MicroRNA-338-5p在视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡中的作用北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-338-5p(miR-338-5p)对视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞增殖和凋亡的影响及其与RAS相关结构域家族成员6(RASSF6)在视网膜母细胞瘤中的相互作用机制。方法第1转染组,第2转染组,第3转染组,第4转染组分别为向WERI-Rb-1细胞中转染抑制剂阴性对照(inhibitor control),miR-338-5p抑制剂(miR-338-5p inhibitor),共转染miR-338-5p inhibitor和小干扰RNA阴性对照(si-NC),共转染miR-338-5p抑制剂和靶向RASSF6 siRNA(si-RASSF6)。用噻唑蓝(MTT)法检测各组WERI-Rb-1细胞的增殖能力;以流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;以蛋白印迹法检测RASSF6蛋白的表达水平;以生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验验证miR-338-5p与RASSF6的靶向关系。结果第1转染组,第2转染组,第3转染组,第4转染组细胞的增殖率分别为(102.58±3.76)%,(68.39±4.52)%,(65.81±2.09)%,(89.18±2.47)%;凋亡率分别为(3.49±0.27)%,(7.62±0.45)%,(8.39±0.62)%,(4.17±0.38)%;RASSF6蛋白的表达水平分别为0.42±0.03,0.86±0.07,0.91±0.06,0.57±0.04。第2转染组与第1转染组比较,第4转染组与第3转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。生物信息学软件和双荧光素酶报告基因检测实验结果表明RASSF6是miR-338-5p的靶基因(P<0.05)。结论miR-338-5p通过靶向RASSF6促进视网膜母细胞瘤细胞的增殖并抑制凋亡。     

miR-142-3p靶向HMGB1逆转乳腺癌细胞MCF-7对阿霉素的耐药性

目的化疗耐药是乳腺癌复发转移、治疗效果不理想的主要因素。本文探讨miR-142-3p通过靶向高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)提高乳腺癌化疗敏感性的分子机制。方法实时荧光定量PCR检测人乳腺癌MCF-7细胞及阿霉素耐药株MCF-7/DOX细胞中的miR-142-3p水平;MTT法检测阿霉素(doxorubicin,DOX)处理后各组的增殖情况、流式细胞术检测凋亡率、Western blot检测HMGB1和自噬有关蛋白的表达水平;双荧光素酶报告实验评价miR-142-3p对HMGB1的靶向调控作用。结果阿霉素耐药株MCF-7/DOX细胞中的miR-142-3p水平明显下调。miR142-3p的过度表达增强了乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性和提高阿霉素诱导的凋亡比率。HMGB1是乳腺癌细胞中miR-142-3p的直接功能靶点,HMGB1的过表达可以明显解除由miR-142-3p上调所产生的细胞凋亡和自噬抑制。结论miR-142-3p的过表达可能通过抑制自噬靶向HMGB1,增强乳腺癌细胞对阿霉素的化学敏感性。miR-142-3p/HMGB1为提高乳腺癌对药物的敏感性提供了新的靶点,具有一定价值。     

藤黄酸上调miR-497-5p影响子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学行为北大核心CSCD

目的研究藤黄酸对子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学行为的影响和机制。方法子宫内膜癌Ishikawa细胞分成4组:对照组、实验组(用0.8μg·mL^(-1)藤黄酸处理)、Anti-miR-NC组(转染inhibitor control,0.8μg·mL^(-1)藤黄酸处理)、Anti-miR-497-5p组(转染miR-497-5p inhibitor,0.8μg·mL^(-1)藤黄酸处理)。用qRT-PCR方法检测miR-497-5p表达,用MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测凋亡率,Transwell小室检测迁移能力,用蛋白印迹法(Western blot)检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3、上皮性钙黏附素、神经性钙黏附素、基质金属蛋白酶-9蛋白表达。结果对照组、实验组、Anti-miR-NC组、Anti-miR-497-5p组子宫内膜癌Ishikawa细胞中miR-497-5p表达量分别为1.00±0.10,1.98±0.17,1.96±0.19和0.99±0.12;上述4组的细胞增殖率分别为(100.00±11.70)%,(55.10±8.10)%,(56.20±7.15)%和(87.51±7.64)%;上述4组的细胞凋亡率分别为(4.66±0.88)%,(12.45±1.85)%,(13.05±1.56)%和(8.72±1.10)%;上述4组的迁移细胞数目分别为215.36±18.42,103.69±9.15,108.42±11.50和164.79±13.57。上述指标,实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);Anti-miR-497-5p组与Anti-miR-NC组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论藤黄酸通过上调miR-497-5p影响子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学行为。     

miRNA-1246通过NF-κB介导乳腺癌细胞紫杉醇耐药的机制研究

目的 探讨微小RNA-1246(miR-1246)在乳腺癌细胞紫杉醇(PTX)耐药中的作用及相关机制。方法 以SK-BR-3细胞构建PTX耐药乳腺癌细胞SK-BR-3/PTX作为SK-BR-3/PTX组,以正常SK-BR-3细胞作为SK-BR-3组;CCK-8实验检测两组细胞活力并计算凋亡指数;RTFQ-PCR检测miR-1246表达水平;免疫荧光实验和Western blot法检测P-gp蛋白表达。SK-BR-3/PTX细胞转染miR-1246 inhibitor和阴性对照(NC)inhibitor,分别设为miR-1246 inhibitor组和NC inhibitor组;Western blot法检测p-NF-κB p65、IκBα和P-gp蛋白表达。PTX处理miR-1246 inhibitor组和NC inhibitor组,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 成功构建PTX耐药乳腺癌细胞SK-BR-3/PTX,耐药指数为51.3。与SK-BR-3细胞相比,SK-BR-3/PTX细胞miR-1246表达水平显著升高(P<0.01),P-gp和p-NF-κB p65蛋白显著上调,...     

微小 RNA-216b-5p对骨肉瘤 MG63细胞功能的影响及其与高迁移率族蛋白 B1的靶向关系

目的 探讨微小RNA-216b-5p(miR-216b-5p)对骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其与高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的靶向关系.方法 将体外培养的MG63细胞分为mimics-NC组、miR-216b-5p mimics组、inhibitor-NC组和miR-216b-5p inhibitor组,采用实时荧光定量PCR检测miR-216b-5p的表达,MTT法、Transwell小室和流式细胞仪分别检测细胞增殖、侵袭和凋亡能力.采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-216b-5p和HMGB1的靶向关系,蛋白质印迹法(Western blot-ting)检测HMGB1蛋白的表达.结果 与mimics-NC组相比,miR-216b-5p mimics组细胞中miR-216b-5p的表达水平[(5.36±0.54)比(1.00±0.11)]和细胞凋亡率[(20.36±3.15)％比(8.58±1.22)％]明显升高,而细胞增殖活力、侵袭能力和细胞中HMGB1蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05);miR-216b-5p inhibitor组细胞中miR-216b-5p的表达水平[(0.24±0.03)比(0.96±0.08)]和细胞凋亡率[(2.05±0.38)比(9.27±1.16)]较inhibitor-NC组明显降低,而细胞增殖活力、侵袭能力和HMGB1蛋白的表达水平较inhibitor-NC组均明显升高(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验证实HMGB1是miR-216b-5p的靶基因.结论 miR-216b-5p可能通过靶向调控HMGB1表达,抑制骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭并诱导细胞凋亡.     

Circ_0000003通过调控miR-338-3p/IRS2轴调控甲状腺癌细胞增殖、转移和凋亡

目的探究circ0000003对甲状腺癌(TC)细胞增殖、转移和凋亡的影响及其机制。方法 CGTH W-3细胞分为转染组-1(转染空白质粒)、转染组-2(转染pcDNA-circ0000003)、转染组-3(共转染miR-338-3p mimics和pcDNA-circ0000003);TPC-1细胞分为转染组-4(转染control si-RNA)、转染组-5(转染si-circ0000003)、转染组-6(共转染miR-338-3p inhibitors和si-circ0000003)。用定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测TC组织和细胞系中circ0000003表达。用蛋白质印迹法检测TC组织中胰岛素受体底物2(IRS2)及凋亡相关蛋白的表达,用CCK-8实验检测细胞增殖,用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,用双荧光素酶报告基因实验验证circ0000003与miR-338-3p之间的靶向关系。结果 Circ0000003在甲状腺癌组织(3.41±0.27)中的表达水平显著较癌旁组织(1.03±0.11)高(P<0.05)。转染组-1,转染组-2,转染组-4,转染组-5在96 h时吸光度分别为0.70±0.07,0.85±0.07,0.71±0.07和0.57±0.04;迁移细胞数目分别为(124.33±6.18),(171.00±12.19),(71.00±6.19)和(126.30±7.93)个;侵袭迁移细胞数目分别为(89.00±11.86),(126.33±7.93),(86.67±8.86)和(56.33±7.93)个。上述指标,转染组-2与转染组-1比较,转染组-5与转染组-4比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 Circ0000003通过调节miR-338-3p/IRS2轴促进TC细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡。     

miR-338-5p通过靶向TSHZ3促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨miR-338-5p通过靶向TSHZ3调控膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-338-5p在33例膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;在膀胱癌T24和UM-UC-3细胞中分别转染mimics-NC、miR-338-5p mimics、inhibitor-NC和miR-338-5p inhibitor,qRT-PCR检测转染效率;采用CCK-8实验检测过表达或者敲低miR-338-5p对膀胱癌细胞增殖能力的影响;Transwell实验检测miR-338-5p对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响;TargetScan、miRDB和Targetminer数据库预测miR-338-5p潜在的靶基因,选定靶基因TSHZ3;双萤光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-338-5p和TSHZ3的靶向关系;在膀胱癌细胞中共转染miR-338-5p mimics和TSHZ3过表达质粒,通过CCK-8和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力;Western blot检测过表达miR-338-5p或者TSHZ3对Wnt/β-c...     

HER-2/neu基因沉默对子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞增殖及其对孕激素敏感性的影响

目的研究shRNA表达质粒稳定转染,靶向沉默HER-2/neu基因对子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞增殖及其对孕激素敏感性的影响。方法根据HER-2/neumRNA的序列设计和合成两条shRNA.分别将其与质粒(pSilencer4.1CMV neo,Ambion)连接,并将连接好的质粒通过LipofectamineTM2000(invitrogen)转染Ishikawa细胞株。应用含有250μg·mL-1G418的DMEM培养基筛选稳定转染克隆。用RT-PCR法及Western blot分别检测稳定转染细胞HER-2/neumRNA及p185蛋白表达水平,用Annexin-V检测细胞凋亡率。用10μg.μL-1孕激素培养细胞72小时后,用MTT法分别检测转染细胞及未转染细胞的增殖率。结果转染特异性shRNA表达质粒组Ishikawa细胞HER-2/neumRNA及p185蛋白表达水平明显低于对照组细胞。细胞增殖率明显降低而细胞凋亡率明显增高(P<0.05)。用10μg.μL-1孕酮培养细胞72小时后,转染特异性shRNA的细胞组细胞增殖率明显低于未转染细胞组(P<0.05)。结论RNA干扰可以明显降低Ishikawa细胞株HER-2/neumRNA及185蛋白的表达,从而抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡。HER-2shRNA还可以增加Ishikawa细胞株对孕激素的敏感性,与孕激素存在协同效应。     

miR-373靶向调控同源异型盒基因 B3表达影响子宫内膜癌 Ishikawa细胞生物学特性的实验研究

目的 探讨微小RNA(miR)-373靶向调控同源异型盒基因B3(HOXB3)表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 本研究起止时间为2018年2月至2019年6月,将体外培养的Ishikawa细胞分为抑制剂阴性对照(inhibitor-NC)组(转染inhibitor-NC)、miR-373抑制剂(inhibitor)组(转染miR-373 inhibitor)、miR-373 inhibitor+siNC组(共转染miR-373 in?hibitor和NC siRNA)和miR-373 inhibitor+siHOXB3组(共转染miR-373 inhibitor和HOXB3 siRNA),采用实时荧光定量PCR检测Ishikawa细胞中miR-373的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-373和HOXB3的靶向关系,采用免疫印迹法检测Ishikawa细胞中HOXB3蛋白的表达,细胞计数(CCK-8)法、Transwell实验和膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法检测各组细胞增殖、侵袭和凋亡能力.结果 HOXB3是miR-373的靶基因.与inhibitor-NC组相比,miR-373 inhibitor组、miR-373 inhib?itor+siNC组和miR-373 inhibitor+siHOXB3组细胞中miR-373表达水平[(1.00±0.11)比(0.32±0.02)/(0.36±0.03)/(0.34±0.03)]和细胞增殖活力[24 h(0.63±0.04)比(0.41±0.03)/(0.43±0.03)/(0.52±0.03);48 h(0.97±0.06)比(0.68±0.05)/(0.72±0.06)/(0.85±0.05);72 h(1.35±0.11)比(0.88±0.08)/(0.92±0.07)/(1.12±0.09)]、穿膜细胞数[(85.26±8.72)个比(37.64±2.85)个/(40.55±3.23)个/(61.38±3.64)个]均明显降低,而细胞凋亡率[(8.75±1.23)％比(25.64±3.38)％/(28.48±3.26)％/(14.25±2.02)％]和细胞中HOXB3蛋白的表达水平[(0.27±0.03)比(0.77±0.06)/(0.73±0.06)/(0.51±0.03)]均明显升高(P<0.05);且miR-373 inhibitor+siHOXB3组中各指标的变化强度明显低于miR-373 inhibitor组(P<0.05);而miR-373 inhibitor+siNC组和miR-373 inhibitor组之间无明显差异(P>0.05).结论 下调miR-373表达可通过靶向HOXB3抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭并促进细胞凋亡.     

右美托咪定调控miR-219a-5p/CACUL1通路抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

摘要：目的:探讨右美托咪定对子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响和机制。方法:采用不同浓度(5,10,20,40μmol·L-1)的右美托咪定处理子宫内膜癌细胞Ishikawa,细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,并确定用药浓度。实时定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测右美托咪定对Ishikawa细胞miR-219a-5p和细胞周期素依赖激酶2相关性Culin结构域1（CACUL1）表达的影响。采用上述方法检测抑制miR-219a-5p表达或过表达CACUL1对右美托咪定处理的Ishikawa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-219a-5p和CACUL1的靶向调控关系。结果:右美托咪定可抑制Ishikawa细胞增殖活力和迁移侵袭能力（P<0.05）,且呈剂量依赖性。右美托咪定处理可促进miR-219a-5p表达,抑制CACUL1表达（P<0.05）。抑制miR-219a-5p表达或过表达CACUL1可逆转右美托咪定对Ishikawa细胞的增殖、迁移和侵袭的影响（P<0.05）。CACUL1是miR-219a-5p的靶基因,miR-219a-5p负性调控CACUL1表达。结论:右美托咪定通过调节miR-219a-5p/CACUL1轴抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

微小RNA-455-3p 下调TRIM27 对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响

目的研究微小RNA-455-3p(miR-455-3p)对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法运用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人鼻咽癌细胞5-8F、CNE-1和鼻咽上皮细胞NP69中miR-455-3p的表达;将miR-NC、miR-455-3p mimics、pcDNA3.1、pcDNA3.1- TRIM27、si-NC、si- TRIM27 组、miR-455-3p mimics 和pcDNA3.1、miR-455-3p mimics 和pcDNA3.1-TRIM27通过脂质体试剂转染到5-8F;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、流式细胞术、蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞的增殖、凋亡和TRIM27蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-455-3p与TRIM27的靶向关系。结果与鼻咽上皮细胞NP69(1.37±0.06)相比,人鼻咽癌细胞5-8F(0.42±0.02)、CNE-1(0.96±0.05)中miR-455-3p的表达显著降低(F =314.35,P =0.001)。过表达miR-455-3p 可明显抑制5-8F、CNE-1 细胞的增殖,促进其凋亡;miR-455-3p 可抑制野生型TRIM27细胞的荧光活性,且与TRIM27的表达呈负相关;抑制TRIM27可抑制抑制5-8F细胞的增殖,促进凋亡,过表达TRIM27能够逆转miR-455-3p对鼻咽癌细胞5-8F增殖凋亡的作用。结论miR-455-3p能够调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡的作用机制与其靶向TRIM27相关,将可为鼻咽癌的治疗提供新靶点。     

MiR-142-3p enhances chemosensitivity of breast cancer cells and inhibits autophagy by targeting HMGB1

MiR-142-3p has been reported to act as a tumor suppressor in breast cancer. However, the regulatory effect of miR-142-3p on drug resistance of breast cancer cells and its underlying mechanism remain unknown. Here, we found that miR-142-3p was significantly downregulated in the doxorubicin (DOX)-resistant MCF-7 cell line (MCF-7/DOX). MiR-142-3p overexpression increased DOX sensitivity and enhanced DOX-induced apoptosis in breast cancer cells. High-mobility group box 1 (HMGB1) is a direct functional target of miR-142-3p in breast cancer cells and miR-142-3p negatively regulated HMGB1 expression. Moreover, overexpression of HMGB1 dramatically reversed the promotion of apoptosis and inhibition of autophagy mediated by miR-142-3p up-regulation. In conclusion, miR-142-3p overexpression may inhibit autophagy and promote the drug sensitivity of breast cancer cells to DOX by targeting HMGB1. The miR-142-3p/HMGB1 axis might be a novel target to regulate the drug resistance of breast cancer patients.     

羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞生物学行为的影响

目的 探讨羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌（NSCLC）NCI-H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 将体外培养的NCI-H1299细胞分为正常对照（NC）组（未处理）、低剂量组（12.5μmol/L羽扇豆醇）、中剂量组（25μmol/L羽扇豆醇）、高剂量组（50μmol/L羽扇豆醇）、miR-NC组（转染miR-NC）、miR-100-5p组（转染miR-100-5p）、anti-miR-NC+高剂量组（转染anti-miR-NC后用50μmol/L羽扇豆醇处理）、anti-miR-100-5p+高剂量组（转染anti-miR-100-5p后用50μmol/L羽扇豆醇处理）。CCK-8和克隆形成实验检测NCI-H1299细胞增殖;Transwell法检测NCI-H1299细胞迁移和侵袭。荧光定量PCR(q PCR)检测miR-100-5p表达;Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP9蛋白的表达。结果 与NC组比较,低、中、高剂量组NCI-H1299细胞活力、细胞克隆数、迁移数、侵袭数、CyclinD1、...     

miR-141-3p靶向调控FOXA1对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞增殖凋亡的影响

目的探讨miR-141-3p对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞增殖及凋亡的影响及其分子机制。方法以AECⅡ细胞为研究对象,分别将miR-NC、miR-141-3p mimics、si-NC、si-FOXA1、miR-141-3p mimics+pcDNA3.1、miR-141-3p mimics+pcDNA3.1-FOXA1转染至AECⅡ细胞,分别记作第1,2,3,4,5,6转染组,同时将且未经处理的细胞作为对照组、肺炎链球菌培养细胞作为模型组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-141-3p的表达水平;蛋白质印迹法检测FOXA1的表达量;甲基噻唑基四唑(MTT)与流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡。结果对照组、模型组、第1,2,3,4,5,6转染组2 h细胞存活率分别为(100.00±5.18)%,(47.19±3.14)%,(47.28±3.15)%,(86.73±4.63)%,(47.38±3.25)%,(79.93±4.23)%,(86.75±4.51)%,(57.90±3.34)%;细胞凋亡率分别为(8.11±1.12)%,(26.23±1.83)%,(26.23±2.83)%,(10.37±1.51)%,(26.23±2.83)%,(13.36±1.57)%,(10.35±1.57)%,(18.91±1.86)%。对照组与模型组比较,第1转染组与第2转染组比较,第3转染组与第4转染组比较,第5转染组与第6转染组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-141-3p过表达可通过抑制FOXA1表达而抑制肺炎链球菌诱导的肺上皮细胞凋亡,促进细胞增殖。     

MiR-34 by targeting p53 induces apoptosis and DNA damage in paclitaxel-resistant human oral squamous carcinoma cells

MicroRNA-34 (miR-34) is one the most important tumor suppressor miRNAs involving in the various aspects of oral cancer. The present study aimed to evaluate the effects of miR-34 restoration in OECM-1 oral cancer resistant to paclitaxel (OECM-1/PTX) and its underlying mechanisms through p53-mediated DNA damage and apoptosis. OECM-1 and OECM-1/PTX were transfected with miR-34 mimic and inhibitor. Cellular proliferation and apoptosis were evaluated through MTT assay and flow cytometry, respectively. The mRNA and protein expression levels of p53, p-glycoprotein (P-gp), ATM, ATR, CHK1, and CHK2 were assessed through qRT-PCR and western blotting. Rhodamin123 uptake assay was used to measure the P-gp activities. P53 expression was also suppressed by sing a siRNA transfection of cells. The expression levels of miR-34 were downregulated in OECM-1/PTX. Restoration of miR-34 led to increase in cytotoxic effects of paclitaxel in cells. In addition, the expression levels and activities of P-gp were reduced following miR-34 transfection. miR-34 transfection upregulated the p53, ATM, ATR, CHK1, and CHK2 expression levels in OECM-1/PTX cells. Furthermore, cells transfected with miR-34 showed higher levels of apoptosis. miR-34 restoration reverses paclitaxel resistance in OECM-1 oral cancer. The chemosensitive effects of miR-34 is mediated through increasing DNA damage and apoptosis in a p53 depended manner.     

微小 RNA-525-5p通过靶向 RECQ样蛋白 5调控乳腺癌放射敏感性

目的探讨微小 RNA-525-5p(miR-525-5p)对乳腺癌细胞辐射照射敏感性的影响及机制。方法该研究起止时间为 2019年 6月至 2020年 6月,人乳腺癌细胞 MDA-MB-231、MCF-7、BT474、非恶性乳腺上皮细胞 MCF-10A均购自美国菌种保藏中心。运用 qRT-PCR法检测人乳腺癌细胞 MDA-MB-231、MCF-7、BT474、非恶性乳腺上皮细胞 MCF-10A中 miR-525-5p的 mRNA的表达;将 miR-525-5p模拟物( miR-525-5p mimics)阴性对照( miR-NC)组(转染 miR-NC)、 miR-525-5p组(转染 miR-525-5p mim. ics)、 RECQL5小干扰 RNA阴性对照( si-NC)组(转染 si-NC)、 RECQL5小干扰 RNA(si-RECQL5)组(转染 si-RECQL5)、 miR-525-5p+RECQL5过表达空载体( pcDNA)组(共转染 miR-525-5p mimics和 pcDNA)、 miR-525-5p+RECQL5过表达载体( pcDNA-REC. QL5)组(共转染 miR-525-5p mimics和 pcDNA-RECQL5),均用脂质体法转染至 MDA-MB-231细胞; Western blotting检测细胞中 RECQ样蛋白 5(RECQL5)的蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性;克隆形成实验检测细胞的存活分数。结果与非恶性乳腺上皮细胞 MCF-10A相比,人乳腺癌细胞 MDA-MB-231、MCF-7、BT474中 miR-525-5p表达［ 0.28±0.02,0.33±0.02,0.42±0.03比 1.01±0.08］显著降低, RECQL5 mRNA和蛋白表达［ 1.68±0.15,1.58±0.12,     

姜黄素对人子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对人子宫内膜癌细胞(HEC-1B)增殖和凋亡的影响。方法:应用6.67~66.67μmol/L的姜黄素分别处理HEC-1B 48h后,采用MTT法检测姜黄素对HEC-1B的增殖程度的影响;流式细胞仪进行细胞周期时相分析;荧光显微镜观察细胞核形态的变化。结果:①MTT法显示培养48h后,姜黄素组的吸光度值A490nm低于对照组(P<0.01),且在一定浓度范围内呈剂量依赖性;②流式细胞仪检测显示培养48h后,姜黄素组的G2/M比例高于对照组(P<0.05),且在一定浓度范围内呈剂量依赖性;③荧光显微镜下给药组部分细胞发生凋亡形态学改变,凋亡率为10.22%~34.72%。结论:姜黄素可抑制HEC-1B的增殖,诱导细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能是通过将细胞阻滞在G2/M期来实现的。