外周血SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用进展

结直肠癌(CRC)的早期诊断具有重要临床意义。外周血SEPT9基因甲基化在大量研究中被证实是CRC的特异性生物学标记物,敏感性和特异性均较高,较之目前常用的粪便隐血试验、血清肿瘤标记物和结肠镜筛查具有一定优势,但在筛查腺瘤、息肉等癌前病变中的应用价值有限,用于评估CRC术后复发和放化疗效果的潜力则尚需进一步临床验证。本文就外周血SEPT9基因甲基化检测在CRC筛查中的应用进展作一综述。     

血浆SEPT9基因甲基化对结直肠癌诊断价值的研究进展

背景:早期筛查和诊断可有效降低结直肠癌(CRC)相关死亡率,并可提高患者总体生存率。目前的CRC早期筛查方法主要包括粪便隐血试验和结肠镜检查。粪便隐血试验敏感性低,假阳性较多,而金标准结肠镜检查为有创性检查,患者依从性较低。因此,目前临床亟需寻找有效且简便的CRC早期筛查和诊断方法。血浆SEPT9基因甲基化检测是近年来国外已开始应用的新型非创伤性CRC早期筛查和诊断方法之一,此法较为准确、简便,适合大规模筛查和早期诊断。本文就血浆SEPT9基因甲基化检测对CRC的诊断价值以及相关研究进展进行概述。     

外周血SEPT9基因甲基化检测联合糖蛋白肿瘤标志物在结直肠癌诊断中的应用

背景:SEPT9基因甲基化是结直肠癌的特异性生物标志物,测定其外周血表达水平可评估受检者结直肠癌的患病风险。目的:初步探讨外周血SEPT9基因甲基化检测联合糖蛋白肿瘤标志物在结直肠癌诊断中的临床意义。方法:纳入2016年12月—2017年4月苏州大学附属第一医院诊断的正常对照组57例、腺瘤组61例和结直肠癌组71例患者,应用PCR荧光探针法测定外周血SEPT9基因甲基化情况,测定肿瘤标志物CEA、CA125、CA19-9、CA72-4、CA211水平,采用ROC曲线分析各指标诊断结直肠癌的价值。建立Logistic回归方程,评估SEPT9联合CEA诊断结直肠癌的价值。结果:正常对照组、腺瘤组、结直肠癌组的SEPT9基因甲基化阳性率分别为0、6. 6%、52. 1%。结直肠癌组CEA水平显著高于正常对照组、腺瘤组(P 0. 05)。ROC曲线分析显示,SEPT9、CEA以及两者联合诊断结直肠癌的AUC分别为0. 817、0. 707和0. 793。Logistic回归分析显示,SEPT9、CEA诊断结直肠癌的OR值分别为1. 394(1. 198～1. 762)、1. 325(0. 997～1. 622)。结论:随着疾病进展,外周血SEPT9基因甲基化率明显升高,对结直肠癌的诊断价值较高。联合外周血SEPT9基因甲基化和CEA有助于提高结直肠癌的早期筛查率。     

外周血SEPT9基因甲基化检测在老年结直肠癌筛查中的意义

目的探讨外周血SEPT9基因甲基化检测在老年结直肠癌筛查中的意义。方法筛查对象为1 407例军队退休干部体检者。IFOBT、TF、SEPT9基因甲基化检测三者任一结果为阳性,通知受试者行结肠镜检查。分别计算IFOBT、TF、IFOBT+TF(双联)、SEPT9基因甲基化检测和三者联合检测在老年结直肠癌筛查的性能指标。结果 1 407例军队退休干部体检者中1 369例体检者均进行了TF、IFOBT和SEPT9基因甲基化检测,至少1项结果为阳性者有176例(12.9%),其中96例(54.5%)接受了结肠镜检查,共检出9例结直肠癌和15例进展性腺瘤。使用IFOBT、TF、IFOBT+TF(双联)检测、SEPT9基因甲基化和三种方法联合检测对结直肠癌和进展期腺瘤的检出率分别为0.4%、0.1%、0.5%、1.2%、1.8%;SEPT9基因甲基化检测对结直肠癌和进展期腺瘤的检出率优于IFOBT+TF(双联)(1.2%vs 0.5%,P=0.04),但三者联合检出率较单纯SEPT9基因甲基化检测,差异无统计学意义(1.8%vs 1.2%,P=0.27),对筛查对象进行性别和年龄分层分析显示,各项检测指标男女差别不大,但SEPT9基因甲基化检测在70岁以上患者中筛查优势明显。结论 SEPT9基因甲基化是一种简单无创的结直肠癌筛查新技术,单独使用对结直肠癌和腺瘤的检出率显著高于IFOBT和TF联合检测,因此SEPT9基因甲基化检测可作为老年人结直肠癌早期筛查的首选策略。     

SEPT9在结直肠癌早期检测中的研究进展

SEPT9是13个Septin同源基因家族之一，参与调控众多过程，包括细胞分裂、细胞极化、细胞迁移以及线粒体分裂等。研究表明在众多肿瘤中，SEPT9都发挥着作用，尤其在结直肠肿瘤研究领域，外周血SEPT9基因甲基化检测更是研究热点，其检测的敏感度和特异度相对于其他糖蛋白肿瘤标志物、粪便隐血试验和粪便免疫化学测试等更具有优势，相对于结直肠镜等侵入性检查更节约成本，同时有着更好的依从性。本文对SEPT9的功能、与结直肠癌之间的关系以及对结直肠肿瘤的筛查及诊断价值做一综述。     

多基因甲基化检测对结直肠癌早期诊断的意义

目的 通过对结直肠癌（CRC）组织中多基因甲基化水平的检测,探讨多基因甲基化对CRC早期诊断的意义.方法 选取25例CRC患者胃镜采集标本组织,通过甲基化特异性PCR（MSP）检测CRC和炎性组织中甲基化水平,分析其与CRC患者临床各指标的关系.结果 在CRC患者中,APC、P16、MLH1、DCC甲基化率分别为52.0%（13/25）、32.0%（8/25）、44.0%（11/25）、60.0%（15/25）.炎性组织中仅有1例DCC甲基化异常表达,甲基化率为10.0%（1/10）,甲基化阳性率显著高于炎性组织（P＜0.05）,4种基因甲基化联合检测诊断CRC的阳性率为92.0%（23/25）,高于单个基因检测的甲基化阳性率,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 APC、P16、MLH1、DCC基因在CRC患者中甲基化水平异常表达,联合检测APC、P16、MLH1、DCC可能作为CRC早期诊断的标志物.     

粪便DNA甲基化分析在结直肠癌早期诊断中的价值

近年来,研究表明DNA甲基化改变与肿瘤的发生发展关系密切,有望用于恶性肿瘤的分子诊断。由于结直肠癌(CRC)组织持续脱落细胞到粪便中,因此检测粪便中CRC相关基因的甲基化状态有可能成为一条无创诊断CRC的新途径。增生性息肉蛋白基因(HPPI)是在结肠增生性息肉中     

人粪便SFRP2基因甲基化分析对结直肠癌的诊断价值

目的探讨人粪便中分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因甲基化分析用于结直肠癌(CRC)早期诊断的可行性。方法从87例结直肠癌或良性病变的患者及24例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析其SFRP2基因甲基化状态。结果CRC、腺瘤、增生性息肉和溃疡性结肠炎患者的SFRP2基因甲基化阳性率分别为94.2%(49/52)、52.4%(11/21)、37.5%(3/8)和16.7%(1/6)。1例正常对照SFRP2基因甲基化检测阳性。检测SFRP2基因甲基化诊断CRC及癌前病变的敏感性和特异性分别为90.5%和85.4%。结论SFRP2基因甲基化是CRC进展过程中的早期事件。粪便SFRP2基因甲基化分析可望成为CRC早期无创诊断或CRC高风险人群筛查的新途径。     

粪便标本中 SFRP1和 WIF-1基因启动子甲基化在大肠癌早期筛查中的意义

目的：探讨联合检测粪便中分泌型卷曲蛋白1（SFRP1）和Wnt途径抑制因子-1（WIF-1）基因启动子甲基化作为大肠癌（ CRC）早期筛查指标的可行性。方法收集48例CRC患者、35例大肠腺瘤患者、32例大肠增生性息肉患者及30例健康人的粪便样本,采用甲基化特异性PCR技术分析样本中SFRP1和WIF-1基因启动子甲基化状态。结果 CRC患者粪便中SFRP1和WIF-1基因启动子甲基化率分别为68．8％和60．4％,腺瘤患者分别为57．1％和42．9％,增生性息肉患者分别为21．9％和18．8％;两者联合检测CRC和大肠腺瘤的敏感度分别为77．1％和65．7％,特异度为93．3％。2个基因甲基化水平在CRC和腺瘤患者的粪便样本中均显著高于增生性息肉和健康人群（P均＜0．05）。此外,SFRP1和WIF-1基因甲基化与临床病理特征无明显相关性。结论检测粪便中SFRP1和WIF-1基因启动子甲基化有望成为CRC早期筛查的一种非侵入性检测方法,在早期筛查和诊断中具有潜在的应用价值。     

外周血SEPT9 DNA甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用

结直肠癌是多种致癌因素作用下发生的恶性肿瘤,预后差,病死率较高。常用的结直肠癌筛查方法包括普通结肠镜检查、弯曲乙状结肠镜检查、愈创木脂化学法粪隐血试验、免疫化学粪隐血试验、粪便DNA检测、CT结肠成像以及血清癌胚抗原检测等,但这些检查均有缺陷。SEPT9 DNA甲基化水平升高与结直肠癌的发生相关,检测外周血SEPT9 DNA甲基化水平进行结直肠癌筛查,适合在易感人群中推广普及。本文就外周血SEPT9 DNA甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用作一综述。     

SEPT9甲基化与多种血清肿瘤标志物对结直肠癌诊断价值的比较

[目的]探讨单一血浆SEPT9甲基化检测与多种血清学肿瘤标物在结直肠癌临床诊断中的意义,并对其诊断价值进行比较。[方法]选取82例不同分期的结直肠患者,64例良性息肉患者和60例正常对照,均行肠镜检查确认病理,采用定量甲基化特异性PCR检测SEPT9甲基化水平,采用化学发光法同时检测血清学中CEA、CA125、CA19-9、CA72-4、CA50和CA242六种血清学肿瘤标记物水平,并做统计学分析。[结果]血浆SEPT9甲基化检测对结直肠癌的检测灵敏度为:82.9%,单一的血清学肿瘤标物CEA、CA125、CA19-9、CA72-4、CA50和CA242对结直肠癌的检测灵敏度分别为35.4%、9.8%、18.3%、17.1%、13.4%和20.7%。6种血清学肿瘤标记物联合检测的灵敏度为57.3%。统计学分析显示,通过血清学6种肿瘤标记物联合检测后,其阳性检出率与任意一个单一肿瘤标记物的阳性检出率差异有统计学意义(P0.05)。与结直肠癌组比较,对照组6种血清学肿瘤标记物联合检测的阳性率差异有统计学意义(P0.05)。SEPT9甲基化检测对结直肠癌的检出率与6种单一的肿瘤标志物检出率差异有统计学意义(P0.05),且与6种肿瘤标记物的联合检测阳性率差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,癌症组血浆SEPT9检测的阳性率差异有统计学意义(P0.01)。[结论]临床常用的单一肿瘤标物对结直肠癌的诊断意义不大,联合检测能提升诊断价值;而单独的血浆SEPT9甲基化检测对结直肠癌的诊断价值高于上述6种标记物联合检测,可以作为结直肠癌临床辅助诊断的一种理想手段。     

结直肠癌相关基因甲基化生物标志物的研究进展

结直肠癌（CRC）的发生是结肠上皮细胞恶性转化过程中的遗传学和表观遗传学改变累积的结果。基因甲基化被认为是肿瘤发展过程中常见的分子改变,且往往发生在肿瘤早期,并可以在患者的粪便和血液中被检测到,因此,基因甲基化状态的改变可作为肿瘤标志物用于结直肠癌的早期临床诊断。此文对与结直肠癌早期检测、转移及预后相关的基因甲基化的分子标志物作一综述。     

Detecting plasma methylated Septin9 gene combined with fecal immunochemical test in screening colorectal cancer and adenoma in outpatients

<正>Objective To evaluate the significance of detecting plasma methylated Septin9(SEPT9)alone and combined with fecal immunochemical test(FIT)in screening colorectal cancer(CRC)and adenoma.Methods From October 2014 to April 2015,outpatiens received CRC and adenoma screening were enrolled.Colonscopy examina-     

Clinical value of preoperative methylated septin 9 in Chinese colorectal cancer patients

BACKGROUND The methylated septin 9(mSEPT9) assay was the first blood-based test approved by the United States Food and Drug Administration as a colorectal screening test.However, the diagnostic and prognostic role of preoperative mSEPT9 for colorectal cancer(CRC) in Chinese patients is still unknown.AIM To improve the understanding of diagnostic and prognostic factors, serum m SEPT9 was detected in Chinese CRC patients.METHODS A retrospective analysis of 354 cases, of which 300 had CRC and 54 were normal,was performed in China. Patients' characteristics, treatments, and laboratory data, including age, the date of surgery, Union for International Cancer Control(UICC) stages, distant metastasis(M), and so on, were collected. Methylation levels of SEPT9 were quantified by quantitative, methylation-specific polymerase chain reaction before surgery. In addition, the effects of mSEPT9 on the occurrence and prognosis of 330 CRC cases from The Cancer Genome Atlas(TCGA) database were evaluated using bioinformatics analyses. Potential prognostic factors for overall survival(OS) and progression-free survival(PFS)were evaluated by Kaplan-Meier univariate analysis.RESULTSIn Chinese CRC patients, positive mSEPT9 was strongly associated with advanced UICC stages, deeper invasion by the primary tumor, and more distant metastasis. Methylation levels of SEPT9 were stage-dependent and showed a stepwise increase in UICC stages(I–IV), primary tumor categories(T1–T4),regional node categories(N0–N2), and distant metastasis categories(M0–M1).The patients with positive mSEPT9 showed a tendency toward lower PFS. After analyzing TCGA clinical data, the high mSEPT9 group was found to be obviously correlated only with more distant metastasis. The patients with high mSEPT9 levels showed a tendency toward lower OS. Besides, nine meaningful mSEPT9 sites were found to provide guidance for the follow-up studies.CONCLUSION MSEPT9 analysis may add valuable information to current tumor staging. Serum m SEPT9 in Chinese CRC patients appears to offer promising novel prognostic markers and might be considered for monitoring CRC recurrence.     

SEPT9基因在人肝细胞癌侵袭转移中的作用

目的研究SEPT9基因对人肝癌细胞侵袭转移的影响。方法通过westernblot法筛选SEPT9蛋白高表达肝癌细胞系,慢病毒转染沉默后检测细胞SEPT9蛋白表达量,通过EdU染色检测sh-SEPT9对肝癌细胞增殖的影响;Transwell和划痕实验检测沉默SEPT9表达后肝癌细胞的侵袭能力和迁移能力;westernblot分析沉默SEPT9表达对肝癌细胞HIF-1α、Ki67、PCNA、MMP-9、VEGF、Vimentin, N-cadherin、E-cadherin蛋白表达影响。结果 westernblot显示SEPT9蛋白在肝癌HepG2细胞存在高表达,慢病毒转然能够获得稳定遗传的HepG2-SEPT9-shRNA细胞系,sh-SEPT9转然后,EdU染色显示HepG2细胞增殖受到明显抑制(P0.05),细胞的侵袭能力和迁移能力显著降低(P0.05);HepG2细胞Ki67、PCNA、Vimentin、N-cadherin、HIF-1α、MMP-9及VEGF表达量明显降低,E-cadherin的蛋白水平明显上升(P0.05)。结论 SEPT9基因通过增强肝癌HepG2细胞的EMT机制,促进肝癌HepG2细胞的侵袭转移。     

SDC2基因甲基化对结直肠癌诊断价值的Meta分析

目的通过Meta分析方法评价多配体蛋白聚糖2(Syndecan-2,SDC2)基因甲基化作为生物标志物诊断结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的价值。方法计算机检索PubMed、Cochrane Library、Embase、Web of Science、CBM、万方、知网、维普数据库,查找建库至2020年9月1日有关SDC2基因甲基化与CRC的研究,按照纳入及排除标准严格筛选文献,提取信息并依据QUADAS-2准则对文献进行质量评价。检验阈值效应及非阈值效应,计算合并灵敏度(sensitivity,Sen)、特异度(specificity,Spe)、阳性似然比(positive likelihood ratio,PLR)、阴性似然比(negative likelihood ratio,NLR)、诊断比值比(diagnostic odds ratio,DOR),绘制综合受试者工作特征曲线(summary receiver operating characteristic curve,SROC)并计算曲线下面积(area under curve,AUC)。采用亚组分析、敏感性分析探讨研究异质性。Deek’s漏斗图用以评价纳入文献偏倚大小。结果共纳入符合标准的文献11篇,包括1419例CRC患者和1363名健康对照者。SDC2甲基化诊断CRC的Sen_合并=0.77(95%CI:0.65~0.86),Spe_合并=0.94(95%CI:0.92~0.96),PLR_合并=14.17(95%CI:9.14~21.99),NLR_合并=0.24(95%CI:0.16~0.38),DOR_合并=58.28(95%CI:28.25~120.20),AUC=0.95(95%CI:0.93~0.97)。亚组分析结果显示,粪便SDC2甲基化对CRC的诊断价值(DOR_合并=84.23,95%CI:55.72~127.35)明显高于血液组(DOR_合并=33.27,95%CI:8.05~137.56)。亚洲地区SDC2甲基化对CRC的诊断价值(DOR_合并=76.44,95%CI:56.03~104.30)明显高于非亚洲地区(DOR_合并=16.50,95%CI:2.97~91.52)。Deek’s漏斗图提示,本研究不存在显著发表偏倚(P=0.840)。结论SDC2基因甲基化对CRC具有极高的诊断价值。     

抑癌基因甲基化与结直肠癌风险因素的研究进展

虽然诊断方法及治疗方案不断优化,但结直肠癌(colorectal cancer, CRC)发病率及死亡率仍在不断攀升.因此"治未病"才是解决问题的关键,近年来抑癌基因启动子CpG岛(CpG islands, CGI)高甲基化由于其有可逆性特点及其是CRC发生发展的早期事件,并且影响药物耐药性、疾病治疗及患者预后,一直是研究的热点.此外研究表明不良饮食选择、缺乏身体活动、过量饮酒和不健康体重等CRC危险因素调节启动子CGI高甲基化,这将有助于开发新的与甲基化相关的癌症预防策略.本文主要从抑癌基因甲基化与CRC风险因素相关关系、意义及调节机制方面做相关介绍.     

DNA甲基化调控DACT2在结直肠癌中的表达

目的探讨DACT2在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达改变及其调控机制。方法免疫组织化学(immunohistochemisty,IHC)方法检测16例CRC临床标本中DACT2的表达。PCR检测甲基转移酶抑制剂5-aza-dc处理前后CRC细胞系中DACT2 mRNA的表达,甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)、亚硫酸氢盐修饰后测序(Bisulfite sequencing,BSSQ)检测组织标本和细胞系中DACT2的甲基化状态。对比分析基因表达与甲基化的对应关系。结果 DACT2在正常结肠黏膜和癌旁组织中呈强阳性表达。与对应的癌旁组织相比,部分CRC组织中DACT2表达下调,比例为68.75%。DACT2在RKO细胞系中表达缺失,在HT-29中呈弱表达,甲基转移酶抑制剂5-aza-dc处理后表达恢复或增强。MSP、BSSQ分析显示,RKO呈完全甲基化,而HT-29、DLD-1、SW480呈部分甲基化。CRC组织标本中DACT2甲基化率为56.25%。基因启动子高甲基化与DACT2表达呈对应关系(P=0.009)。结论 DACT2表达降低可能参与了CRC的发生、发展,而DNA高甲基化是DACT2的表达调控机制之一。     

结直肠癌CpG岛甲基化表型的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是常见的恶性肿瘤之一,是由遗传学和表观遗传学改变逐渐积累导致的.随着一类被称为"CpG岛甲基化表型(CpG island methylator phenotype,CIMP)"的CRC被发现,表观遗传学修饰在CRC发病中的作用就受到了越来越多的重视.CIMP是一类基因组中有高比例的基因启动子区发生了DNA高甲基化的CRC.目前研究显示CIMP具有多个分子水平的特征,而且CIMP与多个临床特征显著相关,但是还不清楚CIMP的具体致病原因和发病机制.CIMP在治疗上的预后和反应与其他CRC存在很大差异,但是目前没有被广泛认可的鉴定CIMP的生物标记,从而阻止了CIMP用于指导临床上CRC的个体化治疗.     

粪便SDC2基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值

目的 探讨粪便SDC2基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值。方法 采用定量甲基化特异性PCR技术检测接受结直肠癌（CRC）筛查的患者粪便样本中SDC2的甲基化（mSDC2）,SDC2基因甲基化检测阳性患者进一步行结肠镜检查,患者均通过结肠镜检查或术后病理检查腺癌（CRC）明确诊断,病理区分为结直肠癌、进展型腺瘤、非腺瘤性息肉、炎症。采用Pearson相关法分析SDC2基因甲基化检测结直肠肿瘤阳性预测值（PPV）与年龄的相关性。结果 纳入268例mSDC2阳性患者,其中确诊结直肠癌23例、进展型腺瘤42例、非腺瘤息肉20例、炎症18例,余下患者结肠镜检查未发现明显异常。<60岁结直肠癌患者SDC2基因甲基化检测PPV为7.04%(10/142),≥60岁者为30.23%(13/43);mSDC2在结直肠癌患者中的PPV随着年龄增长而增加,差异有统计学意义（P<0.05）。随年龄增长,mSDC2循环阈值与年龄呈负相关（r=-0.68,P<0.05）。结直肠癌患者mSDC2的Ct值比进展型腺瘤、非腺瘤息肉、炎症病变均低,差异有统计学意义（P均<0.05）。按m...