三种赤灵芝粉对免疫抑制模型小鼠免疫功能的调节作用

目的:为了探讨灵芝调节机体免疫功能的作用机制,并寻找出一种能有效改善机体免疫功能的灵芝制剂,本文研究了三种赤灵芝粉对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法:实验动物随机分为5组(Ⅰ～Ⅴ组),Ⅱ～Ⅴ组采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)70 mg.kg-1.bw-1,隔日注射,共4次,以制备动物模型,Ⅰ组注射等体积生理盐水。Ⅲ～Ⅴ组于注射CTX次日及末次注射CTX后11日内分别灌胃给予赤灵芝破壁孢子粉(D1)、赤灵芝孢子粉(D2)和赤灵芝精粉(D3)(1g.kg-1.bw-1),定期监测小鼠体重;给药后无菌取脾脏称重,计算脾指数;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验检测巨噬细胞吞噬功能;采用NK细胞介导的细胞毒试验检测NK细胞功能;采用淋巴细胞转化试验检测T、B淋巴细胞功能;采用流式细胞术检测CD4+T及CD8+T细胞比例。结果:与免疫抑制组相比,小鼠给予灵芝粉后,三组小鼠体重均升高(P<0.05);D3组脾指数降低;D1和D2组小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬指数较免疫抑制组升高(P<0.05);三组小鼠NK细胞杀伤活性无明显变化;脾脏T、B淋巴细胞增殖能力无明显变化;D3组小鼠脾脏CD4+和CD8+T细胞比例明显升高,特别是CD4+T细胞升高最为显著且较正常对照高(P<0.05)。结论:三种灵芝对免疫抑制模型小鼠的免疫功能具有调节作用,尤其是赤灵芝精粉具有显著提高CD4+T细胞数量的作用,为其临床应用提供了实验依据。     

雪灵芝粗多糖对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的探讨雪灵芝粗多糖(arenaria kansuensis crude polysaccharide,AKCP)对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法将小鼠随机分为5组:空白对照组、环磷酰胺(CTX)模型组、AKCP高、中、低剂量组。除空白对照组外其他4组采用腹腔注射CTX建立小鼠免疫低下模型。各组分别给予蒸馏水、不同剂量AKCP灌胃,10 d后处死小鼠,检测体质量增率、胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖活性和CD3~+/CD4~+/CD8~+亚群、NK细胞杀伤活性、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、血清中IL-2和IFN-γ水平。结果 CTX组除NK细胞杀伤活性外的上述各项指标均较对照组明显降低(P0.05),不同剂量AKCP作用可减轻CTX所致的各项指标下降,其中AKCP高、中剂量组体质量增率、胸腺指数、脾淋巴细胞CD3~+及CD3~+CD8~+亚群、巨噬细胞吞噬率与吞噬指数均较CTX模型组明显升高(P0.05),AKCP低剂量组脾脏指数、脾淋巴细胞增殖指数以及IL-2和IFN-γ水平显著高于CTX模型组(P0.05)。结论 AKCP对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的免疫功能有保护作用。     

IL-2基因修饰的肿瘤细胞对小鼠体内巨噬细胞数量和功能的影响

目的　探讨IL - 2基因修饰的肿瘤细胞对小鼠体内巨噬细胞 (M)数量和功能的影响 .方法　应用腺病毒载体介导的小鼠IL - 2基因 (Ad -mIL - 2 )修饰CT2 6小鼠结肠腺癌细胞 (CT2 6 -mIL - 2 )后皮下接种小鼠 ,计数小鼠腹腔M的数量 ,观察其吞噬功能 ,混合淋巴细胞反应法 (MLR)测定其抗原提呈能力 ,MTT法检测其杀伤活性 .结果　mIL - 2基因修饰的CT2 6细胞 (CT2 6 -mIL - 2细胞 )皮下接种后 ,小鼠腹腔M数量显著增加 ,吞噬能力明显增强 ,抗原提呈能力提高 ,并具有较强的杀伤活性 .结论　CT2 6 -mIL - 2细胞分泌的IL - 2能有效地激活M ,这可能是CT2 6 -mIL - 2细胞体内致瘤性下降的原因之一 .     

霍山石斛多糖对小鼠的双向免疫调节作用

目的观察霍山石斛多糖对小鼠的双向免疫调节作用。方法将90只昆明种小鼠随机分成9组,分别为正常对照组、免疫亢进模型组、免疫亢进+霍山石斛多糖[低(50 mg?kg-1?d-1)、中(100 mg?kg-1?d-1)、高(200 mg?kg-1?d-1)]剂量组、免疫抑制模型组、免疫抑制+霍山石斛多糖[低(50 mg?kg-1?d-1)、中(100 mg?kg-1?d-1)、高(200 mg?kg-1?d-1)]剂量组。采用连续3 d腹腔注射环磷酰胺(80 mg·kg-1)制作免疫抑制模型小鼠,采用连续11 d肌注卡介苗0.5 mg/只制作免疫亢进模型小鼠,观察霍山石斛多糖对免疫抑制模型小鼠和免疫亢进模型小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性、体外脾淋巴细胞增殖能力和胸腺指数的影响。结果霍山石斛多糖能明显改善环磷酰胺所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性降低、脾淋巴细胞体外增殖能力降低和胸腺指数降低,缓解卡介苗所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性亢进、脾淋巴细胞体外增殖能力亢进和胸腺指数降低。结论霍山石斛多糖具有较好的双向免疫调节作用。     

联合应用IL-2及IL-4基因转染瘤苗对实验性肺转移肿瘤的治疗作用

将IL—2基因转染的高分泌IL—2的B16黑色素瘤细胞株(B2)及IL—4基因转染的高分泌IL—4的B16黑色素瘤细胞株(B4)制备成新型瘤苗,用以治疗实验性肺转移荷瘤小鼠,并辅以低剂量环磷酰胺,结果表明,荷瘤小鼠存活期明显延长;肺部转移结节数明显减少;两种瘤苗联合治疗后的疗效较单独使用明显,当辅以低剂量环磷酰胺时治疗效果更加明显。体内免疫功能检测表明,经两种瘤苗联合治疗的荷瘤小鼠脾细胞NK及CTL杀伤活性升高得更加明显,但对LAK活性及腹腔巨噬细胞杀伤活性无明显协同增强作用;脾细胞经诱导后产生的细胞因子中,IL—2含量有所升高。     

多糖对免疫细胞调节作用的新视角 ——对树突状细胞的影响

多糖作为一种免疫调节和促进剂对巨噬细胞、T/B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)的功能都有调节作用,树突状细胞(DC)是功能最强大的抗原提呈细胞,多糖对树突状细胞功能的影响近年来也有所报道,主要包括多糖对树突状细胞表面分子的表达、细胞因子分泌、吞噬功能、多糖受体及信号转导途径等方面的调节作用。     

玉屏风散对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响

目的:探讨玉屏风散对荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响.方法:采用体外培养S180肉瘤细胞,接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型,并给予玉屏风散治疗,观察计算抑瘤率,检测巨噬细胞吞噬活性,巨噬细胞NO分泌量,自然杀伤细胞(NK)活性,T淋巴细胞增殖能力及白介素-2(IL-2)的产生及活性.结果:玉屏风散可提高荷瘤小鼠吞噬细胞的功能,增加巨噬细胞NO分泌量,促进荷瘤小鼠白介素-2(IL-2)的产生,淋巴细胞的转化、及NK细胞活性.结论:玉屏风散可增强荷瘤小鼠的免疫功能,抑制模型鼠肿瘤的生长.     

戴氏虫草和粉被虫草多糖对巨噬细胞等活性的影响

目的 研究虫草属新种-戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖（CDP1）和粉被虫草菌丝体多糖（CPP1）在体外对小鼠腹腔巨噬细胞（Mφ）吞噬功能和脾细胞免疫功能的影响。方法 MTT比色法测定淋巴细胞增殖,孔雀绿比色法测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,中性红比色法测定细胞毒淋巴细胞（CTL）活性,结果 CDP1在正常情况下不能促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,而CPP1却有促进作用;在免疫抑制的情况下,一定浓度的戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖和粉被虫草多糖能恢复提高吞噬细胞的吞噬功能,而CPP1却有促进作用;在免疫抑制的情况下,一定浓度的戴氏虫草菌丝体细外水溶性多糖和粉被虫草多糖能恢复提高吞噬功能,它们不仅能促进正常脾活化T淋巴细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺和氢化可的松抑制免疫小鼠脾活化T淋巴细胞的增殖,在合适的浓度下能增高小鼠脾CTL活性,同时在一定浓度下能恢复免疫抑制小鼠脾CTL活性。结论 两者具有增强免疫功能的作用。     

虎眼万年青多糖对小鼠免疫功能的调节作用

目的 :依据虎眼万年青组分中多糖对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 ,筛选并优化出 6 0 %醇浓度中性多糖活性组分S3,进而研究其对体液免疫、细胞免疫及细胞因子变化的影响 ,并从细胞和分子水平探讨其作用的机理。方法 :采用溶血素测定方法 ,测定S3对小鼠脾细胞溶血素抗体的诱导作用 ;采用3H TdR渗入法 ,测定S3对ConA诱导小鼠脾淋巴细胞的增殖作用 ;采用3H TdR后标记法 ,测定S3对NK细胞细胞毒活性的影响 ;以ELISA法测定S3对小鼠脾细胞IL 2产生的影响 ;利用流式细胞术 ,检测S3对T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4 CD8阳性细胞百分率的影响 ;采用RT PCR方法检测IL 2mRNA的表达水平。结果 :S3高、中剂量组能明显增强小鼠脾细胞溶血素抗体的形成 (P <0 0 5 ) ;各剂量组均能明显增强ConA诱导的淋巴细胞增殖能力 (P <0 0 0 1) ;各剂量组均能增强NK细胞的细胞毒活性并促进IL 2的产生 (P <0 0 0 1,P <0 0 1) ;高、中剂量组CD8阳性细胞百分率明显降低 (P <0 0 0 1) ,各剂量组均能显著地提高CD4 CD8阳性细胞百分率 (P <0 0 0 1) ;高剂量组可明显促进脾细胞中细胞因子IL 2的mRNA表达 ,使表达量增加 (P <0 0 5 )。结论 :S3具有较强的增强机体多种免疫功能的作用 ,可利用开发为一种免疫增强药物。     

北豆根提取物对小鼠和人淋巴细胞及巨噬细胞作用的体外实验研究

目的：探讨中药北豆根提取物的免疫学调节作用及其作用机制；比较北豆根水提物、醇提物和多糖成分的生物学活性。方法：采用水提取、醇提取及水回流等方法对北豆根进行成分分离。采用MTT法、中性红法检测了北豆根提取物对淋巴细胞增殖的作用以及对小鼠巨噬细胞代谢和吞噬功能的影响。结果：北豆根多糖成分(RMP)具有丝裂原样作用，可刺激小鼠脾细胞及人淋巴细胞增殖，对小鼠巨噬细胞的吞噬功能有一定的促进作用。而北豆根水提物(RMW)和醇提物(RME)对小鼠脾细胞、人淋巴细胞的增殖具有抑制作用，对小鼠巨噬细胞的代谢及吞噬功能也有抑制作用。结论：不同的北豆根成分对免疫细胞有不同的作用，水提物和醇提物对免疫细胞的增殖、代谢和功能具有一定的抑制作用；北豆根多糖成分对淋巴细胞具有丝裂原样作用，能增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能，该活性可用于临床辅助治疗肿瘤。     

IL-2联合银耳多糖激活的同种脾细胞对肝癌实验性治疗的研究

目的 :研究淋巴因子IL 2联合银耳多糖 (TremellaPolysaccharideTP)共同激活的小鼠腺细胞对体外肿瘤细胞的杀伤作用及小鼠移植性肝癌的治疗作用。方法 :将IL 2激活的小鼠脾细胞 (即LAK细胞 )和IL 2与银耳多糖协同激活的小鼠脾细胞 (即TP LAK细胞 )分别作用于体外培养的3H TdR标记的肿瘤细胞P815、H2 2和B16 ,2小时后用γ 闪烁计数仪进行检测 ,并记算杀伤程度。将上述激活的小鼠脾细胞在小鼠荷肝癌局部皮下注射 ,隔日 1次 ,共 5次。检测肿瘤重量、体积、组织学改变和主要脏器的形态学改变。结果 :IL 2与银耳多糖激活的小鼠脾细胞对体外培养的肿瘤细胞有明显的杀伤作用 ,两种效应细胞对B16杀伤作用最强 ,H2 2次之 ,P815最弱 ,TP LAK细胞的作用较之LAK细胞更强 (P <0 0 5 )。治疗组肝肿瘤重量、体积均低于对照组。组织学上肿瘤坏死程度重且范围广 ,淋巴细胞、单核细胞浸润明显 ,纤维组织增生明显。银耳多糖协同IL 2实验组织较单纯的IL 2实验组表现的更为明显。除脾脏外 ,其它主要脏器无明显形态学变化。结论 :IL 2激活脾LAK细胞是有效的抗肝癌细胞 ,IL 2与银耳多糖在活化脾细胞提高抗肿瘤方面具有协同作用 ,对体内主要脏器无明显影响     

GM-CSF与TGF-β联合处理小鼠供体骨髓细胞诱导特异性免疫耐受

目的:观察用GM-CSF和TGF-β在体外处理供体骨髓细胞(BM)后,输给受体鼠,观察能否诱导受体鼠对供体鼠淋巴细胞的特异性耐受。方法:体外用GM-CSF与TGF-β联合处理供体BM细胞诱导非成熟树突状细胞(iDC),并检测其成熟度。将BALB/c受体鼠随机分为3组,进行不同的预处理:(1)BM预免疫组:经尾静脉输入体外诱导的iDC,1×105细胞/只;(2)脾细胞预免疫组:经尾静脉输入C57BL/6供体鼠脾细胞,1×105/只;(3)阴性对照组:经尾静脉输入同体积的PBS。每组小鼠均需经过2次预免疫,每次间隔1周。第2次处理后1周,所有组的小鼠均接受相同剂量的C57BL/6来源的脾细胞腹腔注射,1×105/只。脾细胞攻击后3d,检测各组小鼠对C57BL/6小鼠脾细胞的同种异体反应水平,检测指标包括:采用单向混合淋巴细胞培养方法检测受体鼠淋巴细胞对供体鼠淋巴细胞的增殖指数;采用双抗体夹心ELISA检测受体鼠血清中IFN-γ和IL-10水平、FCM检测脾脏CD4+CD25highTreg细胞含量、及NK细胞抑制性受体KLRG1的表达、采用乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞杀伤功能。结果:经GM-CSF和TGF-β体外处理的供体BM细胞能够抵抗脂多糖(LPS)促成熟的作用;与脾细胞预免疫组相比,经此BM细胞预处理的小鼠,再次遭遇供体小鼠淋巴细胞时,血清IL-10的含量降低(P0.05)、脾脏中CD4+CD25highTreg细胞的比例明显升高、对C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖反应减弱(P0.01);NK细胞杀伤率降低。结论:用GM-CSF与TGF-β联合处理供体小鼠BM细胞在一定程度上能够诱导小鼠对供体小鼠脾细胞的免疫耐受,除Treg外,NK细胞可能也参与了诱导免疫耐受。     

灰树花提取成分对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的:以NK细胞杀伤活性,巨噬细胞吞噬功能及TNFα,IL-1的产生水平为指标,对灰树花乙醇沉淀物（ET-Pre）和RNA提取物影响小鼠非特异性免疫功能及其抗肿瘤机制作初步探讨。方法:以常规生物学测定的乳酸脱氢酶法,吞噬中性红法,结晶紫染色法,MTT生物活性测定法进行检测。结果:灰树花ET-Pre和RNA提取物处理组小鼠脾NK细胞杀伤活性,巨噬细胞吞噬功能及TNF-α,IL-1的产生水平均较对照组呈现有显著意义的增高或增强。并且灰树花RNA提取物提高NK细胞杀伤活性和巨噬细胞吞噬功能的程度大于灰树花ET-Pre的作用。结论:灰树花两种提取物可增强机体非特异性免疫功能,间接发挥抗肿瘤作用。     

RhIL-18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用

目的探讨重组人白细胞介素18(rhIL-18)对核辐射所致小鼠脾细胞凋亡的抑制作用及其对免疫功能的调节调节。方法对32只C57小鼠分4组进行核辐射损伤,2周后取小鼠脾淋巴细胞体外培养,用细胞死亡ELISA试剂盒测定胞浆中核小体含量,用DAN琼脂糖电泳检测凋亡细胞DNA片段,用淋巴细胞转化实验测定rhIL-18对脾细胞免疫功能的调节作用。结果与对照组比较,rhIL-18能够明显降低核辐射所致的小鼠脾细胞凋亡;提高核辐射损伤后小鼠的脾细胞细胞转化能力。结论rhIL-18可能通过抑制核辐射诱导的细胞凋亡而增强小鼠脾细胞功能。     

重组人IL-18对辐射损伤后小鼠免疫功能的调节作用

目的:探讨重组人IL-18(IL-18)对辐射损伤后小鼠免疫功能的影响.方法:对32只小鼠分4组进行辐射损伤,然后分别用淋巴细胞转化实验、NK细胞细胞毒实验、T淋巴细胞亚群测定和血清中IgG测定方法观察IL-18对其免疫功能的调节作用.结果:重组人IL-18能够提高辐射损伤后小鼠的T、B淋巴细胞转化能力,增强NK细胞对肿瘤细胞的杀伤能力,上调CD4 T细胞的数量,但对IgG产生能力没有调节作用.结论:重组人IL-18对辐射后小鼠免疫功能损伤有促进恢复的作用.     

红车轴草提取物对小鼠淋巴细胞[Ca2+]i及腹腔巨噬细胞NO分泌和吞噬的影响

目的探讨红车轴草提取物(Trifoliumpratense Leguminosae extract,TLE)体外对小鼠淋巴细胞[Ca2+]i及腹腔巨噬细胞NO分泌和吞噬微球的影响。方法无菌条件下制备小鼠淋巴细胞悬液及小鼠腹腔巨噬细胞悬液;MTT法检测药物对细胞悬液的毒性情况;Fluo-4/AM染色结合流式细胞术分析TLE对小鼠淋巴细胞[Ca2+]i的影响;Griess反应系统检测TLE对脂多糖(LPS)刺激的小鼠腹腔巨噬细胞NO分泌的影响;1μm与2μm直径的荧光微球结合流式细胞术分析TLE对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的影响。结果终质量浓度为20、40mg/L的TLE对细胞的毒性小;TLE促进了淋巴细胞的Ca2+内流;TLE抑制了巨噬细胞的NO分泌与吞噬作用,与非TLE组比较P<0.01。结论对淋巴细胞[Ca2+]i及巨噬细胞的NO分泌和吞噬的作用可能是TLE调节小鼠免疫系统的途径。     

复方猪苓多糖对小鼠免疫功能的调节

目的 比较猪苓多糖单、方剂对机体的免疫调节作用,验证中药制剂增强机体免疫功能和拮抗肿瘤的正向调节作用。方法 本实验旨在观察猪苓多糖单、方剂对环磷酰胺免疫抑制效应的调节作用。通过检测小鼠淋巴细胞转化功能、ＮＫ细胞杀伤活性、Ｔ细胞亚群和ＩｇＧ水平等指标来比较。结果 复方猪苓多糖具有：（１）提高免疫功能低下小鼠Ｔ,Ｂ淋巴细胞转化能力;（２）增强免疫功能低下小鼠ＮＫ细胞杀伤肿瘤细胞的能力;（３）上调免疫功     

细粒棘球蚴感染中阻断TGF-β1受体对淋巴细胞的影响

目的:观察TGF-β1对细粒棘球蚴体外与BALB/c小鼠T淋巴细胞培养的影响。方法:阻断剂组:BALB/c小鼠脾细胞+细粒棘球蚴+SB525334共培养;对照组:BALB/c小鼠脾细胞+细粒棘球蚴+PBS共培养;空白对照:BALB/c小鼠脾细胞+RPMI-1640培养基+SB525334共培养。方法:48 h收集淋巴细胞,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群、CD4+CD25+T细胞的数量、NK细胞的数量及其活性受体NKG2D的表达;乳酸脱氢酶法检测NK细胞的杀伤活性。结果:体外阻断TGF-β1受体后,引起细粒棘球蚴介导的CD4+T细胞数量升高、CD8+T细胞数量降低、CD4+/CD8+T细胞比值升高、CD4+CD25+T细胞数量减少、NK细胞活性受体NKG2D的表达增加、NK细胞对靶细胞Yac-1的裂解率增加和NK细胞活性及其活性受体NKG2D成正相关。结论:体外阻断TGF-β1受体可提高T淋巴细胞免疫,从而抵制细粒棘球蚴的感染。     

IL-2基因修饰的肿瘤细胞对小鼠体内巨噬细胞数量和功能的影响

目的探讨IL-2基因修饰的肿瘤细胞对小鼠体内巨噬细胞(Mφ)数量和功能的影响.方法应用腺病毒载体介导的小鼠IL-2基因(Ad-mIL-2)修饰CT26小鼠结肠腺癌细胞(CT26-mIL-2)后皮下接种小鼠,计数小鼠腹腔Mφ的数量,观察其吞噬功能,混合淋巴细胞反应法(MLR)测定其抗原提呈能力,MTT法检测其杀伤活性.结果 mIL-2基因修饰的CT26细胞(CT26-mIL-2细胞)皮下接种后,小鼠腹腔Mφ数量显著增加,吞噬能力明显增强,抗原提呈能力提高,并具有较强的杀伤活性.结论 CT26-mIL-2细胞分泌的IL-2能有效地激活Mφ,这可能是CT26-mIL-2细胞体内致瘤性下降的原因之一.     

肺癌DC融合细胞诱导的抗肿瘤免疫应答

目的 研究肺癌DC融合细胞FLD－A11体内外诱导免疫应答的能力,方法 用MTT法测定FLD－A11细胞诱导淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测其诱导淋巴细胞分泌IL－2的水平;LDH释放法测定FLD－A11细胞免疫后小鼠脾淋巴细胞的特异性CTL活性。结果 FLD－A11有有效刺激淋巴细胞的增殖反应（SC：RC＝1：50时,SI＝2.38）,诱导淋巴细胞分泌IL－2。FLD－A11细胞免疫后,小鼠的胸腺和脾脏重量均高于对照组（P＜0.05）,脾淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性显著高于对照组。结论 FLD－A11细胞具有诱导初次抗肿瘤免疫应答的能力,不仅能在体外诱导淋巴细胞的增殖和IL－2的分泌,而且体内免疫接种也能引起小鼠免疫器官的增生反应,产生针对Lewis肺癌的特异性CTL杀伤作用。