乙型肝炎肝硬化患者病毒基因型与特异性、非特异性CTL的关系和意义

目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者不同HBV基因型与外周血HBV特异性、非特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的关系和意义.方法 91例乙型肝炎肝硬化患者作HBV基因型检测,比较B、C基因型感染者之间HBV特异性、非特异性CTL的差别,并探讨其临床意义.结果 91例乙型肝炎肝硬化患者中,C基因型55例（60.44%）,B基因型35例（38.46%）,B、C混合型1例（1.1%）,C基因型人白细胞抗原（HLA）-A2阳性27例（49.09%）,HBV特异性CTL（0.18%±0.03%）,B基因型HLA-A2阳性18例（51.43%）,HBV特异性CTL（0.38%±0.04%）,高于C基因型,t=5.01,P＜0.01,非特异性CTL：C基因型（11.87%±1.50%）,B基因型（11.90%±1.51%）,t=0.14,P＞0.05.HBV DNA水平：C基因型[（6.01 ±0.81）log10拷贝/ml],高于B基因型[（5.01 ±0.54）log10拷贝/ml],t=5.01,P＜0.01,丙氨酸转氨酶（ALT）：C基因型（251.13 ±131.11）U/L,高于B基因型（121.25±63.21）U/L,t=3.61,P＜0.01,血清总胆红素（TBil 45.61 ±15.11）μmoL/L,高于B基因型（28.11 ±6.25）μmol/L,t=3.05,P＜0.01.结论 与乙型肝炎肝硬化B基因型感染者相比,C基因型感染者的HBV特异性CTL较低,导致HBV DNA水平较高,肝功能损害较重.     

慢性乙型肝炎患者HBV C、B基因型与特异性细胞毒性T淋巴细胞表面PD-1表达的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV C、B基因型与HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表面程序性死亡受体-1（PD-1）表达的关系和意义.方法 共研究CHB患者71例,人白细胞抗原（HLA）-A2阳性,HBV DNA ＞103拷贝/ml,其中C基因型34例（47.89％）,B基因型36例（50.70％）.比较C、B基因型感染者外周血HBV特异性CTL表面PD-1的表达水平、HBV特异性CTL水平、HBV DNA水平、ALT和TBil的水平.结果 CHB C基因型感染者的HBV特异性CTL表面PD-1的表达水平（37.30±3.05％）高于B基因型感染者（26.19±3.06％）,t=15.47,P＜0.001,HBV特异性CTL水平（0.25±0.03％）低于B基因型感染者（0.45±0.13％）,t=21.54,P＜0.001,HBV DNA水平（6.75±0.77lo910拷贝/ml）高于B基因型感染者（4.96±1.12 log10拷贝/ml）,t=7.93,P＜0.001,ALT水平（487.39±87.36IU/L）高于B基因型感染者（235.25±90.91IU/L）,t=12.32,P＜0.001,TBil水平（49.73±6.45）高于B基因型感染者（28.48±5.89％）,t=9.01,P＜0.001.结论 CHB C基因型感染者外周血HBV特异性CTL表面PD-1表达水平高于B基因型感染者,导致C基因型感染者HBV特异性CTL水平低于B基因型感染者,HBV DNA水平高于B基因型感染者,因此,肝功能损害比B基因型感染者重.     

原发性肝癌与乙型肝炎肝硬化HBV DNA水平、HBV基因型的比较研究

目的 比较原发性肝癌与乙型肝炎肝硬化患者的血清HBV DNA水平、HBV基因型差别。方法 对210例原发性肝癌（HCC）患者及220例乙型肝炎肝硬化（HBV LC）患者的血清HBVDNA水平及HBV基因型进行分析,比较病毒学和基因型差异。结果 210例HCC患者和220例HBV LC患者HBV DNA检测阳性率分别为84.3％（177/210）、94.5％（ 208/220）;HBV DNA定量为（5.06±1.01） log10拷贝/ml和（5.36±1.13）log10拷贝/ml,HBV LC患者均高于HCC患者（P＜0.01）;HCC组和HBV LC组均以C基因型为主,两组B,C基因型分布无明显差异。结论 HCC患者血清HBV DNA水平低于HBV LC患者。两组HBV基因型分布无明显差异,均以C基因型为多。     

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎HBeAg血清学转换与基因型、HBV特异性CTL的关系

目的 探讨阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎患者发生HBeAg血清学转换与HBV基因型、HBV特异性CTL的关系.方法 70例慢性乙型肝炎患者HBV DNA阳性（HBV DNA≥1×104拷贝/ml）,HBeAg阳性45例,其中B基因型23例（51.11%）,C基因型22例（48.89%）.ALT＞2×正常参考值上限（ULN）、人白细胞抗原（HLA）-A2阳性,用阿德福韦酯（正大天睛药业公司生产）10 mg,口服,每日1次.观察治疗12个月后HBeAg血清学转换与HBV基因型、HBV特异性CTL的关系.结果 阿德福韦酯治疗12个月后,HBV特异性CTL（0.68%±0.11%）高于治疗前（0.33%±0.11%）,t=8.36 P＜0.001,HBV DNA（3.01±0.2）log10拷贝/ml低于治疗前[（6.27 ±0.70）log10拷贝/ml]t=12.63 P＜0.001,HBV DNA阴转（＜500拷贝/ml）43例（61.43%）.HBeAg阳性45例中发生HBeAg转阴13例（28.89%）,HBeAg血清学转换8例（17.78%）,HBeAg血清学转换者HBV特异性CTL（0.86 ±0.05%）高于无HBeAg血清学转换者（37例,82.22%）的HBV特异性CTL（0.61%±0.07%）,t=7.88,P＜0.001.HBeAg血清学转换8例中,B基因型7例（占B基因型30.43%）,C基因型1例（占C基因型4.55%）,x2=5.15,P＜0.05.结论 阿德福韦酯能提高CHB患者的HBV特异性细胞免疫功能,治疗后HBeAg血清学转换的发生与HBV特异性CTL水平升高有关,并可能与基因型有关.     

乙型肝炎肝硬化患者血清HBV DNA水平与细胞毒性T淋巴细胞的关系和意义

目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者血清HBV DNA水平与HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、非特异性CTL的关系和意义.方法 120例HBV DNA阳性、HBeAg阳性、人白细胞抗原（HLA）-A2阳性的乙型肝炎肝硬化患者,用实时荧光定量PCR检测HBV DNA,流式细胞术检测HBV特异性CTL、非特异性CTL,并作肝功能检测.将120例乙型肝炎肝硬化患者根据HBV DNA水平分为甲、乙两组,甲组68例,HBV DNA水平为3～4 log10拷贝/ml,乙组52例,HBV DNA水平为5～6log10拷贝/ml,对两组患者的HBV特异性CTL、非特异性CTL和肝功能进行比较.结果 甲组HBVDNA水平为（3.68±0.19）log10拷贝/ml,乙组HBV DNA水平为（5.97±0.32）log10拷贝/ml,t=22.98,P＜0.001,甲组HBV特异性CTL（0.33%±0.04%）,高于乙组（0.11%±0.01%）,t=9.61,P＜0.001,甲组非特异性CTL为11.99%±1.51%,乙组为11.91%±1.61%,t=0.16,P＞0.05.结论 乙型肝炎肝硬化患者血清HBV DNA水平与HBV特异性CTL有关：HBV DNA水平高者,HBV特异性CTL低,由于HBV DNA水平高,肝功能损害相对较重.HBV DNA水平低者,HBV特异性CTL高,预示抗病毒疗效相对较好.     

慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA水平与滤泡辅助性T淋巴细胞的关系和意义CSCD

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者HBVDNA水平与外周血滤泡辅助性T淋巴细胞（Tfh）的关系和意义。方法179例HBVDNA阳性、HBeAg阳性、人白细胞抗原（HLA）一A2阳性的CHB患者,用实时荧光定量PCR检测HBVDNA,流式细胞术检测Tfh、HBV特异性CTL,并作IL一21的检测。将179例CHB患者根据HBVDNA水平分为甲、乙两组,甲组86例,HBVDNA水平为10^4。～10^5拷贝／ml,乙组93例,HBVDNA水平为10^6-10^7拷贝／ml,对两组患者进行以上检测指标的比较。结果甲组HBVDNA水平为（4．85±0．37）logl0拷贝／ml,乙组HBVDNA水平为（6．83±0．31）log。0拷贝／ml,t：27．31,P〈0．001,甲组Tfh（5．96±1．59）％,高于乙组（3．71±2．15）％,t=4．92,P〈0．01,IL．21（42．61±15．11）ng／L,高于乙组（14．91±3．15）ng／L,t=8．62,P〈0．01,HBV特异性CTL（0．36±0．08）％,高于乙组（0．18±0．06）％,t=19．99,P〈0．001。结论CHB患者血清HBVDNA水平与外周血Tfh水平有关：HBVDNA水平低者,Tfh水平高,IL-21水平和HBV特异性CTL水平也高。HBVDNA水平高者,Tfh水平低,IL-21水平和ItBV特异性CTL水平也低。基线HBVDNA水平影响抗病毒疗效的机制可能与Tfh水平有关。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与细胞毒性T淋巴细胞表面PD-1表达的关系和意义

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者血清HBV DNA水平与HBV特异性CTL表面程序性死亡受体-1（PD-1）表达的关系和意义.方法 将133例CHB患者根据血清HBV DNA水平分为甲、乙两组,甲组70例（52.63％）,HBV DNA水平为104～105拷贝/ml,乙组63例（47.37％）,HBVDNA水平分107 ～ 108拷贝/ml,对两组患者作HBV特异性CTL、非特异性CTL,HBV特异性CTL表面PD-1表达和肝功能的比较.结果 甲组HBV DNA水平为（5.03±1.01）log10拷贝/ml,低于乙组（7.59±0.99） log10拷贝/ml,t=11.23,P＜0.01,HBV特异性CTL表面PD-1表达（26.32±2.56）％,低于乙组（39.35 ±2.86）％,t=18.69,P＜0.01,HBV特异性CTL （0.37±0.02）％,高于乙组（0.22±0.02）％,t=25.80,P＜0.01,非特异性CTL（16.26 ±2.17）％,低于乙组（19.94±2.47）％,t=3.19,P＜0.01,ALT （259.16 ±85.11） U/L,低于乙组（501.16±86.15） U/L,t=15.10,P＜0.01,TBil（27.99±6.13）μmol/L,低于乙组（44.86±9.51） μmol/L,t=3.92,P＜0.01.结论 CHB患者HBV DNA水平低者,HBV特异性CTL表面PD-1表达也低,HBV特异性CTL水平高,HBV DNA水平高者,HBV特异性CTL表面PD-1表达也高,导致HBV特异性CTL水平降低,并启动非特异性CTL,引起肝功能损害加重.     

阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的影响

目的 探讨阿德福韦酯对慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV特异性CTL的影响.方法 对HBV DNA阳性（HBV DNA≥1×104拷贝/ml）、ALT＞2×正常值上限（ULN）、人白细胞抗原（HLA）-A2阳性的CHB患者用阿德福韦酯（正大天睛药业公司生产）10 mg,口服,每日1次,3个月.用实时荧光定量PCR检测HBV DNA,流式细胞术检测HBV特异性CTL.结果 阿德福韦酯治疗3个月后,HBV特异性CTL（0.52±0.11）%高于治疗前（0.34±0.14）%,t=6.78 P＜0.01,HBV DNA阴转（＜1×103拷贝/ml）28例（62.22%）.17例未阴转的患者,HBV DNA水平治疗后3个月[（4.18±0.4）log10拷贝/ml]低于治疗前[（6.23±0.73）log10拷贝/ml]t=9.99,P＜0.01.结论 阿德福韦酯能提高CHB患者的HBV特异性细胞免疫功能.     

中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义

目的了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义。方法应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义。结果2922例HBV感染者中,B、C、B／C、D基因型分别占15．9％、83．5％、0．41％、0．21％,未发现其他基因型。北方地区c基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以c基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主。B基因型较c基因型HBV感染者平均年龄小（P〈0．001）;C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高（P=0．023）;B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较c基因型高（P=0．038）;C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义（P值分别为0．016）。结论中国HBV基因型以B、c基因型为主,仅少量的B／C和D基因型。北方地区以c基因型为主,南方地区c基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主。c基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBVDNA载量低,病情较重。     

HBV基因分型与病毒载量及血清标志物关系的探讨

目的探讨HBV基因型与HBV-DNA水平及血清标志物的相关性。方法选择125例乙肝患者血清HBV-DNA复制阳性的标本分别检测HBV病毒基因分型、HBV-DNA、乙肝血清标志物、谷丙转氨酶（ALT）和总胆红素（TBL）。结果 125例HBV-DNA复制阳性标本中HBV基因分型以B型为主占71.2%（89/125）,C型占24.0%（30/125）,BC混合型占2.4%（3/125）,非B非C型占2.4%（3/125）;B基因型患者血清ALT（297.3±193.6）U/L和TBL（105.1±59.7）mol/L水平高于C基因型患者ALT（158.1±107.5）U/L和TBL（53.1±22.7）mol/L,P〈0.01;B基因型患者血清抗-HBe阳性率91.0%（81/89）显著高于C基因型的23.3%（7/30）,P〈0.01;B型HBV-DNA水平（5.87±1.72）log10copies/mL与C型（6.01±1.91）log10copies/mL无差异（P〉0.05）。结论本地区HBV病毒基因型以B型为主,C型次之,B基因型对肝脏损害较C基因型重,并与HBV载量及HBeAg系统具有相关性,B基因型易发生YMDD突变。     

慢性乙型肝炎患者ALT水平与HBV特异性CTL、非特异性CTL计数的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者丙氨酸转氦酶(ALT)水平与乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、非特异性CTL的关系.方法 148例CHB患者根据ALT水平分为3组:甲组35例,ALT≥2×正常值上限(ULN)-5×ULN(100～250 IU/L);乙组53例,ALT＞5×ULN～≤10×ULN(251～500 IU/L);丙组60例,ALT＞10×ULN(＞500 IU/L),用流式细胞仪检测非特异性CTL,对其中74例(甲组17例,乙组27例,丙组30例)人白细胞抗原(HLA)-A2阳性CHB患者检测HBV特异性CTL.比较三组的HBV特异性CTL、非特异性CTL、HBV DNA水平和HBeAg阳性率.结果 HBV特异性CTL:甲组[(0.42±0.10)%]高于乙组[(0.25±0.08)%],t=6.37,P＜0.01,乙组高于丙组[(0.17±0.004)%]t=5.14,P＜0.01.非特异性CTL:甲组[(15.01±3.01)%]低于乙组[(18.1±5.02)%],t=2.81,P＜0.01,乙组低于丙组[(21.5±6.11)%]t=3.07,P＜0.01.HBV DNA水平:甲组[(4.97±0.86)log10拷贝/m1]低于乙组[(5.92±0.92)log10拷贝/ml],t=4.87,P＜0.01,乙组低于丙组[(6.37±0.71)log10拷贝/ml]t=2.92,P＜0.01.HBeAg阳性:甲组15例(42.86%),低于乙组(32例,占60.38%),x2=2.59,P＞0.05,乙组低于丙组(41例,占68.33%),x2=0.788,P＞0.05,甲组低于丙组x2=5.929,P＜0.05.结论 CHB患者非特异性CTL越高,ALT水平越高[1],而HBV特异性CTL越低,HBV复制越强.     

乙型肝炎病毒YMDD变异与HBV DNA、HBeAg定量值相关性分析

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者在服用拉米夫定后发生YMDD变异与否其HBV DNA与HBeAg定量值之间是否存在相关关系。方法聚合酶链反应（PCR）荧光定量法测定CHB患者治疗前后的HBV DNA、YMDD变异,同时微粒子酶免疫分析法检测其HBeAg定量值。结果218份标本同时检测HBV DNA和HBeAg定量值,对两指标前后两次的升降率进行相关性分析,发现无显著相关性（r=0.3153,P〉0.05）。12例发生YMDD变异（变异组）和25例YMDD野生型（野生组）发生HBeAg血清转换者分别为3例和15例,差异有统计学意义（χ2=3.976,P〈0.05）;变异组和野生组HBV DNA对数值分别为（4.15±1.78）和（2.72±1.58）,差异有统计学意义（P〈0.01）;变异组和野生组HBV DNA、HBeAg定量值分别做相关性分析,发现变异组r=0.5552,有显著相关性（P〈0.05）,野生组r=0.2683,无显著相关性（P〉0.05）。结论拉米夫定抗病毒治疗过程中HBV DNA和HBeAg滴度变化无显著相关性,YMDD变异组血清转换率和持续转换率明显低于无变异组,HBV DNA和HBeAg始终维持在较高水平。     

慢性乙肝患者外周血HBcAg18-27V／I变异体特异性淋巴细胞分析

目的分析不同HBcAg18-27V／I变异体特异性淋巴细胞的频数在慢性乙肝患者外周血中的差异。方法收集44例ALT≥2×ULN的慢性乙肝患者外周血淋巴细胞，通过PCR方法分析感染者病毒学背景（HBV基因型、HBcAg18-27V／I、HLA-A2基因型），应用流式细胞仪分别检测HBcAg18-27V-Tetramer（＋）CD8（＋）和HBcAg18-27I-Tetramer（＋）CD8（＋）的淋巴细胞频数。结果华南地区慢性乙肝患者主要为HLA-A2基因型（22／44）；感染的HBV主要为B基因型（35／44）。其中HBcAg18-27为I变异体的占优势（43／44），在A2阳性组中，HBcAg18-27I-Tetramer（＋）CD8（＋）的淋巴细胞频数与HBcAg18-27V-Tetramer（＋）CD8（＋）的淋巴细胞频数（0．41±0．52 VS 0．28＋0．43）比较差异有统计学意义（P〈0．001）。结论在HBV基因型B／C为主的地区．应用HBcAg18-27V表位进行细胞免疫学研究而不考虑HBV病毒学背景的结果可能导致一定的偏差。     

血清中IL-6和IL-10变化与慢性乙肝急性发作导致肝衰竭的关系

目的通过分析急性发作慢性乙型肝炎（慢性乙肝）患者体内IL-6、IL-12、γ干扰素和IL-10的变化,探讨急性发作及病情严重程度与细胞因子变化的关系。方法对154例急性发作及免疫耐受慢性乙肝患者采用ELISA法检测IL-6、IL-12、γ干扰素和IL-10的水平,同时检测肝功能、HBV DNA定量等。结果处于急性发作的患者年龄较大,HBV DNA定量较低,促炎症因子和抗炎症因子的水平均高于处于免疫耐受的患者;重型肝炎组IL-6的水平（179.80±134.96）pg/ml高于非重型肝炎组（108.80±113.23）pg/ml（P〈0.05）,而IL-10的水平（12.80±4.96）pg/ml低于非重型肝炎组（20.33±7.35）pg/ml（P〈0.05）。结论慢性乙肝急性发作可能与炎症因子的激活相关,IL-6有促进肝损伤作用,而IL-10可能在避免过强免疫损伤中起重要作用。     

慢性乙型肝炎抗病毒治疗后病毒学应答与特异性细胞免疫的关系

目的探讨阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎（CHB）患者病毒学应答与HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的关系。方法51例CHB患者,HBVDNA阳性（HBVDNA≥I×10^4拷贝／ml,HBeAg阳性32例（62．75％）、丙氨酸转氨酶（ALT）〉2×正常值上限（ULN）、人白细胞抗原（HLA）-A2阳性,用阿德福韦酯10mg,口服,每日1次。观察治疗72周后HBVDNA转阴和HBeAg血清学转换与HBV特异性CTL的关系。结果阿德福韦酯治疗72周后,HBVDNA转阴（〈500拷贝／m1）39例（76．47％）,其HBV特异性CTL（0．81％±0．06％）,高于12例（23．53％）的HBVDNA未转阴者（0．66％±0．06％）,t=7．93,P〈0．01,IqBeAg血清学转换8例（25％）,其HBV特异性CTL（0．97％±0．07％）,高于24例（75％）的无HBeAg血清学转换者（0．67％±0．07％）,t=7．61,P〈0．01。结论阿德福韦酯治疗CHB患者病毒学应答和血清学应答与HBV特异性CTL水平升高有关。