形成和聚集具有抑制作用。结果: 低剂量长期背部皮下注射鱼藤酮可诱导SD大鼠出现行为学、黑质病理学、TH及α-突触核蛋白的免疫活性和蛋白量的表达情况的改变，而应用利福平灌胃后这些变化均显著减少。结论: 利福平对鱼藤酮帕金森病大鼠模型的多巴胺神经元具有保护作用，此作用与其对模型中α-突触核蛋白的形成和聚集的抑制作用密切相关。     

血管紧张素Ⅱ对肥厚心肌基质金属蛋白酶及细胞外基质的影响

目的: 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体（AT₁,AT₂）拮抗剂对梗死心脏肥厚心肌组织基质金属蛋白酶(MMPs)及细胞外基质成份的影响。方法: 结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型，术前7 d起分别用安慰剂、AT₁受体拮抗剂撷沙坦（valsartan）（10 mg·kg^-1·d^-1）、AT₂受体拮抗剂PD123319（30 mg·kg^-1·d^-1）。术后1、3、7、14 d分别检测室间隔（IS）MMP-2,3,9及其抑制物-1（TIMP-1）蛋白表达，以及细胞基质纤连蛋白（FN）、肌腱蛋白（TN-C）表达，免疫荧光分析FN、TN-C分布。结果: 心肌梗死14 d, IS呈典型的肥厚心肌病变。 手术组大鼠室间隔MMP-2、3、9及TN-C蛋白表达显著高于假手术组（P<0.01），TIMP-1和FN蛋白表达显著降低（P<0.01）; 手术加valsartan组 MMP-2、3、9 和 TN-C 蛋白表达明显低于手术组及手术加PD123319组, 相反， TIMP-1 和FN 蛋白表达显著高于手术组及手术加PD123319组 (P<0.01); 手术组与手术加PD123319组间MMP-2、3、9、TIMP-1、FN、TN-C蛋白表达差异无显著（P>0.05）。结论: AngⅡ参与心肌梗死心肌组织的重塑，通过AT1起作用调节MMPs降解细胞外基质， AT₁受体拮抗剂的心脏保护作用与其抑制MMPs有关。     

亚砷酸对类风湿性关节炎大鼠治疗作用的研究

目的： 探讨类风湿性关节炎大鼠发病机制并观察亚砷酸对AP-1和MIP-1α表达的影响。方法：随机将32只大鼠分成4组:对照组(C组)、关节炎组（A组）、LSA组（腹腔注射亚砷酸0.5 mg·kg^-1·d^-1）、HSA组（腹腔注射亚砷酸1.0 mg·kg^-1·d^-1）。免疫组织化学检测各组AP-1、MIP-1α表达；采用HE法观察滑膜病理改变。结果： C组未见AP-1和MIP-1α表达，A组AP-1及MIP-1α表达明显高于C组（P<0.05）； LSA组及HSA组AP-1、MIP-1α表达低于A组（P<0.05），且HSA组更明显。结论： AP-1和MIP-1α可能参与大鼠佐剂性关节炎发生、发展；亚砷酸能下调AP-1和MIP-1α表达,可能对RA有一定治疗作用。     

Mage-H1在PC12细胞分化前后的表达变化及其对细胞周期的影响

目的: 探讨黑色素瘤相关抗原H1(Mage-H1)在细胞增殖和分化调控中的作用。方法: 神经生长因子(nerve growth factor, NGF)诱导PC12细胞分化后用相差显微镜对其形态学进行观察。通过RT-PCR、Western blotting 检测分化前后Mage-H1表达变化情况。流式细胞技术分析PC12细胞瞬时表达Mage-H1对细胞周期的影响。结果: 经NGF诱导8 d后,92%以上PC12细胞属于已分化细胞。分化后的PC12细胞与对照组相比,Mage-H1表达上调。PC12细胞瞬时表达Mage-H1后被明显阻滞在G₀-G₁期。结论: Mage-H1可抑制PC12细胞增殖并促进细胞的分化。     

Wortmannin-mediated inhibition of phosphatidylinositol 3-kinase activity triggers apoptosis in normal and neoplastic B lymphocytes which are in cell cycle

The B cell functional response following ligation of surface(s) lgM is dependent upon the differentiation stage of the populationstudied: cross-linking slgM promotes proliferation of restingtonsillar follicular mantle (FM) B lymphocytes but induces apoptosisin the susceptible Epstein- Barr virus genome-negative Burkittlymphoma (BL) cell line Ramos (Ramos-BL). This study investigateswhether phosphatidylinositol-3-kinase (Pl3-kinase), which hasbeen reported to be intimately involved in the regulation ofcellular growth, plays a role in the regulation of these sig-promoted B cell responses, and uses the selective and irreversibleinhibitor of Pl3-kinase activity, wortmannin (Wm). In Ramos-BLB cells, at 8 h post-treatment, Wm triggers a transient increasein apoptosis of 16 ± 6.9% with a concomitant cellularloss of 16 ± 6.1% from the G₁ phase of cell cycle; [³H]thymidineincorporation also decreases by 33 ± 5.0%, from 37,274c.p.m. ± 10% to 25,127 c.p.m. ± 4.0%. Moreover,at 72 h culture, Wm inhibits anti-lgM-induced FM B lymphocytelevels of [³H]thymidine incorporation typically by 47% and triggers80% apoptosis from the G₀G₁ phase of cell cycle. Ramos-BL Bcells exhibit high basal levels of Pl3-kinase activity, as determinedby immunoprecipitation with antibody to the p85 regulatory subunitof Pl3-kinase and ³²P incorporation into phosphatidylinositol,which is not significantly affected by anti-lgM stimulation;by contrast, anti-lgM stimulates significant Pl3-kinase activityover negligible basal levels in FM B lymphocytes. Pre-treatmentwith Wm inhibits Pl3-kinase activity in both cell types. Takentogether these data indicate that in Ramos-BL B cells slgM-triggeredgrowth arrest and apoptosis is Pl3- kinase independent, whereasPl3-kinase activity is critical for slgM-triggered mitogenesisof FM B lymphocytes. Thus Pl3-kinase plays a pivotal role inthe regulation of both normal and neoplastic B lymphocyte progressionthrough the cell cycle, such that if this Pl3-kinase-dependentpathway is inhibited these cells default to apoptosis.     

IL-2-dependent induction of G1 cyclins in primary T cells is not blocked by rapamycin or cyclosporin A

Autocrine stimulation of the IL-2 receptor (IL-2R) is requiredfor commitment of a T cell to enter the cell cycle and may involvetransmission of the IL-2R signal to cell cycle control proteins.Candidates for such proteins are the D-type cyclins which areexpressed in G₁. Short-term cultures of primary human T cellswere used to show that expression of cyclins D2 and D3 is regulatedby IL-2 in a concentration- and time-dependent manner. CyclinD2 RNA was induced rapidly to peak levels well before initiationof DNA synthesis and gradually declined during the remainderof G₁. Cyclin D3 RNA and protein showed a slower induction duringG₁ to maximal levels as cells initiated DNA synthesis that remainedhigh throughout S phase. Induction of cyclins D2 and D3 wasindependent of the cyclosporin A-sensitive calclneurin pathwayand of rapamycin-senaltive pathways, despite the ability ofrapamycin to severely inhibit entry into S phase. These observationssuggest that cyclins D2 and D3 may monitor the IL-2R signalbut that their induction does not guarantee entry into S phase.Rapamycin was found to target a pathway late in G₁ that is distalto induction of D-type cyclin gene expression but proximal toDNA replication, perhaps involving the function of the D-typecyclin proteins or their associated kinases.     

AngⅡ诱导血管内皮细胞衰老及凋亡相关基因的表达

目的： 探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老及凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。方法: 体外培养人脐静脉内皮细胞, 采用四甲基偶氮唑蓝比色法测定内皮细胞存活率，用AngⅡ(10^-6mol/L)及valsartan（AngⅡ1型受体特异性拮抗剂）干预,分为实验对照组、AngⅡ诱导组及valsartan组，采用β-半乳糖苷酶染色和流式细胞术鉴定细胞衰老，通过Hoechst33258荧光染色观察细胞形态学变化，并利用免疫细胞化学染色法、RT-PCR法和Western blotting分析各组细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA及蛋白的表达水平。结果: 与对照组相比，10^-6mol/L AngⅡ诱导组存活的细胞数为对照组的（81.90±0.04)%; (80.10±6.81)%的细胞呈现β-半乳糖苷酶阳性染色。流式细胞仪检测细胞周期停滞于G₀-G₁［(91.36±6.45)%］，证实细胞衰老；荧光显微镜可见明显的细胞凋亡［(31.84±2.86)%］。与AngⅡ诱导组相比，valsartan组Bcl-2mRNA及蛋白表达水平明显增高(P<0.05), Bax mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论: AngⅡ可诱导体外培养的HUVECs老化。经AngⅡ诱导的衰老HUVECs发生凋亡，提示细胞凋亡参与了AngⅡ诱导HUVECs细胞的衰老过程。AngⅡ诱导血管内皮细胞衰老的分子机制之一可能与Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达的失衡有关。缬沙坦对血管内皮细胞衰老有一定保护作用。     

Role of IL-7 and KL in activating molecules controlling the G1/S transition of B precursor cells

While chemically defined conditions for culturing normal tissuehave been attained for only a few cell types, the sustainedproliferation of B precursor cells expressing lL-7 receptorand c-Kit can be supported under chemically defined conditionscontaining recombinant IL-7 and the ligand for c-Kit (KL). Tounderstand the biochemical basis of the cell cycle progressionof B precursor cells proliferating under these conditions, weinvestigated the correlation between growth factor stimulationand CDK4 activity. Consistent with our findings that IL-7 regulatesthe G transition, while KL has only a little role in this process,the kinase activity of CDK4 was related closely with IL-7 stimulationbut not KL stimulation. We investigated the mechanism underlyingCDK4 activation in the IL-7-stimulated B precursor cells. Ourresults showed that (i) CDK4 and cyclin D3 are the G₁/S regulatorsin B precursor cells; (ii) their expression levels are unchangedbetween the cells in G arrest and cycling cells; and (iii) theyare present in an associated form even when the cell cycle stageis arrested at G ¹ Thus, the regulation of the expression ofCDK4 and cyctin D3 or regulation of their assembly are not themechanisms for activating CDK4 in the B precursor cells. Onthe other hand, a number of molecules co-immunoprecipitatedwith CDK4 were enhanced in the lysate of IL-7-stimulated B precursorcells. Thus, we present a possibilIty that CDK4 activation mightbe regulated by molecules associated with the CDK4-cyclin 03complex in an IL-7-dependent manner.     

DNA ethylations induced by ethylnitrosourea in the wild type, cdc4 and cdc7 strains of Saccharomyces cerevisiae

The experiments reported here have investigated the inductionof ethylations to DNA in yeast cells exposed to the chemicalmutagen ethylnitrosourea. A similar level of alkylation wasseen at the N⁷ and O⁶ of guanine and at the N³ of adenine ineither log phase cells or in temperature-sensitive cdc4 andcdc7 cells growth arrested at their specific G₁ positions. Hencethe changes in chromosome structure associated with the abovecdc phenotypes do not modify the amount of DNA damage inducedby ethylnitrosourea. ¹To whom reprint requests should be addressed     

西红花酸对H2O2诱发心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的影响

目的：探讨西红花酸对过氧化氢（H₂O₂）诱导的培养心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的作用。 方法： 通过光镜观察细胞形态、碘化丙啶（PI）染色法和流式细胞术相结合检测培养细胞凋亡率、免疫荧光染色法和流式细胞术相结合检测细胞中caspase-3、Bcl-2蛋白。 结果： 在本实验使用浓度范围内，各浓度H₂O₂组细胞形态明显改变、凋亡率明显高于正常对照组，1×10^-4 mol·L^-1 H₂O₂可使培养心肌细胞Bcl-2蛋白表达明显减少，而caspase-3表达明显增多；各剂量西红花酸组细胞形态学改变减少、凋亡率明显低于1×10^-4 mol·L^-1 H₂O₂组，细胞中Bcl-2蛋白减少幅度与caspase-3增加幅度均减小，且较高浓度（5×10^-5 mol·L^-1）西红花酸组比较低浓度（5×10^-7 mol·L^-1）西红花酸组作用也更明显（P<0.05）。 结论： 西红花酸能够减轻H₂O₂对培养心肌细胞的损伤性凋亡作用，可能与稳定细胞内凋亡相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2的功能有关。     

丹酚酸B对活化的系膜细胞TGF-β_1受体和Smad2表达的影响

目的:通过观察丹酚酸B对活化的系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)受体和Sma与Mad的同源基因2(Smad2)分子表达的影响,探讨丹酚酸B拮抗系膜细胞活化及肾纤维化的机制。方法:分离纯化大鼠肾小球系膜细胞,TGF-β1刺激建立系膜细胞活化模型并检测Smad2、Smad7信号分子表达。丹酚酸B(剂量分别为10-6mol/L、10-5mol/L)进行干预,免疫荧光及蛋白印记法观察对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响,蛋白免疫印迹法检测系膜细胞TGF-β1两型受体(TβRⅠ、TβRⅡ)和Smad2信号分子表达的变化。结果:5μg/L TGF-β1刺激系膜细胞24h可成功制备系膜细胞活化模型,在系膜细胞活化早期即可见Smad2分子的显著磷酸化;10-6mol/L、10-5mol/L丹酚酸B均可明显抑制其活化标志蛋白α-SMA的表达;丹酚酸B干预可致系膜细胞TGF-β1两型受体表达减少,Smad2的磷酸化状态被抑制。结论:丹酚酸B可通过抑制大鼠肾小球系膜细胞TβRⅠ、TβRⅡ表达和信号分子Smad2的磷酸化而拮抗其活化,这可能是丹酚酸B抗肾纤维化的细胞学机制之一。     

普罗布考抑制bFGF和H2O2引起的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖

目的： 研究普罗布考抑制碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和H2O2促大鼠主动脉平滑肌细胞（RASMCs）增殖的机制。方法: 采用MTT、［³H］-TdR掺入法、流式细胞术和RT-PCR观察普罗布考对bFGF和H₂O₂刺激条件下细胞周期、细胞增殖和凋亡的影响。结果: ①普罗布考抑制bFGF和H₂O₂刺激RASMCs增殖。细胞计数、A值和［³H］-TdR掺入量分别下降了40.0%、39.1%、45.5%和46.9%、45.0%、39.5%（P<0.05，P<0.01）。②普罗布考使RASMCs生长停滞在G₀/G₁期，抑制bFGF刺激的细胞增殖，通过诱导细胞凋亡和抑制细胞生长2种方式抑制H₂O₂刺激的细胞增殖。③bFGF和H₂O₂分别使ERK1mRNA表达量增加近4倍和6倍，MKP-1mRNA表达量下降了62.4%和82.2%。普罗布考抑制ERK1mRNA表达，使H₂O₂诱导的MKP-1表达下降上调，而对bFGF诱导MKP-1表达下降无明显影响。结论: 普罗布考通过降低ERK1mRNA表达抑制细胞周期运转和诱导RASMCs凋亡，从而抑制bFGF和H₂O₂刺激引起的细胞增殖。