FKBP52在反复体外受精种植失败患者种植窗期子宫内膜的表达研究

目的探讨FKBP52在反复体外受精种植失败患者种植窗期子宫内膜的表达情况。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和免疫组织化学方法分别测定20例反复体外受精种植失败妇女(组1)种植窗期子宫内膜组织中FKBP52蛋白及其mRNA的表达,并与15例正常生育能力妇女卵泡晚期(组2)和种植窗期(组3)相比较。结果组1的FKBP52mRNA表达水平低于组2,组2低于组3,但差异均无统计学意义(P0.05)。FKBP52蛋白表达于腺上皮的胞核及胞浆,组1在腺上皮的胞核表达明显,组2在腺上皮的胞浆表达明显,组3在腺上皮的胞核及胞浆均有明显表达;组1和组2的FKBP52蛋白表达量分别为(2 125.9±1 729.9)和(1 360.2±853.7),并显著低于组3(8 319.1±5 873.8)(P0.05,P0.01)。结论 FKBP52蛋白在种植窗期的表达和定位异常可能是反复体外受精种植失败患者子宫内膜容受性的影响因素。     

反复妊娠失败患者种植窗期子宫内膜调节性T细胞功能相关因子的表达

目的分析反复妊娠失败患者种植窗期子宫内膜调节性T细胞相关生物标记物的表达情况。方法利用免疫组织化学技术分析反复种植失败(repeated implantation failure,RIF)(n=23)、复发性流产(recurrent miscarriage,RM)(n=33)与对照组(n=15)女性FOXP3、CTLA-4和TGF-β3水平。通过Vectra~自动病理成像定量分析系统计算其阳性细胞率。结果 RIF组、RM组患者子宫内膜CTLA-4阳性细胞率显著高于对照组(P<0.01),而TGF-β3阳性细胞率显著低于对照组(P<0.01)。FOXP3阳性细胞率与CTLA-4阳性细胞率显著正相关(r=0.68,P<0.01)。结论 RIF、RM患者子宫内膜种植窗期TGF-β3、CTLA-4表达异常,表明TGF-β3、CTLA-4可能参与RIF、RM种植窗期子宫内膜免疫耐受调节,影响其子宫内膜容受性。     

子宫内膜整合素αvβ3表达与体外受精-胚胎移植反复种植失败的相关性研究

目的研究整合素αvβ3在人各时期子宫内膜及蜕膜组织的表达,并探讨其与体外受精-胚胎移植（IVF-ET）反复种植失败的相关性。方法以40例IVF-ET治疗反复种植失败的患者为研究对象,以40例因男性因素行卵胞浆内单精子注射（ICSI）治疗的患者及5例正常孕早期患者作为对照,获取患者各个时期的子宫内膜及蜕膜组织,采用免疫组织化学法检测整合素αvβ3蛋白的定位和表达,并对所获得的结果应用Image-ProPlus6．0图像分析软件测定阳性反应强度。结果整合素αvβ3蛋白定位于子宫内膜腺上皮细胞和腔上皮细胞的细胞浆;增殖早、中、晚期及分泌早期内膜上均无表达,分泌中期、晚期内膜明显表达,蜕膜中表达最强（P〈0．05）。反复种植失败患者子宫内膜整合素αvβ3的表达同样存在周期性变化,但其在分泌中、晚期的表达要明显弱于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论整合素αvβ3在正常子宫内膜组织中的表达呈现明显周期依赖性,与胚胎种植密切相关;而其在IVF—ET反复种植失败患者种植窗期子宫内膜组织中的表达明显减弱,可能是导致胚胎种植失败的原因之一。     

反复种植失败的治疗新进展

反复种植失败(RIF)是指患者连续经过多次胚胎移植,仍无法正常妊娠.RIF可以归因于母体因素和胚胎因素,母体因素也可分为局部子宫内膜容受性和全身因素.根据病因,RIF的临床治疗主要包括子宫内膜容受性的改善、全身因素的纠正包括高凝状态的改善和免疫治疗,以及提高胚胎种植率等.目前RIF的治疗较多是围绕子宫内膜容受性的提高,...     

反复种植失败患者的个体化胚胎移植

反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)是目前辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)临床工作中的难题,也是研究和讨论的热点,同时也给患者带来了巨大的经济负担及精神压力。其定义目前尚未统一。结合胚胎移植次数、移植胚胎数目和质量、子宫内膜容受性等来定义RIF可能更准确和全面。由于种植窗不是恒定不变的,统一的胚胎移植时间可能导致子宫内膜与胚胎发育不同步,从而出现RIF。因此个体化胚胎移植是改善RIF患者ART结局的重要手段。     

维生素D信号通路在反复种植失败患者子宫内膜组织中作用的机制研究

目的 探讨维生素D信号通路对反复种植失败(RIF)患者子宫内膜容受性的影响及可能的作用机制。方法 收集2019年5月至2021年2月于海南省妇女儿童医学中心就诊的30例RIF患者为RIF组，选择同期因输卵管和/或男性因素接受IVF-ET治疗，并在子宫内膜活检采集后的移植周期中实现临床妊娠的30例女性作为对照组。分别于自然月经周期黄体生成素高峰后7 d(对照组)或激素替代疗法(HRT)周期服用孕酮后5 d(RIF组)收集两组患者的子宫内膜组织与外周血的血液样本；体外细胞实验选择人子宫内膜间质细胞(hESCs)SCRC-2002细胞系。免疫组织化学染色法检测VD代谢酶CYP27B1和VD受体(VDR)在子宫内膜组织中的表达；利用孕酮(P₄)与二丁酰环磷酸腺苷(cAMP)联合诱导法使hESCs发生蜕膜化；将携带沉默VDR(sh-VDR)与对照序列(sh-NC)的慢病毒载体转染至hESCs中，并将细胞分为：cAMP+P₄+sh-NC组、cAMP+P₄+sh-NC+VD组和cAMP+P₄+sh-VDR+VD组...     

温肾活血方对反复移植失败患者种植窗子宫内膜形态及血流的影响

目的探讨温肾活血方对反复移植失败(RIF)患者种植窗子宫内膜形态及血流的影响。方法选取2016年1月至2017年2月于我院生殖医学中心就诊的100例RIF患者为研究对象,使用随机数字表进行分组,给予不同处理:对照组(50例)予以常规冻融胚胎移植(FET)方案进行内膜准备;中药组(50例)在对照组基础上加用温肾活血方口服,自月经第3天开始服用至移植前1日。比较两组的临床妊娠率、种植率,子宫内膜厚度、血流情况,螺旋动脉搏动指数(PI)及阻力指数(RI),并HE染色观察子宫内膜形态,扫描电镜观察胞饮突发育等。结果中药组临床妊娠率(40.0%)、种植率(23.2%)有高于对照组(分别为24.0%、14.9%)的趋势,但均无显著性差异(P0.05);中药组移植日子宫内膜厚度、血流情况、PI及RI均明显优于对照组(P0.05);中药组移植日子宫内膜腺体及腺腔面积显著高于对照组(P0.05);RIF患者移植日子宫内膜胞饮突数量减少,中药组较对照组胞饮突发育成熟,形态饱满,表面绒毛减少。结论温肾活血方能够有效改善RIF患者种植窗子宫内膜形态,改善内膜血流状态,增加子宫内膜容受性,有利于胚胎着床。     

反复种植失败患者与复发性流产患者分泌期子宫内膜自然杀伤细胞数量分析

目的研究子宫内膜自然杀伤细胞(uNK)在反复种植失败(RIF)患者与复发性流产(RM)患者分泌期子宫内膜的表达情况。方法选取2013年3月至2016年10月于本院生殖医学助孕中心的RIF患者(20例)和RM患者(35例),对照25例。于患者尿LH试纸检测峰值出现后第7~9天,利用子宫内膜取样器刮取少量子宫腔内膜组织;根据子宫内膜形态学Noyes标准,确定RIF患者组(n=20)、RM患者组(n=35)与对照组(男性因素不孕患者,n=25)子宫内膜分期;以CD56作为uNK的表面标记物,免疫组化技术检测3组患者分泌期子宫内膜CD56阳性细胞的数量,并利用Vectra~自动病理成像定量分析系统计算细胞阳性细胞率。结果 3组患者内膜形态学分期均有早、中、晚分泌期病例;RIF组与RM组患者分泌期子宫内膜CD56阳性细胞率[分别为(17.59±12.59)%、(16.54±11.37)%]显著高于对照组[(8.01±7.19)%](P<0.01);3组患者子宫内膜CD56阳性细胞率从分泌早期到分泌晚期均呈显著递增趋势(P<0.05);RIF组与RM组分泌早期、中期及晚期CD56阳性细胞率均显著高于对照组(P<0.05)。结论 RIF与RM患者子宫内膜分泌早、中、晚期uNK细胞数量异常升高,提示其可能影响子宫内膜容受性,从而导致妊娠失败。     

反复胚胎种植失败母体因素分析及治疗

反复胚胎种植失败(RIF)是人工辅助生殖技术中的难题,影响RIF的原因主要分为胚胎因素及母体因素,其中母体因素主要包括宫腔内占位性病变、输卵管积水、子宫腺肌症、子宫内膜炎症等母体病理因素,以及免疫因素、血液高凝状态、子宫收缩过频及子宫内膜容受性不良等。本文从引起RIF的母体因素角度进行综述,针对不同母体因素总结目前的治疗方法进展。     

三种移植策略在反复种植失败患者冻融胚胎移植周期中的应用比较

目的通过比较序贯移植、内膜机械刺激与囊胚移植三种移植方案在反复种植失败(RIF)患者冻融胚胎移植周期中的应用结果,为临床选择RIF的干预策略提供参考。方法回顾性分析2016年6月至2017年12月在我院因反复种植失败拟再次行冻融胚胎移植患者共228例,研究组按照移植方案不同分为三组:A组(序贯移植组):移植1枚卵裂期胚胎+1枚囊胚(40例);B组(内膜机械性刺激组):根据胚胎移植时间及数量的不同分为两个亚组,B1组:子宫内膜机械性刺激+1枚囊胚移植(52例);B2组:内膜机械性刺激+2枚卵裂期胚胎移植(47例);C组(囊胚移植组):移植1枚囊胚(40例)。对照组为移植2枚卵裂期胚胎(49例)。结果 A组临床妊娠率(67.52%)、种植率(41.25%)显著高于对照组(分别为36.73%、21.43%,P均0.05);B1组种植率显著高于对照组(44.23%vs 21.43%,P0.05);多胎率、早期流产率、异位妊娠率各组间无统计学差异(P0.05)。结论 RIF患者选择序贯移植、内膜机械性刺激+囊胚移植及囊胚移植三种移植策略均有改善妊娠结局的趋势;三者中序贯移植较传统卵裂期胚胎移植相比,可显著提高临床妊娠率和种植率;序贯移植可以降低因囊胚培养失败无胚胎移植的风险,但同时可能增加多胎率的风险。临床上需要根据患者的具体情况选择个体化移植策略。     

不明原因反复自然流产妇女植入窗期子宫内膜形态及雌孕激素受体的表达

目的 探讨不明原因反复自然流产（URM）与植入窗期子宫内膜发育程度以及雌、孕激素受体（ER、PR）表达之间的相关性。方法应用光学显微镜、扫描电镜观察URM（试验组）24例生育妇女（对照组）22例子宫内膜组织学,胞饮小泡密度;免疫组织化学分析ER、PR的表达。结果URM组子宫内膜黄体期缺陷（LPD）的发生率明显高于对照组,胞饮小泡密度低于对照组,子宫内膜上皮细胞核及基质细胞核中PR的表达量也低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。两组子宫内膜ER的表达未见统计学差异。结论URM子宫内膜LPD发生率高,胞饮小泡密度明显低于正常生育妇女,提示植入窗期子宫内膜发育滞后可能是导致胚胎着床障碍、反复自然流产的原因之一。在性激素分泌正常的URM妇女中,子宫内膜PR表达下降,对孕激素反应不足可能是导致内膜形态发育滞后的原因。     

整合素αvβ3和骨桥蛋白在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达

目的探讨整合素αvβ3和骨桥蛋白（OPN）在多囊卵巢综合征（PCOS）患者植入窗期子宫内膜的表达。方法选取15名典型PCOS患者（其中7例为自主排卵,8例为促排卵）为PCOS组,同期选择15例月经周期规律妇女为对照组。阴道超声监测排卵,排卵日测定子宫内膜分型及厚度;免疫组织化学技术测定植入窗期的子宫内膜整合素αvβ3和骨桥蛋白的表达;放射免疫法测定内膜活检当天的血清雌二醇（E2）和孕酮（P）的浓度。结果与对照组比较,PCOS组植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和OPN表达均显著下调（P〈0．01）,两者之间不伴有比例的失调;排卵日子宫内膜厚度两组无显著差异（P〉0．05）;子宫内膜分型有显著性差异（P〈0．05）;血清E2水平显著高于对照组（P〈0．01）,E2／P比值亦显著高于对照组（P〈0．05）,而P显著低于对照组（P〈0．01）。结论PCOS患者植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和OPN表达均下调,子宫内膜容受性降低,影响了胚泡着床。     

芬吗通改善反复胚胎移植失败患者子宫内膜血流和提高妊娠率的研究

目的探讨芬吗通在反复移植失败患者中改善子宫内膜血流及提高临床妊娠率的作用。方法选择2011年5月至2012年12月在我中心接受胚胎解冻移植(FET)助孕,且彩色多普勒能量图提示子宫内膜血流不良(无血流信号和仅内膜下可及血流信号)的反复胚胎移植失败的不育症妇女为研究对象,共404例。应用芬吗通治疗1²个疗程,于移植前一日进行子宫内膜血流检查,分析子宫内膜血流改善情况,随访FET结局。结果 404个研究周期中,其中336例进行了移植周期,胚胎种植率26.19%,临床妊娠率44.04%。完成404个研究周期用药前后子宫内膜血流的检测,血流改善283例,改善率70%。用药前,B超示无血流信号、仅内膜下可及血流信号、内膜下及内膜内均可及血流信号的患者所占比例分别为81.4%、18.6%和0%,服用芬吗通后三者的比例分别为25.5%、23.8%和50.7%,内膜下及内膜内均可及血流信号的患者所占比例明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论芬吗通可明显改善反复移植失败患者的子宫内膜血流情况,提高患者的胚胎种植率及临床妊娠率。     

Expression of N-acetyl-glucosamine-6-O-sulfotransferase in the endometrium of implantation window stage from infertile patients

Objective:To observe the expression of N-acetyl-glucosamine-6-O-sulfotransferase(GN-6-ST)in the endometrium during the window stage of implantation from infertile women before IVF-ET treatment,we compared the GN-6-ST gene expression level between the women with succeeded and failed implantation,and investigated the roles of selectin and its ligands in the embryo implantation.Methods:The hysteroscopy and endometrial biopsies were performed in patients prior to undergoing IVF-ET treatment in the IVF Center of the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University from July 2004 to March 2005.Fourteen patients who succeeded in implantation were taken as study group,while the 28 infertile patients with failed implantation served as control group.The RT-PCR method was used to detect the mRNA levels of N-acetyl-glucosamine-6-O-sulfotransferase in the endometrium during the window stage of imp-lantation of the women from both groups.Results:For these infertile patients with succeeded implantation,the average mRNA expression level of acetyl-glucosamine-6-O-sulfotransferase in the endometrium during the window stage of implantation was(0.65±0.33),while for those with failed implantation cycle,the average mRNA expression level was(0.41±0.36),which was significantly lower than that of study group,P<0.05.Conclusions:The combination of the selectin and ligands may play a role in the embryo implantation capacibility.     

局部内膜修整对体外受精-胚胎移植周期胚胎种植率的影响

目的探讨新鲜胚胎移植周期中子宫内膜修整对胚胎着床率、临床妊娠率和活产率的影响。方法回顾性分析宫腔镜术后体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者,控制性超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)过程中B超显示子宫内膜回声异常患者共417例,按其宫腔镜术后病理检查结果分为内膜正常组及内膜异常组。两组患者中各有一部分在COH过程中接受内膜修整(研究组),剩余为对照组。结果研究组胚胎着床率、临床妊娠率和活产率,均显著高于对照组。结论新鲜胚胎移植周期行子宫内膜修整可显著提高内膜回声异常患者的胚胎着床率、临床妊娠率和活产率。     

外周血单个核细胞宫腔内灌注治疗对反复种植失败患者妊娠结局的影响

目的探讨自体外周血单个核细胞（PBMCs）宫腔内灌注治疗对反复种植失败（RIF）患者胚胎种植率和临床妊娠率的影响。方法按随机数字表法将纳入的39例拟行冷冻胚胎移植的RIF患者随机分为治疗组（20例）和对照组（19例）,治疗组在移植前3d抽取外周血20ml,应用淋巴细胞分离液分离PBMC后行宫腔灌注。对照组移植前未行自体PBMC宫腔灌注。结果两组患者年龄、血清卵泡刺激激素（FsH）、取卵周期数、移植周期数、移植胚胎数和单周期移植优质胚胎数均无统计学差异（P〉0．05）。两组胚胎种植率（22．8％VS．6．4％）和临床妊娠率（50．0％VS．17．6％）比较,治疗组均显著高于对照组（P％0．05）。两组单周期活婴出生率（45．0％VS．17．6％）比较无统计学差异（P〉0．05）。结论自体PBMC宫腔内灌注治疗可以提高RIF患者胚胎种植率和临床妊娠率,故可作为RIF患者胚胎移植前提供可选择的处理方案。     

转化生长因子β1在不明原因不育症着床窗期子宫内膜的表达

目的　探讨转化生长因子 β1(TGFβ1)在月经周期子宫内膜组织的表达规律 ,了解其对子宫内膜着床窗期的作用以及与不明原因不育症的关系。　方法　应用免疫组织化学法检测TGFβ1在增殖期 (2 5例 )、分泌期 (2 9例 )子宫内膜、不明原因不育症着床窗期内膜 (12例 )的表达。　结果　TGFβ1在早、中增殖期腺体及间质细胞大多无表达或弱阳性 ,晚增殖期表达明显增加 ,与早、中增殖期相比 ,在腺上皮细胞胞浆染色显著增强 (P <0 .0 1)。TGFβ1在中分泌期内膜腺体和间质细胞胞浆表达丰富 ,与早分泌期比较均有明显增强 (P <0 .0 1)。在不明原因不育症着床窗期内膜间质细胞TGFβ1的表达强度较对照组显著下降 (P <0 .0 5 )。　结论　TGFβ1调节子宫内膜生长、分化 ,可能参与胚胎的着床过程。TGFβ1在不明原因不育症着床窗期表达下降 ,可能是导致不明原因不育症的重要原因之一。