lncRNA HCG18靶向miR-34b-5p/FOXP1轴促进骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的：探讨长链非编码RNA(lncRNA)人类白细胞抗原复合体18(HCG18)对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法：收集47例骨肉瘤组织及对应瘤旁组织,RT-qPCR法检测组织中HCG18和miR-34b-5p表达,Pearson相关分析评价骨肉瘤组织中HCG18和miR-34b-5p表达的相关性。体外培养骨肉瘤U2OS细胞,分别转染si-HCG18、miR-34b-5p mimics、共转染si-HCG18与anti-miR-34b-5p或miR-34b-5p mimics与pcDNA-FOXP1后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,划痕实验和Transwell分别检测细胞迁移和侵袭,蛋白印迹法检测细胞中FOXP1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证HCG18和miR-34b-5p及miR-34b-5p和FOXP1调控关系。结果：骨肉瘤组织中HCG18表达量高于瘤旁组织(P<0.01),而miR-34b-5p表达量低于瘤旁组织(P<0.01)。Pearson相关分析结果显示,骨肉瘤组织中HCG18与miR-34b-5p的表达呈负相关关系(r=-0...     

基于GEO数据库的银屑病lncRNA筛选与ceRNA网络构建

目的：构建银屑病竞争性内源性RNA(ceRNA)调控网络，为银屑病发病机制提供生物信息学参考。方法：基于基因表达综合数据库(GEO)筛选差异表达的lncRNA并通过相关性分析找到与其相关的编码基因，进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。使用lncBase数据库预测lncRNA的靶向微小RNA(microRNA, miRNA);使用TargetScan数据库预测编码基因靶向miRNA;利用Cytoscape构建ceRNA网络。结果：本研究基于差异表达的lncRNA构建出6个lncRNA(LIN01094、LINC01215、KLF-AS1、TINCR、EMX2OS、C14orf132)介导的lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络，显示这些lncRNA可能通过影响细胞周期、蛋白酶体、DNA复制、细胞因子-细胞因子受体的相互作用、FoxO信号通路等发挥作用。结论：差异表达的(lncRNA LIN01094、LINC01215、KLF-AS1、TINCR、EMX2OS、C14orf132)可能作为ceRNA发挥调控功能，参与银屑病发病。     

非小细胞肺癌组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达与患者生存期的关系

目的 探究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1、miR-1913的表达与患者生存期的关系。方法 选取2017年11月—2019年11月滨州医学院烟台附属医院肿瘤中心收治的NSCLC患者100例癌组织和癌旁组织作为研究对象。根据术后3年预后情况分为生存组58例和死亡组42例,采用实时荧光定量—聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达水平;Pearson法分析NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1与miR-1913表达水平的相关性;用Kaplan-Meier法分析NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达与预后的关系;Cox分析NSCLC患者预后的影响因素。结果 与癌旁组织比较,NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-1913表达水平降低(t/P=11.439/<0.001、17.709/<0.001);Target Scan Human网址预测lncRNA FOXD2-AS1与miR-1913间存在结合位点;...     

lncRNA ACTA2-AS1通过靶向下调miR-586 表达抑制子宫内膜癌生物学行为的研究

目的 分析长链非编码RNA(lncRNA)ACTA2-AS1在子宫内膜癌中的表达,探讨ACTA2-AS1对子宫内膜癌细胞周期和迁移的作用及其分子机制。方法 采用GEPIA数据库分析ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织中的表达水平。qRT-PCR检测ACTA2-AS1在子宫内膜癌细胞系和正常子宫内膜上皮细胞ESC中的表达水平。分别转染空白质粒(NC组)和ACTA2-AS1过表达质粒(ACTA2-AS1组)至AN3CA细胞。流式细胞法和细胞划痕实验分别检测ACTA2-AS1对子宫内膜癌细胞AN3CA的G₀~G₁期细胞比例和迁移能力的影响。LncBase v.2数据库预测ACTA2-AS1的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证ACTA2-AS1对靶基因的调控作用。qRT-PCR或Western blot法检测磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)和PI₃K-AKT-mTOR信号通路蛋白表达。结果 GEPIA数据库显示ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01)。ACTA2-AS1在子宫内膜癌细胞系中的表达水平显著低于ESC细胞(P<0.05),ACTA2-AS1表达最低的细胞系是AN3CA(P<0.01)。与NC组比较,上调ACTA2-AS1表达可以增加G₀~G₁期细胞比例(P<0.01)。NC组和ACTA2-AS1组AN3CA细胞迁移率分别为69.54%±6.64%和40.46%±3.76%,上调ACTA2-AS1可以抑制AN3CA细胞迁移能力(P<0.01)。ACTA2-AS1能够靶向结合miR-586(P<0.01)。与NC组比较,上调ACTA2-AS1可明显抑制miR-586表达(P<0.01),PTEN基因表达明显增加(P<0.01),PI₃K-AKT-mTOR信号通路蛋白表达降低。结论 ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织和细胞系中表达降低。对于存在PI₃K-AKT-mTOR信号通路的子宫内膜癌类型,上调ACTA2-AS1表达通过靶向调控miR-586,促进PTEN基因表达和抑制PI₃K-AKT-mTOR信号通路活化,抑制子宫内膜癌细胞周期和迁移。     

miR-144通过影响TLR/MyD88通路抑制肝癌SMMC-7721细胞侵袭

目的 探讨miR-144基因过表达对肝癌SMMC-7721细胞侵袭及Toll样受体（TLR）/髓样分化因子88（MyD88）免疫通路的影响。方法 培养人正常肝细胞HL-7702,肝癌细胞系SMMC-7721,采用荧光实时定量PCR法检测两组细胞miR-144基因表达差异,将SMMC-7721细胞分为空白组、miR-144 NC组、miR-144 mimics组,倒置荧光显微镜检测转染效率,qRT-PCR法检测转染后各组miR-144基因表达情况,通过细胞计数试剂盒（CCK8）法各组SMMC-7721细胞存活情况,通过Transwell法检测各组SMMC-7721细胞侵袭情况,应用免疫印迹法检测各组侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）以及TLR/MyD88通路相关蛋白表达情况,观察添加40 μmol/L MyD88抑制剂TJ-M2010-2组对SMMC-7721细胞TLR/MyD88通路相关蛋白表达情况。结果 与正常组相比,SMMC-7721组miR-144基因相对表达量显著降低（P<0.05）;与空白组、miR-144 NC组相比,miR-144 mimics组miR-144基因表达显著升高（P<0.05）;CCK-8实验显示,与对照组、miR-144 NC组相比,miR-144 mimics组转染48、72、96 h后细胞存活率显著降低（P<0.05）;与空白组、miR-144 NC组相比,miR-144 mimics组侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低（P<0.05）;与空白组、miR-144 NC组相比,miR-144 mimics组、TJ-M2010-2组Toll样受体4（TLR4）、MyD88、磷酸化核因子-κB（p-NF-κB）/核因子-κB（NF-κB）蛋白表达显著降低（P<0.05）,miR-144 mimics组与TJ-M2010-2组TLR4、MyD88、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 miR-144过表达可能通过抑制TLR/MyD88通路转导降低SMMC-7721细胞存活、抑制SMMC-7721细胞侵袭。     

miR-3074通过靶向EPS8基因对宫颈癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨miR-3074通过靶向调节表皮生长因子受体通路底物8(epidermal growth factor receptor substrate 8,EPS8)基因表达对宫颈癌细胞增殖和侵袭的影响。方法 应用OncoLnc在线数据库分析miR-3074表达水平与宫颈癌患者总生存期的关系。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测miR-3074在宫颈癌细胞系(SiHa、HCC94、C33A、HeLa)和正常宫颈上皮细胞H8中的表达。选取miR-3074表达最低的细胞系,分别转染对照模拟物(对照组)和miR-3074模拟物(miR-3074组)。CCK-8法和Transwell实验分别检测细胞增殖活力和侵袭能力。生物信息学软件RNAhybrid预测miR-3074的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-3074与靶基因的靶向关系。qRT-PCR和Western blot法检测miR-3074对靶基因表达的影响。结果 miR-3074表达水平较高的宫颈癌患者总生存期长于miR-3074表达水平较低的患者,差异有统计学意义(P<0.01)。与H8细胞比较,宫颈癌细胞系中miR-3074表达降低(P<0.05),miR-3074表达最低的细胞系是HCC94(P<0.01)。对照组和miR-3074组miR-3074表达分别为1.03±0.17和13.49±2.66,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较,miR-3074组HCC94细胞增殖活力降低(P<0.05),细胞侵袭能力降低(P<0.01)。miR-3074能作用于EPS8mRNA的3′非翻译区(P<0.01)。与对照组比较,miR-3074组EPS8基因表达显著降低(P<0.01)。结论 miR-3074在宫颈癌细胞系中表达下调,miR-3074能够抑制宫颈癌HCC94细胞的增殖和侵袭,其机制可能与靶向抑制EPS8表达有关。     

lncRNA MALAT1、miR-146b-5p膀胱癌组织的表达变化

目的 分析lncRNA MALAT1、miR-146b-5p膀胱癌(BC)组织的表达变化。方法 选取2017年1月6日至2020年1月6日本院收治的90例膀胱癌病患为研究样本，病患接受手术治疗疾病，留取膀胱癌组织、癌旁组织。应用荧光实时定量PCR法对于以上组织内的lncRNA MALAT1、miR-146b-5p进行测定，分析以上物质在BC组织内的表达变化。结果 癌旁组织和BC内miR-146b-5p、lncRNA MALATI相对表达量对比具有统计学意义(P<0.05);BC淋巴结转移和miR-146b-5p、lncRNA MALATI表达存在相关性；BC组织内的miR-146b-5p、lncRNA MALAT1表达情况呈负相关(P<0.05)。结论 膀胱癌组织内的miR-146b-5p表达降低，lncRNA MALAT1表达上升。以上两者负相关。这种情况的出现和病患淋巴结转移有关联性，日后其可能成为诊治膀胱癌疾病的重要标记物。     

食管鳞癌中miRNA-mRNA调控网络的构建和信号通路分析

目的：构建食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中miRNA-mRNA的调控网络,对候选基因进行基因本体（gene ontology,GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析,为ESCC发生发展的分子机制研究提供一定的理论指导。方法：从GEO数据库中筛选ESCC组织中的差异表达miRNA（differentially expressed miRNA,DE miRNA）和差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）,并用在线数据库预测调控DE miRNA的靶基因。对DE miRNA的靶基因及DEGs取交集得到候选基因,使用DAVID在线数据库对其进行GO富集分析和KEGG分析,并运用GEPIA网站进行生存分析。结果：筛选出4个DE miRNA（miR-34c-5p、miR-944、miR-133b、miR-139-5p）,分析DE miRNA在ESCC组织和正常食管组织中的表达情况。候选基因GO富集分析表明其主要参与细胞增殖、凋亡、迁移等过程,KEGG分析表明其主要富集在PI3K/AKT、Rap1、P53信号通路,生存分析发现候选基因中的COL1A1、SOX4与食管癌较差的无病生存期（disease-free survival,DFS）有关。结论：miR-34c-5p、miR-944、miR-133b和miR-139-5p在ESCC中存在差异表达,可能在食管鳞癌的发生发展中发挥作用,且候选基因COL1A1、SOX4与食管癌较差的无病生存期相关。     

miR-519b-3p调控IL-6/STAT3通路对宫颈癌细胞凋亡、迁移、侵袭的影响

目的探讨miR-519b-3p调控IL-6/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路对宫颈癌细胞(SiHa)凋亡、迁移、侵袭的影响。 方法qRT-PCR检测miR-519b-3p在宫颈癌组织中的表达。SiHa细胞分为miR-NC组、miR-519b-3p组、miR-NC+RhIL-6组、miR-519b-3p+RhIL-6组。流式细胞术评估SiHa细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。Western blotting检测B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Bcl相关x蛋白(Bax)、STAT3和p-STAT3蛋白水平。 结果与癌旁组织比较,宫颈癌组织miR-519b-3p表达下调(P＜0.05)。SiHa细胞凋亡率、Bax和E-cadherin蛋白水平miR-519b-3p组高于miR-NC组,miR-NC+RhIL-6组低于miR-NC组,miR-519b-3p+RhIL-6组低于miR-519b-3p组(P＜0.05)。SiHa细胞迁移数、侵袭数、Bcl-2、N-cadherin、p-STAT3蛋白水平miR-519b-3p组低于miR-NC组,miR-NC+RhIL-6组高于miR-NC组,miR-519b-3p+RhIL-6组高于miR-519b-3p组(P＜0.05)。 结论miR-519b-3p通过抑制IL-6/STAT3通路来抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭,并增加细胞凋亡。     

lncRNA MNX1-AS1在非小细胞肺癌中的表达及调控PI3K/AKT通路对癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1(lncRNA MNX1-AS1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的生物学功能及可能的作用机制。方法:选取2017年6月至2019年3月期间在本院进行手术治疗的75例NSCLC患者癌组织及癌旁组织标本,RT-qPCR法检测标本lncRNA MNX1-AS1表达水平,分析lncRNA MNX1-AS1表达与NSCLC临床病理特征及预后的相关性;体外培养NSCLC细胞系PC-9细胞,分别转染si-MNX1-AS1(si-MNX1-AS1组)、si-NC(si-NC组),MTT法及EdU实验检测各组PC-9细胞增殖;Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭;Western blot实验检测PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果:lncRNA MNX1-AS1在NSCLC癌组织与细胞系中表达水平显著升高(P<0.05)。lncRNA MNX1-AS1表达与TNM分期和淋巴转移有关(P<0.05),Kaplan-Meier生存分析显示,lncRNA MNX1-AS1高表达组患者3年累积生存率显著低于低表达组,差异有统计学意义(...     

微阵列芯片分析miR-125b-5p在胃癌中的表达及临床意义

目的: 运用生物信息学技术分析胃癌中microRNA表达特征。方法: 使用R语言软件包分析GEO芯片数据集的两个子集中的miRNA表达量的差异;采用qRT-PCR技术检测本院60例胃癌患者癌组织及20例胃癌手术患者癌旁组织中miR-125b-5p的表达量,统计分析其表达特征与分化程度、TNM分期、性别、年龄、家族史及肿瘤直径之间的关系。结果： miR-125b-5p在GSE93415和GSE99415中的表达均上调,且其在胃癌组织与癌旁胃组织表达量差异具有统计学意义（P<0.05）。使用qRT-PCR验证了miR-125b-5p在胃癌组织中的表达高于癌旁组织的趋势,miR-125b-5p表达量与TNM分期和浸润程度有关（P<0.05）,与年龄、性别、家族史、肿瘤直径和分化程度均无关（P>0.05）;高表达miR-125b-5p的胃癌患者生存期明显缩短。结论： 胃癌组织miR-125b-5p高表达,且与胃癌TNM分期、浸润程度及总生存率有关。     

子痫前期相关miR-23b-5p靶基因的预测及生物信息学分析

目的预测并对子痫前期相关miR-23b-5p的候选靶基因进行生物信息学分析,为miR-23b-5p的机制研究及其靶基因的实验验证提供理论基础。方法在公共基因芯片数据库GEO(Gene Expression Omnibus)中选择子痫前期胎盘脐血miRNA差异表达的数据集GSE119799,选择表达显著下调的miR-23b-5p作为研究对象;使用在线分析网站RNA22-HAS、TargetScan及miRDB分别预测miR-23b-5p的靶基因,并利用韦恩图取其交集。使用富集分析网站DAVID对其交集靶基因进行GO功能富集分析、KEGG信号通路富集分析,并利用STRING网站对其进行蛋白质互作分析。结果获得的222个交集靶基因在生物过程上主要涉及干细胞分化的调控、胞质翻译负性调节等;在细胞组成上主要涉及膜外成分等;在分子功能上主要涉及翻译调节活性、金属离子结合等,主要参与MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路及钙信号通路等。蛋白互作分析显示TLR4是链接度最高的关键基因。结论 miR-23b-5p可能通过影响滋养细胞侵袭、内皮细胞凋亡及炎症免疫反应等来参与子痫前期的发生发展,本研究为后续的靶基因验证及子痫前期发病机制的研究提供了理论基础和研究思路。     

CXCR4、VEGF—C和VEGFR-3在宫颈癌原位灶和淋巴结中的表达及相互关系

目的：探讨CXCR4、血管内皮生长因子-c（VEGF—C）及受体VEGFR-3在原位灶及淋巴结组织中的表达与宫颈癌转移之间的关系。并探讨这几个因子之间的关系。方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应技术（RealTimePCR）,对40例宫颈癌病人的原位灶组织中的CXCR4基因和10例正常宫颈组织中的CXCR4基因进行定量检测。用免疫组化方法（SP法）检测40例宫颈癌病人的原位灶组织中及淋巴结组织中的VEGF—C及受体VEGFR-3的表达。结果：CXCR4基因的表达与分化程度、病理类型、年龄无关,与临床分期、淋巴结转移有关。VEGF—C阳性表达率与宫颈癌分期、分化程度、病理类型、年龄无相关。与淋巴结转移有相关,VEGF—C和VEGFR-3表达有显著相关性（P=0．022）。但VEGFR-3阳性表达率与淋巴结转移无相关。结论：CXCR4基因和VEGF—C、VEGFR-3两种蛋白表达均与宫颈癌的发生发展相关,VEGF—C和VEGFR-3表达有显著相关性。     

基于生物信息学探讨miR-15b-5p在头颈部鳞状细胞癌中的诊断价值和潜在作用机制

目的 采用生物信息学探讨miR-15b-5p在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的诊断价值和潜在作用机制。方法 (1)从GEO数据库和TCGA数据库中收集HNSCC的miR-15b-5p表达数据和/或HNSCC患者的临床资料。通过Meta分析miR-15b-5p在HNSCC中的表达情况及其诊断HNSCC的价值,使用SPSS 26.0软件分析miR-15b-5p表达水平与HNSCC患者临床特征的关系。利用实时荧光定量PCR检测HNSCC细胞和正常细胞中的miR-15b-5p表达水平。(2)通过miRWalk数据库和GEPIA2数据库分别筛选miR-15b-5p的下游靶基因和HNSCC的差异表达基因,对两者取交集后获得miR-15b-5p在HNSCC中的关键靶基因,对关键靶基因进行富集分析。(3)利用UALCAN数据库分析部分靶基因在HNSCC中的表达水平和甲基化水平。利用GEPIA2数据库分析部分关键靶基因表达情况与HNSCC患者无病生存期和总生存期的关系。结果 (1)Meta分析结果显示,miR-15b-5p在HNSCC中呈高表达(P<0.05)。与正常细胞相比,miR-15b-5...     

lncRNA FEZF1-AS1和IGF2BP1在肝癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨长链非编码RNA(lncRNA)Fez家族锌指蛋白1反义RNA1(FEZF1-AS1)和胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)在肝癌组织中的表达及临床意义。方法：收集行手术治疗的60例原发性肝癌病人的肝癌组织和癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织、癌旁组织中lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1 mRNA表达水平;免疫组织化学染色法检测肝癌组织、癌旁组织中IGF2BP1蛋白表达水平;分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1表达水平与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1表达与肝癌病人生存率的关系;Pearson分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1与IGF2BP1 mRNA表达水平相关性。结果：肝癌组织中lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1 mRNA表达水平及IGF2BP1蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.01);肝癌组织中lncRNA FEZF1-AS1与IGF2BP1 mRNA表达水平呈正相关(...     

MiR-4772通过调控卵巢癌免疫相关基因改变肿瘤免疫微环境

目的 运用生物信息学分析miR-4772对卵巢癌肿瘤免疫微环境的影响，并深入挖掘其潜在作用机制。方法 基于TCGA数据库的294例卵巢癌患者数据，计算并获得肿瘤组织PD-L1表达最佳阈值；筛选PD-L1高、低表达组之间的差异表达基因（DEG），采用相关性分析获得重要DEG，运用WGCNA分析从DEG筛选出权重基因和PD-L1相关miRNA，重要DEG和权重基因交集获得核心基因；通过ssGSEA分析探讨PD-L1表达和miR-4772表达对卵巢癌肿瘤免疫格局的影响；KEGG法分析核心基因所涉及的信号通路；PPI网络分析核心基因相互作用；采用生存分析确定生存相关的核心基因。采用GEO数据库的399例卵巢癌患者数据，结合miR-4772模拟物和抑制物转染SKOV3细胞并进行基因表达谱测序验证。结果 卵巢癌肿瘤组织PD-L1表达最佳阈值1.31582，即90%分位数；基于PD-L1高、低表达组，筛选出840个差异表达基因，包括549个基因显著上调，291个基因显著下调，20个重要DEG与miR-4772表达密切相关；WGCNA分析筛选48个miR-4772表达相关的权重基因；12个核心基因共存于重要DEG和权重基因。ssGSEA分析显示，PD-L1和miR-4772高表达组展现更活跃的肿瘤组织免疫浸润和功能活性。KEGG功能分析结果显示12个核心基因主要涉及免疫相关信号通路，PPI分析显示12个核心基因存在密切相互作用，CD96和TBX21表达水平与卵巢癌患者生存预后密切相关。SKOV3细胞转染miR-4772模拟物和抑制物后，基因表达谱测序结果显示12个核心基因和PD-L1表达水平随着miR-4772表达水平变化出现相应改变。结论 miR-4772通过作用于12个核心基因，对卵巢癌肿瘤免疫微环境结构组成发挥调控作用。     

自发性早产孕妇血清中子宫平滑肌功能相关miRNA的表达及生物学功能分析

 目的 基于自发性早产子宫平滑肌中调控失常的miRNAs,寻找早产孕妇血清表达失常的miRNAs。方法 采用病例-对照研究募集2017年5月—2018年8月于复旦大学附属妇产科医院就诊的妊娠24+0周至36+6周的产妇。病例组为自发性早产的入院患者,对照组为同时期门诊产检的正常孕晚期妇女,遵循伦理原则收集和随访其临床资料和血清样本。采用定制Real-time PCR检测两组血清中子宫平滑肌功能相关的8个miRNA的表达水平,寻找早产血清中差异表达的miRNA,并通过生物信息学工具探索差异表达miRNA可能的生物学通路。结果 共募集42例自发性早产孕妇（病例组）和32例非早产孕妇（对照组）。与对照组相比,miR-26b-5p和miR-936在病例组血清中的相对表达显著升高（FDR均为0.036）。生物信息分析提示：miR-26b-5p和miR-936可能通过PCNA、JARID2、PTEN和GATA4等靶分子调控血管上皮生长因子生成、细胞周期调控、磷脂酰肌醇3-激酶活性的正调节和凋亡通路等生物学通路。结论 自发性早产孕妇血清中miR-26b-5p和miR-936表达失常,血清miR-26b-5p和miR-936异常升高可能与自发性早产有关。     

circVRK1/miR-18b-5p轴调控结直肠癌细胞增殖、迁移和凋亡

目的 探讨circVRK1/miR-18b-5p轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 实时定量聚合酶链式反应检测53例结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中circ VRK1和miR-18b-5p表达。体外培养结直肠癌LoVo细胞,双荧光素酶报告基因实验验证circVRK1与miR-18b-5p的调控关系。分别转染pcDNA-circVRK1、miR-18b-5pinhibitor,或共转染pcDNA-circVRK1与miR-18b-5p mimic至LoVo细胞,采用CCK-8法、克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术、蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、迁移、凋亡、蛋白（cleaved-caspase3、Bax、Bcl-2）表达。结果 结直肠癌组织中的circVRK1表达量显著低于癌旁组织（P<0.05）,miR-18b-5p表达量显著高于癌旁组织（P<0.05）。circ VRK1可靶向结合miR-18b-5p,且过表达circVRK1抑制LoVo细胞中miR-18b-5p的表达。过表达circVRK1或敲减miR-18b-5p后,LoVo细胞的抑制率、凋亡率、cleaved...     

MicroRNA-33a 靶向 Twist1 调节宫颈癌细胞的侵袭

目的：研究转录因子Twist1在宫颈癌组织中的表达及其在宫颈癌细胞进展过程中的作用。方法：免疫组织 化学检测32对临床宫颈癌组织及正常宫颈组织中Twist1的表达情况,并运用RNA干扰技术沉默宫颈癌HeLa细胞内Twist1 后检测细胞的侵袭能力以及侵袭相关基因表达的变化;采用Pearson相关性检验分析Twist1与microRNA-33a(miR-33a)在宫 颈癌组织内的关系,并分析miR-33a对Twist1的调节关系及其对细胞侵袭能力的影响。结果：Twist1在宫颈癌组织和正 常宫颈组织中表达的阳性率分别为75.0%(24/32)和21.9%(7/32),二者表达差异具有统计学意义(P<0.05);Twist1 shRNA 能显著减低HeLa细胞的体外侵袭能力。宫颈癌组织中miR-33a的表达较正常组织减低(P<0.05),并与Twist1呈负相关 (r=−0.661,P<0.05);而宫颈癌细胞内过表达miR-33a可减低Tiwst1的表达(P<0.05),并减弱细胞的体外侵袭能力。结论： Twist1在宫颈癌的侵袭转移过程中发挥着重要的作用,miR-33a为上游调控Twist1的表达及细胞侵袭能力的抑癌基因。     

遗忘型轻度认知功能损害血浆中竞争内源性RNA网络构建及分析

目的 探讨阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease,AD）轻度认知功能损害阶段（amentia mild cognitive impairment,aMCI）血浆中的非编码RNA（noncoding RNA,ncRNA）功能失调与AD的病理生理相关性,并探讨潜在的AD生物标志物和发病机制。 方法 纳入金标准诊断的aMCI受试者5例和正常对照组（normal control,NC）5例,应用微阵列技术分析aMCI和NC血浆中长链非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）、微小RNA（microRNA,miRNA）和信使RNA（messenger RNA,mRNA）的表达谱,应用R软件筛选出差异表达的lncRNA、miRNA、mRNA,通过PicTar 2005、TargetScan 5.1和miRanda v5数据库对差异表达的RNA的关系进行分析,建立以上调lncRNA为中心的竞争内源性RNA（competing endogenous RNA,ceRNA）网络,并对其中相关差异表达的mRNA进行基因本体论功能富集和京都基因与基因组百科全书通路富集分析。 结果 在外周血浆中总共筛选出lncRNA 287个、miRNA 46个和mRNA 208个在aMCI和NC的表达差异有统计学意义（P＜0.05）,分别有lncRNA3个、 miRNA5个和mRNA7个参与构建了遗忘型轻度认知功能损害ceRNA调控网络。GO和KEGG结果显示差异表达mRNAs主要在RNA代谢过程、细胞质应激颗粒、转录调控因子活性等生物学过程,单纯疱疹感染通路、催产素信号通路和叶酸合成通路上显著聚集。 结论 不同的ncRNA参与AD的发病机制,构建的ceRNA网络有助于增进对AD发病分子生物学机制的认识,ncRNAs可能成为AD诊断的生物标志物和治疗干预的新靶点。