白细胞介素17在胶原性关节炎大鼠血清中的表达及其意义

背景:类风湿关节炎滑膜细胞及滑膜组织中浸润的单核/巨噬细胞、淋巴细胞等产生的炎性细胞因子在类风湿关节炎滑膜病变中起核心作用,白细胞介素17是近年来发现的一个炎症性细胞因子,与机体很多自身免疫性疾病有关.目的:检测胶原性关节炎大鼠模型血清中白细胞介素17水平,并分析其与炎症指数、白细胞介素1 β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶3的关系.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/08在大连大学医学院免疫实验室完成.材料:雌性近交系Wistar大鼠50只,4～6周龄,体质量为(180±15)g.方法:50只大鼠随机取40只,建立胶原性关节炎动物模型,另外10只作为正常对照.造模组大鼠每只尾根部皮内注射200 μ L乳化的Ⅱ型胶原,1周后,每只大鼠接受加强免疫,尾根部皮内注射乳化Ⅱ型胶原100 μL,诱发胶原性关节炎.对照组大鼠以相同剂量相同部位注射生理盐水.主要观察指标:于24 h后观察大鼠四肢的足肿胀度.ELIsA法检测胶原性关节炎大鼠血清中白细胞介素17、白细胞介素1 β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶3水平,并观察胶原性关节炎大鼠炎症指数.结果:胶原性关节炎大鼠血清中白细胞介素17、白细胞介素1 β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶3水平均高于对照组(P均<0.05),并且白细胞介素17水平分别与白细胞介素1 β、肿瘤坏死因子α和基质金属蛋白酶3呈正相关;胶原性关节炎的大鼠血清白细胞介素17与关节炎炎症指数也有正相关关系.结论:胶原性关节炎大鼠血清白细胞介素17水平升高,且可能与病情活动、关节炎症和骨质破坏有关.     

内皮抑素与佐剂性关节炎大鼠血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9的表达

背景:大多数证据支持关节炎症时滑膜表面形成血管翳与血管内皮细胞生长因子及其基质金属蛋白酶有关.目的:实验拟验证不同剂量内皮抑素对佐剂性关节炎模型大鼠血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9表达的影响.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-01106在桂林医学院完成.材料:清洁级雄性Wistar大鼠40只,鼠龄6～8周,体质量146～153 g,建立佐剂性关节炎大鼠模型,内皮抑索为烟台麦得津生物工程股份有限公司产品.方法:造模后第6天选出右后足和两前足关节炎指数之和≥6的30只大鼠,随机数字表法分为4组.模型对照组以10mL/(kg·d)生理盐水14 d灌服,小剂量内皮抑素治疗组以终浓度2.5 mg/(kg·d)加2～4 mL生理盐水14 d灌服,大剂量内皮抑素治疗组以终浓度10 mg/(kg·d)加2～4mL生理盐水14 d灌服,不加干预的10只正常Wistar大鼠作为正常对照组,每组大鼠均10只.主要观察指标:模型组动物停止灌服后第6天应用酶联免疫吸附法检测各组血清血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质会属蛋白酶9的表达:滑膜炎症的组织病理学评分:关节炎症评分和关节X射线评分.结果:①小剂量和大剂量内皮抑素治疗组人鼠关节滑膜无明显肿胀等炎症表现,模型对照组关节滑膜增厚的炎症现象明显,3组关节滑膜组织病理学评分比较差异有显著性意义(P<0.01).②与模型对照组相比,正常对照组、小剂量及大剂量内皮抑素治疗组血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9表达均降低(P<0.01),且下降幅度与内皮抑素的浓度呈正相关.结论:内皮抑素能下调佐剂性关节炎滑膜细胞血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9的水平.     

血管内皮生长因子对佐剂性关节炎滑膜细胞基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9表达的影响

目的:观察血管内皮生长因子对佐剂性关节炎滑膜细胞质金属蛋白酶3及质金属蛋白酶9表达的影响,并探讨其意义。方法:实验于2006-02/12在桂林医学院实验中心完成。①实验材料:清洁级8周龄雄性Wistar大鼠6只,血管内皮生长因子为Peprotech EC LTD公司产品,基质金属蛋白酶3(扩增369bp)上游引物、下游引物,基质金属蛋白酶9(扩增405bp)上游引物、下游引物均购自晶美公司。②实验干预:先用弗氏完全佐剂造Wistar大鼠模型;造模20d后取Wistar大鼠右后足滑膜细胞进行原代培养。③实验分组:实验分为血管内皮生长因子组:取P2代细胞接种于6孔培养板,分别加入终浓度为5,25,50μg/L血管内皮生长因子;对照组:不加血管内皮生长因子。④实验评估:取病理切片观察滑膜细胞形态学改变;采用半定量反转录聚合酶链反应检测Wistar大鼠佐剂性关节炎滑膜细胞基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9的m-RNA表达。结果:①培养细胞的形态学观察:原代培养14d滑膜细胞从组织块边缘逸出,21d密集生长开始传代;传代细胞48h可明显分辨出树突样细胞、巨噬细胞样细胞和成纤维细胞样细胞;传至21代,细胞生长及特性稳定。②病理切片:滑膜组织有中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞浸润,滑膜细胞增生、排列紊乱,纤维素渗出,胶原纤维沉着,纤维素样坏死,呈滑膜炎表现。③基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9的mRNA表达:对照组基质金属蛋白酶3mRNA表达相对灰度值与血管内皮生长因子终浓度5,25,50μg/L组比较,差异有显著性意义(0.32±0.03,0.77±0.06,1.12±0.12,1.59±0.02,P<0.05);对照组基质金属蛋白酶9mRNA表达相对灰度值与血管内皮生长因子终浓度5,25,50μg/L组比较,差异有显著性意义(0.47±0.07,0.50±0.10,0.91±0.10,1.31±0.06,P<0.05);基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9mRNA表达随血管内皮生长因子浓度的加大表达增加。结论:血管内皮生长因子以剂量递增的方式对体外培养的佐剂性关节炎滑膜细胞基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9的表达有促进作用。     

重组腺病毒介导TIMP1基因对类风湿关节炎大鼠滑膜新生血管的影响

背景:滑膜血管翳形成后可分泌一系列酶如基质金属蛋白酶等,可促进血管新生和炎症反应,形成软骨和骨的破坏.目的:研究重组腺病毒介导的基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)基因对类风湿关节炎模型大鼠关节炎症及滑膜血管新生的影响.设计、时间及地点:基因治疗动物体内实验,于2005-07/2007-06在扬州大学完成.材料:HEK-293A细胞系购于中科院上海细胞生物研究所细胞库,ECV-304细胞为自备,带有绿色荧光蛋白(GFP)基因或/和基质金属蛋白酶组织抑制因子1基因的重组腺病毒(rAD-GFP-TIMP1及tAD-GFP)的病毒贮存液由南京师范大学分子医学实验室惠赠.清洁级4～6周龄SD大鼠40只.方法:将rAD-GFP-TIMP1和rAD-GFP扩增、纯化,用紫外分光光度法检测重组腺病毒的颗粒数.用rAD-GFP-TIMP1感染ECV-304细胞检测病毒活力.30只大鼠注射II型胶原建立类风湿关节炎大鼠模型,分为:①模型组注射PBS.②模型+rAD-GFP-TIMP1组注射rAD-GFP-TIMP1.③模型+RAD-GFP组注射rAD-GFP,均为膝关节腔内注射;10只大鼠注射生理盐水造模做对照组.1次/周,4周.主要观察指标:①rAD-GFP-TIMP1及rAD-GFP在HEK-293A细胞中扩增、纯化后病毒的颗粒数及GFP蛋白表达.②各组大鼠每周进行1次关节炎指数评分.③于造模第4周处死大鼠取膝关节行滑膜病理免疫组织化学染色及微血管密度检测.④取血清采用Western Blot检测大鼠体内基质金属蛋白酶组织抑制因子1、血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶1,2,3,9的表达.结果:①纯化后的rAD-GFP-TIMP1和rAD-GFP滴度分别为:5.7×1012,4.8×1012 pfu/mL;A260nm/A280nm均>1.3;用rAD-GFP-TIMP1感染ECV-304细胞获得成功提示病毒活力正常.②感染rAD-GFP-TIMP1的关节炎大鼠血清中基质金属蛋白酶组织抑制因子1获得了高表达,rAD-GFP-TIMP1治疗组大鼠血清中基质金属蛋白酶组织抑制因子1的相对含量明显高于模型组和rAD-GFP治疗组.③rAD-GFP-TIMP1治疗组的关节炎指数评分明显低于模型组.④感染rAD-GFP-TIMP1可使滑膜新生血管数目明显减少,同时能抑制基质金属蛋白酶1,3,9的表达,而对血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶2的抑制作用不明显.结论:①感染rAD-GFP-TIMP1的大鼠体内基质金属蛋白酶组织抑制因子1基因获得了有效的表达.②感染rAD-GFP-TIMP1能明显降低模型大鼠的关节炎指数评分.③血管内皮生长因子,基质金属蛋白酶1,2,3,9共同参与促进关节炎大鼠滑膜血管新生的形成和发展,rAD-GFP-TIMP1可能通过抑制基质金属蛋白酶1,3,9的表达而发挥抗血管新生的作用.     

维药买朱尼对骨关节炎大鼠模型关节软骨中基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶抑制剂1的影响

背景:骨关节炎患者关节软骨的损害与基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶抑制剂失平衡有关.目的:观察基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1在关节软骨中的表达及维药买朱尼对其影响.方法:将20只SD大鼠采用改良Hulth造模法建立大鼠膝骨关节炎模型,按随机数字表法随机等分为买朱尼组和模型组,建模第2周开始分别灌胃维药买朱尼和生理盐水,连续4周.结果与结论:相比于模型组,买朱尼组大鼠膝关节软骨退变程度减轻,软骨大体评分及Mankin评分降低(P < 0.05),且膝关节软骨细胞中基质金属蛋白酶1的表达降低,基质金属蛋白酶抑制剂1的表达增加(P < 0.05).说明维药买朱尼可以通过下调基质金属蛋白酶1的表达水平、上调抑制剂的表达水平,对软骨产生保护作用.     

慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1与固本颗粒胶囊

背景:中医药防治慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的有效性和安全性已初步得到临床认证.目的:观察COPD模型大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及其特异性抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1表达与固本颗粒胶囊干预的影响.方法:将50只Wistar大鼠随机等分为5组,除正常组外,其余大鼠均以烟熏及气管内滴注脂多糖的方式建立COPD模型.造模 29 d,泼尼松组、固本颗粒胶囊低、高剂量组分别灌胃给予醋酸泼尼松 1.04 mg/(kg?d),固本颗粒胶囊0.47,0.94 g/(kg?d),1次/d,观察记录大鼠的一般状况.免疫组织化学方法检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达.结果与结论:COPD大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达显著增强(P < 0.05).药物干预后,COPD大鼠的一般状况明显改善,肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达有所降低;其中,醋酸泼尼松的作用最为显著,固本颗粒高剂量次之,低剂量最弱.说明固本颗粒胶囊能以剂量依赖的方式缓解COPD大鼠的临床表现,改善气道重塑,纠正COPD大鼠体内蛋白酶和抗蛋白酶失衡.     

长距离跑步大鼠膝关节滑膜基质金属蛋白酶的表达

背景：很多研究表明基质金属蛋白酶 1,3,9 和 13 对关节软骨的退变存在影响,但是针对关节滑膜进行的专项研究相对较少。目的：观察长距离跑步运动对基质金属蛋白酶 1,3, 9 以及基质金属蛋白酶 13 在滑膜上的表达的影响。方法：Wistar 雄性大鼠 15 只随机分为 3 组：对照组、平板组和上坡组。对照组普通笼养;平板组每天在平板0°的水平面跑步机上以 1 km/h,运动 1 h,持续 45 d;上坡组先在平板 0°跑步机上以 1 km/h,运动 1 h,持续 15 d,然后在上坡＋20°的跑步机上每天以 1 km/h,运动 1 h,持续 30 d。造成不同程度的膝关节滑膜损伤模型,造模成功后取双后肢膝关节,进行石蜡包埋,矢状面整体切片,而后进行苏木精-伊红和免疫组织化学染色,观察并分析实验结果。结果与结论：长距离跑步运动后,平板组和上坡组的滑膜组织中基质金属蛋白酶 1 的表达都比对照组增高（P 〈 0.05）,但平板组和上坡组之间差异无显著性意义（P 〉 0.05）;而 3 组基质金属蛋白酶 3 的表达并无明显变化（P 〉 0.05）;基质金属蛋白酶 9 和基质金属蛋白酶 13 在滑膜组织中的表达呈梯度递增状态（P 〈 0.05）,对照组表达最低,平板组有所升高,上坡组的表达最高。说明长距离跑步运动可通过改变基质金属蛋白酶的表达而影响大鼠膝关节滑膜组织的正常生理结构。     

接受骨髓间充质干细胞移植的心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠心肌组织基质金属蛋白酶及抑制剂的变化

背景:Ⅰ型及Ⅲ型胶原含量与比例的变化是促使心脏几何形态改变、心肌收缩和舒展功能的重要因素,基质金属蛋白酶2及抑制剂是胶原代谢的主要调节物质。心肌梗死后心力衰竭大鼠接受骨髓干细胞移植后,心肌组织中这些指标会发生哪些变化?目的:观察接受骨髓干细胞移植治疗的心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠,心肌组织中胶原含量与比例、基质金属蛋白酶2及抑制剂的变化。设计:随机对照实验。单位:解放军总医院老年心血管病科和北京医科大学生物化学系。材料:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系周春燕实验室完成。实验动物由北京医科大学动物实验中心提供,选取4周龄清洁级雄性SD大鼠用于骨髓间充质干细胞的制备,200~250g清洁级雌性SD大鼠14只用于心肌梗死后心力衰竭模型的制备,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。方法:采用梯度离心法与贴壁培养法分离纯化、扩增骨髓间充质干细胞。结扎雌性SD大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死后心力衰竭模型。造模成功4周后将14只大鼠随机分为2组:移植组大鼠梗死后心肌瘢痕区接受雄性SD大鼠来源的5×106骨髓间充质干细胞。对照组大鼠梗死后心肌瘢痕区接受等体积磷酸盐缓冲液。每组7只。主要观察指标:移植治疗后21d:①以苏木精-伊红染色和Masson染色评价左心室形态。②以免疫组织化学分析心肌基质金属蛋白酶2及抑制剂与瘢痕区Ⅰ型及Ⅲ型胶原的变化。③以Western杂交检测基质金属蛋白酶2及抑制剂蛋白的变化。结果:14只大鼠均进入结果分析,无脱失值。与对照组大鼠比较,骨髓间充质干细胞移植大鼠心肌梗死瘢痕区Ⅰ型胶原增加,Ⅲ型胶原降低,心肌组织基质金属蛋白酶抑制剂表达增加,基质金属蛋白酶2表达降低,心室壁增厚,心室腔缩小,心功能增强。结论:骨髓间充质干细胞移植心力衰竭大鼠后,基质金属蛋白酶2及抑制剂发生了动态变化,进而影响瘢痕区胶原比例重建,逆转心力衰竭心脏异常的胶原平衡。     

兔膝关节骨性关节炎半月板形态改变及基质金属蛋白酶-3和金属蛋白酶组织抑制剂-1表达

目的探讨家兔膝关节骨性关节炎的半月板形态改变及其基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)表达情况,及半月板与膝骨性关节炎间关系和相互作用。方法雌性中国家兔24只,48个膝关节,分为实验组12个膝、模型组12个膝和正常对照组24个膝,实验组采用钢针在关节软骨划痕方法制作骨性关节炎模型,模型组仅给予关节切开,对照组不做处理。术后2、4、6周处死动物,对半月板行组织病理学检查,观察半月板细胞及胶原纤维形态变化;采用免疫组织化学法检测半月板MMP-3及TIMP-1表达情况,采用电子显微镜观察半月板胶原超微结构。结果实验组兔膝关节可见明显骨性关节炎改变,大体及组织病理学结果显示半月板退变、胶原破坏、软骨细胞变性坏死;实验组第2、4、6周时,半月板MMP-3水平(118.16±2.11、127.35±1.87、141.02±2.54)和第4、6周时TIMP-1水平(136.76±1.62、157.03±1.25)明显高于模型组(MMP-3为92.43±1.57、95.38±2.89、99.74±2.17,TIMP-1为91.11±3.02、106.54±1.13)和对照组(MMP-3为92.15±1.68、96.63±2.07、101.41±1.75,TIMP-1为91.08±2.21、107.47±1.76)(P0.05),模型组与对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论膝骨性关节炎可造成半月板生物力学和生化环境紊乱,半月板组织结构退变、功能丧失可进一步加重骨性关节炎病变。     

创伤性关节炎软骨中基质金属蛋白酶13及组织特异性抑制剂1的表达

背景:关节软骨损伤后继发性退变机制仍不十分清楚。近年研究发现关节软骨细胞外基质合成与降解失衡是造成软骨变性的重要原因之一,其中基质金属蛋白酶可能起决定性的作用。目的:观察基质金属蛋白酶13及其组织特异性抑制剂1在创伤性关节炎中的表达及与软骨退变的关系。方法:将新西兰兔分别用骨水泥制作的模具从1.33kg,46cm高度和0.43kg,20cm高度进行自由落体撞击制备轻型和重型撞击创伤性关节炎兔模型。结果与结论:苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色结果显示,基质金属蛋白酶13和组织特异性抑制剂1在两组均增高(P<0.05)。组织特异性抑制剂1在重型撞击创伤性关节炎模型兔软骨组织中的分泌明显高于轻型撞击组(P<0.05)。说明关节软骨在创伤后,基质金属蛋白酶13及组织特异性抑制剂1表达上调,共同作用促进了关节软骨退变,其中组织特异性抑制剂1的过量表达可能是造成关节软骨进一步损害的原因之一。     

口腔疣状癌基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制因子-2的表达及其相关性的研究

目的:研究口腔疣状癌中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-2)的表达.探讨其在口腔疣状癌发生发展过程中的作用和意义.方法:取25例口腔疣状癌,10例正常口腔黏膜,25例口腔鳞癌(高、低分化鳞癌各为15、10例),应用免疫组织化学法检测上述标本中MMP-2、MMP-9及,TIMP-2的表达和分布.结果:正常口腔黏膜组织TIMP-2为阴性表达:MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为10.00%、20.00%.口腔疣状癌MMP-2阳性表达率为28.00%.MMP-9阳性表达率为44.00%,TIMP-2阳性表达率为72.00%.口腔疣状癌、口腔高分化鳞癌、口腔低分化鳞癌MMP-2、MMP-9、TIMP-2表达均高于正常口腔黏膜(P<0.05).结论:在口腔疣状癌,口腔高分化鳞癌、口腔低分化鳞癌中.MMP-2与MMP-9的阳性表达率呈正相关,与TIMP-2呈负相关;相关分析发现,MMP-2、MMP-9和TIMP-2的袁达两两相关,同时3者的表达可能单独或共同参与.     

基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)在卵巢浆液性囊腺肿瘤中的表达及与卵巢浆液性囊腺癌的临床、病理特征之间的关系.方法:通过免疫组化方法检测16例卵巢浆液性囊腺瘤、15例交界性卵巢浆液性囊腺瘤及40例卵巢浆液性囊腺癌中MMP-2和TIMP-2的表达情况,并应用图像分析仪对卵巢浆液性囊腺癌MMP-2、TIMP-2阳性细胞百分面积进行定量检测,计算MMP-2/TIMP-2比值.结果:卵巢浆液性囊腺瘤、交界性卵巢浆液性囊腺瘤及卵巢浆液性囊腺癌中MMP-2的表达分别是25%、60%、73%,TIMP-2的表达分别是31%,47%,63%.MMP-2/TIMP-2比值在卵巢浆液性囊腺癌Ⅲ、Ⅳ期较Ⅰ、Ⅱ期增大,低分化(G3)较中、高分化(G2、C1)增大.结论:MMP-2和TIMP-2可能均与卵巢浆液性囊腺癌的形成和进展有关.     

川芎嗪对肝星状细胞基质金属蛋白酶13和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

背景:既往动物实验表明,川芎嗪能降低肝纤维化大鼠血清Ⅲ型胶原、透明质酸及层粘连蛋白水平,延缓肝纤维化的形成,但其具体作用机制尚不清楚.目的:观察川芎嗪对肝星状细胞增殖及基质金属蛋白酶13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA表达的影响,并探讨川芎嗪抗肝纤维化的可能机制.设计、时间及地点:观察性实验,于2006-11/2007-06在重庆医科大学基础医学研究所完成.材料:盐酸川芎嗪注射液(10 mL∶80 mg),使用时用含体积分数为0.1小牛血清的1640培养基稀释,为巴里莫尔制药(通化)有限公司产品;肝星状细胞株HSC.T6,系SV40转染SD大鼠肝星状细胞而成,其表型为活化的肝星状细胞,由中国医学科学院肿瘤研究所提供.方法:培养肝星状细胞株,传至三四代时增殖明显即可用于实验.实验分为2组,空白对照组:仅加入细胞:药物干预组:分别加入川芎嗪0.01,0.1,1,10,50,100,200,400,600,1 000 mg/L后作用于HSC-T6.主要观察指标:四甲基偶氮唑盐比色法测定肝星状细胞增殖:ELISA法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原及透明质酸质量浓度;反转录-聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶13和基质金属蛋白酶13 mRNA的表达.结果:①与空白对照组相比,川芎嗪100～1 000 mg/L各剂量组作用不同时间的吸光度值均降低(P<0.01).在川芎嗪100-1 000 mg/L这一质量浓度范围内,随着药物质量浓度加大,对细胞的抑制作用增加.②川芎嗪(100,200 mg/L)对Ⅰ、Ⅲ型胶原、透明质酸的产生有抑制作用(P<0.05～0.01),并随着药物质量浓度增加,抑制作用增强.10 mg/L川芎嗪对Ⅰ、Ⅲ型胶原均没有影响,但可以降低透明质酸质量浓度(P<0.05).③100,200 mg/L川芎嗪可促进基质金属蛋白酶13的表达,随药物质量浓度增大,基质金属蛋白酶13/基质金属蛋白酶组织抑制因子1比值增大(P<0.05～0.01).结论:川芎嗪抗纤维化的可能机制是抑制肝星状细胞的增殖:促进基质金属蛋白酶13的表达,从而促进胶原降解,使细胞外基质减少.     

急性冠状动脉综合征患者血清基质金属蛋白酶-9及其抑制物水平变化

目的:观察不同类型冠心病患者血清基质金属蛋白酶-9、组织金属蛋白酶抑制物-1水平的变化,进一步了解血清基质金属蛋白酶-9及组织金属蛋白酶抑制物-1在冠状动脉粥样硬化发生发展中的作用及临床意义.方法:采用酶联免疫吸附法测定60例冠心病患者(急性冠状动脉综合征患者30例、稳定性心绞痛患者30例)、30例非冠心病患者(对照组)血清基质金属蛋白酶-9,组织金属蛋白酶抑制物-1的水平.结果:急性冠状动脉综合征组血清基质金属蛋白酶-9水平高于稳定性心绞痛组及对照组(P<0.01),而血清组织金属蛋白酶抑制物-1水平低于稳定性心绞痛组及对照组(P<0.01).稳定性心绞痛组血清基质金属蛋白酶-9水平高于对照组(P<0.01),血清组织金属蛋白酶抑制物-1水平低于对照组(P<0.01).急性冠状动脉综合征患者治疗后血清基质金属蛋白酶-9水平低于治疗前,组织金属蛋白酶抑制物-1高于治疗前(P<0.01).结论:血清基质金属蛋白酶-9水平增高及组织金属蛋白酶抑制物-1水平降低与粥样斑块破裂相关,可作为判断粥样斑块不稳定的血清学指标.血清基质金属蛋白酶-9水平增高及组织金属蛋白酶抑制物-1水平降低有助于评价冠状动脉病变的程度及冠心痛患者的预后.     

同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1及金属蛋白酶组织抑制剂1的影响

背景:同型半胱氨酸已被证实是动脉粥样硬化发生的一个独立危险因素。目的:观察同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1及金属蛋白酶组织抑制剂1的分泌量和活性的影响。设计:自身对照观察。单位:吉林大学再生医学科学研究所病理室。材料:体外培养的鼠龄4～6周,体质量150g左右雄性Wistar大鼠的血管平滑肌细胞。大鼠由吉林大学白求恩医学部实验动物室提供。方法:实验于2001-05/2003-05在吉林大学再生医学科学研究所病理室完成。采用体外培养大鼠血管平滑肌细胞,分成5组,分别加入浓度为0(对照组),0.10,0.25,0.50和1.00mmol/L同型半胱氨酸作用48h,通过酶谱分析同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞细胞基质金属蛋白酶1活性的影响,Western blot技术和半定量RT-PCR方法观察细胞基质金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量及其mRNA的表达。主要观察指标:细胞基质金属蛋白酶1的活性,金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量及其mRNA的表达。结果:①金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量:半胱氨酸0.25,0.50和1.00mmol/L组金属蛋白酶1显著低于对照组(P<0.05～0.01);半胱氨酸0.10,0.25,0.50和1.00mmol/L组金属蛋白酶组织抑制剂1均高于对照组(P<0.05～0.01);②基质金属蛋白酶1活性随着半胱氨酸剂量增加而降低,0.50和1.00mmol/L组降低显著(P<0.01);③加入同型半胱氨酸4组金属蛋白酶1mRNA表达显著低于对照组(P<0.01)],半胱氨酸0.25mmol/L组金属蛋白酶组织抑制剂1mRNA高于对照组(P<0.05),0.50和1.00mmol/L组显著高于对照组(P<0.01))。结论:同型半胱氨酸通过抑制细胞基质金属蛋白酶1的分泌,抑制其酶活性,减少胶原降解而使胶原蓄积。提示同型半胱氨酸减少胶原降解可能是动脉粥样硬化的发病机制之一。     

基质金属蛋白酶9与肺组织重构

目的：总结归纳基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化等疾病过程中参与肺组织重构的表达和作用。 资料来源：应用计算机检索Pubmed数据库1979-01／2005-11基质金属蛋白酶9的文章，检索词“Gelatinase B；asthma；Pulmonary Disease，Chronic Obstructive；pulmonary fibrosis”，限定文章语言种类为English；同时检索中国期刊全文数据库1979-01／2005-11期间的相关文章，检索词“基质金属蛋白酶9；哮喘；肺疾病，阻塞性；肺纤维化”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：纳入标准：有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的表达。排除标准：①较陈旧的文献；②重复研究。资料提炼：共收集到有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的肺组织重构的表达及作用文章233篇，排除重复或类似的同一研究，15篇符合要求。 资料综合：①基质金属蛋白酶9在哮喘中肺组织的表达：在未经治疗的稳定期的哮喘患者或轻度哮喘患者中均未发现基质金属蛋白酶9的增加。在严重哮喘患者中，哮喘加重期患者，哮喘持续状态患者均有基质金属蛋白酶9的增加。②基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病中的表达：慢性阻塞性肺疾病患者肺实质、血清和痰中基质金属蛋白酶9水平是增加的，基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病的发病机制中发挥作用，但其与慢性阻塞性肺疾病分期的关系还有待进一步研究。③基质金属蛋白酶9在肺纤维化中的表达：基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1参与了肺纤维化中肺组织的重构，尤其在特发性肺纤维化发病过程中。特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶9水平是升高的，但在肺间质纤维化不同类型及相同类型的不同阶段，基质金属蛋白酶9有不同的变化，需要进一步的研究。 结论：由于基质金属蛋白酶9参与了哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化中肺组织的改变和重构，尤其是在疾病的不同时期基质金属蛋白酶9的表达也是不同的，因此对基质金属蛋白酶9的研究有重要的临床意义。     

基质金属蛋白酶9与肺组织重构

目的:总结归纳基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化等疾病过程中参与肺组织重构的表达和作用。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1979-01/2005-11基质金属蛋白酶9的文章,检索词“GelatinaseB;asthma;PulmonaryDisease,ChronicObstructive;pulmonaryfibrosis”,限定文章语言种类为English;同时检索中国期刊全文数据库1979-01/2005-11期间的相关文章,检索词“基质金属蛋白酶9;哮喘;肺疾病,阻塞性;肺纤维化”,限定文章语言种类为中文。资料选择:纳入标准:有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的表达。排除标准:①较陈旧的文献;②重复研究。资料提炼:共收集到有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的肺组织重构的表达及作用文章233篇,排除重复或类似的同一研究,15篇符合要求。资料综合:①基质金属蛋白酶9在哮喘中肺组织的表达:在未经治疗的稳定期的哮喘患者或轻度哮喘患者中均未发现基质金属蛋白酶9的增加。在严重哮喘患者中,哮喘加重期患者,哮喘持续状态患者均有基质金属蛋白酶9的增加。②基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病中的表达:慢性阻塞性肺疾病患者肺实质、血清和痰中基质金属蛋白酶9水平是增加的,基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病的发病机制中发挥作用,但其与慢性阻塞性肺疾病分期的关系还有待进一步研究。③基质金属蛋白酶9在肺纤维化中的表达:基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1参与了肺纤维化中肺组织的重构,尤其在特发性肺纤维化发病过程中。特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶9水平是升高的,但在肺间质纤维化不同类型及相同类型的不同阶段,基质金属蛋白酶9有不同的变化,需要进一步的研究。结论:由于基质金属蛋白酶9参与了哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化中肺组织的改变和重构,尤其是在疾病的不同时期基质金属蛋白酶9的表达也是不同的,因此对基质金属蛋白酶9的研究有重要的临床意义。     

肝素对脂多糖诱导内皮细胞损伤中基质金属蛋白酶及其组织抑制剂基因表达的影响

目的 探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其组织抑制剂-1(TIMP-1)在脂多糖(LPS)诱导内皮细胞损伤中的表达,并观察肝素对其水平的影响.方法 LPS 10μg/ml刺激人肺微血管内皮细胞(HPMEC)诱导损伤,肝素预处理组分别于LPS刺激前15 min加入0.1 U/ml及1 U/ml普通肝素,对照组加入等量磷酸盐缓冲液(PBS).分别在刺激2、6、12h收集细胞提取RNA,应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞中MMP-9及TIMP-1的mRNA表达.结果 与对照组比较,LPS刺激2h组MMP-9和TIMP-1的mRNA表达明显增高,12h达高峰(MMP-9 mRNA:4.26±0.81比1.00±0.46,TIMP-1 mRNA:4.93 ±0.08比1.00±0.13,均P＜0.05),以TIMP-1增高明显.预防性应用肝素可明显降低MMP-9和TIMP-1的mRNA表达(0.1 U/ml组:MMP-9 mRNA 2.74±0.30,TIMP-1 mRNA 2.96±0.13;1 U/ml组:MMP-9 mRNA 3.08±0.48,TIMP-1 mRNA 2.93±0.27,均P＜0.05).不同剂量肝素组间基因表达水平差异无统计学意义.结论 LPS诱导内皮细胞损伤时MMP-9、TIMP-1表达增加,肝素可能通过调节MMP-9、TIMP-1表达水平发挥其保护作用.     

基质金属蛋白酶-9及组织抑制剂-1在大鼠肠粘连形成过程中的作用

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织抑制剂-1(TIMP-1)在术后肠粘连形成过程中的表达变化及其意义。方法:用干纱布擦伤回肠浆膜,制成大鼠肠粘连模型,采用免疫组化和图像分析方法,与对照组比较,观察术后2、7、14d时粘连肠组织中MMP-9及TIMP-1的表达变化。结果:与对照组比较,术后2d时模型组织中MMP-9的表达显著增加(P<0.05),而术后7、14d时粘连组织中MMP-9的表达较对照组均显著减少(P<0.01);术后各时相点时粘连肠组织中TIMP-1的表达均显著高于对照组(均P<0.05)。结论:MMP-9及TIMP-1在术后肠粘连的形成过程中发挥着重要的作用。