TNF-α对病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的作用及意义

目的：研究病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌细胞凋亡及肿瘤坏死因子(TNT-α)对心肌细胞凋亡的影响和意义。方法：用TUNEL法结合电镜观察VMC小鼠接种病毒后3、5、7、9、15、35天心肌细胞凋亡情况，另外我们用TNF-α及TNT-α单克隆抗体(mAb)干预，以观察TNF-α对VMC心肌细胞凋亡的影响。结果：实验发现VMC各时点凋亡心肌细胞数目较正常对照组明显增加，TNF-α干预能加重心肌细胞凋亡，给予TNF-α mAb中和了体内的TNF-α后，能使心肌细胞凋亡减少。结论：VMC中存在异常的心肌细胞凋亡现象，心肌细胞凋亡可能参与了VMC的发病。TNF-α能诱导VMC心肌细胞凋亡。TNF-α参与VMC的发病可能与其诱导心肌细胞凋亡有关。     

抗Fas的抗体在实验性病毒性心肌炎中作用机制的研究

目的探讨中和型抗Fas的抗体对小鼠柯萨奇病毒性心肌炎的治疗作用及作用机制。方法60只BAIB/c小鼠随机分为4组：1组空白对照组，2组病毒对照组、3组IgG对照组、4组抗Fas抗体治疗组。于接种后第10天每组随机处死小鼠8只，心肌组织切片HE染色了解心肌损伤情况，电镜技术及原位末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡情况，免疫组化方法检测casimse-3的表达，逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测心肌组织中easpase-3的mRNA表达。实时定量PCR（RQ-PCR）定量心肌柯萨奇病毒B3（CVB3）mRNA拷贝数。结果（1）病毒对照组可见caspase-3表达和心肌细胞凋亡，且均与心肌病变积分成正相关（r=0．81，P〈0．01；r=0．73，P〈0．05）。（2）抗Fas抗体治疗组小鼠心肌组织病变积分、心肌细胞凋亡率、caspase-3蛋白和mRNA表达及心肌内CVB3 mRNA拷贝数均明显低于病毒对照组（P〈0．05）和IgG对照组（P〈0．05）。结论Fas/FasL途径介导的心肌细胞凋亡参与了病毒性心肌炎的发病过程，凋亡是导致病毒性心肌炎心肌损伤的重要机制之一，抗Fas抗体可降低caspase-3活化和mRNA表达，减少心肌细胞凋亡，降低心肌细胞内病毒复制，使心肌损伤明显减轻。     

IL-12表达水平变化及其免疫活性对病毒性心肌炎的影响

目的 探讨在小鼠急性病毒性心肌炎（VM）发病过程中白细胞介素12（IL-12）mRNA表达水平和蛋白浓度变化，及其免疫学活性对心肌炎的影响。方法 135只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组（n=25)，心肌炎对照组（n=50),rIL-12组（n=40),Il-12抗体组（n=20)。后3组经腹腔接种柯萨奇病毒（CVB3m)诱发急性心肌炎，rIL-12组于病毒接种后4h皮下注射重组IL-12，10ng/0.1ml，心肌炎组注射等量PBS，均连续用5d(0-4d)。抗体组于0-1d经腹腔注射IL-12中和抗体0.1ng/0.1ml，心肌炎组注射等量PBS，均连续用5d(0-4d)，抗体组于0-1d经腹腔注射IL-12中和抗体0.1mg/0.1ml，共2次，分别于接种后1、3、5、7d各组随机取若干只小鼠采血后处死，留取心脏，脾等标本。结果 小鼠感染CVB3m后，其心肌组织中IL-12mRNA的表达水平增高，同时体内IL-12，IFN-γ的蛋白含量也增高；在投入rIL-12后，IFN-γ的蛋白含量升高更明显，NK细胞活力增强，同时小鼠心肌组织中病毒滴度降低，心肌损害减轻，小鼠生存率提高（分别为66%和85%）；而在IL-12抗体投入组结果则相反，且小鼠生存率降低（50%），但与心炎组相比差异无显著性。结论 在VM早期小鼠体内rIL-12能减轻心肌损害。提高感染小鼠的存活率，起到保护性的作用。     

参芪扶正注射液对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的影响

<正>目的:观察参芪扶正注射液对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的影响,探讨VMC的主要发病机制及参芪扶正注射液治疗VMC的机制。方法:利用CVB3嗜心肌型单次病毒感染方式诱导VMC模型。120只雄性BALB/c小鼠随机分为五组:空白组、模型组、病毒唑组、参芪扶正注射液     

苦参碱对病毒性心肌炎小鼠蛋白激酶B表达的影响

目的 评价苦参碱对柯萨奇B3型病毒（CVB3）感染的病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌组织蛋白激酶B（Akt）表达的影响,以探讨苦参碱保护心肌的作用机制.方法 实验采用雄性Balb/c小鼠连续3 d腹腔注射0.2ml 100TCID50的CVB3的方法制备VMC的动物模型.分为6组：苦参碱每日80 mg/kg、40 mg/kg、20 mg/kg治疗组,利巴韦林组、病毒组及正常对照组.药物于末次注射病毒的60 min后开始,连续腹腔注射10 d,正常组给予同体积的生理盐水.分别于给药后第5天和第10天处死小鼠,应用Tunel标记法检测各组心肌细胞凋亡情况;于给药后第10天应用免疫组化及Western Blot法检测心肌组织磷酸化AktSer-473蛋白的表达.结果 与正常组比较,病毒组心肌组织凋亡明显增加（P＜0.05）;与病毒组比较,苦参碱各剂量组心肌组织凋亡明显减少（P＜0.05）.于给药后第10天,苦参碱每日40 mg/kg组磷酸化AktSer-473蛋白的表达明显上调（P＜0.05）.结论 苦参碱可能通过促进磷酸化AktSer-473蛋白的表达,抑制CVB3感染的VMC小鼠心肌组织凋亡.     

MCMV IE-1 siRNA对小鼠巨细胞病毒性心肌炎的治疗作用

目的：观察针对小鼠巨细胞病毒(MCMV)即刻早期基因1(IE-1)的小分子干扰RNA片段 (siRNAs)对小鼠巨细胞病毒性心肌炎的治疗作用。方法：无病原体的BALB/c小鼠120只，4 周龄,雄性, 重10-12 g, 随机分为6 组, 20 只/ 组, 其中对照和MCMV病毒感染组各1 组及 4 个MCMV IE-1 siRNA 治疗组。对照组小鼠腹腔内注射0.1 mL DMEM液, 其它5 组小鼠腹腔内接种0.1 mL含TCID5010-4 MCMV 的DMEM 液, 30 min后4 个MCMV IE-1 siRNA 治疗组小鼠腹腔内注射0.2 mL 不同剂量的MCMV IE-1 siRNA, 对照和MCMV病毒感染组分别注射0.2 mL siRNA 媒体溶液。实验第7 、14 、21 、28 、35、42、49、56、63和70d 测定心肌酶谱肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)、谷草转氨酶（GOT）、乳酸脱氢酶(LDH)和LDH₁/ LDH₂活性,并且进行了心肌组织病理学、超微病理学和髓过氧化物酶（MPO）和MCMV IE-1的检查。结果：随注射siRNA 剂量增加, 心肌炎发病率也逐渐降低；心肌细胞变性、坏死及间质炎性细胞浸润程度和超微病理变化逐渐减轻；血清心肌酶谱（CK、CK-MB、GOT、LDH和LDH₁/ LDH₂）活性逐渐降低；心肌组织MPO下降；心肌细胞中MCMV IE-1表达减弱。siRNA对病毒性心肌炎疗效的影响是剂量依赖性的。结论：针对MCMV IE-1 siRNA可抗MCMV病毒感染，保护小鼠心肌组织。     

小鼠急性病毒性心肌炎心肌HO-1mRNA及其蛋白表达

目的：探讨小鼠急性病毒性心肌炎（viral myocarditis,VMC）心肌细胞血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）基因及其蛋白表达的动态变化。方法:72只清洁级近交系4-6周龄雄性BALB/c小鼠随机分为2组：心肌炎组（V组）40只（腹腔注射 CVB3病毒），实验对照组（C组）32只。于病毒接种后第4 d、8 d、15 d、21 d分别采血后处死小鼠并留取心脏标本。采用免疫组化法和原位杂交法检测心肌HO-1蛋白及mRNA表达，分光光度计法分间接测定COHb含量，光镜及透射电镜观察心肌组织病理及细胞超微结构改变。结果: （1）心肌炎组可见炎症细胞浸润，心肌细胞可见大面积坏死，晚期可见钙化灶形成；电镜下可见肌原纤维溶解断裂，线粒体膜消失，含溶酶体丰富的单核巨噬细胞浸润，对照组小鼠心肌未见上述变化。（2）血COHb含量变化：心肌炎组小鼠血COHb含量在第8 d和第15 d均较对照组明显增高，2组差异显著（0.047±0.005和0.031±0.004；0.076±0.006和0.030±0.005，P<0.01）。（3）血清cTnI含量变化：V组小鼠血清cTnI含量与C组比较除第21d无明显差别外，其余各时点均高于C组，差异有统计学意义，P<0.01。（4）HO-1免疫组化结果：心肌炎组HO-1蛋白均成阳性表达，各时点心肌HO-1平均吸光度值均高于对照组（P<0.01）。 （5）HO-1mRNA原位杂交结果：心肌炎组HO-1mRNA原位杂交染色各时点均呈阳性表达，各时点吸光度值均高于对照组（P<0.01）。结论:病毒性心肌炎可诱导心肌组织HO-1mRNA及其蛋白的表达，可能是受损心肌发挥自我保护作用机制之一。     

沙库巴曲/缬沙坦通过PI3K/AKT通路抑制CVB3诱导的病毒性心肌炎小鼠中病毒复制及心肌细胞凋亡

目的观察沙库巴曲/缬沙坦(LCZ696)对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎(VMC)小鼠中病毒复制及心肌细胞凋亡的作用, 并探究其具体机制。方法 40只BALB/c小鼠随机分成4组(n=10):Sham组、Sham+LCZ696组、VMC组和VMC+LCZ696组。向BALB/c小鼠腹腔注射106 TCID50/ml浓度CVB3 0.1 ml建立VMC模型, Sham组注射等量生理盐水, 病毒注射当天被定义为第0天。每天60 mg/kg沙库巴曲/缬沙坦进行灌胃治疗, 连续7 d。统计小鼠生存率;小动物超声检测小鼠心功能;ELISA法检测肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)水平;Western blot检测小鼠心脏促炎因子(IL-6、TNF-α), 凋亡相关蛋白(caspase-3、cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2), CVB3病毒表面蛋白(VP-1)及相关通路蛋白(p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT)水平;PCR检测小鼠心脏中CVB3 mRNA水平;HE染色检测小鼠心脏炎性细胞浸润水平;TUNEL检测小鼠心脏组织中细胞凋亡水平。结果与Sham组相比...     

多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠脾细胞凋亡的研究

目的：探讨以多房棘球绦虫（Em）重组BCG—Em14-3-3疫苗免疫小鼠再以Em的续绦期幼虫泡球蚴的原头节攻击后，鼠脾细胞凋亡的变化。方法：将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB／c小鼠，免疫后8周用Em原头节进行攻击感染。感染后18周杀鼠取脾分离脾细胞，用流式细胞术检测脾细胞的凋亡，同时设空载体、BCG和PBS对照组。结果：疫苗接种组小鼠脾细胞的凋亡率明显低于感染对照组；鼻腔内接种组脾细胞的凋亡率显著低于皮下注射组。结论：泡球蚴的感染可引起小鼠脾细胞发生凋亡，Em重组BCG-Eml4-3—3疫苗接种可抑制感染小鼠脾细胞的凋亡。疫苗鼻腔内接种是一种较好的免疫途径。     

病毒性心肌炎小鼠心肌组织中趋化因子表达谱的改变及其意义

目的：研究病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌组织趋化因子（ChKs)表达谱变化，探讨ChKs在VMC发病中的可能作用及意义。方法：B3型柯萨奇病毒（CVB3）腹腔注射雄性BALB／c小鼠；RTPCR定性和定时定量分析心肌组织MCP－1、IP－10、Ltn和FKN等12种ChKs表达。病理切片和血清CKMB分析判定病变和病程程度。结果：（1）在所检测的12种ChKs中，VMC组呈阳性表达的有9种，显著多于正常组心肌组织的6种，有3种ChKs(BLC、Eot和LARC）两组均未检出；（2）VMC组9种阳性表达的ChKs中CVB3诱导性表达的为MIP－2、MIG和IP－10，6种组成性表达的ChKs在VMC时上调表达的有MIP－1β、MCP－1、MCP－2、Ltn等4种，下调表达的有RANTES，与正常对照组比未呈现明显差异的为FKN。（3）ChKs的表达消长存在一定的差异，感染4d后MIP－2等达高峰，随后下降；9d后出现MCP－1和RANTES表达上升峰；FKN在感染9d内表达较稳定。（4）亚急性早期、中期、中后期和晚期心肌组织ChKs表达谱有明显区别，各期ChKs表达谱中优势表达的ChKs分别为IP－10、IP－10、MCP－1、MCP－1。结论：VMC心肌组织ChKs呈成簇性方式改变，表达谱改变的复杂性可能与发病机制的复杂性有关，优势表达的ChKs可能在病毒性心肌炎发病中扮演着更重要的角色。     

The universal muscular chain reaction,muscle spasm,Torsions, ruptures and extravasations. Chameleons of pathology and some manifestations of simple muscular disorders

Most bodily functions require the coordinated actions of complementary and supplementary paired muscle groups. Where this essential muscular cooperation is lacking, hollow organs may burst and others become literally screwed up, giving rise to many similar spastic diseases such as Torticollis, Twisted ovarian cyst, Torsion of the Testis, Volvulus of the intestines, Varicose Veins, Megacolon, Aortamegaly, Scoliosis, Erb's Palsy, Peyronie's Disease, Main-en-Griffe, Undescended Foot (Pes Cavus), Talipes, Strabismus. Spasm is “panenepidemic” and unclassified examples of Torsion Dystonia and Dyskinesia really are as common as debt and taxes.     

Hypo- und Hypermagnesämie aus kardiologischer Sicht

Zusammenfassung Eine Reihe pathologischer Zustände bedingen Magnesiummangel. Zustände mit Hypermagnesämie sind ebenfalls bekannt, doch wesentlich seltener. Für den Kardiologen beachtenswert ist, daß unter Therapie mit bestimmten Diuretica bei Herzinsuffizienz, bei Herzinfarkt, Kardiomyopathie, Digitalisintoxikation und bestimmten Herzrhythmusstörungen Hypomagnesämie beobachtet wurde. Leider kann in der klinischen Routine nur ein extracelluläres Magnesiumdefizit durch Serumbestimmungen gemessen werden; über Magnesiummangel einzelner Organe kann nichts ausgesagt werden. Hinweise für Magnesiummangel geben aber neben der Messung des Serumspiegels Anamnese, klinischer Befund, bestimmte EKG-Veränderungen wie auch evtl. Hypokalämie, ein Zustand, bei dem sich oft — besonders bei Aldosteronismus — parallele Veränderungen zeigten.Tierexperimente deuten darauf hin, daß infarktähnliche Läsionen unter Magnesiummangel entstehen, doch ob Herzinfarkt beim Menschen durch Magnesiummangel ausgelöst werden kann, ist noch ungeklärt. In Leichenherzen zeigte sich im Infarktgebiet neben Calciumakkumulation signifikanter Magnesiumverlust, wobei unklar blieb, ob sich Ursache oder Folge des Infarktes widerspiegelten. Falls ein ursächlicher Zusammenhang besteht, ist er im Myokardstoffwechsel selbst zu suchen, wie bei der Alkoholkardiomyopathie, wo myokardialer Magnesiummangel zumindest als pathogenetischer Teilfaktor anerkannt wird. Andererseits versucht man aber auch Beziehungen zwischen Atherosklerose, Blutgerinnung und Hypomagnesämie herzustellen, in der Meinung, daß Magnesiummangel auch über den coronaren Pathomechanismus des Herzinfarktes wirken könnte. Sicher scheint, daß gewisse EKG-Veränderungen und Herzrhythmusstörungen durch einen irritierten Magnesiumhaushalt bedingt sein können, da sie bei Gabe bzw. Entzug von Magnesium verschwinden. Daß Magnesiummangel die Glykosidtoleranz verringert, wird tierexperimentell bestätigt. Unter Hypomagnesämie bewirkt Acetylstrophanthidin eher und länger Rhythmusstörungen als ohne, außerdem lassen diese sich durch Magnesiumgaben eliminieren. Da in gewissen Fällen spontane und digitalisinduzierte Herzrythmusstörungen durch Magnesiuminjektionen beseitigt wurden, scheint Magnesium als Therapeuticum angebracht. Einsatz verschiedener Magnesiumsalze bei Angina pectoris, degenerativen Herzerkrankungen und Herzinsuffizienz ohne geprüften und offensichtlich gestörten Magnesiumhaushalt ist fragwürdig, weil keine eindeutigen klinischen Erfolgsbeweise vorliegen. Immerhin mag es aber larvierte, durch Serumbestimmungen nicht erfaßbare Mangelzustände geben. Allgemein erscheint es aus kardiologischer Sicht ratsam, den Magnesiumhaushalt zu überwachen und in entsprechenden Fällen auszugleichen, um möglichen Myokardläsionen oder fatalen Herzrhythmusstörungen entgegenzuwirken.     

Environmental risk factors and their role in the management of atopic dermatitis

Introduction: The etiology of atopic dermatitis (AD) is multifactorial with interaction between genetics, immune and environmental factors.

Areas covered: We review the role of prenatal exposures, irritants and pruritogens, pathogens, climate factors, including temperature, humidity, ultraviolet radiation, outdoor and indoor air pollutants, tobacco smoke exposure, water hardness, urban vs. rural living, diet, breastfeeding, probiotics and prebiotics on AD.

Expert commentary: The increased global prevalence of AD cannot be attributed to genetics alone, suggesting that evolving environmental exposures may trigger and/or flare disease in predisposed individuals. There is a complex interplay between different environmental factors, including individual use of personal care products and exposure to climate, pollution, food and other exogenous factors. Understanding these complex risk factors is crucial to developing targeted interventions to prevent the disease in millions. Moreover, patients require counseling on optimal regimens for minimization of exposure to irritants and pruritogens and other harmful exposures.     

HLA genes in Amerindians from Mexico San Vicente Tancuayalab Teenek/Huastecos

Huastecos or Teenek Amerindians are presently living at North East Mexico (San Luis Potosi State). They have probably one of the most ancient culture of Mexico and Central America together with Mayas and Olmec groups with which also show close relationships. Proximity to Atlantic Ocean/Mexican Gulf originated that Spaniards had very early contact with them at about 1519 CE or before. In the present paper we have aimed to study HLA gene profile which may be useful for HLA and disease epidemiology and transplant programs in Teeneks. HLA-DRB1*04:07, -DRB1*14:06 and -DRB1*04:11 have been found in high frequency like in other Amerindian groups. High frequency typical Amerindians HLA extended haplotypes have been found, such as A*02-B*35-DRB1*04:07-DQB1*03:02; A*68-B*39-DRB1*04:07-DQB1*03:02 and A*02-B*39-DRB1*04:07-DQB1*03:02; also new haplotypes have been described, like A*02-B*52-DRB1*04:11-DQB1*03:02, A*68-B*35-DRB1*14:02-DQB1*03:01 and A*68-B*40-DRB1*16:02-DQB1*03:01. Genetic proximity is observed not only to linguistically close Mayans, but also to Mazatecans, Mixtecans and Zapotecans, who speak an altogether different languages; it shows once more that genes and languages do not correlate. This population was greatly diminished after European contact between 1500 and 1600 years CE; in fact, North and South America First Inhabitants population was brought from 80 down to 8 million people because of diseases (i.e.: measles, smallpox or influenza), slavery and war.     

État de l’art : nouveaux anticoagulants et transfusion

Direct oral anticoagulants (DOAC) are indicated for stroke prevention in atrial fibrillation and for the prevention and treatment of venous thromboembolism. As any anticoagulant, they are associated with a bleeding risk. Management of DOAC-induced bleeding is challenging. Idarucizumab, antidote for dabigatran, is currently available and is part of the therapeutic strategy, whereas antidotes for anti-Xa agents are under development. Activated or non-activated prothrombin concentrates are proposed, although their efficacy to reverse DOAC is uncertain. We propose an update on DOAC-associated bleeding management, integrating the availability of idarucizumab and the critical place of DOAC concentration measurements.     

Die Bindungsfähigkeit des Serum-Albumins für Bromsulphthalein bei Patienten mit chronischer Urämie während Hämodialyse-Behandlung

Zusammenfassung Im Verlauf der Hämodialysc chronisch Nierenkranker verhält sich die mit der Acrylamidgel Elektrophorese nachweisbare Bindung von Bromsulphthalein und Albumin etwa umgekehrt proportional zur Konzentration unveresterter Fettsäuren. Diese Fettsäuren verdrängen den Farbstoff aus seiner Albuminbindung. Der Effekt ist in vivo durch die vorübergehende Zunahme von Fettsäuren infolge der Postheparin-Lipolyse anläßlich der Heparinisierung bei der Hämodialyse auslösbar und auch nach Zugabe von Ölsäure zu einer reinen Albumin-Bromsulphthalein-Lösung in vitro nachweisbar. Bereits bei physiologischen Hyperlipacidämien wird dieser Verdrängungsmechanismus wirksam. Er kann möglicherweise — dem Bromsulphthalein vergleichbar — Medikamente aus ihrer Albuminbindung verdrängen, wodurch deren Wirkung auf die Gewebe und/oder die Ausscheidung durch die Nieren beeinflußt wird.