NF-KB在发育鼠戊四氮反复点燃癫痫形成中的作用

目的:用NF-KB阻滞剂吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)阻断NF-KB的表达,探讨核因子KB(NF-KB)在发育鼠戊四氮(PTZ)点燃癫痫形成过程中的作用.方法:生后10 d(P10)Wistar大鼠72只,随机分为PTZ组、PDTC PTZ组及生理盐水对照组3组,制备戊四氮反复点燃癫痫模型.观察各组大鼠行为学改变、海马各区细胞形态及细胞计数、NF-KB表达、5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)阳性细胞数和苔藓纤维发芽等指标.结果:(1)NF-KB表达,PTZ组显著高于对照组及PDTC PTZ组(P<0.01);(2)海马神经细胞计数,PTZ组齿状回(DG)区颗粒细胞较对照组显著增加(P<0.05);PDTC PrZ组CAI、CA3和门区神经元数较PTZ组均明显减少(P(0.05);(3)DG区BrdU阳性细胞数,PTZ组和PDTC PTZ组均较对照组显著增加(P<0.01);PDTC PTZ组DG区BrdU阳性细胞数目明显较PTz组少(P<0.01);NF-KB吸光度值与BrdU阳性细胞数／颗粒细胞数相关性分析呈正相关,具有统计学意义(P<0.01);(4)苔藓纤维发芽,PDTC PTz组和PTZ组均有苔藓纤维发芽,两组比较没有显著差异.结论:NF-KB在发育鼠癫痫中发挥重要作用,促进海马神经元发生,保护海马神经细胞,但对苔藓纤维发芽无明显作用.     

戊四氮癫痫幼鼠海马内NF-κB与N-Cadherin定位与苔藓纤维发芽现象

目的:探讨单次癫痫发作后脑内NF-κB和N-Cadherin表达与海马结构中苔藓纤维发芽现象之间的关系与作用。方法:利用腹腔注射戊四氮(PTZ)制作发育期SD大鼠(14 d、28 d)单次惊厥发作模型,各日龄组随机分为生理盐水(NS)组、PTZ组、吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)组和PDTC+PTZ组,采用免疫组化法检测NF-κB和N-Cadherin的表达,利用Timm染色法观察海马苔藓纤维发芽现象。结果:NS组在海马CA3区可见极少Timm染色颗粒;致惊后1周偶见Timm染色颗粒、3周可见Timm染色颗粒沿海马CA3区呈条带样分布(P<0.01);PDTC预处理组Timm染色颗粒较PTZ致惊组明显减少(P<0.05)。NS组大鼠海马CA1、CA3区无NF-κB p65核转位细胞,致惊后24 h各日龄组幼鼠海马CA1、CA3区NF-κB p65核转位细胞较NS组明显增加(P<0.01);PDTC预处理后NF-κB p65的核转位细胞较致惊组明显减少(P<0.05)。NS组海马CA1、CA3区可见少量N-Cadherin阳性细胞;致惊组海马CA3和齿状回门区的N-Cadherin的阳性细胞与NS组相比明显增多(P<0.01),PDTC预处理后相同区域内N-Cadherin阳性细胞较PTZ致惊组明显减少(P<0.05)。NF-κB p65、N-Cadherin及Timm染色颗粒的表达结果与惊厥鼠的日龄并无关联性。结论:幼鼠单次惊厥发作可以引起海马不同程度的苔藓纤维发芽,而NF-κB p65、N-Cadherin的分布位置与变化时相与苔藓纤维发芽相吻合,表明NF-κB p65、N-Cadherin可能参与或伴随着苔藓纤维的发芽。     

不同成熟期大鼠戊四氮反复惊厥模型与癫痫发病机制研究

目的：观察新生大鼠、成熟大鼠反复惊厥后海马结构的变化及NF-κB 表达，探索未成熟脑癫痫发病机制。 方法： 对生后10 d、60 d（P10、P60）两实验组大鼠用戊四氮(PTZ)反复腹腔注射5 d，设P10、P60生理盐水对照组；硫堇染色对CA1、CA3、DG及门区神经元进行细胞计数, 观察海马神经元坏死及凋亡；免疫组化技术检测NF-κB的表达；Timm组织化学染色观察苔藓纤维发芽并评分。 结果： (1) P10实验组与对照组比较，海马齿状回、CA1、CA3区无明显神经元丢失，DG区颗粒细胞数在实验组(23.25±3.06) 多于对照组（16.25±1.58）；P60实验组CA1、CA3区神经元计数（8.22±1.88、5.62±1.68）明显少于对照组（6.31±1.50、3.62±1.40），DG区无明显差异；（2）两实验组CA3区锥体层苔藓纤维发芽均多于对照组，但P60(3.25±1.03)较P10（1.50±0.92）更明显；（3）P10、P60实验组NF-κB 表达高于对照组，且P10组较P60组更为明显（P<0.05）。 结论： 新生大鼠致痫后海马神经元无明显丢失，脑内NF-κB 表达增加，可能是未成熟脑对惊厥性脑损伤具有耐受性的重要神经生物学基础。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑IGF-1、NF-κB表达及神经细胞凋亡的影响

目的： 观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠脑胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达及神经细胞凋亡的影响。方法： 用亚惊厥剂量的PTZ复制大鼠慢性癫痫模型，用药组以灵芝孢子粉灌胃，记录癫痫发作的潜伏期及持续时间，采用免疫组织化学和TUNEL法分别检测脑IGF-1、NF-κB/P65的免疫反应性和神经细胞凋亡情况。结果： 大鼠海马和皮质区每高倍视野（×400）下平均凋亡细胞数模型组（18.80±2.13、16.87±2.00）明显多于对照组（0.97±0.52、0.58±0.25），IGF-1、 NF-κB/P65蛋白表达模型组明显高于对照组（均P<0.01）；在造模第17、21、25 d时用药组较模型组癫痫发作的潜伏期有所延长（分别为P<0.05，P<0.05，P<0.01），海马和皮质区凋亡细胞数用药组（12.30±2.46、10.48±1.33）明显少于模型组，NF-κB/P65蛋白表达用药组低于模型组，而IGF-1的免疫反应性用药组明显强于模型组。结论： IGF-1、NF-κB 及神经细胞凋亡均可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显抑制NF-κB蛋白的表达，增强IGF-1的免疫反应性，可能是其对癫痫所致神经细胞凋亡有明显抑制，从而对神经细胞起保护作用的机制之一。     

灵芝多糖对戊四氮活化海马神经细胞NF-κB变化的影响

目的：本文以新生大鼠的海马神经细胞为研究对象，通过体外培养新生大鼠海马神经细胞, 观察神经细胞生长状况,制备细胞癫痫模型,检测灵芝多糖对癫痫大鼠海马神经细胞的NF-κB变化的影响,进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝多糖的作用。方法:将体外培养海马神经细胞随机分为模型组、灵芝多糖处理组、对照组,用免疫荧光化学分析方法检测NF-κB表达的变化。结果:体外培养新生大鼠的海马神经细胞成功，在培养的第7 d，制备细胞癫痫模型，通过免疫细胞荧光化学反应证明戊四氮（PTZ）的作用使NF-κB核表达较灵芝多糖处理组和对照组明显增多，提示海马神经细胞被活化，灵芝多糖处理组较模型组NF-κB核表达少。结论:应用无血清培养基及联合阿糖胞苷培养方法，神经细胞生长良好，获得神经细胞的纯度达90%以上，为神经细胞相关的实验研究提供了良好的模型。灵芝多糖可能通过减少神经细胞内钙离子内流，从而间接抑制PTZ诱导的NF-κB活化，降低神经细胞的兴奋性，达到抗癫痫作用。     

PDTC对肝纤维化大鼠核转录因子-κB、α-平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原表达影响研究

目的探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对二甲基亚硝胺(DMN)所致肝纤维化大鼠肝组织中核转录因子-κB(NF-κB)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Col-1)表达的影响及其意义。方法雄性SD大鼠38只,随机分为A、B、C组。A组为正常对照组,B、C组再各自随机分为2周及4周组并腹腔注射DMN诱导大鼠肝纤维化模型,C组造模同时给予PDTC灌胃。应用化学发光凝胶电泳迁移率(EMSA)检测肝组织NF-κBp65活性;采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测肝组织NF-κBp65和Col-1的mRNA表达;应用免疫组化检测NF-κBp65、α-SMA和Col-1的表达。结果 B组及C组NF-κBp65活性及其mRNA表达、Col-1 mRNA表达、NF-κBp65免疫组化阳性细胞数、α-SMA及Col-1阳性面积均明显高于A组(P<0.01或P<0.05),且随着时间的延长,4周组高于2周组(P<0.01或P<0.05);同期比较发现C组NF-κBp65活性及其mRNA表达、Col-1 mRNA表达、NF-κBp65免疫组化阳性细胞数、α-SMA及Col-1阳性面积均明显低于B组(P<0.01或P<0.05)。NF-κBp65活性与NF-κBp65 mRNA表达、Col-1 mRNA表达、NF-κBp65免疫组化阳性细胞数、α-SMA及Col-1阳性面积呈正相关(r=0.747,0.780,0.779,0.658,0.780,P均<0.01)。结论 NF-κB与大鼠肝纤维化密切相关;PDTC可能通过抑制NF-κB的活性及α-SMA、Col-1表达从而产生抗肝纤维化作用。     

核因子-κB对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡及TGF-β1表达的影响

目的: 探讨核因子-κB(NF-κB)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡和转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达的影响。方法: 体外培养ASMCs，以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药,将ASMCs分为对照组、TNF-α组和TNF-α+PDTC组。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β₁ mRNA表达，Western blotting检测NF-κB、TGF-β₁的表达，免疫细胞化学染色法检测PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位，四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMCs增殖，Annexin V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡。结果: （1）TNF-α组ASMCs的NF-κB活性显著高于对照组(P<0.01),TNF-α+PDTC组NF-κB活性显著低于TNF-α组 (P<0.01)。（2）TNF-α组ASMCs增殖显著高于对照组(P<0.01),TNF-α＋PDTC组的增殖反应显著低于TNF-α组(P<0.01)；TNF-α+PDTC组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P<0.01)。（3）TNF-α组ASMCs的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组(P<0.01)，TNF-α+PDTC组的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著低于TNF-α组(P<0.01)。（4）TNF-α组ASMCs的TGF-β₁的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋PDTC组（P<0.01）。结论: NF-κB活化可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β₁的表达和分泌。     

核因子κB在蛋白激酶C诱导哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

目的： 探讨核因子κB（NF-κB）在蛋白激酶C（PKC）致哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖中的作用。方法： 16只Wistar大鼠随机分为哮喘组（8只）和对照组（8只）。应用PKC激动剂PMA和NF-κB抑制剂PDTC干预哮喘组和对照组大鼠ASMCs。采用流式细胞术、MTT法及增殖细胞核抗原（PCNA）免疫荧光技术等方法检测ASMCs增殖；免疫荧光技术及电泳迁移率改变分析(EMSA)检测NF-κB活性。 结果： PMA干预哮喘组ASMCs 后S期细胞比例、A值、PCNA表达率、NF-κBp65阳性率及结合带的灰度值均显著高于未干预的哮喘组ASMCs (均P<0.05)，PDTC预处理后再给予PMA上述指标均低于仅用PMA干预及未干预者(均P<0.05)。仅用PDTC处理的哮喘组ASMCs上述指标均低于未干预的ASMCs (均P<0.05)。结论： NF-κB参与哮喘大鼠ASMCs增殖，在其增殖中存在着PKC－NF-κB信号途径。     

PDTC抑制大鼠重症急性胰腺炎肺损伤NF-κB的激活

目的观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠NF-κB在胰、肺组织内的表达情况,探讨其与肺损伤的关系。方法SD大鼠45只,随机分为对照组、SAP组、牛磺胆酸钠(二硫代氨基甲酸吡咯烷pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)预处理组(各组再分为3、6、12h3个亚组,对照组n=3,模型组n=6)。采用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射法建立重症胰腺炎模型,预处理组在建立模型前1h腹腔内注PDTC(100mg/kg)。取胰、肺组织行病理观察,免疫组化SP法观察NF-κB表达情况。结果对照组仅少量肺泡间质细胞表达NF-κB;SAP组与PDTC预处理组NF-κB阳性细胞数明显增加(P<0.05),并呈动态变化,6h达高峰,PDTC预处理6h和12h组明显低于SAP组(P<0.05),阳性信号主要位于胰腺腺泡细胞、中性粒细胞、单核/巨噬细胞、支气管黏膜上皮细胞、肺泡上皮细胞胞浆和胞核内。结论PDTC可能通过抑制NF-κB的激活减轻重症急性胰腺炎并发肺损伤。     

核转录因子-κB在实验性肝纤维化中的表达、分布及意义

目的:研究核转录因子-κB(NF-κB)在实验性肝纤维化过程中的表达、分布及意义。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常组、肝纤维化模型组和NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组,PDTC组大鼠在给CCl4的同时给予PDTC灌胃。肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量测定,鲎试剂法测定血浆内毒素水平,赖氏法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT),TBA法检测丙二醛(MDA)的水平,免疫组化法测定NF-κB的表达,Western blot-ting检测结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果:免疫组化显示NF-κBp65在正常肝组织中少量表达于中央静脉周围的肝细胞胞浆内,肝纤维化模型组肝组织可见程度不等的细胞浆和(或)细胞核表达,主要分布于纤维化区、肝窦区、血管壁及部分胆管细胞、变性肝细胞也可见阳性染色,阳性细胞数从第1周末就显著高于正常对照组,PDTC组阳性细胞数明显低于同期肝纤维化模型组(P0.05);肝纤维化模型组内毒素含量、NF-κB以及CTGF表达明显升高,且两两均呈正相关;PDTC组内毒素含量呈先升高后降低趋势,NF-κBp65和CTGF表达显著低于同期肝纤维化模型组,且二者呈正相关(r=0.815,P0.01),内毒素与NF-κBp65和CTGF表达无相关性。结论:内毒素可能通过激活NF-κB通路上调CTGF的表达。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐抑制NF-κB活化对HL-60细胞的化疗增敏作用

目的：探讨化疗诱导性核因子κB的活化机制及抗氧化抑制NF-κB活化对白血病细胞凋亡及化疗敏感性的影响。 方法： 采用间接免疫荧光方法和凝胶迁移率变动试验（EMSA）观察不同浓度的化疗药物单独或与抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）联合作用于HL-60细胞后NF-κB的活化反应；运用流式细胞术和MTT试验比较NF-κB活化及活化抑制对HL-60细胞凋亡及化疗敏感性的影响。 结果： EMSA试验表明，柔红霉素（DNR）和足叶乙甙（VP-16）均呈剂量依赖性诱导NF-κB活化；RelA亚基位于细胞核进一步证实了NF-κB活化。PDTC呈剂量依赖性抑制诱导性NF-κB活化，当其浓度达到100 μmol/L时，NF-κB活化被完全抑制。比较PDTC干预前后细胞的凋亡反应，发现2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L VP-16诱导的细胞凋亡指数分别由(5.34±0.62)%、(10.16±0.42)%、(17.32±1.15)%增至(8.97±0.81)%、(16.01±1.06)%、(22.96±1.33%)，且PDTC显著增强DNR及VP-16对HL-60细胞的生长抑制率(P<0.01)。 结论： 反应性氧中间产物介导化疗诱导性NF-κB活化，抗氧化抑制NF-κB活化可以增进HL-60细胞凋亡及化疗敏感性。     

大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中PDTC预处理对NF-κB表达及细胞凋亡的调节作用

目的观察核因子-κB(NF-κB)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰、肺组织内的表达及肺组织内细胞凋亡情况。方法 SD大鼠60只,分为对照组、SAP组、二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)预处理组。5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱发大鼠SAP模型。SP法观察NF-κB在胰、肺组织内的表达情况,TUNEL法检测肺组织内细胞凋亡情况。结果 SAP组各时间点NF-κB在胰、肺组织内的阳性表达水平与对照组相比均明显增加(P<0.01),PDTC预处理组各时间点NF-κB阳性表达水平与SAP组相比均明显减弱(P<0.05)。SAP组肺组织内凋亡指数高于相对应的对照组(P<0.05),PDTC预处理组凋亡指数均低于相对应的SAP组(P<0.05)。结论 NF-κB的激活和凋亡细胞的增多是加重肺损伤的重要因素之一。PDTC对SAP肺损伤的保护作用可能与抑制NF-κB激活及肺组织内细胞凋亡相关。     

NF-κB抑制齐PDTC对大肠癌体外血管生成因子表达的影响

 目的 探讨NF-κB抑制剂PDTC对大肠癌Lovo细胞系体外血管生成因子表达的影响。方法 采用NF-κB抑制剂PDTC处理Lovo细胞，以未作处理Lovo细胞作为对照组，以PDTC处理后的Lovo细胞作为实验组。Western blot检测各组细胞NF-κB、p-IκBα、VEGF和b-FGF蛋白表达情况；Transwell细胞迁移实验检测HUVEC迁移能力；收集各组Lovo细胞上清液，分别加入到培养液中培养HUVEC，并采用CCK-8细胞增殖实验检测HUVEC增殖能力。结果 Western blot结果提示实验组NF-κB、p-IκBα、VEGF和b-FGF表达量均明显低于对照组（P<0.05）；Transwell细胞迁移结果显示实验组HUVEC迁移穿过微孔膜的细胞数量较对照组明显减少（P<0.05），其迁移抑制率为49.2%；CCK-8细胞增殖实验结果显示实验组HUVEC增殖数量较对照组明显减少（P<0.05），其增殖抑制率为73.2%。结论 在大肠癌细胞中，NF-κB抑制剂PDTC可能通过下调NF-κB的活性而降低其体外血管生成能力。     

香烟烟雾提取物通过活化NF-κB上调小鼠巨噬细胞ICAM-1表达

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)对香烟诱导的小鼠巨噬细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的调控机制,以及地塞米松的抑制作用。方法:分别用香烟烟雾提取物(CSE)、CSE 二硫基氨基甲酸吡咯烷(PDTC)、CSE 地塞米松(DEX)与小鼠巨噬细胞共同孵育1、4和12h,采用免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测巨噬细胞NF-κB和ICAM-1的表达。结果:(1)CSE组巨噬细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比(41.50%±1.30%)明显高于对照组(10.40%±1.57%),P<0.01;CSE PDTC组和CSE DEX组阳性细胞百分比(17.89%±2.62%,12.72%±1.10%)明显低于CSE组,均P<0.01;(2)CSE组巨噬细胞ICAM-1mRNA水平(1.34±0.05)及其蛋白表达阳性细胞百分比(43.02%±2.37%)明显高于对照组(0.49±0.03,10.58%±0.88%),均P<0.01;CSE PDTC组和CSE DEX组巨噬细胞ICAM-1mRNA水平(0.98±0.05,1.07±0.04)及其蛋白表达阳性细胞百分比(18.42%±1.06%,27.76%±2.06%)明显低于CSE组,均P<0.01;(3)巨噬细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比与ICAM-1mRNA水平及其蛋白表达阳性细胞百分比均呈显著正相关(分别为r=0.789和r=0.833,均P<0.01)。结论:香烟可通过诱导巨噬细胞NF-κB的活化在转录水平上上调ICAM-1的表达,地塞米松可抑制香烟诱导的NF-κB活化和ICAM-1的表达。     

抑制核因子κB与妊娠糖尿病大鼠子宫胰岛素抵抗的关系

目的:观察妊娠糖尿病(GDM)大鼠子宫组织中,核因子-κB(NF-κB)及葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)的表达,探讨GDM子宫胰岛素抵抗与抑制NF-κB表达的关系。方法:将30只SD孕鼠随机分为正常妊娠对照(NC)组、妊娠糖尿病(GDM)组和PDTC干预组,每组10只。采用链脲霉素(STZ)腹腔注射建立大鼠GDM模型。PDTC干预组大鼠在建模后每日腹腔注射PDTC(40 mg/kg)。大鼠分娩前及妊娠20 d处死留取子宫标本,观察子宫组织的病理变化。用免疫组化染色法及Western blot法检测子宫组织中GLUT-4与NF-κB的表达变化。结果:GDM组NF-κB的表达明显高于NC组(P0.01);PDTC干预组NF-κB的表达明显降低(P0.01)。GDM组GLUT-4的表达明显低于NC组(P0.01);PDTC干预组GLUT-4的表达与GDM组比较明显升高(P0.01)。结论:抑制核因子κB的活性能使GDM大鼠子宫组织中GLUT-4的表达升高,提示GDM大鼠子宫胰岛素抵抗的发生可能与核因子κB活化介导的GLUT-4表达下调有关。     

皮质发育障碍模型鼠脑皮质形态学和致痫机制研究

目的：观察皮质发育障碍（DCDs）大鼠脑皮质形态学及海马苔藓纤维发芽的情况，探讨其与癫痫发生的关系。方法：建立DCDs动物模型，观察其行为、EEG改变，采用HE染色、Nissl染色和Timm’s硫化银组织化学染色，肉眼和光镜下观察大鼠脑皮质形态变化，评估海马苔藓纤维发芽情况，各组数据取苔藓纤维发芽评分，采用非参数秩和Kruskal-Wallis H检验，组间两两比较用Nemenyi法。结果：①正常对照组和母鼠组大鼠无抽搐发作，F1代组少数自发性癫痫发作，大多表现活动增多、兴奋躁动、搔抓和“洗脸样活动”频繁。②大多数皮层电极EEG示小波幅节律为主，无典型的尖波、棘波、尖慢波、棘慢综合波发放。③F1代鼠脑皮质结构紊乱，双侧海马CA3区均有苔藓纤维发芽（P〈0．05），而正常对照组和假手术组脑结构未见异常。结论：脑皮质和海马的结构异常及海马CA3区苔藓纤维发芽可能是DCDs导致癫痫发生的重要机制。     

延胡索总生物碱对慢性癫痫大鼠皮层NLRP3/caspase-1/GSDMD介导的细胞焦亡的影响

目的：研究延胡索总生物碱（TAC）对戊四氮（PTZ）所诱导的慢性癫痫大鼠的治疗作用，探讨其对大脑皮层核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/caspase-1/消皮素D(GSDMD)介导的细胞焦亡的影响及可能机制。方法：清洁级雄性SD大鼠30只，随机抽取6只大鼠作为正常组，其余大鼠采用PTZ(35 mg/kg)腹腔连续注射28 d复制慢性癫痫模型。将造模成功的18只大鼠随机分为模型组、低剂量TAC组和高剂量TAC组，每组6只。低、高剂量TAC组大鼠分别灌胃给予7和14 mg/kg的TAC，连续给药14 d，正常组和模型组大鼠灌胃给予等体积生理盐水。观察记录大鼠全面强直阵挛发作（GTCS）和极小阵挛发作（MCS）的潜伏期；采用HE染色观察颞叶皮层的病理学变化；TUNEL法检测神经细胞凋亡；免疫组化和Western blot法检测皮层组织核因子κB(NF-κB)、NLRP3、caspase-1和GSDMD蛋白表达；免疫组化检测脑组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL-18)和IL-1β蛋白表达；RT-qPCR检测各组NLRP3、caspase-1和GSDMD的m...     

宫内感染致脑损伤对仔鼠认知发育和海马神经发生的影响

 目的:探讨宫内感染致仔鼠脑损伤后对认知发育和海马神经发生的影响。方法: 15只Sprague-Dawley孕鼠（孕15 d）按随机数字表法分为造模组（8只）和对照组（7只）。繁殖后的2组雄性仔鼠按随机数字表法分为宫内感染组（35只）和对照组（35只），进行大脑解剖学观察、神经细胞凋亡检测、Morris水迷宫实验、神经细胞增殖及存活分析。结果: （1）宫内感染组仔鼠大脑较对照组萎缩，TUNEL阳性细胞数和caspase-3阳性细胞数均较对照组显著增加 (P<0.05)。（2）宫内感染组仔鼠近期记忆及远期记忆保持能力均较对照组降低，潜伏期显著延长（P<0.05）。（3）细胞增殖分析显示宫内感染组3 、7 和14日龄仔鼠BrdU阳性细胞数较对照组显著增加（P<0.05）；细胞存活分析显示，28日龄的2组仔鼠BrdU阳性细胞数无显著差异（P>0.05）。结论: 宫内感染可致仔鼠脑损伤，海马神经细胞凋亡可能与认知发育障碍密切相关。宫内感染诱导的神经发生可能与脑损伤后神经自身修复有关。     

载脂蛋白M在急性肾衰大鼠肾组织中的表达及NF-κB抑制剂的干预作用

目的：观察肾组织载脂蛋白M（apoM）在缺血再灌注性急性肾衰（ARF）时的表达变化以及核因子-κB（NF-κB）特异性抑制剂-吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对apoM表达的影响，探讨apoM是否参与ARF的发病机制。方法：建立大鼠缺血再灌注性急性肾衰模型，分为假手术组、ARF组和PDTC组。采用Western blotting，检测不同时点肾皮质apoM和核内NF-κB p65亚基的表达。结果:ARF组各时点apoM水平较假手术组明显增高（P＜0.01），且呈双峰型变化，于再灌注6 h达第1次高峰，之后表达逐渐下降，从24 h到48 h表达再次上调；PDTC组apoM的变化趋势与ARF组相同，但各时点apoM水平较ARF组显著降低（P＜0.01）。ApoM与核内NF-κB p65亚基的表达呈明显正相关。结论:apoM可能通过NF-κB的介导参与缺血再灌注性ARF的发病。     

甜菜碱对戊四氮致痫大鼠海马GFAP、甘氨酸和甘氨酸受体表达的影响

 目的：研究甜菜碱对癫痫大鼠海马胶质细胞原纤维酸性蛋白（GFAP）、甘氨酸(Gly)及甘氨酸受体(GlyR)表达的影响。方法：将健康雄性Wistar大鼠随机分为：正常对照组（腹腔注射生理盐水,1.0 mL生理盐水灌胃);癫痫组（腹腔注射戊四氮,1.0 mL生理盐水灌胃）;甜菜碱高、中、低浓度组（腹腔注射戊四氮,甜菜碱灌胃）;丙戊酸钠组（腹腔注射戊四氮,丙戊酸钠灌胃）。实验结束后大鼠眼眶取血检测血清中同型半胱氨酸的含量;在低温条件下迅速取脑组织,分析Gly含量的变化,免疫荧光检测GFAP的水平,兔疫荧光和Western bloting检测海马区GlyR表达的变化。结果：各组大鼠大发作潜伏期无显著差异(P＞0.05),但是甜菜碱治疗组较癫痫组的首次大发作持续时间显著缩短(P<0.01)。癫痫组同型半胱氨酸的含量与正常组比较显著降低（P<0.01）,甜菜碱高、低浓度组同型半胱氨酸含量与癫痫组比较明显降低（P<0.05）。癫痫组甘氨酸的含量与正常对照组相比显著下降（P<0.01）。甜菜碱高、中、低浓度组甘氨酸的含量与癫痫组比较显著增高（P<0.01）。免疫荧光检测GFAP结果,癫痫组与正常组比较显著增高（P<0.01）,而甜菜碱高中低浓度与癫痫组相比显著降低（P<0.01）。免疫荧光与Western bloting检测GlyR结果,癫痫组GluR的表达与正常对照组相比显著降低（P<0.01）,甜菜碱高、中、浓度组较癫痫组显著升高（P<0.01）。结论：甜菜碱具有较好的抗癫痫作用。