α-干扰素与肉桂酸对人肺癌细胞增殖的抑制作用

背景与目的:有研究表明肉桂酸对肿瘤细胞有抑制作用。本实验拟进一步研究α-干扰素(alpha-interferon,α-IFN)与肉桂酸(cinnamicacid,CINN)单独及联合作用对人肺腺癌细胞增殖的抑制作用。方法:用α-IFN和CINN处理人肺腺癌A549细胞,通过绘制生长曲线、软琼脂集落形成实验、甲基绿-派洛宁染色、流式细胞术(FCM)测定等方法来研究其对细胞的增殖抑制作用。结果:与对照组相比,α-IFN和CINN能明显抑制A549细胞增殖(P<0.05),促进细胞分化(P<0.05),α-IFN和CINN联合应用时抑制作用较二者单独作用时强;细胞在软琼脂中集落形成率明显下降(P<0.05);FCM显示细胞周期移行被阻滞于G1/G0期。结论:CINN联合α-IFN能抑制肺腺癌细胞增殖,α-IFN和CINN两药联合作用效应强于α-IFN或CINN单独作用。     

不同种类干扰素联合维甲酸对HL-60细胞增殖和分化的影响

目的:研究干扰素联合维甲酸(ATRA)对HL-60细胞增殖和分化的影响及其机制.方法:IFNα、IFNγ、ATRA单独或联合作用于HL-60细胞后,采用MTT法检测细胞的增殖,用光镜观察、NBT还原实验和流式细胞仪检测细胞的分化,并用间接免疫荧光法观察PML蛋白表达的情况.结果:两种干扰素分别与ATRA联合应用都能够增强ATRA对HL-60细胞的增殖抑制作用,两种干扰素之间无显著性差别.IFNγ与ATRA联合应用能够增强ATRA对HL-60细胞的诱导分化作用,但IFNα与ATRA联合应用却没有此作用.两种干扰素都能够诱导PML蛋白的表达.结论:两种干扰素都能够通过诱导PML蛋白表达而抑制细胞生长;IFNγ与ATRA联合应用增强ATRA对HL-60细胞的诱导分化作用可能与两种药物的信号传导途径发生交叉激活有关.     

小剂量IL-2和IFNα与TNFα联合治疗恶性肿瘤的免疫学与临床研究

目的:研究小剂量细胞因子在恶性肿瘤免疫治疗中的意义。方法:全身应用小剂量重组干扰素(ＩＦＮα２ｂ)、白细胞介素－２(ＩＬ－２)和肿瘤坏死因子(α－ＴＮＦ)联合治疗多种恶性肿瘤６０例。应用ＡＰＡＡＰ法和免疫单向扩散法(ＲＩＤ)分析了治疗前后患者外周血中Ｔ、Ｂ淋巳细胞、ＮＫ细胞、免疫球蛋白(Ｉｇ)和补体Ｃ３活性。结果:治疗１个疗程后外周血中ＣＤ４＋的Ｔ淋巴细胞和ＣＤ２３＋的Ｂ淋巴细胞显著的高于治疗前水平(Ｐ＜０．０５);ＣＤ４＋/ＣＤ８＋比值也明显增高(Ｐ＜０．０１)。免疫球蛋白(ＩｇＭ)活性亦显著的高于治疗前水平(Ｐ＜０．０５)。ＫＰＳ积分较治疗前明显增高(Ｐ＜０．００１)。治疗后细胞因子加化疗组的ＫＰＳ积分平均增高２８．５分(Ｐ＜０．００１);ＣＲ ２６例(６５．０%);ＰＲ １１例(２７．５%),总有效率８２．５%。单纯细胞因子治疗组的ＫＰＳ积分平均增高２３分(Ｐ＜０．００１);ＰＲ １３例(６５．０%),总有效率６５．０%。结论:本方案可以显著的提高多种恶性肿瘤患者的细胞免疫和体液免疫。有可能提高肿瘤的化疗效果和患者的生存质量,延长生存期。     

BRCA1和BRCA2基因突变携带者对侧乳腺癌风险与三苯氧胺的关系

为调查在ＢＲＣＡ1或ＢＲＣＡ2基因突变携带者中应用三苯氧胺 (ＴＡＭ )能否减少对侧乳腺癌发生 ,比较了2 0 9例双侧乳腺癌 (病例组 )和 384例单侧乳腺癌 (对照组 )患者 ,两组患者均存在同一基因 (ＢＲＣＡ1或ＢＲＣＡ2 )突变。通过直接ＤＮＡ测序、蛋白阻断试验、异源双链分析、单链构象分析和特异性等位基因低聚核苷酸杂交技术进行基因突变分析。结果表明 ,使用ＴＡＭ相关的对侧乳腺癌多变量比数比 (ＯＲ值 )为 0 .5 0 (95 %ＣＩ 0 .2 8～ 0 .89)。服用ＴＡＭ 2～ 4年者对侧乳腺癌危险性降低了 75 %。卵巢切除术 (0 .4 2 ,0 .2 2～ 0 .83)…     

干扰素对肝癌细胞HLA-DR表达的增强作用

探讨干扰素对肝癌细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达的调节作用。方法采用免疫组化ＡＢＣ法和ＥＬＩＳＡ法分别检测了不同剂量的ＩＦＮ－γ或ＩＦＮ－α刺激前后ＨＬＡ－ＤＲ在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１、ＢＥＬ－７４０２和ＨＣＣ－９２０４等４种人肝细胞癌细胞系以及正常人肝细胞系ＱＺＧ的表达情况。     

TPA对HL60细胞作用的研究

佛波酯 (ＴＰＡ)对肿瘤细胞的作用报道不一 ,显示高度的细胞特异性。我们观察了ＴＰＡ诱导ＨＬ6 0细胞分化、调亡的作用 ,以探讨ＴＰＡ的作用机制。一、材料和方法细胞系及其培养 :5× 10 /ｍｌＨＬ6 0细胞培养于含 2 9×10 -4 ｍｏｌ/ＬＴＰＡ的ＲＰＭＩ 16 40培养基中 ,37℃饱和温度 ,5 %ＣＯ条件下悬浮培养 2 4,48ｈ后 ,分别做Ｗｒｉｇｈｔ染色、四氮唑蓝 (ＮＢＴ)还原试验及酸性非特异酯酶 (ａ ＮＡＥ)活性检测。提取ＴＰＡ作用后ＨＬ6 0细胞ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳。分别取ＴＰＡ作用后的ＨＬ6 0细胞 ,70 %冷乙醇固定 ,流式细胞仪(…     

TNF—α和IFN—γ抑制肺腺癌A549细胞系生长的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）和干扰素（ＩＦＮ－γ）联合应用对人肺腺癌Ａ５４９细胞系的细胞毒性作用。方法 实验分为空白组、对照组、ＴＮＦ组、ＩＦＮ且及ＴＮＦ＋ＩＦＮ组，应用ＭＴＴ经色法检测各组的ＯＤ值，计算其抑制率。结果 ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－γ对人肺腺癌Ａ５４９细胞系均有直接抑制作用，联合用药有明显提高ＴＮＦ对Ａ５４９细胞系的抑制效应。结论 ＴＮＦ－α和ＩＮＦ－γ对人肺腺癌Ａ５４９细胞系有明     

二次放射促进p14~(ARF)诱导的低再群体化肺癌细胞凋亡

抑癌蛋白ｐ14ＡＲＦ是细胞周期素依赖性激酶 4(ＣＤＫ4)抑制蛋白 (ｐ16 ＩＮＫ4ａ)可变读框基因 (ＡＲＦ)编码的产物 ,具有显著的细胞周期抑制效应。本实验在前期研究证实了ｐ14ＡＲＦ可抑制肺癌细胞放射后加速再群体化 (ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄｒｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ)的基础上 ,对ｐ14ＡＲＦ诱导的低再群体化肺癌细胞实施 2次放射打击 ,观察细胞凋亡变化1　材料与方法1.1　载体和细胞系 :选ｐＣＩ ｎｅｏ ｐ14ＡＲＦ为人ｐ14ＡＲＦ真核表达载体 ,用存在ＡＲＦ基因原发纯合缺失但表达野生型ｐ5 3的人肺腺癌Ａ5 49和Ｈ46 0细胞系为靶细胞…     

IFNγ联合全反式维甲酸对白血病细胞株NB4、MR2增殖和分化的影响

背景与目的:全反式维甲酸(all-transretinoicacid,ATRA)的应用,使90%以上的急性早幼粒细胞白血病(acutepromyelocyticleukemia,APL)患者获得了完全缓解,但维甲酸耐药的快速发生成为ATRA治疗APL的一大缺憾。许多研究表明ATRA耐药与缺乏干扰素合成的某些蛋白质有一定的关系,本研究拟探讨干扰素联合ATRA作用抑制ATRA耐药APL细胞增殖和分化的可能性及其机制。方法:γ干扰素(interferonγ,IFNγ)、ATRA单独或联合作用于ATRA敏感细胞株(NB4)及ATRA耐药细胞株(MR2)后,采用MTT法检测细胞的增殖,用光镜观察和NBT还原实验检测细胞的分化,间接免疫荧光法观察早幼粒细胞白血病(promyelocyticleukemia,PML)蛋白表达的情况。结果:第8天时,IFNγ组、ATRA组和(IFNγ ATRA)组NB4细胞的生长抑制率依次为68.0%、85.0%和95.2%;MR2细胞的生长抑制率依次为24.1%、4.3%和51.5%。联合用药组NB4细胞、MR2细胞的生长抑制率明显高于单独用药组(P<0.05)。第3天时,IFNγ组、ATRA组和(IFNγ ATRA)组NB4细胞的NBT阳性率依次为19.3%、74.7%和93.3%,MR2细胞的NBT阳性率依次为16.8%、5.2%和31.5%,联合用药组NB4细胞、MR2细胞的NBT阳性率明显高于单独用药组(P<0.05)。IFNγ作用后,NB4细胞和MR2细胞核内的荧光颗粒较对照组明显增多。结论:IFNγ与ATRA具有协同作用,二者联合应用不仅能够增强ATRA对NB4细胞和MR2细胞的增殖抑制作用,而且能够部分诱导对ATRA耐药的MR2细胞发生分化。     

胃癌MAGE-1基因启动子 B′B区去甲基化状态的研究

Ａ ＮＫ细胞由于其体外增殖和抗肿瘤能力强 ,对正常细胞无杀伤作用等优点 ,成为近年来肿瘤过继免疫疗法的研究热点。本研究多方面比较无血清培养基ＡＩＭＶ与完全培养基对体外Ａ ＮＫ细胞的支持作用 ,发现无血清培养基用于Ａ ＮＫ细胞的临床生物治疗 ,即不减少Ａ ＮＫ细胞的数量和活性 ,又能增加其临床应用的安全性。制备方法力求简便快速 ,首先常规分离健康人外周血单个核细胞 ;然后 ,置于塑料离心管中用ＰＭＥ(5ｍｍｏｌ/Ｌ)室温处理 4 0ｍｉｎ ;再后 ,用完全培养基 (ＲＰＭＩ 16 4 0含 10 %人ＡＢ血清 )和无血清培养基ＡＩＭＶ在塑料培养…     

丹参酮ⅡA对肺腺癌细胞粘附分子表达的干预作用的初步观察

细胞粘附分子ＣＤ4 4是一种多功能细胞表面跨膜糖蛋白[1] 。目前已知ＣＤ4 4变异体包括ＣＤ4 4Ｖ1～ＣＤ4 4Ｖ10 等 10余种[2 ] ,其中ＣＤ4 4Ｖ6在非小细胞肺癌转移淋巴结中呈高表达[3] 。我们用中药单体丹参酮ⅡＡ对肺腺癌细胞ＣＤ4 4Ｖ6表达的影响进行了研究 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　材料　人肺腺癌Ａ54 9细胞株 :由第三军医大学提供 ,用ＲＰＭＩ1640培养液培养 ,0 .2 5 %胰酶消化 ,3或 4天传代一次。丹参酮ⅡＡ单体 :由重庆药检所提供标准品 ,纯度为 90 % ,以 0 .0 2 %二甲亚砜 (ＤＭＳＯ)溶解 ,过滤除菌 ,最后取终浓度 0 .5、1…     

α-干扰素与5-FU联合作用对肝癌细胞HepG2.2.15生物学特性的影响

目的:探讨α-干扰素(IFN-α)联合5-FU对肝癌细胞HepG2.2.15生物学特性的影响及其作用机制.方法:采用MTT法观察5-FU和IFN-α对HepG2.2.15细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡变化及细胞表面Fas表达变化;RT-PCR检测凋亡抑制基因Bcl-xL表达变化.结果:IFN-α单独应用对HepG2.2.15细胞增殖抑制作用较弱,与5-FU联合应用时对细胞的增殖抑制作用明显增强,P<0.01;两者联合应用对HepG2.2.15细胞周期的影响表现为与对照组和IFN-α、5-FU单用药组相比,联合用药组G0/G1期细胞比率升高(78.33%vs54.95%、60.08%和72.50%),S期比率降低(10.97% vs 29.04%、18.69%和17.44%),P<0.01;经药物处理48h后,联合用药组的细胞凋亡率为(25.08±2.54)%,与对照组及IFN-α和5-FU单独应用组相比,细胞凋亡率明显增高,P<0.01.IFN-α对HepG2.2.15细胞表面Fas表达没有影响,但可协同5-FU明显提高细胞表面Fas的表达,P<0.01.联合用药组HepG2.2.15细胞Bcl-xL的表达较对照组和单药组明显下降,P<0.05.结论:IFN-α和5-FU联合应用可抑制HepG2.2.15细胞的增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是调节凋亡抑制基因Bcl-xL的表达,影响内源性凋亡信号传导通路来发挥作用.     

应用血清蛋白质组波谱模型鉴定卵巢癌

应用新技术检测卵巢癌对于提高妇女健康水平具有重要作用 ,特别是对于卵巢癌高危人群如有家族或个人肿瘤史、有肿瘤易感基因ＢＲＣＡ1和ＢＲＣＡ2突变的妇女更为急迫 ,但目前对于这部分人群尚无有效的筛查方法。因此需要寻找特异性更强和灵敏度更高的肿瘤分子标记物。目前最普遍使用的卵巢癌生物标记物是肿瘤抗原ＣＡ12 5 ,尽管 80 %的晚期卵巢癌患者ＣＡ12 5浓度不正常 ,但是仅有 5 0 %～ 6 0 %的Ⅰ期卵巢癌患者ＣＡ12 5浓度增高。ＣＡ12 5单独作为标记物的阳性预测值不到 10 %,加上超声检查 ,阳性预测值增加至 2 0 %。低分子量的血清蛋白…     

成纤维细胞介导的人α型干扰素基因疗法与过继免疫化疗联合治疗人肝癌的实验研究

作者以皮下接种人肝细胞癌细胞ＳＭＭＣ７７２１的裸鼠为荷瘤模型，由人外周血单个核细胞经体外ＩＬ－２和丝裂霉素Ｃ灭活的人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１共同刺激培养后激活的杀伤细胞（ＡＫ），研究了将成纤维细胞介导的人ＩＦＮ－α基因疗法与ＩＬ－２／ＡＫ／阿霉素过继免疫化疗联合应用后对肝癌的治疗作用。结果表明：（１）给肝癌裸鼠单独腹腔埋植人ＩＦＮ－α基因转移的ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞（ＮＩＨ３Ｔ３－ＩＦＮ－α￣＋）就能显著抑制肝癌（皮下）体内生长，使荷瘤裸鼠存活期明显延长；（２）在腹腔埋植ＮＩＨ３Ｔ３－ＩＦＮ－α￣＋之后再静脉注射ＡＫ细胞、腹腔内注射ＩＬ－２，发现荷瘤裸鼠的皮下肿瘤结节生长抑制作用更明显；（３）将ＮＩＨ３Ｔ３－ＩＦＮ－α￣＋与ＩＬ－２／ＡＫ／阿霉素联合应用后，对肝癌裸鼠的治疗效果更佳。     

乏氧诱导因子-1α在非小细胞肺癌中的表达研究

目的　探讨乏氧诱导因子 1α(HIF 1α)在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义。方法　采用免疫组织化学技术检测HIF 1α在 68例非小细胞肺癌标本中的表达。结果　HIF 1α在非小细胞肺癌中的阳性表达率为 5 7.3 5 %( 3 9/ 68)。腺癌中HIF 1α阳性表达率为 5 4.76%( 2 3 / 42 ) ,鳞癌为 61.5 4%( 16/ 2 6) (P>0 .0 5 ) ;中高分化的肿瘤标本中HIF 1α阳性表达率 ( 74.2 9%,2 6/ 3 5 )显著高于低分化的肿瘤标本 3 9.3 9%( 13 / 3 3 ) (P <0 .0 5 ) ;Ⅰ～Ⅱ期HIF 1α的阳性表达率 ( 86.96%,2 0 / 2 3 )显著高于Ⅲ～Ⅳ期 42 .2 2 %( 19/ 45 ) (P<0 .0 5 )。HIF 1α的表达与患者性别、年龄及有无淋巴结转移无明显关系。结论　HIF 1α在非小细胞肺癌中有着较高的表达率 ,且与肿瘤的分化程度和临床分期有一定的关系 ,提示在非小细胞肺癌的治疗中应该重视HIF 1α导致的放化疗抗拒     

肿瘤坏死因子、干扰素与化疗药物联合作用在体外对卵巢癌细胞株生长的影响

用ＮＩＨ：ＯＶＣＡＲ－３、３ＡＯ和ＡＯ卵巢癌细胞株作为靶细胞研究了肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）和化疗药物的体外协同应用对卵巢癌株生长的影响。ＮＩＨ：ＯＶＣＡＲ－３和３ＡＯ细胞对各种浓度的ＴＮＦ、ＩＦＮ－γ均呈现抵抗；ＡＯ细胞对ＴＮＦ敏感，对ＩＦＮ－γ抵抗。ＴＮＦ、ＩＦＮ－γ与化疗药物协同用药时显示出明显的对靶细胞的杀伤效果。统计学分析提示，对于ＮＩＨ：ＯＶＣＡＲ－３细胞，表阿霉素和ＴＮＦ起主要作用；而对３ＡＯ细胞的杀伤作用中，表阿霉素和５－Ｆｕ影响最大，ＴＮＦ和ＩＦＮ－γ其次；ＡＯ细胞实验中，ＴＮＦ对杀伤效果的影响最大，表阿霉素、５－Ｆｕ其次；卡铂在这三种卵巢癌细胞的联合用药组合中作用很小。实验结果对临床应用ＴＮＦ治疗卵巢癌时选择良好协同药物具有参考意义。     

肺癌患者血清CYFRA21-1水平及其意义

ＣＹＦＲＡ2 1 1作为新的肿瘤标记物已应用于临床。我们用德国ＢＭ公司ＥＳ3 0 0全自动酶免分析仪及原装试剂检测了肺癌患者的血清ＣＹＦＲＡ2 1 1水平 ,现将结果报告如下。资料与方法　研究对象对我院 1999年 1～ 12月间的 3 2名住院肺癌患者 ,均经病理确诊。年龄 ( 64 .5± 9.16)岁 ,男 2 2例 ,女 10例。其中腺癌 14例 ,鳞癌 13例 ,小细胞未分化癌 5例。对非小细胞肺癌(ＮＳＣＬＣ)按 1997年ＵＩＣＣ的修订标准进行ＴＮＭ分期 ,其中ⅠＢ期 2例 ,ⅡＡ期 3例 ,ⅡＢ期 4例 ,ⅢＡ期 5例 ,ⅢＢ期 2例 ,Ⅳ期11例。小细胞癌 (ＳＣＬＣ)按美国退伍…     

性激素受体在膀胱癌中表达及其与肿瘤恶性程度的关系

应用免疫组化中ＳＡＢＣ方法 ,对 55例膀胱癌进行抗ＥＲ、ＰＲ、ＡＲ单克隆抗体标记 ,观测膀胱癌中雄激素受体 (ＡＲ)、雌激素受体 (ＥＲ)、孕激素受体 (ＰＲ)的表达 ,以探寻性激素受体 (ＳＨＲ)与肿瘤生物学行为的关系。1　材料与方法1 1　临床资料本组 55例中 ,男性 4 4例 ,女性 11例。年龄 39～ 88岁 ,平均 6 7 6岁。初发肿瘤 4 6例 ,复发性肿瘤 9例。按ＴＮＭ临床分期 :Ｔｉｓ～Ｔａ期 7例 ,Ｔ1期2 4例 ,Ｔ2 期 16例 ,Ｔ3期 5例 ,Ｔ4 期 3例。1 2　病理标本膀胱肿瘤开放手术标本 55例 ,均经病理诊断为膀胱癌 ,其中膀胱移行细胞癌 (ＢＴ…     

环孢菌素、他莫西芬及α-干扰素对白血病细胞多药耐药的逆转作用

目的 :寻找适合临床实际需要的逆转多药耐药的方法。方法 :用 MTT法和流式细胞仪测定技术研究环孢菌素 A(Cs A)、他莫西芬 (TAM)及α-干扰素 (IFN-α)单独应用和半量联合应用逆转裸鼠高致瘤性多药耐药人白血病细胞系 K5 6 2 - n/ VCR的作用。结果 :Cs A、TAM、IFN -α 3种药物单独和联合应用对 K 5 6 2 - n/ VCR细胞系的多药耐药均有逆转作用 ,Cs A单用逆转效果远远强于TAM及 IFN -α,Cs A>IFN -α>TAM;两两半量联合效果视不同组合而不同 ,三者半量联合应用比两两半量联合逆转效果强 ,而两两半量联合及三者半量联合应用的逆转效果与单独应用 Cs A相似 ,优于单独应用 TAM和 IFN-α。 Cs A使多药耐药细胞系 K 5 6 2 - n/ VCR细胞内 DNR含量增加 ,TAM及IFN-α不改变 K5 6 2 - n/ VCR细胞内 DNR含量。结论 :Cs A、TAM及 IFN -α 3种药物单独和联合应用对 K5 6 2 - n/ VCR细胞的多药耐药均有逆转作用 ,联合应用逆转作用比单独作用强 ,将 Cs A+TAM两药联合或 Cs A+TAM+IFN-α三药联合与化疗药物同时应用可能更有利于提高 MDR白血病患者的治愈率     

重组人肿瘤坏死因子抗卵巢癌的体内外实验研究

以ＭＴＴ法测试发现重组人肿瘤坏死因子（ｒＨＴＮＦ－α）对体外培养的人卵巢癌细胞系ＯＶＣＡＲ３和ＣＡＯＶ３有较强的细胞毒效应。同时还测试了五种化疗药物５－Ｆｕ、ＣＴＸ、ＶＣＲ、ＤＤＰ、ＫＳＭ对这两种细胞的细胞毒性。在化疗药物浓度参照临床用药剂量制定的条件下，五种化疗药物对这两种细胞的细胞毒性均明显低于ｒＨＴＮＦ－α。因此，ｒＨＴＮＦ－α抗卵巢癌的潜力值得重视。形态学研究表明，ｒＨＴＮＦ－α首先引起卵巢癌细胞的线粒体和内质网的破坏，继之才出现细胞膜损伤和细胞裂解。实验还证实，ｒＨＴＮＦ－α与ＤＤＰ或ＫＳＭ联合均有一定的协同抗癌效应。在体外实验的基础上，作者对人卵巢癌细胞ＯＶＣＡＲ３的裸鼠移植瘤模型进行了实验性治疗。结果显示，ｒＨＴＮＦ－α单独应用有显著的抗移植瘤作用，与ＫＳＭ合用有较强的协同效应。