IL-38通过上调CXCL1及IL-8募集中性粒细胞促进转移病灶的形成研究

目的:探讨IL-38在肿瘤患者肿瘤组织中的表达水平及其对肿瘤转移病灶形成的影响。方法:本研究共纳入2009年1月~2014年12月我院收治的32例转移性肿瘤患者和62例原位癌患者作为研究对象。另选取43例同期在我院体检中心进行体检的健康人员作为对照。采用ELISA法(酶联免疫吸附法)检测各组研究对象血清IL-38水平。免疫组化分析转移性肿瘤患者及原位癌患者组织IL-38、CXCL1及IL-8的表达。建立小鼠肺转移模型,分别用B16F1与B16F0细胞尾静脉注射C57小鼠,然后小鼠肝脏转染IL-38,间隔48 h重复转染。两周后统计分析小鼠肺组织转移病灶数。免疫组化检测小鼠肺组织中性粒细胞浸润、CXCL1及IL-8水平。Realtime-PCR检测肺组织中趋化因子CXCL1与IL-8的表达。肺转移模型小鼠转染IL-38后,给予小鼠CXCL1及IL-8抑制剂。比较各组小鼠肺组织转移病灶数及中性粒细胞浸润情况。Western blot检测各组小鼠肺组织中IL-38、CXCL1、IL-8的表达及MEK、ERK的磷酸化水平。结果:肺转移肿瘤患者的血清IL-38水平显著高于原位癌及健康者(P0.05),其肿瘤组织中IL-38、CXCL1及IL-8的表达水平均显著高于原位癌患者(P0.05)。IL-38能显著增加B16F1在C57小鼠肺部形成转移病灶的数量(P0.05),且能促进不易发生转移的B16F0在肺部形成明显的转移病灶。组化结果显示,IL-38能显著增加小鼠肺组织中性粒细胞的浸润(P0.05)。Realtime-PCR结果显示,IL-38转染能显著增加肺组织中CXCL1及IL-8的表达(P0.05)。给予CXCL1及IL-8抑制剂能显著抑制IL-38引起的小鼠肺部病灶数增加及肺组织中性粒细胞浸润(P0.05)。Western blot结果显示,IL-38转染能显著上调肺转移小鼠模型肺组织中CXCL1、IL-8的表达及MEK、ERK的磷酸化水平,给予CXCL1及IL-8抑制剂能显著抑制IL-38对MEK、ERK磷酸化的影响。结论:肺转移肿瘤患者的血清和肿瘤组织中IL-38水平均显著升高,IL-38可能通过上调CXCL1、IL-8及MEK、ERK的磷酸化水平募集中性粒细胞,从而促进转移病灶的形成。     

趋化因子CXCL16对脓毒症小鼠生存率、组织损伤及炎症反应的影响北大核心CSCD

目的:探讨趋化因子CXCL16在脓毒症小鼠中的表达,组织损伤及炎症反应过程。方法:CLP诱导C57BL/6小鼠形成脓毒症模型,并收集血清,腹腔灌洗液及肝、肺、肾脏组织样本。记录小鼠生存情况;ELISA检测趋化因子CXCL16及IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α和IFN-γ表达水平;血液分析仪计数炎症细胞;流式细胞术分选炎症细胞;病理切片观察组织损伤;Anti-CXCL16抗体蛋白治疗脓毒症并观察效果。结果:CXCL16在脓毒症小鼠血清、腹腔灌洗液、组织蛋白中表达水平显著升高(P<0.05)。与CLP+PBS组相比,CLP+CXCL16组小鼠生存率明显降低(P<0.05),中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞数量增加且促进炎症因子释放(P<0.05),肝、肺、肾组织损伤加重,肝肾功能血清指标ALT、AST、Urea和Creatinine升高(P<0.05)。与CLP+IgG组相比,Anti-CXCL6组死亡率降低,组织损伤减轻,肝肾功能血清指标降低(P<0.05),抗体治疗具有一定效果。结论:CXCL16在脓毒症小鼠中表达上调,其高表达与脓毒症免疫病理过程有关,CXCL16能够通过加重炎症反应促进脓毒症发生发展。     

CXC趋化因子受体2(CXCR2)参与脓毒症脑病小鼠脑内皮细胞激活并介导中性粒细胞迁移

目的探讨CXC趋化因子受体2(CXCR2)在脂多糖(LPS)诱导的脓毒症脑病中对脑内皮细胞激活和中性粒细胞迁移入脑的影响。方法设置C57BL/6J小鼠和CXCR2基因敲除小鼠正常对照组、野生型小鼠LPS处理组和CXCR2基因敲除小鼠LPS处理组。腹腔注射LPS建立脓毒症脑病模型,醋酸AS-D萘酚酯酶组织化学染色检测小鼠脑皮质区域内中性粒细胞的浸润情况, ELISA检测小鼠全脑和血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和CXC趋化因子配体1(CXCL1)的水平。分离脑皮质部位微血管内皮细胞并进行原代培养,Western blot法检测LPS(1μg/mL)和TNF-α(200 ng/mL)对原代小鼠脑微血管脑内皮细胞CXCR2蛋白表达的影响以及CXCL1对脑内皮细胞骨架蛋白纤维型肌动蛋白(F-actin)及血管细胞黏附分子1(VCAM-1)蛋白表达的影响。结果腹腔注射LPS后,野生型小鼠(C57BL/6J小鼠)脑和血浆中TNF-α水平升高,同时脑中CXCL1水平也显著升高,且小鼠脑皮质内浸润的中性粒细胞数目显著增多;然而CXCR2基因敲除小鼠脑皮质内浸润的中性粒细胞数目较野生型小鼠显著减少。体外使用LPS和TNF-α刺激后,脑内皮细胞CXCR2蛋白水平升高; CXCL1刺激脑内皮细胞后, F-actin和VCAM-1的蛋白水平也明显升高。结论 CXCR2参与脓毒症脑病小鼠脑内皮细胞的激活,进而介导中性粒细胞的迁移。     

趋化因子CXCL8/IL-8与急性白血病关系的研究进展

趋化因子CXCL8 (CXCL8),又称白细胞介素8(IL-8),是一种多效性细胞因子.急性白血病细胞结构性表达IL-8及其受体.全反式维甲酸(ATRA)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞向中性粒细胞分化过程中,伴有IL-8表达的变化;且当患者出现分化综合征时外周血IL-8含量显著升高;而成熟的中性粒细胞表达IL-8受体,但不表达IL-8.研究发现具有ELR序列的IL-8与肿瘤发生、发展、治疗的毒副作用及治疗效果密切相关,IL-8及其受体形成的趋化因子轴已经成为新的生物治疗热点及靶向治疗的靶点.本文综述了IL-8与急性白血病特别是急性早幼粒细胞白血病关系的研究进展.     

转录激活因子3在化脓性链球菌M1蛋白诱导的急性肺损伤小鼠中的作用

目的探讨转录激活因子3(ATF3)在化脓性链球菌M1蛋白血清型诱导的急性肺损伤小鼠中的作用。方法 20只雌性C57/B6小鼠随机分为对照组(A组)和急性肺损伤组(B组),每组10只。20只雌性ATF3敲基因小鼠(ATF3~(-/-))随机分为对照组(C组)和急性肺损伤组(D组)。应用化脓性链球菌M1蛋白建立小鼠急性肺损伤模型,观察4组小鼠肺组织病理改变,计算肺组织湿重与干重比值,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞数量,实时PCR方法检测小鼠肺泡巨噬细胞CXC趋化因子(CXCL1和CXCL2)mR NA的表达,ELISA法测定小鼠肺组织中CXCL1和CXCL2的浓度。结果与A组小鼠比较,B组小鼠肺组织病理改变加重、肺组织湿重与干重比值、BALF中中性粒细胞数量、肺泡巨噬细胞中CXCL1和CXCL2 mR NA表达量、肺组织CXCL1、CXCL2浓度均增加(P0.05);与B组小鼠比较,D组小鼠肺组织病理改变加重、肺组织湿重与干重比值、BALF中中性粒细胞数量、肺泡巨噬细胞中CXCL1和CXCL2 m RNA表达量、肺组织CXCL1、CXCL2浓度均明显增加(P0.05)。结论 ATF3对化脓性链球菌M1蛋白诱导的急性肺损伤小鼠有保护作用,可能与ATF3减少CXC趋化因子的产生、减轻中性粒细胞肺内聚集有关。     

IL-22诱导小鼠输卵管上皮细胞表达趋化因子的初步研究

目的探讨细胞因子IL-22对小鼠输卵管上皮细胞趋化因子CXCL9、CXCL10表达的影响。方法流式细胞术检测体外培养的小鼠输卵管上皮细胞膜表面IL-22R表达水平。重组鼠IL-22(100 ng/ml)刺激小鼠输卵管上皮细胞,ELISA检测不同时间(0、12、24、48、72 h)CXCL9、CXCL10表达情况,Trans AM ELISA检测转录因子STAT3 DNA结合活性。不同质量浓度的重组鼠IL-22(0、25、50、100、200 ng/ml)刺激小鼠输卵管上皮细胞,ELISA检测CXCL9、CXCL10表达情况。结果小鼠输卵管上皮细胞膜表面表达IL-22R。比较6个时间点CXCL9、CXCL10表达差异,发现CXCL9、CXCL10表达具有时间依赖性。比较不同质量浓度IL-22处理下CXCL9、CXCL10表达差异,IL-22 100 ng/ml为最佳干预浓度,且CXCL9、CXCL10表达与IL-22质量浓度具有依赖关系。IL-22刺激组STAT3 DNA结合活性显著升高,与阴性对照组比较有显著差异(P0.05)。结论 IL-22能显著诱导小鼠输卵管上皮细胞生成并释放CXCL9、CXCL10,且具有时间和剂量依赖性。     

4天香烟烟雾暴露联合poly(I:C)刺激对小鼠肺部免疫应答及干扰素表达的影响

目的：探讨短期香烟烟雾暴露联合poly(I:C)刺激对小鼠肺部免疫应答及干扰素表达的影响。方法：BALB/c小鼠随机分为4组：对照组、熏烟组、poly(I:C)组和熏烟联合poly(I:C)组。检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中总细胞数及细胞分类计数;普通光镜下观察各组细胞形态;荧光定量PCR检测肺组织细胞因子、趋化因子和干扰素及干扰素刺激基因表达。结果：与对照组相比,熏烟联合poly(I:C)组总细胞数计数、巨噬细胞与中性粒细胞计数明显升高（P<0.05）,且熏烟联合poly(I:C)组巨噬细胞计数高于poly(I:C)组;与poly(I:C)组比较,熏烟联合poly(I:C)组小鼠气道灌洗液巨噬细胞体积较大,呈圆形或不规则形,细胞质较多空泡;与对照组相比,熏烟联合poly(I:C)组小鼠肺组织中性粒细胞趋化因子CXCL1(P<0.05)、CXCL2(P<0.01)和淋巴细胞趋化因子CCL2(P<0.01) mRNA表达升高,肺组织IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达明显升高（P<0.01）,肺组织IFN-β(P<0.01)、IFN-γ(...     

呼吸道合胞病毒感染后期OVA刺激对小鼠气道炎症及AHR的影响

目的研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染后期过敏原刺激对小鼠气道炎症及AHR的影响。方法 6~8周龄雌性Balb/c小鼠随机分为Mock组、RSV组、OVA组及R+O组。检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类计数;苏木精-伊红(HE)染色观察肺部病理损伤;全身体积描述记法检测小鼠气道反应性;ELISA检测BALF中IL-4、IL-5、CXCL10、CCL5、CCL20的水平。结果 R+O组小鼠BALF中炎症细胞总数、巨噬细胞、中性粒细胞及嗜酸性粒细胞分类计数较其他3组均显著增高(P0.05);R+O组小鼠肺组织病理评分及AHR较其他3组亦显著增高(P0.05);BALF中各处理组IL-4、IL-5较Mock组明显增高(P0.05),但处理组之间无显著性差异;R+O组CXCL10水平较其他3组显著升高(P0.05)。结论 RSV感染后期接受OVA刺激可致CXCL10表达增加,进而促使巨噬细胞、中性粒细胞及嗜酸性粒细胞募集,加重小鼠气道炎症及AHR。     

屋尘螨在诱导BALB/c小鼠混合型气道炎症中的作用及致病机制探讨

目的 探讨屋尘螨(HDM)抗原在小鼠模型中诱导混合型气道炎症中的作用及其机理,为支气管哮喘的临床诊断和治疗提供理论依据.方法 BALB/c小鼠于实验第0天、7天、14天、21天、28天和35天进行PBS或HDM提取液(50μg或100 μg)滴鼻.采用头体积描记法测量小鼠的气道反应性;对支气管肺泡灌洗液(BAL)进行细胞计数和分类;酶联免疫法(ELISA)检测BAL中CXCL1、CXCL2、CCL11 (eotaxin)、IL-5、IFNγ、IL-10和IL-17的含量及血清总IgE,HDM特异性IgG1、IgG2a;采用实时荧光定量PCR检测肺组织中相关基因mRNA表达;并对肺组织PAS染色后进行病理学观察.结果 HDM抗原引起了以中性粒细胞和嗜酸性粒细胞为主的混合型气道炎症、血清HDM特异性IgG1的升高及高脚杯细胞增生(GCH)等组织学变化,其混合型气道炎症可能与CXCL1和IL-5等细胞因子的分泌增多有关,是固有免疫和适应性免疫共同活化的结果.这种炎症表型在经高浓度HDM(100 μg)致敏的小鼠中表现得更为显著.结论 HDM过敏原在小鼠模型中诱导了中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的共同活化.     

Ficolin通过激活补体加重poly(I:C)联合LPS诱导的急性肺脏损伤北大核心CSCD

目的:探究纤维胶凝素(ficolin)在poly(I:C)联合LPS刺激诱导的急性肺损伤中的作用及机制。方法:6~8周龄SPF级C57BL/6小鼠和ficolin基因敲除小鼠分别随机分组,连续2 d滴鼻50μg/d poly(I:C),然后50μg/d滴鼻LPS 1 d,构建poly(I:C)和LPS联合刺激诱导的急性肺损伤小鼠模型,单独刺激或滴鼻PBS为对照组;HE染色检测肺组织病理变化;流式细胞术检测每组小鼠肺组织中性粒细胞和巨噬细胞的比例变化;Western blot检测每组小鼠肺组织和RAW264.7细胞中C3的表达变化和活化情况。结果:成功建立了poly(I:C)联合LPS刺激诱导的急性肺损伤小鼠模型。联合刺激组小鼠肺脏病理损伤加重,肺泡融合和弥漫性损伤,大量炎症细胞浸润;其中中性粒细胞和间质巨噬细胞比例显著提高,肺泡巨噬细胞比例显著降低。联合刺激增加小鼠肺组织和RAW264.7细胞中补体C3的表达和酶解活化,而敲除ficolin可明显降低联合刺激诱导的C3活化,并减少间质巨噬细胞募集和肺泡巨噬细胞耗竭,改善急性肺损伤。结论:Ficolin可通过激活补体加重poly(I:C)联合LPS刺激介导的肺脏炎症和急性肺损伤,是重症肺炎潜在的治疗靶点。     

IL-31在哮喘小鼠中的动态表达及对肺泡上皮细胞表达CCL11和CCL22的影响

目的通过观察IL-31在OVA诱导小鼠哮喘模型中的动态表达及IL-31对肺泡上皮细胞表达趋化因子CCL11和CCL22的影响,探讨IL-31在哮喘气道炎症中的作用。方法常规OVA法建立小鼠哮喘模型,于末次激发后取肺组织HE染色及AB-PAS染色,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞和嗜酸性粒细胞(EOS)计数,ELISA法检测血浆中IgE、IL-4、IFN-γ、IL-31水平,荧光定量PCR检测肺组织IL-31R mRNA表达水平,同时体外培养小鼠肺泡上皮细胞,用IL-31处理24 h后检测CCL11和CCL22 mRNA的表达水平。结果成功构建哮喘小鼠模型,哮喘小鼠BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比和血浆中IgE水平明显增多。哮喘小鼠肺组织病理切片见中性粒细胞、EOS浸润。哮喘小鼠血浆中Th2类细胞因子IL-4水平明显高于对照组,Th1类细胞因子IFN-γ明显低于对照组。哮喘小鼠血浆IL-31水平和肺组织IL-31R mRNA表达水平明显增高,第2周至第8周虽略有降低但仍明显高于对照组。IL-31作用小鼠肺泡上皮细胞24h后,趋化因子CCL11、CCL22mRNA表达增高。结论IL-31通过刺激趋化因子表达募集炎性细胞,促进气道炎症的发生发展。     

CCL21/CCR7对小鼠急性心肌梗死后炎症反应及梗死面积的影响

目的:探讨抗CCL21处理对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后小鼠炎症反应和心肌损伤的影响.方法:结扎冠脉前降支构建C57BL/6小鼠心肌梗死模型,随机分为假手术组(Sham)、对照组(isotype-IgG control)和CCL21单抗干预组(goat anti-mouse CCL21 mAb).qPCR检测AMI后心肌组织CCL21受体CCR7表达,ELISA法检测抗CCL21处理对心肌梗死后小鼠血清炎症趋化因子和肌钙蛋白的影响.HE染色评估心肌梗死后心肌组织炎性细胞浸润.1和7 d后Evans blue/TTC双染评估梗死区和危险区面积.结果:AMI导致小鼠血清CCL21水平和心肌组织CCR7在心肌组织内表达水平显著增高.冠脉结扎后小鼠血清白细胞趋化因子水平显著增高,anti-CCL21干预组小鼠血清CXCL1等趋化因子水平均显著低于对照isotype-IgG组.给予anti-CCL21处理有效逆转了cTnI和心肌酶LDH-1升高,并显著降低心肌梗死区面积.结论:抗CCL21处理可显著抑制心肌梗死后炎症反应并降低小鼠心肌梗死面积.     

内源性IL-17诱导MIP-2与IL-6表达在衣原体肺炎中促进中性粒细胞循环

目的 探讨衣原体肺炎中白细胞介素-17(interleukin -17,IL-17)对中性粒细胞(polymorphonuclear leucocyte,PMN)循环的调节作用及机制.方法 用40 μl含1×103包涵体形成单位(inclusion-forming units,IFU)的衣原体鼠肺炎株(Chlamydia muridarum,Cm)呼吸道感染BALB/c小鼠,诱导鼠衣原体肺炎.用抗鼠IL-17单克隆抗体吸入中和内源性IL-17,以相应独特型抗体(IgG2α)作为对照.用RT-PCR检测小鼠肺组织及肺上皮细胞系巨噬细胞炎性蛋白-2 (macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)和IL-6 mRNA的表达.取小鼠支气管肺泡灌洗液细胞染色计数PMN,感染肺组织进行病理染色.结果 衣原体肺炎中,内源性IL-17中和小鼠肺组织PMN浸润显著降低,支气管肺泡灌洗液PMN数量显著低于对照组.IL-17与TNF-α协同可上调肺上皮细胞MIP-2和IL-6 mRNA表达,且内源性IL-17中和小鼠肺组织MIP-2和IL-6表达显著降低.结论 衣原体肺炎中IL-17通过促进肺组织细胞分泌趋化性细胞因子MIP-2和前症性细胞因子IL-6,诱导PMN循环,参与宿主抗衣原体炎性应答.     

炎症性细胞因子在沙眼衣原体肺感染中的表达及其与机体防御的关系

目的 探讨炎症性细胞因子TNF-a，IL-1β和IL-6在沙眼衣原体肺感染中的产生及与机体防御的关系。方法 用沙眼衣原体小鼠肺炎株(MoPn)通过鼻腔感染小鼠，用过氧化物酶连接的鼠抗衣原体脂多糖单抗染色HeLa229细胞检测衣原体在肺组织的生长；通过测定中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)检测中性粒细胞在小鼠肺组织中的聚集；用RT-PCR检测小鼠肺组织炎症性细胞因子mRNA表达。结果 MoPn感染后第2天，肺组织有衣原体生长，于感染后第7天达高峰，第21天清除感染的衣原体。感染后第3天，前炎症细胞因子TNF-α，IL-B和IL-6在小鼠肺组织中的表达明显增高，IL-1β mRNA表达于感染第7天后降低，而TNF-a和IL-6 mRNA的表达至感染后第14天仍维持较高水平。高水平的TNF-α，IL-lβ和IL-6表达出现于中性粒细胞浸润的高峰期。结论 衣原体肺感染诱导前炎症细胞因子TNF-α，IL-1β和IL-6的高表达，可能具有中性粒细胞趋化活性，并参与衣原体感染的免疫防御。     

HSF1通过抑制中性粒细胞浸润减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的:探讨热休克因子1(HSF1)是否通过抑制中性粒细胞浸润减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)及其分子机制。方法:采用气管滴注脂多糖(LPS)的方法制备小鼠ALI模型,采用流式细胞术检测HSF1野生型(HSF1+/+)小鼠和HSF1敲除(HSF1-/-)小鼠LPS处理后12、24和36 h支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞比例和表达趋化因子受体XCR-1的中性粒细胞比例;采用免疫荧光法检测HSF1+/+和HSF1-/-小鼠上述时点肺组织中性粒细胞含量;运用ELISA方法检测不同时点血清、肺组织及BALF中趋化因子配体XCL-1的浓度。结果:流式细胞术结果显示,HSF1-/-+LPS组BALF中的中性粒细胞百分率和中性粒细胞表面XCR-1表达水平均高于HSF1+/++LPS组,LPS处理后24 h达到高峰(P<0.05);肺组织免疫荧光观察结果显示,HSF1-/-+LPS组的中性粒细胞数目均多于HSF1+/++LPS组,以LPS处理后24 h最多;HSF1-/-+LPS组血清、BALF和肺组织中XCL-1浓度均显著高于HSF1+/++LPS组(P<0.05)。结论:...     

CXCL16/CXCR6与炎症性疾病

多种临床疾病(包括肿瘤的发生)与炎症相关,因而趋化因子及其受体愈来愈受到广泛关注.近年有研究发现:人CXC型趋化因子配体16(CXC chemokine ligand 16,CXCL16)及其受体CXC型趋化因子受体6 (CXC chemokine receptor 6,CXCR6)在肾炎、肺部疾患、动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、类风湿性关节炎等多种炎症性病变组织中表达;并且,在前列腺癌、结肠癌、乳腺癌等炎症相关肿瘤的肿瘤细胞或浸润性淋巴细胞上也有表达.CXCL16通过CXCR6介导免疫细胞向病变组织趋化,影响疾病转归,甚至参与肿瘤细胞增殖或血管生成.对CXCL16/CXCR6的深入研究,将为炎症性疾病的诊断和炎症相关肿瘤的预后提供参考.     

西乐葆对重症肺炎小鼠ANXA1/FPR2通路及炎症反应的影响北大核心CSCD

目的:探究西乐葆对重症肺炎小鼠炎症反应及肺组织中膜联蛋白A1(ANXA1)/N-甲酰肽受体(FPR2)通路的影响。方法:采用肺炎克雷伯杆菌感染构建重症肺炎小鼠模型。选用BALB/c小鼠120只,随机分为对照组、模型组、西乐葆低剂量组(1.5 mg/kg)、西乐葆中剂量组(3 mg/kg)、西乐葆高剂量组(6 mg/kg)和地塞米松组,每组20只。分离并计数肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞;测定小鼠肺指数和肺组织湿重/干重(W/D);ELISA法检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性和IL-6、IL-1β、TNF-α水平;HE染色检测肺组织病理学变化;TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况;Western blot检测肺组织ANXA1、FPR2蛋白水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠肺组织结构破坏严重,肺泡大小不等,肺泡间隔增厚,可见明显充血,并伴有大量炎症细胞浸润,小鼠肺指数、细胞凋亡率、W/D、MPO活性、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数量及IL-6、IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.05),ANXA1、FPR2蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,西乐葆各剂量组及地塞米松组小鼠肺泡壁和肺泡间隔结构得到一定程度的修复,炎症细胞浸润减少,小鼠肺指数、细胞凋亡率、W/D、MPO活性、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数量及IL-6、IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.05),ANXA1、FPR2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:西乐葆可明显促进ANXA1/FPR2通路表达,减轻重症肺炎小鼠的炎症反应。     

地塞米松减轻过敏性哮喘模型小鼠气道炎性反应

目的 观察地塞米松(DEX)对过敏性哮喘模型小鼠气道炎性的影响并探讨相关机制。方法 将小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组。哮喘组小鼠于实验第0、7、14天皮下注射卵清蛋白(OVA)/氢氧化铝混合液,第21、22天1%OVA混悬液雾化吸入20 min;地塞米松组在哮喘组基础上于每次雾化吸入前3 h地塞米松(2 mg/kg)腹腔注射。末次雾化结束测定小鼠气道阻力,24 h后收集肺泡灌洗液(BALF),Wright-Giemsa染色后行细胞分类计数;ELISA测定BALF中IL-6、IL-18和IL-1β等浓度;免疫组织化学法(IHC)检测肺组织NLRP3、IL-1β蛋白表达,HE染色观察肺组织病理。结果 与对照组比较,哮喘组小鼠气道高反应性(AHR)明显增高;BALF中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等炎性细胞数量明显增加;IL-5、IL-6、IL-18和IL-1β表达均升高(P<0.01);肺组织NLRP3、IL-1β蛋白表达增强。与哮喘组比较,地塞米松组小鼠AHR显著降低,BALF中炎性细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞均明显减少(P<0.01),IL-5、IL-6、IL-18...     

CXCR4在哮喘小鼠肺组织中的表达及氯喹的干预作用

目的检测哮喘小鼠中趋化因子受体CXCR4的表达及其拮抗剂氯喹(CQ)的干预作用。方法将6~8周SPF级Balb/c小鼠随机分成对照组、哮喘组和氯喹干预组,哮喘组和氯喹干预组用鸡卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型,干预组于激发前30 min给予CQ,连续3 d,对照组用PBS代替。最后1次激发24 h内小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应;最后1次激发48 h内检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及细胞分类计数;HE染色光镜下观察肺组织的病理炎症改变,免疫组化染色检测肺组织CXCR4的表达;荧光定量PCR(Q-PCR)测定肺组织中CXCR4 mRNA的表达。结果哮喘组气道高反应及BALF中细胞总数明显高于对照组,干预组小鼠气道高反应及BALF中细胞总数与哮喘组相比显著降低;BALF中哮喘组嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和单核细胞数较空白组显著增加,而氯喹干预组较哮喘组显著减低;HE染色结果显示哮喘组肺部炎症细胞浸润明显,干预组与哮喘组相比明显减轻,病理评分降低;免疫组化显示哮喘组CXCR4在气道上皮细胞呈强阳性表达,干预组表达呈弱阳性;哮喘组CXCR4 mRNA的表达较对照组升高,氯喹干预组较哮喘组CXCR4 mRNA表达量降低;CXCR4表达量与BALF细胞总数呈正相关。结论 CXCR4可能参与哮喘小鼠的气道炎症和气道高反应的发生,氯喹能改善哮喘小鼠的气道高反应和气道炎症可能与拮抗CXCR4相关,为氯喹治疗哮喘提供理论和实验依据,为开发治疗哮喘新药提供新的思路。     

早孕滋养细胞膜型及可溶性趋化因子CXCL16表达调控

目的 探讨趋化因子CXCL16在人早孕滋养细胞表达和释放的调控机制.方法 原代培养人早孕滋养细胞,实时定量RT-PCR、免疫化学和ELISA方法分析CXCL16的表达和分泌;ELISA方法分析细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4刺激前后滋养细胞CXCL16的表达和分泌水平;ELISA方法分析ADAM10治疗前后滋养细胞CXCL16的表达及分泌水平.结果 滋养细胞表达并分泌趋化因子CXCL16;IFN-γ治疗后滋养细胞表达和分泌CXCL16水平均显著上升(P<0.01),但TNF-α和IL-4并不影响CXCL16的表达或分泌;ADAM10可以加速CXCL16自滋养细胞的脱落,但并不上调CXCL16的合成.结论 IFN-γ和ADAM10参与调控母胎界面滋养细胞趋化因子CXCL16的合成和分泌.