常规HE制片中组织脱水不良的再处理

病理技术工作中 ,组织脱水彻底与否是常规ＨＥ制片程序中切片质量优劣的关键。临床上常有因脱水不彻底 ,导致切片质量差 ,而影响病理诊断。我们在实践中摸索出了一个切实可行的处理方法 ,现报告如下。1　方　法将原脱水不良的组织蜡块重新溶解 ,取出组织块放入二甲苯ⅠⅡ各一瓶中溶解包裹在组织块表面的石蜡 ,溶解时间每瓶约 5～1 0分钟 (具体时间视溶液的新旧及气候温度具体制定 ) ,滴净组织块上的二甲苯 ,然后移入无水酒精ⅠⅡ及 95 %酒精ⅠⅡ各一瓶中洗净二甲苯 ,每瓶酒精清洗时间为 1～ 2分钟 ,然后顺着脱水透明浸蜡的程序重新脱水透明…     

胃黏膜切片制作中的包埋技术

为胃镜下取得的胃肠黏膜组织制作一张质量高的石蜡切片 ,组织的包埋也是一个关键。现就有关包埋法进行探讨。1　材料与方法　　经胃镜取得黏膜组织后 ,按切片ＨＥ标本的常规制作过程中 ,需注意以下几点。1.1　固定与标记　将组织标本放到滤纸小片上 ,立即置于 10 %甲醛混合固定液中 (40 %甲醛 10ｍｌ加蒸馏水 90ｍｌ与 95 %酒精 2 0ｍｌ)。如送检组织太小 ,为避免脱水后标本不容易看清 ,可用伊红酒精液滴 1～ 2滴作为着色标记。1.2　脱水与透明　用 95 %酒精两道 ,次日用纯酒精两道脱水 ,各 35～4 0ｍｉｎ。用二甲苯两道透明各 10ｍｉｎ。1.…     

小鼠创伤愈合新生皮肤组织切片的制备

目的 探索有效的小鼠创伤愈合新生皮肤石蜡组织切片制作方法.方法 控制HE组织切片制作中关键步骤时间来对比不同方法之间的制片效果.结果 采用4%多聚甲醛中加0.04%戊二醛固定.中性PBS液冲洗组织切片10min,70%酒精过夜,80%、90%、95%酒精脱水各2h,无水乙醇脱水1h,在二甲苯中透明共15min,4步浸蜡法制作出的组织切片形态完整,质量较好.结论 摸索的新方法较一般常规组织切片制作方法不仅节省时间,更重要的是克服了一般常规方法制作出的新生皮肤组织切片组织破碎的问题,且重复性好.     

高尔基法银浸染的脑组织振荡切片机切片法

显示大小脑脊髓的神经元和神经胶质细胞常采用高尔基银浸润技术,经火棉胶包埋,制成切片。在制作过程中,由于要经过各级酒精和乙醚以及各级火棉胶润浸包埋,步骤多、时间长,且又耗费况100%     

石蜡包埋制作全喉大切片的体会

大切片的制作通常用火棉胶包埋，但其过程复杂，且切片太厚（400μm），不便于组织形态观察。我们用石蜡包埋法制作全喉标本切片，效果满意。1 材 料 尸检切取的全喉和手术切除的喉癌标本，按需要从水平、冠状、矢状面三个方向把喉切开，取材的厚度在3cm左右。用15%的甲醛固定。2 方 法2.1 脱钙 对已有钙化的甲状软骨用5%的硝酸水液脱钙，时间限为72h以内，脱钙后用流水充分水洗。2.2 脱水透明 将全喉放在有盖的容器内依次进行脱水与透明。70%、80%、90%酒精各脱水12h。两次100%洒精各脱水6h；两次二甲苯透明各6h。3.3 浸蜡、包埋 经透明后,…     

病理HE切片制片中的技术改进

病理ＨＥ切片技术是临床病理检验和病理学教学中不可缺少的一个组成部分 ,切片的好坏将会直接影响到诊断结果和教学效果[1] 。为了使切片质量不断提高 ,笔者在平时的制片中通过反复推敲 ,对一些环节如烤片和透明过程等加以改进 ,取得较为满意的效果 ,现介绍如下。1　材料和方法将取材组织经常规 10 %甲醛溶液固定 ,流水冲洗 ,酒精依次脱水 ,二甲苯溶液透明和石蜡浸蜡 ,最后进入包埋切片[2 ] 。将切取的石蜡片 (3μｍ～ 4 μｍ)平摊于 4 5℃左右的恒温水箱中 ,及时捞片 ,置于晾干架上 ,以 2 2 0Ｖ ,4 50Ｗ电吹风对组织切片热吹风 3～ 4ｍｉｎ…     

DAB法显示脊髓微血管的实验研究

该文运用 DAB染色法显示大白兔脊髓微血管形态 ,发现用 1 0 %甲醛磷酸盐缓冲液固定的标本血管显色好 ,并在 4℃下经过 7～ 1 0天后仍能正常显色 ,标本直接冰冻切片显色效果差 ;切片后直接贴在载玻片上进行滴染显色不易产生皱折 ,节省染色剂。本实验操作简单易行 ,可用于脊髓组织微血管形态学研究。     

介绍一种予防切片退色的方法

在病理制片过程中,有时发生切片退色,使切片模糊不清,呈云雾状。其原因是在封片之前无水酒精不纯、含有水,或是二甲苯使用时间过长,失去脱水能力,为了防止切片退色,除及时更换试剂外,可在脱水的透明环节之间,把切片置于二     

病理切片中松节油代替二甲苯脱蜡

目前一般医院对石蜡切片常用二甲苯脱蜡 ,但是二甲苯可引起部分人粒细胞减少 ,对人体健康有一定的影响 ,近3年来 ,我科采用松节油替代二甲苯脱蜡制片近 80 0 0张 ,取得了较满意的效果 ,现报告如下。方法与结果一、经自动脱水机处理的组织石蜡包埋制片。二、将石蜡切片放入 6 0℃恒温烘箱内烤 1～ 2小时 ,至脱蜡前 ,将烘箱温度提高至 75℃～ 85℃ ,烘烤 2～ 3分钟。三、烘好的切片放入松节油Ⅰ、Ⅱ两缺中各脱蜡 10分钟。四、自 10 0 %酒精 1分钟 ,95 %酒精 1分钟 ,80 %酒精 1分钟逐渐洗去松节油。五、自来水洗 1分钟后 ,放入苏木精中染色 3～…     

作过染色程序的自动放射摄影相

(忄有)性层,石腊切片如平常一样经过两次的二甲苯和两次纯洒精;火棉切片则从80％酒精 经95％即时入纯酒精后,如是浸入用等量纯酒精乙醚配的0.3％火棉胶内30秒钟,干燥后,在防止灰尘下一直保持到第二天。     

切片组织快速脱水法

酒精在制作切片过程中是最普通应用的脱水剂。在酒精作为脱水剂时,往往从较低浓度开始,然后逐步增加其浓度,一般从70%或80%的浓度开始,经过90%、95%以至无水酒精,通常一次切片染色仅脱水时间就需两天左右,为了节省时间,笔者在实践过程中,摸索出切片组织快速脱水法,现介绍如下。一、脱水剂的配制     

几种骨片不同制作方法的比较

骨为坚硬的结缔组织,其中含有大量的钙盐。骨片的制作方法有多种,诸如磨片、石蜡切片、火棉胶包埋切片以及冰冻切片等。染色方法也很多,如 ＨＥ染色、大力紫染色、硫堇一苦味酸染色等。 过去我们制作骨片,一般都是采用磨片。磨片的特点是结构清晰,利于观察;但其缺点也较多,一是费时费力,二是标本较厚、干燥较慢,且在使用时极易压碎。火棉胶包埋的骨切片步骤繁琐,应用试剂多,工作人员接触毒物机会也较多,对人体健康有害。石蜡骨切片经脱钙后,骨组织要经梯度酒精脱水,组织往往容易变脆变硬,切片比较困难。块染的石蜡骨切片虽然…     

韦格特神经纤维染色方法的改进

韦格特染色法可用于神经系统教学标本的制作 ,主要显示人脑和脊髓中神经纤维的分布 ,特别是纤维束的位置和进程 ,其效果比较稳定、可靠。但也存在耗时和耗料等不足。为此 ,笔者对韦格特染色法进行了改进 ,现报道如下。1　方　法　　取成人脑干 ,分切为 3段。用流水冲洗 3ｄ后 ,以 10 %甲醛液固定 2ｄ。预染时间依脑干大小而定 ,成人脑干一般为 8～ 10ｄ。乙醇梯度脱水从5 0 %～ 10 0 %逐渐增加 ,每个梯度 2ｄ。入乙醚醇1ｄ后用 5 %火棉胶液浸 15ｄ、8%火棉胶液浸30ｄ、15 %火棉胶液浸 60ｄ后 ,15 %火棉胶液包埋。切片厚度为 4 0～ 60 μｍ。…     

聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳胶板干燥保存法及幻灯片的制作

聚丙烯酰胺梯度凝胶板经95%、100%乙醇脱水,然后可以经过两种方式处理:①自然干燥,再挂上一层火棉胶。②脱水后,流水冲至透明,再经二甲苯脱去一部分剩余水分,自然干燥。得到的干板可以长期保存。而透明后的干板又可制成幻灯片,供实验、教学等方面用。此法也可用于保存单一浓度的聚丙烯酰胺凝胶板。     

单层扁平上皮银法中显示方式的改良

目的:探讨单层扁平上皮银法中显示方式的改良在实际应用中的效果。方法:将取好的狗大网膜放入培养皿铺平浸于1%硝酸银溶液内,放置日光或阳光照射,至组织膜呈棕黄色;经蒸馏水洗后用苏木素染细胞核,10min后,流水冲洗;经蒸馏水洗后盐酸酒精分色,30s～1min,流水冲洗后,再蒸馏水洗,揭开大网膜上面一层剪成小块,铺在载玻片上凉干,树胶封片。结果:单层扁平上皮细胞边界呈锯齿状,棕黄色,细胞核呈紫蓝色。结论:经过苏木素复染后的细胞核呈紫蓝色,没有银的沉淀,使细胞形态更为清晰。较之旧法,效果甚佳。     

快速冰冻切片制作方法及经验

目的：探讨优质冰冻切片的制作经验。方法：新鲜标本取材后,冷冻托涂少量胶水,组织按包埋面平整放置于冷冻托上速冻,冻好后立即切片,粗修出组织最大面,调节好防卷板,待组织切片平铺于刀架贴面上,常温粘附载玻片贴片,立即于95％酒精固定,水洗,改良 Gill 苏木素2min,水洗,温水蓝化,伊红3－5s,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。结果：切片完整,厚薄均匀,无褶无刀痕,组织内无冰晶;染色核浆,红蓝对比分明。结论：高质量冰冻切片的关键因素是取材、冷冻的温度和时间、切片的技巧、固定及染色方法。     

病理切片HE染色可不用酒精脱水

我院的病理切片HE染色不用各级酒精脱水。其步骤之脱蜡、去苯、染色操作是一样的。当伊红染好后。水洗放入60℃左右温箱中(一般各病理科的温箱或烤箱的温度均调在60℃左右)烘15分钟,即可放入石碳酸——二甲苯混合液中,下步透明、封固操作不变。经过同一组织蜡块切的片子分别用各级酒精脱水与用温箱烘干。在显微镜下两者用测微器测量证明,组织细胞的大小和形态不变,不影响制片质量。经过两年的染色脱水烘干方法,体会有以下优点: 一、节约大量的无水酒精。(据我院使用情况每年至少可节约24000毫升无水酒精。) 二、组织切片附着在玻璃片上,少浸几次液体可减少脱片的机会。三、避免因脱水的各级酒精不纯,当切片从酒精移入二甲苯时,而产生白色云     

组织脱水不良的补救

病理组织切片质量的优劣 ,对于临床病理诊断的准确性至关重要 ,但往往因各种不同的原因直接影响着病理切片的质量 ,其中脱水不良是较常见的一种。造成脱水不良的因素很多 ,如取材时组织切取太大、太厚 ;标本固定不充分 ;标本组织结构较特殊 ;脱水液种类选择不当或因脱水液使用过久使用率又高 ,引起脱水液被稀释 ,有效浓度降低等。本文旨在探讨组织脱水不良后的补救方法。1　材料与方法1.1　材料　全自动脱水机 (美国 L eica公司 ) ,70 %～ 10 0 %梯度酒精 7罐 ,二甲苯 (AR) 2罐 ,5 6～ 5 8℃切片石蜡 3罐。正丁醇 (AR) 15 0 m L分成 、 …     

悬滴法在免疫组织化学实验中的应用

悬滴法用于免疫组化反应的思路始于细胞悬滴培养技术 ,在培养组织细胞的过程中 ,为节约培养液 ,常在组织细胞上加微量培养液 (40 μＬ)后翻转培养瓶使液体悬于顶部 .在免疫组化反应过程中 ,当在切片上加抗体时常常又遇抗体扩散及流失现象 ,因而给免疫组化反应结果带来了一些不稳定因素 .本文参考细胞悬滴培养的思路尝试将悬滴技术应用于免疫组化反应中获得成功 .现简介如下 .1　材料和方法样本获取 :取成年猫Ｌ5 脊髓常规脱水后 ,石蜡包埋切片 (5 μｍ) .常规二甲苯脱蜡水化后用于免疫组织化学染色用悬滴法进行免疫组化染色 :一抗用ＮＴ3兔…     

快速石蜡包埋切片法代替冰冻切片法的初步体会

近几年来我科采用提高温度的方法 ,进行快速石蜡包埋切片法 ,以替代冰冻切片法。经 10 0多例的病理检验证明 ,结果满意 ,一般 30～ 40分钟可出诊断结果 ,而反复切多块检验约需 40～ 6 0分钟。1　方法要点1 1　试剂　 (1)混合固定液 :含 40 %甲醛液 10ｍｌ,95 %酒精 85ｍｌ,冰乙酸 5ｍｌ,三种药液混合而成 ;(2 )无水乙醇 ;(3)纯丙酮 ;(4)二甲苯。1 2　方法　 (1)试剂置温箱预热温度为 80℃～ 90。℃ ;(2 )标本取材 :①快检手术标本与普通石蜡切片取材大小相似 ,煮沸固定 1分钟 (混合固定液 ) ,取出后修整 (因高温固定 ,组织块变形 )比普通石…