醋酸铅对小鼠精子毒作用和雄性生育力的影响

本文通过慢性经口染毒试验,观察了醋酸铅对雄性小鼠的精子形态、精子数量、精子运动能力和雄性生育力的影响,及生殖器官的组织病理学改变。结果表明,饲以1%醋酸铅饲料3个月可出现精于畸形率增高,血铅明显升高;2%醋酸铅可使精子运动能力下降,精子计数减少,睾丸出现轻度损伤;4%醋酸铅可影响雄性生殖机能,平均活胎数减少,总死胎率升高。提示醋酸铅对雄性小鼠生殖细胞有潜在的诱变能力,并能使雄性生育力降低。     

5G手机射频辐射暴露对雄性小鼠生殖能力的影响

目的 明确5G手机射频辐射暴露对雄鼠生育力的影响,并初步探讨其机制。方法 将7～8周龄健康雄性C57BL/6小鼠随机分为Sham组、3.5 GHz RFR组和4.9 GHz RFR组,每组16只,分别用3.5 GHz和4.9 GHz的手机射频辐射连续暴露42 d,每天1 h。通过检测精子数量、畸形率和活力评估精子质量;通过HE染色观察各级生精细胞形态、生精小管直径、生精上皮厚度评估睾丸组织结构;通过精子线粒体膜电位和睾丸ATP含量评估精子线粒体功能;通过生育率、产仔数和仔鼠存活率评估小鼠的生育力;通过检测LRGUK基因甲基化水平、m RNA和蛋白水平对机制进行探索。结果 与Sham组相比,3.5 GHz RFR组和4.9 GHz RFR组的精子数量无明显变化,精子畸形率显著升高,精子活力显著降低;睾丸组织结构无明显改变;精子线粒体功能无明显变化;小鼠生育力无明显变化;睾丸内LRGUK基因的甲基化水平显著升高,mRNA和蛋白表达水平显著降低。结论 3.5 GHz和4.9 GHz的手机射频辐射连续暴露42 d可导致小鼠精子畸形率升高,精子活力降低,但对小鼠的生育力无明显影响,这可能与睾丸L...     

氯氰菊酯暴露对青春期雄性小鼠精子发生的影响

[目的]探讨氯氰菊酯暴露对青春期雄性小鼠精子发生的影响及其可能机制。[方法]选择30只5周龄雄性ICR小鼠,随机分为暴露组和对照组,于出生后35天（PND35）至PND70,每天给予暴露组小鼠氯氰菊酯（25mg/kg）灌胃染毒,对照组以等容积的玉米油灌胃。末次染毒16h后,处死小鼠,取附睾尾评价精子数量;取睾丸称重并进行组织病理学检查;免疫组织化学法检测睾丸间质细胞;放射免疫分析法检测血清和睾丸组织睾酮水平;蛋白质免疫印迹法测定睾丸组织类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）和睾酮合成关键酶蛋白表达水平。[结果]暴露组小鼠睾丸生精小管管腔内出现大空泡。与对照组相比,暴露组第Ⅶ-Ⅷ期生精小管所占百分比明显下降,附睾尾精子数量明显减少,血清和睾丸组织睾酮含量明显降低,睾丸组织生成StAR的表达明显下调,而氯氰菊酯对小鼠睾丸间质细胞数量无影响。[结论]青春期氯氰菊酯暴露后对小鼠精子发生有损害作用,这可能与睾丸睾酮合成的降低有关。     

乙醇对雄性小鼠精子生成的影响

分析经口染毒乙醇３５天的雄性小鼠的精子数量、活动度、精子畸形率及睾丸细胞染色体畸变,研究乙醇对雄性小鼠精子生成的影响。结果表明,４０００ｍｇ／ｋｇ组和４５００ｍｇ／ｋｇ组小鼠精子活动度明显下降;３０００,４０００和４５００ｍｇ／ｋｇ组精子畸形率明显增高;４５００ｍｇ／ｋｇ组睾丸细胞染色体畸变率明显增高,与阴性对照组相比,上述指标差异均有显著性（Ｐ〈０．０１）。说明乙醇对小鼠的精子生成有一定损害作用     

小剂量氯化汞对小鼠的生殖毒性

目的观察小剂量氯化汞对雄性小鼠生殖功能的毒性作用以及氯化汞对小鼠精子数量和质量的影响。方法雄性ICR小鼠随机分为4组:阴性对照组,0.25、0.50、1.00mg/kg氯化汞组。分别以0.25、0.50、1.00mg/kg氯化汞腹腔染毒4周龄雄性小鼠每3天1次,共10次。50d后以雌雄2∶1合笼交配,观察雌鼠受孕率、生育子胎数、胎鼠重量,同时测定睾丸指数、附睾精子数量、精子活动率和精子畸形率。结果对照组、0.25、0.50和1.00mg/kg组合笼1周雌鼠受孕率分别为100%、100%、83.33%和66.67%,合笼3周雌鼠受孕率分别为100%、100%、83.33%和75%;其中1.00mg/kg组1周雌鼠受孕率显著低于对照组(P<0.05)。以上各组母鼠生育子胎数分别为127、142、113、95只,异常妊娠率分别为0%、1.41%、2.65%和4.21%;1.00mg/kg组异常妊娠率显著高于对照组(P<0.05)。0.50、1.00mg/kg组附睾精子数显著低于对照组和0.25mg/kg组(P<0.05);0.25、0.50、1.00mg/kg组睾丸指数、精子活动率与对照组比较差异无显著性(P>0.05)附睾精子畸形率显著高于对照组(P<0.05)。结论1.00mg/kg氯化汞染毒可降低雄性小鼠生育力,增加了受孕雌鼠异常妊娠率。氯化汞引起的这种雄性小鼠生育力的降低、异常妊娠率的增高可能与精子畸形率增高和精子数量下降有关。     

胚胎期暴露手机辐射对雄性仔鼠生殖功能影响

目的:探讨胚胎期暴露手机辐射对雄性仔鼠生殖功能影响。方法:建立胚胎期暴露手机辐射动物模型,将雄性仔鼠随机分为3组。饲养2个月后处死各组小鼠,分别测定各组实验动物睾丸体重系数、精子数量、精子存活率和精子活动率。结果:与对照组比较,胚胎期暴露不同制式手机辐射雄鼠体重系数和精子存活率之间差异不具有统计学意义;而精子数量和精子活动率低于对照组,且暴露于两种不同制式手机辐射组间差异不具有统计学意义。结论:胚胎期暴露手机辐射可致仔鼠精子数量减少,精子活动率降低。     

染锰鼠睾丸增殖细胞核抗原与热休克蛋白表达

目的研究锰对小鼠精子数量与睾丸增殖细胞核抗原(PCNA)和热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将小鼠随机分为3个不同剂量MnCl2(7.5,15,30 mg/kg)组和对照组,分别于染锰,3,7,14,28,56 d计数精子数量,用免疫组化S-P法结合图象分析技术测定睾丸PCNA和HSP70表达。结果随染锰剂量增加和时间延长精子数量减少、睾丸PCNA表达降低。3个不同剂量MnCl2组精子计数于染锰28 d明显低于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),睾丸PCNA表达于染锰14,28,56 d比对照组明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01),直线相关分析各染锰组小鼠精子数量与睾丸PCNA表达呈正相关(r=0.794,P<0.01)。睾丸HSP70表达,15,30 mg/kg组染锰56 d明显低于染锰28 d(P<0.01)。结论锰对小鼠生精功能的损伤呈一定的剂量-效应和时间-效应关系。各染锰组小鼠精子数量与睾丸PCNA表达呈正相关(r=0.794,P<0.01)。锰可诱导小鼠睾丸HSP70表达,染锰28 d达高峰。     

环境雌激素双酚A对男性生殖细胞影响的研究进展

近年来,世界各国男性不育的检出率呈逐年增高趋势.男性不育的原因复杂,包括先天性疾病和后天性因素如外伤、不良生活作息行为（吸烟、酗酒等）、环境污染、药物滥用等.最近研究报道,发育早期暴露环境雌激素可干扰男性生殖系统发育和功能.双酚A（bisphenol A,BPA）是最普遍存在的一种环境雌激素.动物实验和体外研究报道,发育早期暴露BPA可抑制人和小鼠胎儿期睾丸间质细胞分泌睾酮；BPA可通过影响雄性子代生精细胞内基因的正常表达,干扰减数分裂,影响精子的产生；BPA还可降低新生小鼠睾丸支持细胞间连接蛋白的表达；在激素水平上,BPA可抑制小鼠促性腺激素释放激素和卵泡刺激素的产生.本文就BPA通过影响睾丸间质细胞、生精细胞和支持细胞的功能,导致男性不育进行综述,对进一步研究男性不育的原因提供新思路.     

异佛尔酮二异氰酸酯对雄性动物生殖细胞遗传效应的研究

对异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)对雄性小鼠生殖细胞遗传效应进行了研究。结果表明,IPDI对小鼠精子的生成和发育过程无明显影响,亦未引起小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变率增高,对睾丸细胞的 DNA 合成无明显抑制作用,睾丸组织学检查未发现病理变化。由此可见,IPDI 对雄性小鼠生殖细胞无明显诱变作用.     

外周致密纤维1在吸烟小鼠模型的表达

目的探讨不同吸烟周龄小鼠的精子活率和睾丸组织外周致密纤维1(ODF1)mRNA的表达。方法 6~8周龄的C57BL/6J健康雄性小鼠分别给予吸烟2周、4周和6周处理,ELISA试剂盒检测血清可替宁含量,血球计数板计数精子活率,实时荧光定量PCR检测ODF1mRNA表达水平的改变。结果经过2周、4周和6周的烟雾处理后,小鼠血清中可替宁含量明显高于不吸烟组,差异均有统计学意义(P0.05)。吸烟6周后,小鼠血清中可替宁含量可达(10.76±2.19)ng/ml。此外,吸烟6周小鼠的睾丸组织ODF1mRNA表达量明显低于对照组(P0.05)。经过烟雾处理后,小鼠精子活率并没有发生显著改变。结论本实验成功建立吸烟小鼠模型,可以为其他疾病的研究提供吸烟小鼠模型。其次,吸烟可能通过影响ODF1基因的表达而作用于精子的发生阶段,从而影响男性生殖系统。     

In vivo Gene Transfer into Testis and Sperm: Developments and Future Application

Despite significant advances in the treatment of infertility via assisted reproductive technology (ART), the underlying causes of idiopathic male infertility still remain unclear. Accumulating evidence suggests that disorders associated with testicular gene expression may play an important role in male infertility. To be able to fully study the molecular mechanisms underlying spermatogenesis and fertilization, it is necessary to manipulate gene expression in male germ cells. Since there is still no reliable method of recapitulating spermatogenesis culture, the development of alternative transgenic approaches is paramount in the study of gene function in testis and sperm. Established methods of creating transgenic animals rely heavily upon injection of DNA into the pronucleus or the injection of transfected embryonic stem cells into blastocysts to form chimeras. Despite the success of these two approaches for making transgenic and knockout animals, concerns remain over costs and the efficiency of transgene integration. Consequently, efforts are in hand to evaluate alternative methodologies. At present, there is much interest in developing approaches that utilize spermatozoa as vectors for gene transfer. These approaches, including testis mediated gene transfer (TMGT) and sperm mediated gene transfer (SMGT), have great potential as tools for infertility research and in the creation of transgenic animals. The aim of this short review is to briefly describe developments in this field and discuss how these gene transfer methods might be used effectively in future research and clinical arenas.     

十溴联苯醚对青春期雄性小鼠精子数及睾酮的影响

目的探讨十溴联苯醚（decabromodiphenylether,BDE-209）对青春期雄性ICR小鼠的生殖毒性。方法青春期雄性ICR小鼠随机分为6组：对照组（生理盐水）,DMSO组,BDE-209处理组（100,200,300,500 mg/kg BW）。小鼠经口染毒7周后处死,称量小鼠睾丸、附睾重量并计算脏器系数。采用放射免疫法检测小鼠血清中睾酮水平,采用ELISA法检测小鼠血清中cAMP水平。结果与对照组相比,DMSO组未见明显生殖损害（均有P〉0.05）,而BDE-209处理组睾丸重和附睾重、睾丸脏器系数和附睾脏器系数均显著降低（均有P〈0.05）;与对照组相比,BDE-209处理组小鼠精子数目亦减少（均有P〈0.05）。进一步研究发现,BDE-209处理后,小鼠血清cAMP浓度和睾酮浓度低于对照组（均有P〈0.05）。结论 BDE-209暴露青春期雄性小鼠导致小鼠睾酮合成降低,精子合成减少,损伤青春期雄性小鼠生殖功能。     

乙酰唑胺对大鼠精子发生和成熟的影响

目的:研究碳酸酐酶抑制剂对大鼠精子发生和成熟的影响。方法:乙酰唑胺混悬液(40mg/kg)给大鼠灌胃,分别于给药当天、1d和3d处死动物,进行睾丸、附睾称重、苏木素-伊红(HE)染色和光镜下观察分析;附睾尾剪碎计数精子密度、精子活力,染色后计数精子畸形比率;测定附睾管腔液α-葡糖苷酶水平;采用罗丹明(Rh)123荧光探针标记附睾精子,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位。结果:给予乙酰唑胺的大鼠精子活力明显降低,畸形率显著增加,附睾精子线粒体膜电位明显降低,附睾管腔液α-葡糖苷酶水平有所下降,但睾丸和附睾无明显病理学改变。结论:碳酸酐酶抑制剂可能通过影响附睾精子成熟,对雄性生殖功能进行调控。     

甲睾酮对小鼠生殖系统发育及生精功能的影响

目的探讨甲睾酮对雄性小鼠精子的产生及生殖器官的影响。方法将48只昆明小白鼠随机分为4组,每组12只,每天分别向各组灌胃甲睾酮16mg／ks,32mg／kg,64mg／kg和等量蒸馏水（对照组）,连续10d。结果与对照组比较,甲睾酮16mg／kg组精子活率最高为66．22％（P〈0．05）;甲睾酮64mg／kg组睾丸指数、精子畸形率、精子密度都极显著和显著地升高（P〈0．01和P（0．05）,且睾丸组织有较明显的病理学损伤。结论适量甲睾酮能提高精子活率,大剂量使精子活率降低且畸形率升高。     

城市地面交通现场暴露对雄性小鼠的生殖毒性

[目的]探讨交通污染对雄性小鼠的生殖毒性作用。[方法]将30只雄性昆明系小鼠随机分为重度污染暴露组、轻度污染暴露组和清洁环境空白对照组,每组10只,进行现场暴露染毒,每日持续暴露10h。持续暴露35d后,观察交通污染对各组实验小鼠生殖器官发育、精子数量和质量、睾丸和附睾组织病理学变化以及睾丸细胞DNA损伤情况。[结果]与空白对照组小鼠相比,重度暴露组小鼠体重、睾丸和附睾重、睾丸脏器系数下降,睾丸细胞DNA损伤率增加;与空白对照组相比,轻度和重度暴露组小鼠精子数量下降,精子畸形率上升,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。组织病理学结果显示,轻度和重度暴露组小鼠睾丸和附睾组织有不同程度损伤。[结论]交通污染对雄性小鼠生殖系统会造成一定程度损伤。     

5-Aza-2＇-deoxycytidine暴露对新生大鼠精子发生的影响

[目的]探讨暴露于DNA甲基化抑制剂5-Aza-2’-deoxycytidine（5-Aza-CdR）对新生SD大鼠生长发育和成年精子发生的影响。[方法]新生大鼠随机分为3组,每组24只雄鼠。自出生第3天（postnatal day3,PND3）开始经口给予5-Aza-CdR 25、250μg／kg,对照组给予等量的溶剂。连续暴露5d,最后一次暴露结束后24h,处死半数雄鼠（幼鼠。剩余部分继续喂养至12周龄（成鼠）,乙醚麻醉。取睾丸组织做病理学检查、精子头计数等,附睾做精子畸形检查。[结果]随着剂量的增加,幼鼠体重出现下降趋势,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。组织病理学发现幼鼠睾丸组织中出现空泡变性。检查发现染毒结束后继续喂养至12周的成鼠睾丸组织无明显形态和组织学变化;但每克睾丸组织精子头计数及每日精子生成量随幼年时暴露剂量增加呈现下降趋势（P〈0.05）,而精子畸形率随剂量增加呈现上升趋势（P〈0.05）。[结论]新生大鼠对DNA甲基化抑制制5-Aza-CdR生殖毒性作用敏感,低剂量短时间的暴露即可引起成年期生殖功能的异常。     

EGFR RNA干扰抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化

目的探讨降低表皮生长因子受体（EGFR）在肺内的表达对博莱霉素致小鼠肺纤维化的影响。方法将40只4-6周龄C57BLB／c雄性小鼠按简单随机法分为正常对照组（气管滴入PBS）、纤维化组（气管滴入博莱霉素3mg／kg）、RNAi组（气管滴入博莱霉素3mg／kg＋气管滴入siR-NA20μl）和RNAi阴性对照组（气管滴入博莱霉素3mg／kg＋气管滴人siRNA阴性对照20μl）。实验第10天处死小鼠,收获肺组织,检测羟脯氨酸含量。肺组织切片行HE染色观察肺组织病理改变,采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）法检测EGFR的表达。Westernblot检测EGFR、磷酸化EGFR表达。结果RNAi组与纤维化组比较,肺组织EGFRmRNA表达（0．31±0．05 vs 0．75±0．08,P〈0．01）和EGFR蛋白表达（1．53±O．47vs2．56±0．37,P〈0．01）均显著下降;肺病理损伤较纤维化组减轻,肺羟脯氨酸含量显著减少（543．00±25．89vs900．73±31．77,P〈0．01）;磷酸化EGFR蛋白表达亦较纤维化组明显减少（1．78±0．35 vs 2．84±0．51,P〈0．01）。结论EGFRRNAi抑制了EGFR活化,减轻了博莱霉素诱导的肺纤维化改变。