HPLC法测定金荞麦中（一）-表儿茶素含量

金荞麦为蓼科植物金荞麦Fagopyrum dibotrys(D．Don)Hara的干燥根茎。其有效成分为原花色素类缩合鞣质及其前体的混合物，包括(一)-表儿茶素[(一)-epicatechin]及其衍生物的单体、二聚体和多聚体。金荞麦收载于《中华人民共和国药典》2000年版一部，其质量标准中无含量测定项。文献报道的金荞麦药材含量测定方法采用比色法和薄层扫描法，本实验采用HPLC法测定金荞麦中(一)-表儿茶素的含量。     

不同生长年限与采收期对金荞麦药材产量与质量的影响

目的:研究不同生长年限与采收期对金荞麦产量、活性成分含量及经济效益的影响,明确金荞麦适宜的生长年限及采收期。方法:采用HPLC测定不同采收期金荞麦中表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯的含量,样方法计算药材产量,通过调查统计种植成本并分析经济效益。结果:不同采收期的金荞麦,其活性成分含量存在显著差异,2年生11月采收的金荞麦其表儿茶素含量最高,3年生7月采收的金荞麦其表儿茶素没食子酸酯含量最高。从产量的角度分析,2~4年生金荞麦的逐年增产率呈现下降趋势。从经济效益的角度分析,2年生金荞麦的年产值及投产比均最高。因此,采收2年生金荞麦可获得较高产量及实现经济利益最大化。结论:表儿茶素为《中华人民共和国药典》2020年版对金荞麦质量控制的评价指标,如果以表儿茶素作为金荞麦药材质量的考核指标,2年生11月是适宜采收期,此时期采收的金荞麦其产量较大、质量佳且种植户可获得最大的经济利益。     

高效液相色谱-电化学检测法测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量

目的:建立可测定金荞麦饮片中表儿茶素含量的高效液相色谱-电化学检测法。方法:采用DiamonsilC₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,流动相甲醇-0.1 mol.L^-1磷酸盐缓冲液(1∶3,pH 2.5),流速1.0 mL.min^-1,柱温35℃,参比电极ISAAC(in-situ silver/silver chloride),工作电极玻碳电极,检测电位+600 mV。结果:表儿茶素的线性范围为0.004 875～1.56μg,r=0.999 9;平均回收率为100.7%,RSD 1.9%(n=5)。9批不同市售来源的金荞麦饮片中表儿茶素的含量存在差异。结论:该方法重复性好,可以用来测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量。     

HPLC同时测定金荞麦中原儿茶酸和表儿茶素的含量

目的:建立HPLC法同时测定金荞麦中原儿茶酸和(-)-表儿茶素含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Thermo ODS-2HYPERSIL(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.3%冰乙酸溶液梯度洗脱,检测波长:原儿茶酸为255nm、(-)-表儿茶素为280nm,流速为1.0ml·min-1,柱温30℃。结果:原儿茶酸进样量在0.0444~0.8880μg线性关系良好(r=0.9999),加样回收率(n=6)103.0%,RSD为1.5%;(-)-表儿茶素进样量在0.05355~1.071μg线性关系良好(r=1.0),加样回收率(n=6)98.5%,RSD为1.7%。结论:该方法准确、快速,可为全面评价金荞麦质量提供依据。     

药用植物金荞麦中黄酮类化合物积累的时空变化规律

目的 探究药用植物金荞麦不同生育期各器官中黄酮类化合物积累的时空分布规律,为金荞麦合理采收、资源化利用和高价值开发提供科学依据。方法 以根茎繁殖不同生长年限的金荞麦为研究对象,在不同生育时期采集根、茎、叶、花器官,采用高效液相色谱法测定各器官样品中儿茶素、表儿茶素、芦丁和总黄酮含量。结果 随着金荞麦生育期推进,植株不同器官的黄酮类化合物积累增加,以秋季地上部分枯萎后的含量最高;不同生育时期叶片中的儿茶素、表儿茶素、芦丁和总黄酮含量均显著高于根茎和茎秆（P<0.05）。不同器官间儿茶素、表儿茶素、芦丁和总黄酮含量差异有统计学意义（P<0.05）,花中儿茶素、芦丁和总黄酮含量最高;表儿茶素含量在茎秆中最低。黄酮类物质含量在根茎不同部位差异有统计学意义（P<0.05）,表儿茶素和总黄酮含量在根茎不同组织部位表现为须根>韧皮部>根茎（不含须根）>木质部（P<0.05）,儿茶素和芦丁分别在须根和韧皮部含量最高。1年生与2年生金荞麦植株不同器官的黄酮类化合物含量差异无统计学意义。结论 在不考虑产量的前提下,根茎繁殖金荞麦种植1年即可采收,适宜采收期为11月上旬。     

金荞麦中原花青素B2和表儿茶素在人工胃肠液中的含量变化

目的：研究金荞麦中原花青素B₂和表儿茶素在人工胃肠液中的含量变化,为金荞麦的体内物质基础研究提供依据。方法：采用HPLC测定金荞麦提取液中原花青素B₂和表儿茶素在人工胃液和人工肠液中的含量变化。结果：原花青素B₂和表儿茶素在酸性的人工胃液中含量随时间延长明显增加,胃蛋白酶对原花青素B₂和表儿茶素的含量影响不大。原花青素B₂和表儿茶素在人工肠液NE（无胰蛋白酶）中含量增加,胰酶能够降低原花青素B₂和表儿茶素的含量,对原花青素B₂含量影响尤为明显。结论：酸性的人工胃液是引起金荞麦提取液中原花青素B₂和表儿茶素含量上升的主要原因,胰酶与原花青素B₂和表儿茶素发生结合是降低原花青素B₂和表儿茶素的含量的主要原因。     

金荞麦片质量标准的实验研究

目的:建立金荞麦片(金荞麦)质量标准。方法:TLC法鉴别制剂中金荞麦,采用HPLC法同时测定(-)-表儿茶素、原矢车菊素B2含量,采用SymmetryC18色谱柱(5μm,3.9mmid×15mm),水(用磷酸调pH值3.00±0.02)-乙腈(92∶8)为流动相,检测波长:280nm,柱温:35℃。结果:TLC可鉴别出金荞麦的特征斑点。(-)-表儿茶素的进样量在0.1136～2.272μg范围内呈现良好的线性,r=0.999968(n=8);平均加样回收率为97.12%,RSD=0.92%(n=6)。原矢车菊素B2的进样量在0.1664～1.664μg范围内呈良好的线性,r=0.999702(n=8);平均加样回收率为98.26%,RSD=0.61%(n=6)。结论:本法专属性强,重现性好,结果准确,可用于控制金荞麦片质量。     

金荞麦片质量控制标准研究

目的探讨金养麦片质量控制的标准。方法采用梯度洗脱法检测金荞麦片中表儿茶素含量。结果金养麦片中表几茶素含量为0．41-0．61m/片,且精密度、重复性、稳定性、叫收率良好。、结论梯度洗脱法检测金荞麦片中表儿茶素含量可作为其质艟控制标准     

正交试验优选金荞麦的提取工艺研究

目的优选金荞麦中有效成分表儿茶素的提取工艺。方法采用HPLC法测定表儿茶素,以干膏得率和表儿茶素提取率为考察指标,采用正交试验设计优选最佳提取工艺。结果优选工艺为药材加10倍量45%乙醇,回流提取3次,每次1.5 h。结论优选所得的工艺稳定可行,可作为金荞麦的提取工艺。     

不同型号大孔树脂对金荞麦中有效成分的纯化工艺考察

目的:考察不同型号大孔树脂对金荞麦中有效成分的纯化效果。方法:以表儿茶素和金E的含量、浸膏率为指标,结合HPLC指纹图谱,选择最佳型号大孔树脂。结果:AB-8型大孔树脂对表儿茶素洗脱率为89.78%,对金E洗脱率为93.04%。HPLC指纹图谱共有峰面积比较表明AB-8型大孔树脂最适合用于金荞麦有效成分的纯化。结论:采用AB-8型大孔树脂纯化金荞麦中有效成分是可行的,且操作简单、稳定。     

刈割茬次对饲药兼用金荞麦产量和质量的影响

目的 以2个金荞麦新品系为研究对象,探讨不同刈割茬次对饲药兼用金荞麦产量及品质的影响。方法 对金荞麦饲草的鲜质量、干质量、粗蛋白和粗纤维含量,以及根茎产量和表儿茶素含量进行分析比较。结果 在相同刈割茬次条件下,金荞麦品系1和2在饲草的产量、粗蛋白和粗纤维含量,以及根茎的产量和表儿茶素含量差异无统计学意义;随着刈割茬次的增加,金荞麦饲草粗蛋白含量显著增加,而粗纤维含量则显著降低（P<0.05）;随着刈割茬次的增加,根茎产量显著降低（P<0.05）,对其表儿茶素含量无显著影响。结论 在平衡饲草和根茎的产量和品质时,金荞麦最佳刈割茬次为2~3次。     

高效液相色谱法(HPLC)测定龙香膏中儿茶素和表儿茶素的含量

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立同时测定龙香膏中儿茶素和表儿茶素含量的方法。方法:采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-50 mmol·L~(-1)磷酸二氢钾水溶液(8:92)为流动相,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长280 nm,柱温35℃,进样体积5μL。结果:儿茶素和表儿茶素色谱峰分离良好,无明显干扰峰;儿茶素浓度在1.5~75.0μg·mL~(-1)(r=0.9998),表儿茶素浓度在1.0~50.0μg·mL~(-1)(r=0.9999)范围内峰面积积分与样品浓度线性关系良好;儿茶素平均加样回收率为101.52%,RSD为3.21%,表儿茶素平均加样回收率为99.7%,RSD为2.49%;受试样品在24 h内儿茶素和表儿茶素含量无明显变化。3批受试样品的儿茶素平均含量为5.34 mg·g~(-1),表儿茶素平均含量为4.27 mg·g~(-1)。结论:本实验建立的HPLC法经方法学验证,可用于龙香膏中儿茶素和表儿茶素含量的同时测定。     

不同型号大孔树脂对金荞麦中有效成分的纯化工艺研究

目的：研究不同型号的大孔树脂对金荞麦中有效成分的纯化效果,以寻找最佳型号的大孔树脂。方法：以表儿茶素、金E含量和浸膏率为指标,结合HPLC指纹图谱,选择最佳型号大孔树脂。结果：AB-8型大孔树脂对表儿茶素洗脱率为89.78%,对金E洗脱率为93.04%。HPLC指纹图谱共有峰面积比较表明AB-8型大孔树脂更适合用于金荞麦有效成分的纯化。结论：采用AB-8型大孔树脂纯化金荞麦中有效成分是可行的。     

HPLC同时测定金养麦中原儿茶酸和表儿茶素的含量

目的：建立HPLC法同时测定金荞麦中原儿茶酸和（-）-表儿茶素含量的方法.方法：采用反相高效液相色谱法,Thermo ODS-2HYPERSIL（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.3％冰乙酸溶液梯度洗脱,检测波长：原儿茶酸为255nm、（-）-表儿茶素为280nm,流速为1.0ml·min-1,柱温30℃.结果：原儿茶酸进样量在0.0444-0.8880μg线性关系良好（r=0.9999）,加样回收率（n=6） 103.0％,RSD为1.5％;（-）-表儿茶素进样量在0.05355-1.071μg线性关系良好（r=1.0）,加样回收率（n=6）98.5％,RSD为1.7％.结论：该方法准确、快速,可为全面评价金荞麦质量提供依据.     

表儿茶素为指标的金荞麦分散片含量测定的研究

目的：研究金荞麦分散片的处方,并确定以表儿茶素为指标的分散片含量测定前处理工艺。方法：用预试验和正交试验筛选出优化处方;以表儿茶素为指标,依据正交试验设计法,重点考察乙醇浓度、料液比、提取时间3个因素对醇提效果的影响,应用高效液相色谱技术分析提取效果。结果：金荞麦分散片的崩解时间小于3min,且能均匀分散,并符合《中华人民共和国药典》（2010年版）的标准。醇提法最佳工艺是乙醇浓度60％、料液比1：15、提取时间1h;以最终工艺测得每片表儿茶素的含量为151．35g,相当于浸膏粉0．154g。结论：金荞麦分散片的处方工艺简便可行;优化的醇提法不受辅料干扰,合理可靠,适用于分散片含量测定项下的样品前处理。     

金荞麦多酚分散片处方优选及溶出度研究

目的:优选金荞麦多酚分散片的处方并对其溶出度进行考察。方法:以崩解时间为指标,采用单因素试验法优选填充剂和崩解剂种类,采用正交设计优选各辅料的用量。以表儿茶素和原花青素为指标对金荞麦多酚分散片的溶出度进行考察。结果:处方组成为主药34.2%,交联聚乙烯吡咯烷酮15.0%,微晶纤维素50.0%,硬脂酸镁0.8%,该处方压片后崩解时间小于3 min,表儿茶素和原花青素在3 min内溶出率均达85%以上,原花青素在5 min内、表儿茶素在10 min内溶出率达100%。结论:此处方工艺配比所制备的金荞麦多酚分散片溶散迅速,溶出特性较好。     

反相HPLC测定金荞麦药材和饮片中表儿茶素的含量

 目的 通过研究,以期建立金荞麦药材和饮片中指标成分的含量测定方法。方法 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.004%磷酸溶液（10∶90）为流动相;检测波长为280 nm;对11批金荞麦药材和12批饮片中的表儿茶素进行了含量测定。结果 11批药材除1批逸出值外,其余10批的平均含量（以干品计）为0.050 4%;12批饮片的平均含量（以干品计）为0.030 6%。结论 所建方法稳定可靠,简单易行。建议以总平均含量的60%,即0.030%作为金荞麦药材中表儿茶素的最低限量纳入质量标准（草案）正文含量测定项下;以总平均含量的70%,即0.020%作为金荞麦饮片中表儿茶素的最低限量纳入质量标准（草案）含量测定项下。     

金荞麦分散片的研究及与薄膜衣片溶出度的比较

目的:制备金荞麦分散片,建立质量控制方法,并与市售薄膜衣片的溶出度进行比较。方法:使用湿法制粒制备金荞麦分散片,并参照2010版《中华人民共和国药典》标准中分散片的各项指标进行检测,以纯水为介质,采用小杯法测定表儿茶素在金荞麦分散片与薄膜衣片中的溶出度,计算溶出参数m(线性方程斜率值)、T50(累积溶出量为50%时的时间)、Td(累积溶出量为63.2%时的时间)。结果:制备的金荞麦分散片符合要求,金荞麦分散片的溶出速度比薄膜衣片快。结论:所制备的分散片处方合理,不仅崩解符合要求,而且在10 min时累积溶出率达到75%,明显优于市售片,为将金荞麦制备成分散片提供依据。     

金荞麦饮片液相色谱含量测定及指纹图谱研究

目的：研究金荞麦饮片高效液相色谱指纹图谱及含量测定方法。方法：采用高效液相色谱-电化学检测法,Diamonsil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱；流动相为甲醇-0.1 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 2.5)；流速1.0 mL·min^-1；柱温35 ℃；参比电极为ISAAC(in-situ Ag/AgCl)；工作电极为玻碳电极；辅助电极为铂电极。结果：建立了金荞麦饮片高效液相色谱图谱,发现了6个色谱峰为共有峰,其中4个分别为没食子酸,原儿茶酸,原儿茶醛和表儿茶素的色谱峰。原儿茶酸的质量分数为0.004%～0.05%,原儿茶醛的质量分数为0.003%～0.015%。结论：该方法可用于金荞麦饮片质量控制。