TLR4/MyD88/AMPK通路参与调节高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织炎症和细胞凋亡北大核心CSCD

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)基因敲除对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织炎症和细胞凋亡的影响。方法:雄性C57BL/6J和TLR4基因敲除小鼠随机分为正常对照组(NC)、肥胖组(OB)、TLR4基因敲除组(TK)、TLR4基因敲除肥胖组(TO),NC组给予正常饲料喂养,其他组给予高脂饲料喂养。16周后取血检测各组小鼠空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)和游离脂肪酸(FFA)水平;HE染色观察各组小鼠脂肪细胞形态变化;Western blot检测TLR4、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)、髓样分化因子88(MyD88)、Bax和Bcl-2蛋白表达;ELISA检测小鼠血清单细胞趋化因子-1(MCP-1)、IL-6、TNF-α、IL-10水平。结果:与NC组相比,OB组小鼠脂肪细胞明显增大,FPG、TC、TG、LDL、FFA、MCP-1、IL-6和TNF-α水平明显升高(P<0.01),HDL和IL-10水平明显降低(P<0.01,P<0.05),TLR4、MyD88和Bax表达明显增加(P<0.01),p-AMPKα和Bcl-2表达明显减少(P<0.05);与OB组相比,TO组小鼠上述检测指标表达明显逆转。结论:TLR4基因敲除可通过MyD88依赖的AMPK缓解高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织慢性炎症和细胞凋亡。     

吡格列酮对脂质灌注大鼠糖代谢和PPAR-γ表达的影响

目的：探讨吡格列酮 (Pio) 对游离脂肪酸诱导的胰岛素抵抗大鼠糖代谢和PPAR-γ表达的影响。方法:采用扩展正糖钳夹实验和［3-3H］标记葡萄糖示踪技术，观察了4 h脂质灌注导致大鼠血浆游离脂肪酸（FFA）升高引起糖代谢和脂肪组织PPAR-γ表达变化及Pio处理后的影响。 结果:在钳夹稳态期，对照组（N组）血浆FFA水平明显降低，而脂质灌注组（L组）和吡格列酮+脂质组（P/L组）FFA水平明显升高。 P/L组葡萄糖输注率(GIR)较N组明显降低（P<0.01）, 而L组又明显低于P/L组（P<0.01）；N组和P/L组肝糖输出 (HGP) 与基础值相比被明显抑制达85%（均P<0.01），在L组，胰岛素对HGP的抑制作用受到明显障碍（仅抑制8.7%）。L组和P/L组葡萄糖清除率（GRd）明显低于N组（P<0.01）。P/L组脂肪组织PPAR-γ表达明显增加。 结论:脂质灌注诱导了大鼠胰岛素抵抗。吡格列酮干预使大鼠脂肪组织PPAR-γ表达明显增加，并抑制了内源性肝糖产生，从而部分逆转了脂质诱导的胰岛素抵抗。     

TLR4/NF-κB信号通路对CBS~(+/-)小鼠非酒精性脂肪性肝病的影响

目的:探讨TLR4/NF-κB信号通路对胱硫醚β-合成酶(CBS)基因杂合敲除(CBS+/-)小鼠非酒精性脂肪性肝病形成的影响。方法:随机选取4周龄CBS基因正常(CBS+/+)小鼠(n=6)及CBS+/-小鼠(n=6),均给予高蛋氨酸饮食12周。应用全自动生化分析仪检测小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及同型半胱氨酸(Hcy)水平;分离肝脏并计算肝指数(肝重/体重);ELISA法检测小鼠肝脏组织TC及TG含量变化;苏木精-伊红(HE)和油红O染色观察小鼠肝脏结构和脂质改变;RT-qPCR和Western blot检测小鼠肝组织中TLR4和NF-κB的mRNA及蛋白表达;Pearson相关性分析评估小鼠肝脏中TLR4和NF-κB表达与TC和TG含量的相关性。结果:与CBS+/+组小鼠相比较,CBS+/-组小鼠血清Hcy水平升高(P0.05),肝指数升高(P0.05),肝组织及血清中TC和TG含量增加(P0.05或P0.01);HE和油红O染色结果表明CBS+/-组小鼠肝脏脂肪变性明显;TLR4和NF-κB的mRNA及蛋白表达明显升高(P0.01);TLR4和NF-κB分别与小鼠肝脏中TC和TG含量呈正相关。结论:TLR4/NF-κB信号通路在CBS+/-小鼠非酒精性脂肪性肝病的形成过程中发挥重要作用。     

脂肪因子Omentin-1对代谢综合征小鼠的影响及可能机制

探讨脂肪因子Omentin-1对代谢综合征((metabolic syndrome,MS)小鼠的影响及可能机制。选择6～8周龄SPF级雄性BALB/c小鼠,通过高脂高糖饮食建立MS模型,将小鼠随机分为模型组及治疗组。治疗组给予腹腔注射Omentin-1 [8μg/(kg·d)],模型组给予腹腔注射等量生理盐水。干预4周后,采用免疫组化、ELISA及Western blotting等方法评估Omentin-1治疗对MS小鼠糖、脂质代谢及系统性炎症的影响,并进一步分析Omentin-1对小鼠内脏脂肪组织炎症及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor-γ, PPAR-γ)信号的影响。研究发现治疗组小鼠空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、甘油三酯(triglyceride,TG)及低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平均显著低于模型组(P0.05),而高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平显著高于模型组(P0.05)。治疗组小鼠外周血IL-8及TNF-α水平均显著低于模型组(P0.05)。治疗组小鼠脂肪组织巨噬细胞浸润及IL-6水平均显著低于模型组(P0.05),但IL-10水平显著高于模型组(P0.05)。治疗组小鼠脂肪组织PPAR-γ及脂联素水平显著高于模型组(P0.05)。这提示Omentin-1可有效改善MS小鼠系统性炎症及糖、脂质代谢,可能与激活脂肪组织PPAR-γ信号通路有关。     

黄芪甲苷通过toll样受体4/核因子κB通路介导辐射所致肾损伤的防护作用

目的 探讨黄芪甲苷（AS-Ⅳ）是否通过toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）介导的信号通路对辐射诱导肾脏损伤起到保护作用。 方法 将小鼠分为正常对照组、DMSO溶剂组、辐射组(IR)、IR + AS-Ⅳ 20 mg/kg 组和IR + AS-Ⅳ 40 mg/kg 组。小鼠给予AS-Ⅳ腹腔注射1个月后,以8Gy的60Coγ进行全身辐射。测定血清肌酐（Cr）和尿酸（BUA）的含量,进行肾组织HE和免疫组织化学染色,并检测肾脏TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白的表达情况。 结果 与对照组相比,辐射组小鼠血清中Cr和BUA含量明显升高（P<0.001）,肾小球萎缩,肾小管扩张,TLR4和髓样分化因子88（MyD88）阳性表达明显增多(P<0.001),且TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白［TLR4、MyD88、NF-κB、白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）］表达极显著升高（P<0.01）;AS-Ⅳ预处理能降低血清中Cr和BUA的含量（P<0.05, P<0.01或 P<0.001）,明显改善辐射所致的病理反应,降低TLR4/NF-κB 信号通路相关蛋白的表达（P<0.05或 P<0.01）。 结论 AS-Ⅳ可能通过TLR4/NF-κB信号通路下调炎症因子的释放,从而改善辐射诱导的小鼠肾损伤,发挥保护作用。     

罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝组织肿瘤坏死因子α表达的作用

探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliforator-activated receptor-γ,PPAR-γ)激动剂罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)小鼠肝组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响及其在NASH进展中的作用.选取健康雄性C57BL/6J小鼠15只,随机分为3组:对照组、模型组和罗格列酮干预组.酶法检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和甘油三酯(triglyceride,TG)水平.HE染色光镜下观察肝组织切片脂肪变程度、炎症活动度和纤维化程度.采用RT-PCR和Western印迹法检测TNF-α mRNA和蛋白的表达.结果表明:HE染色显示对照组小鼠肝脏未出现明显脂肪变、炎症和纤维化,而模型组肝脂肪变及炎症明显,罗格列酮干预组上述病变减轻.肝组织TNF-α mRNA及蛋白表达依次为模型组>罗格列酮干预组>对照组(TNF-α mRNA和蛋白条带吸光度值依次为:1.11±0.01、0.99±0.02、0.91±0.00和0.99±0.01、0.60±0.01、0.47±0.01,P＜0.01).结论:在高脂、胆碱-蛋氨酸缺乏饮食(high fat, methionine and choline deficienct diet, MCD)诱导的小鼠NASH模型中,肝组织TNF-α的表达与NASH的进展有关;PPAR-γ特异性激动剂罗格列酮可抑制TNF-α的表达,阻止NASH的进展,为NASH的靶向性治疗药物的选择提供了新思路.     

人参皂苷Rg1通过TLR4/MyD88/NF-κB p65通路调控小鼠急性肾损伤诱导的急性肝损伤的机制研究

目的：探讨人参皂苷Rg1(GRg1)对小鼠急性肾损伤所诱导的急性肝损伤的保护作用及其调控机制。方法：昆明小鼠随机分为假手术（sham）组、模型（model）组、GRg1组和necrostatin-1 (Nec-1)组，每组10只。制备急性肾损伤模型，24 h后收集血液。采用生化试剂盒检测小鼠血清肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）、天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酸转氨酶（ALT）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平。采用ELISA法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。HE染色观察组织病理学改变，采用免疫组织化学和Western blot法检测TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白的表达水平。结果：与假手术组比较，model组小鼠出现明显的肝细胞坏死、肝肾功能减退，血清中SCr、BUN、AST和ALT均显著升高（P<0.01）,MDA含量显著上升，SOD活性显著降低（P<0.01），且血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量显著升高（P<0.01）,TLR4、MyD88和N...     

辛伐他汀对食饵性兔动脉粥样硬化形成中血栓素、前列环素的作用及意义

目的 采用食饵性兔动脉粥样硬化(AS)模型,探讨辛伐他汀对AS形成过程中血管内皮系统及纤溶系统的作用。方法 雄性新西兰兔42只,随机分为正常对照组、AS组(高脂喂饲)和辛伐他汀组(高脂喂饲+辛伐他汀5mg/kg·d)。在实验前、造模第8及12周末分别测定主动脉AS面积、血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血浆6-酮-前列腺素_(1α)(6-keto-PGE(1α))、血栓素B_2(TXB_2)。结果 随实验进程,AS组及辛伐他汀组TC、TG及主动脉AS面积均较正常对照组逐渐升高(P<0.01),辛伐他汀组TC、TG及主动脉AS面积低于同期AS组(P<0.05～0.01);AS组及辛伐他汀组6-keto-PGF_(1α)、TXB_2均显著低于同期正常对照组(P<0.01),但动态观察AS组及辛伐他汀组6-keto-PCF_(1α)与TXB_2无显著差异。结论辛伐他汀对血栓素及前列腺素代谢无直接作用,支持辛伐他汀保护内皮、血小板及对抗炎症作用有限,并不能完全消除AS危险因素。     

虎杖苷对非酒精性脂肪肝的影响及相关分子机制探究

目的:研究虎杖苷对非酒精性脂肪肝的影响及相关分子机制。方法:将健康的42只雄性SD大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)和3种不同剂量的虎杖苷组(C1、C2、C3组),模型组和虎杖苷组给予高脂饲料喂养8周,造模成功后,A组和B组给予生理盐水灌胃,C1、C2、C3组分别给予50、100和200 mg/(kg·d)的虎杖苷混悬液灌胃。HE染色后观察病理学改变;测定大鼠空腹血糖和胰岛素,并计算胰岛素抵抗指数和胰岛素敏感指数;测定谷胱甘肽-S-转移酶、超氧化物歧化酶及丙二醛含量;实时定量PCR检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6表达水平; Western blot方法检测PPAR-α、LXR-α、SREBP-1c蛋白的表达。结果:与A组比较,B组SOD和GST含量均显著性降低,而MDA显著性升高; TNF-α、IL-6 mRNA表达均显著性增加; FBG、FNS及IR显著性升高,而ISI显著性降低。与B组比较,虎杖苷各剂量组中SOD和GST含量显著性升高,而MDA显著性降低; C2及C3组TNF-α表达显著性降低,C1、C2及C3组IL-6表达显著性降低; C2及C3组FBG、FNS及IR显著性降低,而ISI显著性升高。Western blot结果表明B组较A组PPAR-α蛋白表达显著性降低,LXR-α、SREBP-1c蛋白表达显著性增加;与B组比较,C2和C3组LXR-α、SREBP-1c表达显著性下调,而PPAR-α蛋白无明显变化。结论:虎杖苷可能是通过抗氧化作用,抑制脂质过氧化,抑制机体炎症反应,降低胰岛素抵抗,下调脂质合成因子SREBP-1c和LXR-α蛋白的表达,减少脂质合成等关键途径来治疗NAFLD。     

依那普利对CVB3诱导的病毒性心肌炎小鼠的保护作用

目的探讨依那普利对CVB3诱导的病毒性心肌炎小鼠的保护作用。方法将小鼠分为对照组、病毒性心肌炎模型组、依那普利10 mg/kg组、依那普利20 mg/kg组,每组8只。103半数感染量CVB3病毒溶于0.1 ml磷酸缓冲液,腹腔注射构建病毒性心肌炎小鼠模型。对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。依那普利10 mg/kg组和依那普利20 mg/kg组小鼠每天分别灌胃10、20 mg/kg的依那普利。7 d后处死小鼠,收集血液,全自动生化仪检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量;苏木伊红染色观察心肌组织病理变化;使用试剂盒检测心肌组织中谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量;酶联免疫吸附实验检测心肌组织中炎症因子的含量;蛋白质印迹检测心肌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、p-p65、Toll样受体4(TLR4)以及Nrf2通路相关蛋白的表达水平。结果与对照组相比,病毒性心肌炎模型组血清中LDH、AST、CK-MB的含量显著升高(P0.01);心肌细胞排列不规则,细胞间出现较大缝隙(P0.01);心肌组织中GST-px、SOD的活性显著降低(P0.01),MDA的含量显著升高(P0.01);白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的含量显著升高(P0.01);iNOS、p-p65、TLR4的表达量显著升高(P0.01),而Nfr2、HO-1、NQO-1的表达水平显著降低(P0.01)。与病毒性心肌炎模型组相比,依那普利10、20 mg/kg组血清中LDH、AST、CK-MB的含量显著降低(P0.01);心肌细胞排列较规则,炎性细胞数量减少(P0.01);心肌组织中GST-px、SOD的活性显著升高(P0.01),MDA的含量显著降低(P0.01);IL-1β、TNF-α和IFN-γ的含量显著降低(P0.01);iNOS、p-p65、TLR4的表达量显著降低(P0.01),而Nfr2、HO-1、NQO-1的表达水平显著升高(P0.01)。结论依那普利能抑制CVB3病毒性心肌炎小鼠的心肌组织氧化应激和炎症反应,减轻心肌组织损伤,对病毒性心肌炎小鼠具有保护作用,其作用机制与TLR4通路的抑制、Nrf2通路的激活有关。     

LXR-α在大鼠非酒精性脂肪肝组织中的表达及其意义

目的 采用高脂肪饮食制备SD大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型,检测不同阶段大鼠肝脏肝X受体α(LXR-α)表达,以阐明LXR-α在NAFLD发病和疾病进展中的作用.方法 36只雄性健康SD大鼠随机分为对照组、模型组,每组再分别设4、8、12周3个时相点.动态观察大鼠体重及肝脏湿重,检测血清及肝匀浆液中脂质的变化.作肝组织病理学检查及脂肪变性程度的判定.并检测LXR-α及其下游基因固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)的mRNA的表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠体重、肝指数、血脂水平随着造模时间延长逐渐升高(P<0.05);随着造模时间延长肝组织LXR-α及SREBP-1c mRNA与对照组比较逐渐升高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 LXR-α及SREBH1c的表达随造模时间延长表达水平也相应升高,从而加重肝脏脂质代谢紊乱,与NAFLD的发生、发展关系密切.     

人参皂苷Rb1对高脂血症大鼠肝脏细胞焦亡的影响及其可能机制

目的:观察人参皂苷Rb1对高脂血症大鼠肝脏细胞焦亡的影响,探讨其对肝脏脂质沉积的影响及作用机制。方法:将32只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、人参皂苷Rb1组和辛伐他汀组。除正常组给予基础饲料外,其余各组给予高脂饲料。造模4周后,灌胃给药,对照组与模型组给予相应体积的生理盐水,人参皂苷Rb1与辛伐他汀组给予相应药物。8周后全自动生物化学分析仪检测血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量; HE染色观察肝脏组织病理变化;Western blot法与RT-qPCR法检测肝脏细胞焦亡相关因子NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18和GSDMD的蛋白及mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-C含量显著上升(P0.01),HDL-C含量显著降低(P0.05);肝脏脂肪变性肝细胞布满视野;NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18和GSDMD mRNA和蛋白的表达显著升高(P0.01)。人参皂苷Rb1可使血清TC、TG和LDL-C含量显著下降(P0.05),HDL-C含量显著上升(P0.01);脂肪变性程度明显减轻,脂滴少而小;NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18和GSDMD mRNA和蛋白的表达显著降低(P0.05或P0.01)。结论:人参皂苷Rb1可能通过降低肝细胞焦亡相关因子的表达而减轻高脂血症大鼠肝脏损伤和脂质沉积。     

TLR4信号转导途径在年幼期哮喘大鼠气道炎症中的作用

目的：研究哮喘大鼠Toll样受体4(TLR4)表达变化及其对嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡的作用机制。方法:清洁级SD大鼠27只，随机分为对照组(A)、哮喘组(B)、地塞米松(D)组，每组9只。用OVA致敏与激发复制哮喘模型。光镜观察肺组织病理变化；BALF中炎症细胞计数；ELISA测定血清IL-10含量；原位杂交测定肺组织TLR4mRNA表达；TUNEL法检测EOS凋亡。结果:(1)光镜观察：B组见肺组织大量炎症细胞侵润，支气管黏液腺增生；D组上述现象明显减轻。(2)BALF中细胞总数、EOS绝对计数和EOS占细胞总数的百分比：B组均明显高于A组(均P<0.01)；D组均明显低于B组(均P<0.01)。(3)血清IL-10含量：B组与A组有显著差异(P<0.01)；D组显著低于B组(P<0.01)。(4)TLR4mRNA的检测：TLR4在肺组织表达B组与A组差异无统计学意义(P>0.05)；D组显著高于B组(P<0.01)。(5)EOS凋亡率检测结果，B组与A组比差异显著(P<0.05)；D组显著高于B组(P<0.01)。相关分析显示，TLR4mRNA表达与EOS凋亡率呈显著正相关(r＝0.612，P<0.01)。结论:DXM上调血清中IL-10水平，诱导肺组织EOS凋亡，可能与TLR4信号通路有关。     

奥贝胆酸对高脂喂养的C57BL/6J小鼠糖脂稳态的影响

目的 研究奥贝胆酸(OCA)对高脂喂养C57BL/6J小鼠糖脂代谢的影响。方法 给C57BL/6J小鼠喂高脂饮食(HFD)12周后，将其随机分为模型组(model)和OCA干预组(10 mg/kg,连续灌胃6周),每组10只。喂12周正常饲料的C57BL/6J小鼠作为对照组(control),模型组和对照组灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。实验期间开展口服葡萄糖耐量和胰岛素耐量实验。实验结束后，测定血清中肝功能相关指标，记录肝脏质量，测定肝脏中脂质相关指标，并对肝脏进行苏木精-伊红(HE)染色；RT-qPCR检测肝脏中脂质代谢相关基因表达。结果 糖负荷和注射胰岛素后，模型组各个时间点血糖和曲线下面积(AUC)明显高于对照组(P<0.01),OCA干预组能缓解模型组小鼠糖耐量异常(P<0.05),提高胰岛素敏感性(P<0.05);模型组血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白总胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平明显高于对照组(P<0.01),高密度脂蛋白总胆固醇(HD...     

参苓白术散通过TLR4 / NF-κB 通路对溃疡性结肠炎小鼠的抑制作用研究

目的:从TLR4/NF-κB信号通路角度观察参苓白术散对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎(UC)的作用及机制。方法:实验小鼠分为空白组、模型组、参苓白术散高、中、低剂量组和美沙拉嗪组。除空白组外,其余各组均自由饮用3%DSS溶液一周以建立UC模型。造模成功后各给药组予相应药物灌胃,空白组与模型组给予0.5 ml生理盐水灌胃。观察各组小鼠疾病活动指数(DAI)和结肠病理改变,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清TNF-α、MIF、IL-10、EGF水平,免疫组化法检测小鼠结肠组织内TLR4、NF-κB p65蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠DAI评分升高,结肠单位重量增加、长度变短,结肠黏膜病理受损严重,血清TNF-α、MIF含量显著升高,IL-10、EGF含量明显下降;结肠组织中NF-κB与TLR4蛋白表达上调(P0.01)。与模型组相比,参苓白术散低、中、高剂量组和美沙拉嗪组小鼠血清TNF-α、MIF含量显著降低,IL-10、EGF含量明显上升;结肠组织中NF-κB、TLR4蛋白表达下调(P0.01)。结论:参苓白术散对DSS诱导的小鼠UC有治疗作用,其作用可能与其调节TLR4/NF-κB通路及相关炎症因子,从而减轻肠道炎症反应,缓解肠黏膜损伤有关。     

短期高果糖喂养对小鼠肝脏脂质沉积和胰岛素敏感性的影响

目的: 探讨短期高果糖饮食对小鼠肝脏甘油三酯含量及胰岛素敏感性的影响。方法: 雄性C57BL/J6小鼠分为对照组及高果糖组,经喂养3 d后对小鼠行腹腔葡萄糖耐量试验,处死小鼠后测定各组肝脏甘油三酯含量,采用HE染色观察肝脏组织的病理改变;测定肝脏脂质合成酶类的蛋白表达,同时通过比较各组注射与未注射胰岛素的小鼠磷酸化Akt/总Akt (p-Akt/t- Akt)和磷酸化GSK-3α/β/总GSK-3α/β(p- GSK-3α/β/t- GSK-3α/β)表达变化评估肝脏胰岛素敏感性。结果: 喂养3 d后,与对照组相比,高果糖组葡萄糖耐量曲线下面积和肝腔甘油三酯均显著增加(均P<0.01),同时肝组织HE染色显示高果糖组小鼠肝细胞已有明显脂滴沉积;与对照组相比,高果糖组的乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)和硬脂酰辅酶A脱饱和酶-1(SCD-1)表达显著增加(均P<0.01);胰岛素注射后,与对照组相比,高果糖组的p-Akt/t-Akt及p-GSK-3α/β/t-GSK-3α/β均显著降低(均P<0.01)。结论: 3 d高果糖饮食即可引起肝脏脂质沉积,脂质沉积与果糖刺激FAS、ACC和SCD-1表达增加有关;肝脏脂质沉积的同时伴有肝脏胰岛素抵抗发生。     

辛伐他汀对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用

目的探讨辛伐他汀对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用。方法雄性SD大鼠24只,随机分为正常组、盐水组、辛伐他汀小剂量组、辛伐他汀大剂量组,每组6只。辛伐他汀大剂量组和小剂量组烟雾吸入致伤后,用灌胃器给予辛伐他汀大剂量组50mg/kg辛伐他汀,给予辛伐他汀小剂量组25mg/kg辛伐他汀。盐水组烟雾吸入致伤后灌入等体积的生理盐水,每日一次。正常组不做致伤及灌液处理。四组大鼠分别于48h后取左肺组织行病理切片光镜观察。腹主动脉取血2ml,离心后取血清检测肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-10含量,并取右肺组织匀浆取上清液检测髓过氧化物酶、脂质过氧化物酶和超氧化物歧化酶含量。结果光镜下正常组肺泡结构清晰完整,盐水组肺泡腔内可见大量粒细胞聚集、浸润,肺泡间隔增厚,而辛伐他汀大剂量和小剂量组上述病理表现明显减轻。与盐水组相比,辛伐他汀小剂量组肿瘤坏死因子水平降低(P<0.01),脂质过氧化物酶含量降低(P<0.05);辛伐他汀大剂量组肿瘤坏死因子、白细胞介素-6含量降低(P<0.01),白细胞介素-10含量升高(P<0.01),髓过氧化物酶、脂质过氧化物酶水平降低(P<0.05),超氧化物歧化酶水平升高(P<0.05)。结论辛伐他汀可减轻炎症及氧化应激,对烟雾所致吸入性损伤大鼠的肺起保护作用。     

丹参酮ⅡA对ApoE~(-/-)小鼠肝脏脂质沉积及铁死亡相关蛋白表达的影响

目的:观察丹参酮ⅡA对ApoE-/-小鼠肝脏脂质沉积及铁死亡相关蛋白表达的影响。方法:32只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、丹参酮ⅡA高剂量(60 mg/kg)组、丹参酮ⅡA低剂量(30 mg/kg)组和辛伐他汀组,另取8只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。模型组及各治疗组均给予高脂饲料喂养,空白组给予普通饲料喂养。造模4周后丹参酮ⅡA高、低剂量组及辛伐他汀组分别给予相应的药物灌胃,正常对照组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃。8周后全自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量;HE染色和油红O染色观察小鼠肝组织形态及脂质沉积;试剂盒检测肝组织活性氧簇(ROS)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;免疫组化检测肝脏p53和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达;Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统及RT-qPCR检测肝脏铁死亡相关因子GPX4、xCT/SLC7A11、p53和铁蛋白重链1(FTH1)蛋白及mRNA的表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠血清TC、TG和LDL-C含量显著升高(P0. 05或P0. 01),HDL-C含量无明显变化;肝组织脂肪空泡清晰可见;GSH水平降低,ROS水平显著升高(P0. 01);p53蛋白及mRNA的表达增高,GPX4、xCT/SLC7A11和FTH1蛋白和mRNA的水平显著降低(P0. 05或P0. 01)。与模型组相比,丹参酮ⅡA高、低剂量组小鼠血清TC、TG和LDL-C含量显著下降,HDL-C含量无明显改变;肝组织脂滴变小且脂肪变性程度明显减轻;GSH水平增高,ROS水平降低(P0. 01);GPX4、xCT/SLC7A11和FTH1蛋白及mRNA的水平显著升高,p53蛋白及mRNA的表达显著降低(P0. 05或P0. 01)。结论:丹参酮ⅡA能够降低ApoE-/-小鼠肝脏脂质沉积和脂质过氧化损伤,可能与干预肝细胞铁死亡相关蛋白作用有关。     

Toll样受体4/核因子-κB对哮喘大鼠气道炎症和重构的影响

目的: 探讨TLR4/NF-κB对哮喘大鼠气道炎症和气道重构的影响。方法: 将18只SD大鼠随机分成3组:对照组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组6只。造模成功后,利用HE染色、免疫组织化学方法及病理图像分析系统分析大鼠气道平滑肌的嗜酸性粒细胞(EOS)浸润情况、气道壁厚度以及增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的蛋白表达量。利用RT-PCR和Western blotting检测ASM中TLR4和NF-κB的mRNA及蛋白表达。结果: 哮喘4周组和哮喘8周组的气道壁EOS计数、气道壁厚度、气道反应性均较正常对照组显著增加(P<0.01);哮喘4周组和哮喘8周组的TLR4及NF-κB的mRNA水平和蛋白表达与对照组比较均显著增加(P<0.01);TLR4及NF-κB的mRNA水平随哮喘天数的增加而显著增加(P<0.01);哮喘4周组、哮喘8周组PCNA和Bcl-2的蛋白表达量均显著高于正常对照组(P<0.01);哮喘两组间上述指标差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论: TLR4/NF-κB可能参与哮喘大鼠气道炎症和气道重构的调控。     

内质网应激参与双酚A导致小鼠的肝脏脂质沉积

目的研究内质网应激在双酚A(BPA)导致的肝脏脂质沉积中的作用。方法将雄性CD1小鼠随机分为对照组(n=10)和BPA组(n=10)。BPA组给予一定浓度BPA的饲料进行喂养[BPA质量按照500μg/(kg·d)的量加入普通饲料]。8周后化学酶促-比色法检测肝脏三酰甘油(TG)含量,油红O染色观察肝脏内脂质聚集情况,RTPCR法检测肝脏组织脂肪酸合成酶(FAS)和脂肪酸转运蛋白1(FATP1)的mRNA表达。Western blot检测内质网应激相关蛋白(Bip、IRE1α、PERK、e IF2α和SREBP-1c)等蛋白及其磷酸化的表达水平。结果与对照组相比,BPA组小鼠肝脏的TG含量明显增加(P0.05);油红O染色结果与TG定量一致。BPA组肝脏组织中FAS和FATP1的mRNA表达水平显著高于对照组(P0.05)。BPA组肝脏组织中Bip、p-IRE1α/IRE1α、p-PERK/PERK、p-e IF2α/e IF2α和SREBP-1c的蛋白表达水平显著高于对照组(P0.05)。结论内质网应激途径可能参与了BPA所导致的肝脏脂质沉积。