恶性黑色素瘤患者肿瘤组织中BRAF基因突变的?分子病理检测

目的:探讨恶性黑色素瘤患者肿瘤组织中BRAF基因突变情况.方法:应用Taqman-ARMS方法检测164例恶性黑色素瘤患者肿瘤组织中BRAF基因突变情况.结果:恶性黑色素瘤患者肿瘤组织中BRAF基因总突变率为11.59%(19/164),均为V600E突变,BRAF基因突变在黑色素瘤亚型和临床分期Ⅰ或Ⅱ中差异有统计学意义(P<0.05).结论:恶性黑色素瘤患者中BRAF基因存在一定的突变率,且慢性日光损伤型或非慢性日光损伤型及Ⅲ或Ⅳ期恶性黑素瘤BRAF基因突变多见.     

BRAF基因突变在甲状腺乳头状癌中的临床意义

目的：探讨BRAF V600E基因突变与甲状腺乳头状癌的临床相关性。方法：采用PCR技术和直接测序法,对63例甲状腺乳头状癌患者和45例其他类型甲状腺疾病患者石蜡组织BRAF V600E基因突变进行检测。结果：甲状腺乳头状癌组中32例存在突变;而在其他类型甲状腺疾病组中未发现突变。BRAF V600E基因突变在甲状腺乳头状癌不同肿瘤直径组之间的比较差异以及在有无区域淋巴结转移组之间的比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论：BRAF V600E基因突变与甲状腺乳头状癌的发生、肿瘤的大小和区域淋巴结的转移有关。     

黑色素瘤组织和血液中的BRAF V600E基因检测

目前BRAF(V600E)基因突变已在转移性黑色素瘤、结肠癌、甲状腺癌和其他的癌症中均被发现。研究表明,带有这种基因突变的肿瘤对于BRAF抑制剂尤其敏感,因此需要可靠地确定肿瘤标本的BRAF基因状态。目前常常用于这种突变筛查的技术不能解决间质的浸润和免疫细胞野生型     

实时剪切波弹性成像杨氏模量最大值诊断甲状腺乳头状癌BRAF V600E基因突变的价值

目的:探究实时剪切波弹性成像（SWE）杨氏模量最大值诊断甲状腺乳头状癌（PTC）鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1（BRAF）V600E基因突变的价值。方法:回顾性分析2018年1月~2019年6月宿迁市第一人民医院收治的110例PTC患者共124个结节的临床及超声影像学资料。患者经病理学检查均确诊为PTC,并完成了BRAF V600E基因检测以及SWE检查,临床资料完整。通过比较V600E基因突变型与野生型PTC的SWE检查结果,并绘制患者Emax值的ROC曲线,分析Emax值对PTC患者BRAF V600E基因突变的诊断效能。结果:BRAF基因检测结果显示:124个PTC结节BRAF基因检测V600E野生型共37个,V600E突变型共87个。野生型PTC结节的SWE图像多以蓝色为主,而突变型主要表现为红橙相间彩色混杂的图像。突变组PTC结节Emax、Emean、Eratio值均明显大于野生组,比较差异具有统计学意义（P<0.05）,ROC曲线分析显示:Emax值诊断V600E突变的AUC=0.846>0.5（95%CI:0.808~0.885, P<0.01）;Cut-off值为43.65 kPa,此时敏感度为91.45%,特异性为68.23%。以Emax≥43.65 kPa为临界值对124个结节进行诊断,结果显示:SWE诊断PTC结节为V600E基因突变型90个,野生型34个,正确率为86.29%;SWE诊断结果与基因检测结果一致性显著（Kappa值=0.665, P<0.01）。结论:PTC BRAF V600E基因突变型与野生型的SWE影像学特征具有明显差异,应用SWE的Emax值诊断PTC结节V600E基因突变的正确率和敏感性均较高,诊断价值显著,值得在临床上推广应用。     

推进BRAF基因突变检测,提高临床肿瘤诊疗水平

正日前,中国医学科学院肿瘤医院病理科应建明教授在中华医学会病理学分会第二十一次学术会议暨第五届中国病理年会上,分享BRAF基因突变检测在甲状腺癌、结直肠癌(CRC)等实体瘤鉴别诊断、治疗指导及预后管理方面的重要意义,以及免疫组化BRAF V600E抗体检测方法的临床应用。应建明教授指出:BRAF V600E在多种肿瘤中均有表达,其对于多种肿瘤的预后管理、鉴别诊断及治疗等均有很好的临床     

BRAF V600E和TERT启动子突变与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系

目的探讨鼠类肉瘤滤过性酶菌致癌同源体B1(BRAF)V600E基因突变和端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的发生率及其与临床病理特征的关系。方法收集62例PTC患者新鲜冷冻组织进行显微切割,收集癌细胞并提取DNA,PCR扩增后利用测序法对PTC患者BRAF V600E和TERT启动子突变进行检测,并收集62例患者的临床病理资料进行统计学分析。结果 62例PTC中58例(94%)在BRAF T1799A处发生突变。有13例(21%)在TERT启动子C228T处发生突变。PTC患者中,BRAF V600E基因突变仅与肿瘤大小有关(P0.05),TERT启动子突变与PTC患者年龄、肿瘤大小有关(P0.05)。结论 BRAF和TERT启动子突变对PTC患者的临床病理表现产生一定影响,对患者的预后评估具有指导意义。     

非小细胞肺癌中BRAF V600、EGFR基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中BRAF V600、EGFR基因突变及其与临床病理特征的关系。方法采用PCR-DNA测序法检测146例NSCLC标本中BRAF V600、EGFR基因突变情况,并分析基因突变与临床病理特征的关系。结果 BRAF V600基因突变率为7.5%(11/146),与患者吸烟史有关(P=0.045),而与患者性别、年龄、组织学类型及分化程度等无关(P0.05)。EGFR基因突变率为46.6%(68/146),多见于女性、不吸烟、腺癌患者(P0.05)。共检测出4例同时具有BRAF V600(3例V600E及1例V600D)及EGFR基因突变(19号外显子缺失2例,21号外显子L858R突变2例),两者未见相关性(P0.05)。结论 NSCLC患者BRAF V600基因突变与患者性别、年龄、组织学类型及分化程度等无关,多见于无吸烟史患者。     

比较实时荧光 PCR 法与 Sanger 测序法检测甲状腺乳头状癌BRAF基因突变

目的：分析实时荧光PCR(real-time PCR)法与Sanger测序法检测甲状腺乳头状癌患者BRAF V600E基因突变的阳性率及符合率。方法收集312例甲状腺乳头状癌手术切除标本,分别采用real-time PCR法和Sanger测序法检测甲状腺乳头状癌中BRAF V600E基因突变情况。结果312例甲状腺乳头状癌标本real-time PCR法和Sanger测序法检出BRAF基因突变的阳性率分别为65．4%(204/312)、63．8%(199/312)。 BRAF基因突变与患者性别无关,与患者年龄相关;两种方法检测结果总符合率为98．4%。结论 real-time PCR法适用于BRAF基因突变的检测。     

甲状腺乳头状癌BRAF V600E突变与肿瘤相关成纤维细胞的关系

目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中BRAF V600E突变与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAF)的关系。方法收集PTC标本890例,采用ARMS-PCR法检测BRAF V600E基因突变,应用免疫组化EnVision两步法检测α-SMA的表达以标记CAF的增生,分析两者的相关性及与临床病理特征的关系。结果 PTC中CAF增生率为85.51%,CAF增生与PTC腺外侵犯、钙化有关。BRAF V600E突变率为70.67%,BRAF V600E突变与肿瘤直径、被膜侵犯、CAF增生相关,BRAF V600E突变与患者性别、年龄、病灶数量、腺外侵犯、钙化、TNM分期、淋巴结转移均无关。结论 CAF增生提示肿瘤侵袭能力增强,BRAF V600E突变的PTC细胞可能与CAF相互作用,改变肿瘤微环境,使PTC更易发生腺外侵犯。     

新疆地区甲状腺乳头状癌中BRAF V600E基因的表达及意义

目的探讨新疆地区BRAF V600E基因点突变在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,及其与临床病理特征的关系。方法收集原发性PTC 178例,石蜡包埋组织经QIAGEN试剂盒提取DNA,经Taq Man探针荧光定量PCR技术检测PTC中BRAF基因点突变。结果 178例原发性PTC中BRAF V600E基因点突变142例,突变率为79.8%(142/178)。患者年龄(≥45岁)、肿瘤直径(≤1 cm)、被膜外侵犯BRAF V600E基因点突变率高(P均0.05),而BRAF V600E基因点突变与患者性别、多灶性及淋巴结转移灶和肿瘤部位均无相关性(P均0.05)。结论新疆地区PTC中BRAF V600E基因点突变与临床病理特征密切相关,且具有一定特异性,可作为PTC诊断提供依据。     

分化型甲状腺癌中BRAF V600E突变分析

目的探讨分化型甲状腺癌中BRAF V600E突变与临床病理特征的关系。方法收集甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)80例(其中经典型67例、滤泡亚型8例、嗜酸细胞亚型3例、高细胞亚型2例)、滤泡癌5例,其中30例PTC取相应癌旁组织,全部送基因检测室检测BRAF V600E突变情况。结果 80例PTC中BRAF V600E突变率为65.0%,5例滤泡癌及30例癌旁组织中未发现BRAF V600E突变;BRAF V600E突变与患者年龄、肿瘤包膜侵犯、淋巴结转移及TNM分期有关。PTC亚型中,经典型和高细胞亚型的BRAF V600E突变率较高(70.1%、100.0%),滤泡亚型的突变率较低(33.3%)。结论PTC中BRAF V600E突变可能与患者年龄有一定相关性,还与包膜侵犯、淋巴结转移及TNM分期有关,经典型和高细胞亚型的BRAF V600E突变率较高,明显高于滤泡亚型。     

甲状腺乳头状癌BRAF V600E、TERT和RET分子检测及与临床病理特征的关系

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中三种驱动基因BRAF V600E、TERT和RET与临床病理特征的关系。方法 收集4 678例PTC,2 637例患者行BRAF V600E和TERT启动子检测(C250T和C228T位点),另2 041例患者行BRAF V600E和RET检测，并分析以上3种基因与临床病理特征的关系。结果 PTC中BRAF V600E、TERT及RET基因阳性检出率分别为88.9%(4 161/4 678)、0.5%(12/2 637)、3.7%(75/2 041)。BRAF V600E突变仅与被膜侵犯及桥本甲状腺炎伴随相关(P<0.05);TERT启动子突变与患者年龄、肿瘤最大径、肿瘤数量、淋巴结转移、TNM分期均有关(P<0.05);RET基因融合与患者性别、肿瘤最大径、淋巴结转移、桥本甲状腺炎伴随有关(P<0.05)。双基因改变患者合计12例，包括1例BRAF V600E突变伴CCDC6-RET(Exon1-Exon12)基因重排变异，1例BRAF V600E突变伴NCOA4-RET(...     

FNAB联合BRAF基因突变检测在术前甲状腺结节诊断中的应用

目的探讨术前甲状腺结节诊断中细针穿刺活检(fine-needle aspiration biopsy,FNAB)联合丝/苏氨酸特异性激酶基因V600E(BRAF V600E)突变检测的应用价值。方法选取88例甲状腺结节患者,经超声检查TI-RADS分级Ⅳ~Ⅴ级,均行FNAB联合BRAF V600E突变检测,并分析其在术前诊断中的应用价值。结果随着TI-RADS分级的增高BRAF突变阳性率显著增高(P0.05),在恶性病变中BRAF V600E突变率较高(80.4%),FNAB检测与术后病理符合率为71.6%,联合BRAF V600E突变检测与术后病理符合率为86.4%,联合检测明显优于单独FNAB检测(χ~2=5.783,P=0.016)。结论术前行FNAB联合BRAF V600E突变检测能够精确FNAB的诊断,提高术前诊断率。     

43例中国眼部恶性黑色素瘤cKit和BRAF基因突变分析

 目的 分析中国眼部恶性黑色素瘤中cKit和BRAF基因突变情况。方法 收集43例中国眼部恶性黑色素瘤患者组织标本（脉络膜恶性黑色素瘤30例,结膜恶性黑色素瘤13例）, 采用巢式PCR扩增和基因测序的方法检测cKit基因第9,11,13,17,18外显子以及BRAF基因第15外显子突变情况。结果cKit基因在脉络膜恶性黑色素瘤患者中突变率达16.7%(5/30),而在结膜恶性黑色素瘤中突变率仅为7.7% (1/13);在结膜恶性黑色素瘤中检测到1例BRAF基因突变(1/13),在脉络膜恶性黑色素瘤中未检测到BRAF基因突变。结论 本研究首次报道cKit基因在中国脉络膜恶性黑色素瘤患者中突变率较高,提示以cKit为靶标的靶向药物未来有可能为中国眼部恶性黑色素瘤患者,尤其是脉络膜恶性黑色素瘤患者带来新的希望。     

Analysis of cKit and BRAF mutations in 43 Chinese patients with ocular melanomas

目的 分析中国人眼部恶性黑色素瘤中cKit和BRAF基因突变情况.方法 收集43例中国眼部恶性黑色素瘤患者组织标本(脉络膜恶性黑色素瘤30例,结膜恶性黑色素瘤13例),采用巢式PCR扩增和基因测序的方法检测cKit基因第9、11、13、17和18外显子以及BRAF基因第15外显子突变情况.结果 cKit基因在脉络膜恶性黑色素瘤患者中突变率达16.7％ (5/30),而在结膜恶性黑色素瘤中突变率仅为7.7％ (1/13);在结膜恶性黑色素瘤中检测到1例BRAF基因突变(1/13),在脉络膜恶性黑色素瘤中未检测到BRAF基因突变.结论 cKit基因在中国脉络膜恶性黑色素瘤患者中突变率较高,提示以cKit为靶标的靶向药物未来有可能为中国脉络膜恶性黑色素瘤患者带来新的希望.     

BRAF VE1抗体在结直肠癌中检测BRAF V600E突变的应用

目的使用BRAF VE1抗体免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF V600E位点突变,并分析其敏感性和特异性。方法采用ARMS法和免疫组化法检测36例结直肠癌组织中BRAF V600E突变状态,并使用测序验证。结果免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF VE1抗体的敏感性为100%,特异性为62.9%。与甲状腺样本BRAF V600E突变相比,结直肠癌标本为细胞质着色,染色呈棕黄色。结论免疫组化法可高效、快速、低成本初步筛选结直肠癌的BRAF V600E突变,但需分子检测进一步确认。     

甲状腺乳头状癌合并桥本甲状腺炎中BRAF V600E蛋白的表达及临床意义

目的通过分析BRAF V600E蛋白在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)合并桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis, HT)中的表达情况,探讨其表达的临床病理意义。方法选取2017年1月～2019年7月间行手术治疗且行中央淋巴结清扫的465例经典型PTC为研究对象,将其分为PTC合并HT组(139/465)和单纯PTC组(326/465),用免疫组化EnVision法检测两组中BRAF V600E蛋白表达情况,并对检测结果及临床病理特征进行统计学分析。结果 PTC合并HT组中BRAF V600E蛋白的阳性率(59.71%)低于单纯PTC组(69.94%),差异有统计学意义(P=0.032);PTC合并HT组中BRAF V600E蛋白阴性组患者发病年龄55岁的比例更高(92.86%);与单纯PTC组相比,PTC合并HT组女性(88.49%)患病率明显高于男性(67.79%),差异有统计学意义(P0.001);PTC中HT或BRAF V600E蛋白表达与肿瘤大小、肿瘤多发、中央区淋巴结转移均无关(P0.05)。结论 PTC合并HT患者BRAF V600E蛋白的阳性率较低。PTC中HT或BRAF V600E蛋白表达与肿瘤大小、肿瘤多发、中央区淋巴结转移无关。     

甲状腺乳头状微小癌中survivin、galectin-3、TPO蛋白表达与BRAFV600E基因突变关系的研究

目的:检测甲状腺乳头状微小癌(PTMC)及其癌旁良性组织中细胞凋亡抑制因子存活素(survivin)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)和甲状腺髓过氧化物酶(TPO)蛋白表达差异以及PTMC中鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因的突变,探讨survivin、Gal-3和TPO蛋白与BRAFV600E基因突变的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测56例PTMC组织及其癌旁良性组织中survivin、Gal-3和TPO蛋白的表达情况;对聚合酶链式反应(PCR)扩增产物直接测序,分析BRAFV600E基因突变情况;survivin、Gal-3和TPO蛋白表达阳性率与BRAF基因突变率关系分析采用χ2检验方法。结果:PTMC癌组织中,survivin和Gal-3强阳性表达,而TPO不表达;癌旁良性组织中,survivin和Gal-3表达缺失,TPO正常表达;survivin、Gal-3和TPO在癌组织和其癌旁良性组织间的表达率比较差异均有统计学意义(均P<0.001);BRAFV600E基因在PTMC中有32.1%(18/56)突变;BRAFV600E基因突变率和3种蛋白在PTMC组织中的表达率与淋巴结转移有关联(P=0.009,P=0.025,P=0.007,P=0.008),而与患者年龄和性别无关联(均P>0.05);BRAFV600E基因突变与survivin、Gal-3、TPO蛋白表达均无关联(均P>0.05)。结论:PTMC癌组织中,survivin和Gal-3表达升高、TPO表达降低和BRAFV600E基因突变可能在PTMC发生发展中起重要作用,survivin、Gal-3、TPO蛋白表达与BRAFV600E基因突变的检测,可为PTMC病情的判定、预后的转归提供有价值的信息。     

鞍区恶性颅咽管瘤1例并文献复习

目的探讨恶性颅咽管瘤的临床病理特征、诊断及鉴别诊断、治疗及预后。方法回顾性分析1例鞍区原发性恶性颅咽管瘤患者的临床资料、病理形态、免疫表型、BRAF V600E基因突变检测、治疗及随访,并复习相关文献。结果(鞍区占位)灰白色碎组织一堆,大小1.5 cm×1.0 cm×0.5 cm。镜下肿瘤细胞呈乳头状、腺样排列,局部伴有小灶鳞状分化,部分区域可见梭形细胞呈栅栏状排列,细胞密度高,中等大小,有异型性。免疫表型:肿瘤细胞p63、CK5/6和β-catenin均(+),SMA灶状(+),Ki-67增殖指数约20%,Syn、Cg A及垂体六项等均阴性。患者术后行放疗,6.5个月后死亡。PCR-荧光探针法检测BRAF V600E提示存在突变。结论恶性颅咽管瘤罕见,原发性恶性颅咽管瘤更为罕见,恶性颅咽管瘤临床预后较差,掌握其临床病理特征对该病的临床治疗及预后评估均具有重要意义。     

117例甲状腺结节FNAC检查与BRAF基因联合检测的结果分析

目的探讨超声引导下甲状腺细针穿刺细胞学检查(fine needle aspiration cytology,FNAC)与丝/苏氨酸特异性激酶(serine-threonine protein kinase,BRAF)基因V600E联合检测对于甲状腺结节的临床应用价值。方法收集117例甲状腺结节患者,术前分别行FNAC检查和BRAF V600E突变检测,并将其结果与术后病理诊断结果进行对比分析。结果术前FNAC与BRAF V600E突变联合检测的符合率为92.3%(108/117),灵敏度为88.5%(69/78),均高于单独的BRAF V600E突变检测,差异有统计学意义(P0.05)。两者联合检测的灵敏度也高于单独的FNAC检查,差异有统计学意义(P0.05)。结论甲状腺FNAC细胞学评估与BRAF基因联合检测可提高甲状腺结节的术前诊断率,并对临床有重要的指导意义。