补肾生髓方和益气活血方对局灶性脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号通路Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达的影响

目的 探讨补肾生髓方和益气活血方对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号转导通路Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达的影响。方法 采用线栓法复制右侧大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾生髓方组和益气活血方组。脑缺血2 h后,持续灌注7 d。采用PCR检测额顶叶皮质Nurr1、SMO mRNA表达水平,采用Western blot检测其蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达水平均明显上调（P<0.05）;益气活血方组和补肾生髓方组Nurr1 mRNA及其蛋白、SMO蛋白相对表达水平均较模型组明显下调（P<0.05）;模型组、益气活血方组和补肾生髓方组SMO mRNA相对表达水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;益气活血方组与补肾生髓方组Nurr1、SMO蛋白表达水平有显著差异（P<0.05）。结论 补肾生髓方和益气活血方促进脑组织修复的作用与其下调Notch信号转导通路中Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达有关。     

两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织Hes-1、Hes-5表达的动态影响

目的：探讨益气活血方和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠缺血侧额顶叶皮质Hes-1、Hes-5蛋白表达的动态影响。方法：采用线栓法复制局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组。脑缺血2h,分别再灌注1,2．3周,采用免疫组织化学SABC法检测Hes-1、HeS-5蛋白表达的阳性面积和平均吸收光密度值。结果：在缺血区额项叶皮质。再灌注1-2周时,模型组Hes-1、Hes5表达阳性面积单位、平均吸收光密度值较假手术组明显增加（P〈0．05,或P〈0．01）。再灌注1周时．益气活血方和补肾生髓方组Hes-1、Hes-5蛋白表达阳性面积及平均光密度值显著高于模型组（P〈0．05．或P〈0．01）,益气活血方组Hes-1和Hes5蛋白表达平均光密度值显著高于补肾生髓方组（P〈0．01）。再灌注2周时,除补肾生髓方组Hes-5外,益气活血方组和补肾生髓方组Hes-1和Hes5蛋白表达阳性面积及平均光密度值显著高于模型组（P〈0．05,或P〈0．01）,益气活血方组Hes-5表达阳性面积显著高于补肾生髓方组（P〈0．01）。再灌注3周时。补肾生髓方组Hes1表达阳性面积,补肾生髓方组和益气活血方组Hes5表达阳性面积及益气活血方组Hes5表达平均光密度值显著高于模型组（P〈0．05）。结论：两种中药复方均能通过增强缺血侧脑组织额顶叶皮质Hes-1和Hes-5的表达,促进局灶性脑缺血后内源性神经干细胞的增殖分化。     

益气活血方和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达的影响

目的:探讨补肾生髓方和益气活血方对脑缺血大鼠海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达的影响。方法:采用线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组。脑缺血2 h,持续灌注10 d,采用免疫组化Envision两步法观察缺血侧海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达。结果:与假手术组比,模型组wnt5a和LRP5蛋白表达的平均吸收光密度值显著高于假手术组(P<0.05);与模型组比,补肾生髓方组与益气活血方组wnt5a蛋白表达的平均吸收光密度值显著高于模型组(P<0.05),补肾生髓方组LRP5蛋白表达的平均吸收光密度值显著低于模型组(P<0.05)。结论:两种中药复方可通过增强海马CA1区wnt5a蛋白表达,抑制LRP5蛋白的表达,调节wnt/β-catenin信号转导通路。     

益气活血方和补肾生髓方对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3表达的影响

目的 探讨益气活血方和补肾生髓方对脑缺血大鼠海马Wnt/β-catenin信号通路Wnt3a、卷曲蛋白9(Frizzled9)和T细胞因子3(TCF3)蛋白表达的影响.方法 采用线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组,脑缺血2h后持续灌注7d.采用Western-Blot法检测缺血侧海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达,用免疫组化Envision两步法检测缺血侧海马CA1区Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达.结果 在缺血侧海马区,与假.手术组比较,模型组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著增加(P＜0.01);与模型组比较,益气活血方组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著降低(P＜0.01),补肾生髓方组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著降低(P＜0.01或P＜0.05).在缺血侧海马CA1区,与假手术组比较,模型组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,益气活血方组与补肾生髓方组能显著降低CA1区Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达(P＜0.01).结论 2种中药复方能通过抑制缺血侧海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达,调节Wnt/β-catenin信号通路,促进局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织修复.     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠海马区Notch信号通路相关蛋白表达的影响

目的 探讨丹龙醒脑方对脑缺血再灌注模型大鼠海马区Notch信号通路相关蛋白Notch1、Notch2及Hes1表达的影响.方法 将80只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹龙醒脑方小剂量组(丹小组7.4 g/kg)、大剂量组(丹大组14.8 g/kg),线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,再灌注7 d取缺血侧海马组织.采用免疫组织化学法、免疫印迹法检测大鼠海马区Notch1、Notch2及Hes1蛋白表达.结果 与假手术组比较,各组Notch1、Notch2及Hes1蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,丹小组、丹大组Notch1、Notch2及Hes1蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01).结论 丹龙醒脑方能通过上调海马区Notch1、Notch2及Hes1蛋白表达水平,调节Notch信号转导通路,这可能是其促进脑缺血损伤后神经功能修复的机制之一.     

两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质LRP5和β-Catenin表达的影响

目的:观察补肾生髓方和益气活血方对局灶性脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质LRP5和β-Catenin蛋白表达的影响。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾生髓方组、益气活血方组。线栓法阻塞大鼠左侧大脑中动脉,制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,脑缺血2?h再灌注2周。治疗组连续给药2周,采用免疫组化EnVision两步法检测额顶叶皮质LRP5和β-Catenin表达的阳性面积和平均吸收光密度值。结果:皮质LRP5的平均吸收光密度值(A值),模型组与假手术组之间无明显差异,模型组与补肾组差异显著(P0.05),模型组与益气组差异不明显,补肾组与益气组之间有明显差异(P0.01);皮质LRP5的阳性面积值(Area值),模型组与假手术组差异不显著,与各治疗组之间有明显差异(P0.05),补肾组与益气组之间无明显差异。皮质β-Catenin的A值,模型组与假手术组之间有明显差异(P0.05),益气组、补肾组与模型组之间无明显差异,补肾组与益气组之间无明显差异;皮质β-Catenin的Area值,模型组与假手术组之间无明显差异,与各治疗组之间差异具有显著性(P0.05),补肾组与益气组之间无明显差异。结论:益气活血方和补肾生髓方能通过降低额顶叶皮质LRP5和升高β-Catenin蛋白表达,调节Wnt信号转导通路,促进脑缺血再灌注后内源性神经干细胞的增殖分化。     

两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质LRP5和β—Catenin表达的影响

目的：观察补肾生髓方和益气活血方对局灶性脑缺血再灌注大鼠额顸叶皮质LRP5和β-Catenin蛋白表达的影响。方法：大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾生髓方组、益气活血方组。线栓法阻塞大鼠左侧大脑中动脉,制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,脑缺血2h再灌注2周。治疗组连续给药2周,采用免疫组化EnVision两步法检测额顶叶皮质LRP5和β-Catenin表达的阳性面积和平均吸收光密度值。结果：皮质LRP5的平均吸收光密度值（A值）,模型组与假手术组之间无明显差异,模型组与补肾组差异显著（P〈0．05）,模型组与益气组差异不明显,补肾组与益气组之间有明显差异（P〈0．01）;皮质LRP5的阳性面积值（Area值）,模型组与假手术组差异不显著,与各治疗组之间有明显差异（P〈0．05）,补肾组与益气组之间无明显差异。皮质β-Catenin的A值,模型组与假手术组之间有明显差异（P〈0．05）,益气组、补肾组与模型组之间无明显差异,补肾组与益气组之间无明显差异;皮质β-Catenin的Area值,模型组与假手术组之间无明显差异,与各治疗组之间差异具有显著性（P〈0．05）,补肾组与益气组之间无明显差异。结论：益气活血方和补肾生髓方能通过降低额顶叶皮质LRP5和升高β-Catenin蛋白表达,调节Wnt信号转导通路,促进脑缺血再灌注后内源性神经干细胞的增殖分化。     

两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠Nestin、NSE和GFAP表达的影响

目的 比较益气活血方(脑络欣通)和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠缺血侧侧脑室下区神经上皮干细胞蛋白(Nestin)、缺血半暗带神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法 采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注动物模型,动物随机分为假手术组、模型组、益气活血方组及补肾生髓方组.脑缺血2h,分别再灌注1周、2周、3周,采用免疫荧光法检测Nestin、NSE和GFAP表达的阳性细胞数或平均吸收光密度值(A值).结果 缺血侧侧脑室下区,再灌注1周、2周益气活血方组,再灌注2周、3周补肾生髓方组,Nestin表达的阳性细胞数较模型组显著增多(P＜0.05或P＜0.01);再灌注1周益气活血方组较补肾生髓方组显著增多(P＜0.01),再灌注2周、3周补肾生髓方组较益气活血方组显著增多(P＜0.05).缺血半暗带区,再灌注1周、2周益气活血方组,再灌注2周补肾生髓方组,NSE表达的阳性细胞数较模型组显著增多(P＜0.01);再灌注1周时益气活血方组较补肾生髓方组显著增多(P＜0.01),再灌注2周时补肾生髓方组较益气活血方组显著增加(P＜0.01).缺血半暗带区,再灌注1周、2周益气活血方组与补肾生髓方组GFAP表达平均吸光度较模型组明显增加(P＜0.05或P＜0.01);再灌注各时间段两复方组比较无显著差异(P＞0.05).结论 益气活血方与补肾生髓方能通过增加缺血侧侧脑室下区Nestin、缺血半暗带区NSE数量、增强GFAP的表达,促进局灶性脑缺血后神经干细胞的增殖分化,两种复方在增加Nestin、NSE数量方面存在一定差异.     

β-石竹烯作用于Notch1/NF-κB信号轴对脑缺血再灌注损伤大鼠的改善作用

目的 探究β-石竹烯(β-caryophyllene,BCP)对脑缺血再灌注(cerebral ischemia-reperfusion,CIR)损伤大鼠的保护作用及相关机制.方法 将SD大鼠按随机数字表法分为假手术组,缺血再灌注组,β-石竹烯低、中、高剂量组(分别为102、204、408 mg ? kg-1),Jagged1+BCP对照组,Jagged1(Notch1激动剂)组.模型组、β-石竹烯低、中、高剂量组及Jagged1+BCP对照组、Jagged1组使用线栓法构建SD大鼠CIR模型,缺血1.5 h,再灌注48 h后,进行脑缺血梗死体积测定以及神经行为学评分,用Western blot检测脑组织中Notch1、NF-κB p65、NF-κB p-p65及Hes1蛋白表达;HE染色观察缺血侧海马中的细胞死亡数量;ELISA法检测大鼠缺血侧海马中TNF-a及IL1-β的含量变化.结果 与模型组进行比较,BCP给药组可明显改善大鼠神经功能缺失,减少缺血侧脑梗死体积,降低海马中Notch1、NF-KB及Hes1的蛋白表达量(P＜0.05),减少TNF-a、IL-1β的释放(P＜0.05),减少海马神经元细胞的死亡数.与Jagged1干预组比较,BCP给药组Notch1的激动剂Jagged 1可以拮抗BCP的治疗效果.结论 BCP能够减轻大鼠的脑缺血再灌注损伤,可能通过抑制Notch1/NF-KB减少炎性因子的释放,发挥其缺血性保护作用.     

阳和平喘颗粒通过上调miR-139-5p和下调Notch1/Hes1通路促进哮喘大鼠BMSCs归巢

目的 观察阳和平喘颗粒对哮喘miR-139-5p、Notch1/Hes1信号通路及骨髓源性间充质干细胞（BMSCs）归巢的影响。方法 50 只 SD 大鼠随机均分为 5 组：正常对照（NC）组、模型对照（MC）组、BMSCs 移植（BMSCs）组、BMSCs+地塞米松（BMSCs+DXM）组[地塞米松 0.0625 mg/ （kg·d）]、BMSCs+阳和平喘组[阳和平喘颗粒3.5 g/ （kg·d）]。采用卵清蛋白致敏激发建立大鼠哮喘模型,BMSCs组、BMSCs+DXM组、BMSCs+阳和平喘组大鼠在激发最后1 d经尾静脉移植入1×106/mL BMSCs悬液。NC组、MC组以生理盐水灌胃,药物干预组分别予相应药物灌胃,灌胃量为1 mL/100 g,均持续1周。HE染色观察肺组织病理形态学,流式细胞术检测肺组织中CXCR4蛋白表达,酶联免疫吸附法检测肺组织γ干扰素（IFN-γ）、白介素-4（IL-4）表达。免疫荧光观察支气管上皮细胞CXCR4、Notch1、Hes1表达。RT-PCR法检测肺组织miR-139-5p、Notch1、Jagged1、RBP-J、Hes1基因表达,免疫印迹法检测肺组织 Notch1、Jagged1、Hes1 蛋白表达。结果 （1）与 NC 组比较,MC 组肺组织 CXCR4、IL-4、Notch1mRNA、Jagged1mRNA、RBP-JmRNA、Hes1mRNA及Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达升高,INF-γ、miR-139-5p mRNA表达降低（P<0.05）;（2）与MC组比较,BMSCs组、BMSCs+DXM组、BMSCs+阳和平喘组CXCR4、IFN-γ、miR-139-5pmRNA升高,IL-4、Notch1mRNA、Jagged1mRNA、RBP-JmRNA、Hes1mRNA及Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达降低（P<0.05）;（3）与BMSCs组比较,BMSCs+阳和平喘组CXCR4、IFN-γ、miR-139-5pmRNA表达升高,IL-4、Notch1mRNA表达量降低（P<0.05）。结论 阳和平喘颗粒通过上调miR-139-5p,下调Notch1/Hes1通路,强化BMSCs归巢对Th2炎症反应的抑制作用。     

人参广角汤热病临床运用经验

人参广角汤(原名人参犀角汤)系已故川南名医曹绵维老先生所创,后被著名中医方剂学家、成都中医药大学陈潮祖教授收录于其所编著的《中医治法与方剂》(人民卫生出版社1976年出版)一书中,该方填补了临床治疗热厥证无方可寻的空白.其制方思维綦严,立意精伦,配方巧妙,疗效极佳,堪为世人赞叹.     

益气通瘀汤治疗气虚血瘀型良性前列腺增生症60例

目的:观察益气通瘀汤治疗良性前列腺增生症的临床疗效。方法:选择符合良性前列腺增生症诊断标准且属中医辨证中气虚血瘀证患者60例,予口服益气通瘀汤治疗2个月。结果:显效20例,有效31例,无效9例,总有效率85%。结论:益气通瘀汤能有效治疗良性前列腺增生症。     

调肝启阳汤治疗阳痿心得

在临床诊疗过程中,因阳痿而就诊的人群以青壮年为主,其中绝大多数患者不耐受单纯的补肾壮阳之品。笔者根据临床观察认为,肝气郁结,湿聚化热为此类人群的主要病机。据此,总结出调肝启阳汤,根据次症的不同加减运用,临床疗效满意。     

润肠通便汤治疗便秘的实验研究

[目的]探讨润肠通便汤治疗便秘的通便作用。[方法]观察润肠通便汤对正常小鼠、燥结失水便秘模型和复方地芬诺酯（DC）便秘模型小鼠排便的影响；对正常小鼠小肠推进运动和肠容积的影响。[结果]润肠通便汤对正常小鼠、燥结失水便秘模型小鼠及复方地芬诺酯（DC）便秘模型小鼠均有明显促进排便的作用；润肠通使汤还能促进正常小鼠小肠推进运动，有较明显的增加肠道重量，增加肠管容积的作用。[结论]润肠通便汤具有明显的通便作用。     

退黄汤治疗低危组病理性黄疸患儿的疗效观察

目的:退黄汤治疗低危组病理性黄疸疗效观察。方法:选择患儿45例,服用退黄汤。结果:总有效率达93%。结论:中药退黄汤为治疗低危组病理性黄疸的有效方剂,值得推广。     

新加达原饮治疗慢性乙型肝炎的临床研究*

目的〓观察新加达原饮治疗慢性乙型肝炎（CHB）的临床疗效。方法〓20例患者均给予新加达原饮治疗,疗程12周,比较治疗前、治疗后4、8、12周时患者肝功能,HBeAg及HBV-DNA变化情况,分析ALT、HBeAg及HBV-DNA的关系。结果〓与治疗前比较,患者ALT于治疗后8周时显著升高（P<0.01）,12周时明显下降（P<0.01）;HBeAg及HBV-DNA水平持续下降,治疗12周时下降最显著（P<0.01）。结论〓新加达原饮能快速降低慢性乙型肝炎患者HBeAg及HBV-DNA的水平,根据治疗后患者ALT,HBV-DNA及HBeAg变化曲线不同,推测新加达原饮抗乙型肝炎病毒的机制可能是通过激发机体免疫应答完成的。     

芩消汤治疗肾病综合征的临床研究

肾病综合征(nephrotic syndrome)是临床常见及多发病,其主要表现为大量蛋白尿、低蛋白血症、水肿及高脂血症,且水肿难于纠治或反复发作,经一般常规方法不能治愈.重度水肿者除给患者带来极大的痛苦外,常发生严重电解质平衡紊乱,终致肾衰.其水肿较重反复不愈的原因主要在于血浆胶体渗透压降低及神经内分泌调节反射的被激活.苓消汤是我科刘尚义教授经验方,该方具有健脾益肾、养阴利水之功,临床应用于肾病综合征患者特别是顽固性水肿者疗效较为显著.现将2003年1月至2005年6月我院门诊及住院收治的107例肾病综合征病例进行收集整理,报道如下:     

怡神助眠汤治疗失眠症的疗效及对脑内神经递质的影响

目的观察怡神助眠汤治疗失眠症患者的疗效及其对脑内神经递质的影响。方法将60例失眠症患者随机分为两组各30例,中药组予服怡神助眠汤,西药组予服唑吡坦,两组疗程均为4周。两组患者治疗前、治疗结束时填写匹兹堡睡眠指数量表并检测脑涨落图。结果 (1)中药组、西药组总有效率分别为86.7%、76.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)两组治疗结束时PSQI量表评分较治疗前明显下降(P<0.01)。(3)治疗后两组患者脑内γ-氨基丁酸(GABA)均较治疗前升高(P<0.01),组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后中药组5-羟色胺(5-HT)较治疗前升高(P<0.01),而西药组无明显变化,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论怡神助眠汤治疗失眠症患者疗效较好,其作用机制可能与升高GABA和5-HT水平相关。     

炙甘草汤对低钾诱发家兔心律失常的电生理影响

目的：研究炙甘草汤对低钾诱发家兔心律失常的电生理影响。方法：应用常规的玻璃微电极细胞内记录技术，观察炙甘草汤对低钾诱发家兔心律失常的动作电位0相幅值（APA），动作电位时程（APD），50％复极化时间（APD50），90％复极化时uj （APD90），最大舒张电位（MDP），4相自动去极速度（Vmax），自发放电频率（RPF）的影响。结果：（1）用20mg／mL的炙甘草汤灌流心室肌细胞后与模型对照组相比细胞电生理变化不明显。（2）用40mg／mL的炙甘草汤灌流心室肌细胞后与模型对照组相比动作电位时程（APD）缩短（P〈0．05），90％复极化时间（APD90）缩短（P〈0.05）。（3）用80mg／mL的炙甘草汤灌流心室肌细胞后与模型对照组相比动作电位时程（APD）明显缩短（P〈0.01），50％复极化时间（APD50）、90％复极化时间（APD90）缩短（P〈0.05）。（4）用80mg／mL的炙甘草汤灌流左心室流出道慢反应自律细胞后与模型对照组相比自发放电频率下降（P〈0.05）。结论：炙甘草汤能缩短动作电位时程、50％及90％复极化时间，降低自发放电频率，并能防治低钾诱发的心律失常的发生。