炙甘草汤对脐静脉内皮细胞表面GM-CSF受体及G-CSF受体表达的影响

目的:研究炙甘草汤对脐静脉内皮细胞表面GM-CSF受体及G-CSF受体表达的影响。方法:实验设空白对照组、炙甘草汤组、右归饮组及两方剂混合组,每组脐静脉内皮细胞分别加入相应的中药液,3天后结束培养,免疫组化方法检测细胞表面GM-CSF受体及G-CSF受体表达情况。结果:GMCSF受体表达:混合用药时下调作用最明显(P0.01),其次是炙甘草汤组(P0.05);G-CSF受体表达:两个中药方剂均能明显下调受体表达,其中右归饮下调效果最明显(P0.001)。结论:炙甘草汤能明显下调脐静脉内皮细胞表面GM-CSF受体及G-CSF受体表达。     

炙甘草汤、右归饮刺激脐静脉内皮细胞分泌TPO与EPO的比较研究

目的:比较研究炙甘草汤、右归饮对脐静脉内皮细胞分泌TPO与EPO的影响。方法:脐静脉内皮细胞设空白对照组、炙甘草汤组、右归饮组及混合组,每组分别加入相应的中药液,于培养第3、6、9天收集细胞培养上清,ELISA方法检测细胞培养上清中TPO与EPO的分泌水平。结果:(1)TPO分泌方面,第6天,与空白对照组比较,炙甘草汤明显刺激脐静脉内皮细胞产生TPO;第9天,炙甘草汤单独作用以及两种中药联合使用时TPO的产生与空白对照组相比也有明显差异。(2)EPO分泌方面,第6天与第9天,右归饮作用时能够刺激脐静脉内皮细胞产生EPO,但炙甘草汤单独作用以及两种中药联合使用时却不能明显刺激细胞产生EPO。结论:在刺激细胞产生TPO方面,炙甘草汤的效果最明显,而在刺激细胞产生EPO方面右归饮表现出更好的效果,两个方剂作用机制存在差异,且两个方剂的刺激作用均存在持续性。     

炙甘草汤及相应细胞培养上清对脐血HPP-CFC形成的影响

目的:探讨炙甘草汤及细胞培养上清对脐血HPP-CFC形成的影响。方法:取新鲜脐血经淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,选取炙甘草汤与右归饮两个中药方剂,淋巴细胞作对照组、炙甘草汤组、右归饮组、混合组及相应培养上清组,每组分别加入相应的中药液及细胞培养上清,于甲基纤维素半固体培养基培养14天后观察集落形成情况。结果:单独中药添加并不能明显刺激HPP-CFC集落形成,各培养上清组均能刺激集落形成增加,炙甘草汤细胞培养上清刺激集落形成效果最明显,与对照组相比P0.001;其次是右归饮培养上清与混合中药培养上清,与对照组相比P0.01;脐静脉内皮细胞培养上清也能刺激集落微弱增加。结论:炙甘草汤脐静脉内皮细胞培养上清能明显刺激脐血HPP-CFC形成增加,刺激效果优于右归饮培养上清与混合培养上清。     

扶肝化纤汤含药血清对TGF-β1诱导HSC-T6细胞增殖及TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨扶肝化纤汤抗肝纤维化的可能作用机制。方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、扶肝化纤汤组,每组20只,扶肝化纤汤组以16. 78g/kg扶肝化纤汤灌胃,正常对照组予等体积生理盐水灌胃,每日1次,连续7天,末次给药后于大鼠腹主动脉取血制备含药血清。培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,设置空白对照组及1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%扶肝化纤汤含药血清组,检测不同浓度扶肝化纤汤含药血清对转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导的HSC-T6活化增殖的影响,确定15%扶肝化纤汤含药血清为最佳给药浓度。细胞实验分为空白对照组(HSC-T6细胞)、正常组(HSC-T6细胞+正常对照血清+TGF-β1)、中药组(HSC-T6细胞+15%扶肝化纤汤含药血清+TGF-β1);阻断组1 (HSC-T6细胞+SIS3)、阻断组2 (HSC-T6细胞+正常对照血清+TGF-β1+SIS3)及阻断组3 (HSC-T6细胞+15%扶肝化纤汤含药血清+TGF-β1+SIS3),培养24 h后比较各组HSC-T6细胞增殖抑制率及细胞中Smad 3、Smad 7、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原mRNA表达。结果与空白对照组比较,正常组、中药组、阻断组2、阻断组3 HSC-T6细胞增殖抑制率差异有统计学意义(P 0. 01)。与正常组比较,中药组、阻断组2、阻断组3HSC-T6细胞增殖抑制率差异均有统计学意义(P 0. 01)。与中药组比较,阻断组3抑制率明显升高(P 0. 01)。与空白对照组比较,中药组、阻断组2、阻断组3均可下调Smad 3、Ⅰ型胶原mRNA表达,上调Smad 7、α-SMA mRNA表达(P 0. 01);正常组可上调Smad 3、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达,下调Smad 7mRNA表达(P 0. 01)。与正常组比较,中药组、阻断组2、阻断组3均可下调Smad 3、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达,上调Smad 7 mRNA表达(P 0. 01)。与中药组比较,阻断组3可下调Smad 3、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA表达,上调Smad 7 mRNA表达(P 0. 01)。结论扶肝化纤汤能够抑制TGF-β1诱导的HSC-T6细胞的活化增殖,其可能通过影响TGF-β1/Smad信号转导通路发挥抗肝纤维化作用。     

龙蛭汤对衣霉素诱导人脐静脉内皮细胞内GRP78和CHOP的影响

目的探讨龙蛭汤对衣霉素(TM)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内质网应激及其标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和特异性蛋白C增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法制备龙蛭汤含药血清,体外培养HUVEC细胞株,分为对照组(10%空白血清),TM组(10%空白血清+3μg/mL TM),TM+龙蛭汤组(10%含药血清+3μg/mL TM),龙蛭汤组(10%含药血清),继续培养6 h。使用CCK-8法比较各组细胞活力,细胞免疫荧光法和Western Blot比较各组GRP78和CHOP蛋白表达,RT-PCR法比较各组GRP78和CHOP mRNA表达。结果与对照组比较,TM组HUVEC细胞活力下降,GRP78、CHOP蛋白及mRNA表达增加(均P0.05);与TM组比较,TM+龙蛭汤组、龙蛭汤组HUVEC细胞活力升高,GRP78、CHOP蛋白及mRNA表达降低(均P0.05)。结论龙蛭汤可通过下调GRP78、CHOP表达,减轻细胞过度的内质网应激反应,提高HUVEC细胞活力。     

基于ox-LDL信号通路探讨桑芪滋阴补肾汤对人脐静脉血管内皮细胞的影响及其作用机制

目的:探讨桑芪滋阴补肾汤对高血压颈动脉粥样硬化发生和发展的影响及其作用机制。方法:采用ox-LDL诱导HUVEC细胞建立血管内皮细胞损伤模型，分为空白对照组、模型组、高浓度桑芪滋阴补肾汤组、中浓度桑芪滋阴补肾汤组、低浓度桑芪滋阴补肾汤组和阳性药(阿托伐他汀)组。采用CCK8法检测各组细胞存活率；采用RT-PCR法检测各组细胞中VEGFA的mRNA表达水平；采用WB法检测各组细胞中NLRP3和Caspase-1的蛋白表达情况；采用ELISA法检测肺泡灌洗液中IL-6和TNF-α水平。结果:与空白对照组比较，模型组细胞存活率降低，细胞中VEGFA的mRNA表达水平降低，NLRP3和Caspase-1的蛋白表达水平升高，细胞上清液中IL-6、TNF-α的含量升高(P<0.05);与模型组比较，低、中、高浓度桑芪滋阴补肾汤组细胞存活率升高，细胞中VEGFA的mRNA表达水平升高，NLRP3和Caspase-1的蛋白表达水平降低，细胞上清液中IL-6、TNF-α的含量降低，升高或降低水平与药物浓度呈正相关，差异具有统计学意义(P<0.05);与阳性药组比较，高浓度桑芪滋阴补肾汤组细胞...     

右归饮对大鼠激素性股骨头坏死局部脂联素表达的影响

目的:研究补肾助阳中药右归饮对大鼠激素性股骨头坏死模型脂联素的影响。方法:取Wistar大鼠30只,随机分为空白对照组、模型组、右归饮治疗组,采用内毒素和甲基强地松龙肌肉注射诱导造成激素性股骨头坏死模型后,右归饮治疗组给右归饮灌胃,空白对照组和模型组以等量生理盐水灌胃治疗,于6周后手术取股骨头,观察股骨头病理形态,计算空骨陷窝率,利用基因芯片技术检测股骨头基因表达,并利用RT-PCR技术检测脂联素基因adipoq的表达情况。结果:①HE染色显示右归饮治疗组较模型组骨膜变完整,同源软骨细胞数增加,骨小梁变整齐,软骨下血管变丰富。②模型组空骨陷窝率最高,右归饮治疗组次之,空白对照组最低。空白对照组、右归饮治疗组的空骨陷窝率与模型组相比较,差异均有统计学意义(P0.01)。③基因芯片表达结果显示,空白对照组与模型组相比较,脂联素基因adipoq无明显差异(Ratio值2.0);右归饮治疗组与模型组相比较,脂联素基因adipoq明显上调(Ratio值2.0)。结论:在大鼠激素性股骨头坏死模型模型中,糖皮质激素联合内毒素造模对股骨头局部的脂联素表达无明显影响;补肾助阳中药右归饮能明显刺激股骨头局部的脂联素的表达。     

补肾助阳中药与合并脑外伤骨折加速愈合分子机制的研究

目的:明确补肾助阳中药右归饮与合并脑外伤的骨折在愈合过程中起主要作用的生长因子;明确心-小肠-骨生理联系机制,获得中医脏腑理论的现代解析;方法:将90只大鼠随机分为3组:骨折组、脑损伤+骨折组、右归饮+骨折组,每组各30只。术后3 d,1,2,3,4周取骨痂及十二指肠标本。通过基因芯片技术,筛选出有显著差异的基因并通过QPCR进行验证。结果:基因芯片结果显示,模型组与骨折组相比,骨痂及十二指肠中血管内皮生长因子(CGRP)、降钙素基因相关肽(VEGF)基因表达明显上升(R2),有统计学意义。QPCR结果显示,骨痂与十二指肠中各指标表达趋势基本一致;骨折合并脑外伤及骨折合并右归饮组骨痂及十二指肠中CGRP、VEGF表达与单纯骨折组同一时间点比较表达量明显增加(P0.05),峰值时间明显提前(P0.05),且峰值维持时间久;骨折合并脑外伤与骨折合并右归饮各指标比较差异无统计学意义(P0.05)结论:CGRP、VEGF是骨折合并右归饮及骨折合并颅脑损伤后加速骨痂形成的主要生长因子,并将心(脑)-小肠-骨三者联系在一起。     

参苏饮对炎症人支气管上皮细胞表达β-防御素2的作用研究

目的:观察参苏饮对炎症人支气管上皮细胞(16HBE)表达β-防御素2(h BD-2)的影响。方法:将40只SPF级SD雄性大鼠灌胃给药参苏饮及其拆方,心脏采血制备含药血清,传代培养人支气管上皮细胞(16HBE),利用1mg/L LPS刺激12h建立体外16HBE细胞炎症模型后分为5组,即空白对照组、模型组、参苏饮全方组、益气解表组和止咳化痰组。Western法检测给药3h、8h后各组胞浆蛋白h BD-2的表达情况。结果:与空白对照组比较,模型组h BD-2蛋白含量在给药3h显著升高(P0.05),而在给药8h两组比较差异无统计学意义(P0.05);与模型组比较,参苏饮全方组、益气解表组、止咳化痰组在给药3h、8h均能显著性上调h BD-2蛋白含量(P0.05)。结论:参苏饮能够促进炎症人支气管上皮细胞表达h BD-2蛋白,提示参苏饮发挥益气固表、抗菌消炎的物质基础可能与h BD-2有关。     

顺铂诱导颗粒细胞损伤及二仙汤含药血清保护颗粒细胞的作用机制

目的:探讨顺铂对卵巢颗粒细胞的影响及二仙汤含药血清改善大鼠卵巢颗粒细胞损伤的作用机制。方法:选取大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂处理的方法,将顺铂处理后卵巢颗粒细胞随机分为:c DDP组、c DDP+雌二醇组、c DDP+二仙汤组,另设正常组,加入相应药理血清连续培养48 h。采用Western Blotting法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax蛋白表达; RT-PCR法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax mRNA表达。结果:与正常对照组比较,c DDP组bax mRNA及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与c DDP组比较,CDDP+雌二醇组及c DDP+二仙汤组Bax mRNA及蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与正常组比较,c DDP组bcl-2 mRNA水平及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与c DDP组比较,CDDP+雌二醇组及c DDP+二仙汤组bcl-2 mRNA转录及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:二仙汤能够抑制c DDP诱导的卵巢颗粒细胞损伤,其作用机制可能与调节bcl-2/bax平衡有关。     

PCPA失眠大鼠脑干NG2细胞和NMDA受体的表达及酸枣仁汤的干预作用

目的:观察对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠大鼠脑干NG2细胞和NMDA受体mRNA的表达,探讨酸枣仁汤治疗失眠的可能机制。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、对照组、PCPA组、酸枣仁汤组、PCPA+酸枣仁汤组,每组10只,采用腹腔注射PCPA制作失眠大鼠模型,灌胃不同药物后取材,采用RT-PCR检测NG2和NMDA受体mRNA的表达情况。结果:PCPA组NG2细胞、NMDA受体mRNA表达升高,NG2表达量与对照组比较差异有统计学意义(P0.05),NMDA受体表达量与对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01);与PCPA组比较,PCPA+酸枣仁汤组NG2、NMDA受体mRNA表达下降(P0.05),差异有统计学意义。正常组和对照组NG2、NMDA受体表达量比较无统计学意义(P0.05)。结论:PCPA诱导的失眠大鼠NG2细胞和NMDA受体表达升高,而酸枣仁汤可以下调二者表达量,提示酸枣仁汤干预失眠的机制可能与调节NG2细胞和NMDA受体的表达有关。     

右归饮加减方对兔激素性股骨头坏死的干预作用 及其机制研究

目的:观察右归饮加减方对激素性股骨头坏死的治疗作用并探索其治疗机制。方法:采用大剂量马血清联合地塞米松制造早期股骨头坏死兔模型。将12只造模成功的白兔随机分为模型组和右归饮组,另随机选取同批次大白兔6只作为空白对照组,分别给予右归饮加减方水煎液和纯净水灌胃干预6周。比较3组白兔基础代谢率变量;取各组白兔股骨头,显微CT(Micro CT)对比骨小梁密度;制作股骨组织切片,苏木精伊红(HE)染色,光镜下观察骨小梁形态,比较空骨陷窝数;丽春红-品红(MASSON)染色观察成骨细胞数;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞数;血管内皮生长因子(VEGF)免疫组化染色观察血管新生情况。结果:右归饮组基础代谢率变量及股骨头组织HE染色的骨细胞数均较模型组显著升高,而空骨陷窝数显著低于模型组,差异均有统计学意义(P均=0.000);Micro CT显示右归饮组股骨头单位体积内骨小梁体积/总体积、骨小梁的厚度/间隙、骨小梁数均较模型组显著提高(P=0.004,P=0.000,P=0.001);MASSON染色显示右归饮组白兔股骨头内成骨细胞数明显高于模型组(P0.05);TRAP染色提示破骨细胞数空白对照组最低但与右归饮组无统计学差异,均显著低于模型组(P0.01);VEGF免疫组化显示右归饮组股骨头血管新生阳性区面积明显大于空白对照组和模型组(P0.05,P0.01)。结论:右归饮加减方能显著提高激素性股骨头坏死模型白兔的基础代谢和骨密度,其作用机制可能是促进成骨并抑制破骨活性,显著提高股骨头内血管新生能力。     

醋甘遂与炙甘草免煎颗粒配伍对大鼠肾功能及醛固酮含量的影响

目的:通过检测大鼠肾功能指标和血清醛固酮、钠钾离子的含量,初步观察醋甘遂与炙甘草免煎颗粒配伍对肾脏的损伤。方法:将大鼠按体重随机分为正常组、炙甘草组(免煎颗粒剂)、醋甘遂组(研末)、醋甘遂-炙甘草组、甘遂半夏汤组。其中正常组给予生理盐水灌胃,其余各组给予相应药液灌胃,连续给药14天。实验结束时,腹主动脉取血分离血清和血浆检测肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、乳酸脱氢酶(LDH)、醛固酮(ALD)的含量以及血清中Na+、K+含量;取一侧肾组织用福尔马林固定观察肾组织细胞病理形态。结果:与正常组相比,炙甘草组、醋甘遂组、醋甘遂-炙甘草组Cr含量有升高趋势,但差异无统计学意义(P0.05),BUN含量各组均有升高趋势,醋甘遂-炙甘草组升高显著,差异有显著统计学意义(P0.01),且与醋甘遂组比较,亦显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。尿酸含量各组之间无明显变化,LDH含量显著降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。血清Na+、K+含量:与正常组比较,各给药组之间无显著性变化,差异无统计学意义(P0.05)。醛固酮(ALD)含量:与正常组比较,各给药组均显著降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。其中甘遂半夏汤组较醋甘遂-炙甘草组显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:甘遂确实对肾脏造成了损伤,但醋甘遂与炙甘草配伍未表现出明显的毒性增强作用,说明二者配伍不存在增毒作用,是否有增效作用需要配合病理状态的研究来深入探讨。     

龙蛭汤含药血清对人脐静脉内皮细胞增殖及自噬的影响

目的探讨龙蛭汤促人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的可能作用机制。方法采用400μmol/L过氧化氢(H_2O_2)干预人脐静脉内皮细胞4 h建立自噬模型,通过CCK-8法观察龙蛭汤含药血清对模型组细胞增殖的影响,观察HUVECs自噬微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)和Bcl-2同源结构域蛋白(Beclin-1)表达。结果与正常组比较,空白组细胞增殖OD值及相对增殖率差异无统计学意义(P0.05);与空白组和正常组比较,模型组HUVECs增殖OD值及相对增殖率降低,LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达均升高(P0.05);与模型组比较,龙蛭汤组HUVECs增殖OD值及相对增殖率及LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达上升(P0.05)。正常组和空白血清组细胞未见明显变化,模型组细胞胞质内双层膜样结构和空泡数量减少,龙蛭汤组细胞24 h后胞质内双层膜样结构增多,弯曲延展,包裹部分细胞器。结论龙蛭汤含药血清对H_2O_2诱导的HUVECs损伤细胞具有明显保护作用,其能维持细胞形态的完整和促进细胞增殖,其机制可能与上调细胞自噬水平相关。     

右归丸对肝肾亏虚型退变髓核细胞活力及相关炎性因子表达的影响

目的:研究右归丸含药大鼠血清对肝肾亏虚型退变髓核细胞活性及IL-1、TNF-α表达的影响。方法:选取48只雌雄各半质量为180～220 g SD大鼠,按随机数字表法分为空白对照组、桃红四物汤组及右归丸组,各组药物干预后取血清冻存备用。选3例辨证肝肾亏虚型的腰椎间盘突出且需要手术的患者,获取髓核组织细胞并进行细胞培养。各组冻存的含药血清分别配置成5%、10%、20%浓度梯度干预髓核细胞,运用MTT法获取细胞OD值并制作细胞生长曲线,选取各组最佳含药血清浓度。将2代髓核细胞分为空白血清组、桃红血清组、右归血清组。选用各组最佳浓度血清分别连续干预3、7、14 d, Western Blot检测2代髓核细胞中IL-1、TNF-α的表达水平。结果:10%空白血清、20%桃红四物汤含药血清及20%右归丸含药血清有利于髓核细胞生长。分别在第3、7、14天与空白血清组比较,桃红血清组、右归血清组髓核细胞中IL-1、TNF-α的表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05),且右归血清组相比桃红血清组IL-1、TNF-α降低更加明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论:右归丸大鼠含药血清干预肝肾亏虚型退变髓核细胞可显著提高细胞增殖活力,下调炎性因子IL-1、TNF-α的表达,右归丸含药血清干预肝肾亏虚型退变髓核细胞效果优于桃红四物汤含药血清,从侧面进一步论证了辨证论治理论的科学性。     

畅脉乐胶囊对血瘀型高血压病患者血管内皮细胞分泌血栓调节蛋白的影响

目的观察畅脉乐胶囊对血瘀型高血压病患者血管内皮细胞分泌血栓调节蛋白的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,按不同类别的血清及是否添加药物分为6组,作用24 h,观察细胞形态变化;用RT-PCR、western blot测定TM表达。结果与空白对照组比较,血瘀组TM表达水平明显升高(P0.05);与血瘀组比较,血瘀证加畅脉乐组TM的表达下降(P0.05)。结论畅脉乐胶囊能下调血瘀型高血压病患者血管内皮细胞TM的表达。     

独活寄生汤及其拆方干预腰椎间盘纤维环细胞信号通路的研究

目的 探讨独活寄生汤及其拆方通过细胞信号转导通路影响腰椎间盘源性痛的作用机制.方法 将实验动物分为6组,即正常对照组、独活寄生汤组、拆方A组、拆方B组、p38阻断剂组、空白对照组(生理盐水).除正常对照组外,其余5组均采用纤维环体表穿刺法建立兔腰椎间盘退变模型;造模8周后,行纤维环细胞的培养与鉴定;提取各组的含药血清并刺激退变的纤维环细胞,通过Westem blot检测各组细胞的p38磷酸化蛋白的表达水平.结果 正常对照组p38磷酸化水平最低,空白模型组最高,二者与其余4组比较均有显著性差异(P＜0.01);独活寄生汤组和p38阻断剂组与空白对照组比较,均有显著性差异(P＜0.01);拆方B组除与独活寄生汤组比较无显著性差异(P＞0.05)外,它和拆方A组与其余各组比较均有显著性差异(P＜0.01).结论 独活寄生汤通过抑制p38信号转导通路磷酸化水平,从而抑制炎性因子的产生及缓解软骨细胞的凋亡进程;独活寄生汤的拆方祛风湿、止痹痛组及补气血、益肝肾组均具有抑制p38磷酸化蛋白表达的作用.     

右归饮协同骨髓干细胞移植修复液氮冷冻骨坏死的研究

目的:观察右归饮协同骨髓干细胞(MSCs)移植对液氮冷冻股骨头坏死家兔模型骨修复的影响。方法:40只兔随机分为4组:A组(模型组)、B组(右归饮组)、C组(干细胞移植组)、D组(右归饮加干细胞移植组)。分离、培养、增殖MSCs;改良液氮冷冻法造模成功1周后,B组采用右归饮灌胃治疗,C组行髓芯减压术后MSCs 1mL(细胞密度:1×105·mL-1)移植治疗,D组采用右归饮协同MSCs移植治疗,对一般形态学、4、7周后的股骨头组织病理学和RT-PCR观察VEGF表达情况进行检测。结果:各治疗组较A组的观测指标均有明显改善,其中各治疗组空骨陷窝阳性率和VEGF阳性表达与A组组间比较差异均有统计学意义(P0.01),且D组改善优于B、C两组(P0.05)。结论:右归饮协同骨髓干细胞(MSCs)移植法能够显著改善冷冻坏死股骨头的血供、增强VEGF表达,促进坏死骨修复。     

右归饮对模拟人体内应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响

目的该文对采用右归饮含药血清对大鼠成骨细胞进行牵张应力的刺激后形成的骨细胞以及分泌的碱性磷酸酶的影响进行评价,重点论证了在模拟的人体应力环境中使用右归饮进行治疗后,促进了骨细胞增殖分化的作用。方法将随机选择的40只SD大鼠分为两组一组为右归饮组,每天进行灌胃治疗,右归饮的含生药量为20 g/kg,一组为生理盐水组,每天进行灌胃,生理盐水组的灌胃量等同于右归饮组~([1])。两组均进行连续灌胃1周。末次灌胃后2 h,采用常规麻醉心脏取血的方法,将血清分离出来,在-20℃进行保存。骨细胞的培养采用序列酶消化法,将细胞进行等量分组,共分为6组,每组6孔,标注为:右归饮含药血清牵张形变组、生理盐水血清组、右归饮含药血清组、无血清培养基对照组、无血清牵涨形变组、生理盐水血清12牵张形变组。进行血清同步培养24 h,生成各组细胞,采用0.5 Hz PINLV、12%形变量的牵张力对相应的右归饮血清组、无血清组细胞等进行力学记载。采用ALP定量测定的方法检测各组的细胞ALP活性,分别于12、24 h进行加力,使用显微镜进行镜检和拍照,监测成骨细胞胞浆内的CAKP颗粒书目。使用统计学软件进行分析。结果在0.5 Hz、12%牵张应力条件下,采用常规培养条件和无血清细胞进行细胞培养的比较,前者的ALP表达受到限制,右归饮血清培养液在力学环境下的ALP比另一组要高,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论在无血清条件下,右归饮能够促进模拟人体牵张应力环境下的骨细胞的分化的增值。     

右归饮促进骨折愈合的最佳浓度的实验研究

目的:观察右归饮不同浓度促进骨折愈合的效果,获得右归饮治疗骨折的最佳浓度,并获得右归饮治疗的最佳时间。方法:将120只SD雄性大鼠,体质量(250±20)g,随机分为4组:骨折组、低浓度右归饮+骨折组、中浓度右归饮+骨折组、高浓度右归饮+骨折组,每组6只。造模完成后,骨折组用生理盐水灌胃,右归饮组灌服不同浓度右归饮汤剂,于造模后3、7、14、21、28 d处死大鼠取骨痂进行影像形态学及QPCR检测。结果:在各个时间点高、中、低浓度右归饮组均较对照组骨痂量明显增多,VEGF表达量显著升高(P0.01),表达高峰出现时间明显提前、维持时间延长,且与浓度呈一定的正相关。结论:右归饮能明显促进骨折愈合,高浓度为治疗骨折的最佳浓度,并且应在早期即开始使用。