产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、沙雷菌AmpC酶检测及耐药性分析

目的：通过检测阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、沙雷菌去阻遏持续高产AmpC酶和超广谱β－内酰胺酶（ESBL）及其耐药性分析，揭示其主要耐药机制，指导临床合理用药。方法：采用改良的酶提取物三维试验法，在常规NCCLS纸片扩散法基础上接种大肠杆菌ATCC25992，在头孢西丁和头孢曲松药敏纸片周围放射性切出琼脂小槽，待测菌的粗酶提取物在槽内扩散，分别进行AmpC和ESBL测定。结果：阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、沙雷菌AmpC酶检出率分别为21．4％、0％、45．5％；AmpC酶＋ESBL分别是10．7％、0％、45．5％。它们对青霉素类、一、二、三代头孢菌素类、头霉素类、单环β－内酰胺类、氟喹诺酮类、磺胺类及一些酶抑制剂复合抗生素耐药率60％－90％不等。哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟耐药率小于50％。亚胺培南未检出耐药菌株。结论：AmpC酶及AmpC酶＋ESBL的检出以沙雷菌最高、阴沟肠杆菌次之、产气肠杆菌未检出；临床经验用药可选用碳青霉烯类如亚胺培南四代头孢菌素如头孢吡肟、复合抗生素如哌拉西林／他唑巴坦。     

头孢吡肟对临床常见革兰阴性杆菌的体外抗菌活性研究

目的：了解头孢吡肟对革兰阴性杆菌的体外抗菌活性。方法：利用K-B法测定头孢吡肟对临床分离的常见革兰阴性杆菌的耐药率并与头孢他啶，头孢噻肟和氨曲南的体外药敏实验结果相比较。结果：共测定376株细菌对头孢吡肟、氨曲南、头孢他啶、头孢噻肟的耐药率，大肠埃希菌分别为5.8%，10.0%，6.8%，14.1%，铜绿假单胞菌分别为9.7%，10.0%，15.6%，37.8%，阴沟肠杆菌分别为9.0%,47.3%,42.9%,27.2%；鲍曼不动杆菌分别为39.7%，42.6%，44.1%，55.3%；肺炎克雷伯菌分别为7.5%,16.7%,12.8%,16.7%。结论：头孢吡肟对革兰阴笥杆菌的抗菌活性高于三代头孢菌素和氨曲南，特别是对产AmpC酶的革兰阴性杆菌如阴沟肠杆菌的稳定性佳，具有良好的临床应用价值。     

头孢吡肟体外抗菌活性研究

目的 研究第四代头孢菌素头隐吡肟的体外抗菌活性和抗菌谱。方法 用Ｅ－ｔｅｓｔ检测头孢吡肟对８种９６株临床分离菌的最低抑菌浓度,并与另外６种β－内酰胺抗生素进行比较。结果 头孢吡肟对苯唑西林敏感的葡萄球菌,肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌和枸橼酸杆菌等均有很强的抗菌活性。结论 头孢吡肟对Ｇ＾＋球菌和Ｇ＾－杆菌均有良好的抗菌活性。     

阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的:了解本地区阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行状况及其耐药性。方法:收集154株临床分离无重复阴沟肠杆菌,通过改良三维实验检测阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:在154株菌中,18.83%的菌株单产ESBLs,22.73%的菌株单产AmpC酶,5.19%的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,53.25%的菌株AmpC酶和ESBLs均不产生。产不同类型β-内酰胺酶其耐药性有所不同。结论:本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。高产AmpC酶菌株对一、二、三代头孢菌素、头孢西丁、酶抑制剂复合制剂等高度耐药,对头孢吡肟敏感,而产ESBLs菌株对三代头孢菌素、头孢吡肟均不同程度耐药,而对各种酶抑制剂复合制剂保持较高的敏感性,因此,产Ampc酶及ES-BLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

超广谱β内酰胺酶（ESBL）的临床特点及对策

本文介绍大肠杆菌及 克雷伯菌产生ESBLs对第三代头孢菌素耐药,而柠檬酸杆菌、沙雷茵、阴沟杆菌及绿脓杆菌产生Amp C酶对头孢一、二 三代抗生素耐药。产生ESBLs细菌对亚胺培南/西司他丁敏感,产生Amp C酶的细菌对亚胺培南/西司他丁第四代头孢菌素敏感。     

临床分离革兰阴性杆菌对头孢他啶和头孢吡肟耐药观察

目的:调查我院2001年至2003年间临床分离革兰阴性杆菌对头孢他啶和头孢吡肟的耐药状况,为临床合理用药提供依据。方法:纸片扩散法检测头孢他啶和头孢吡肟对6种988株革兰阴性杆菌的抑菌环,按1999年版NCCLS标准进行判断,得出耐药结果,进行比较。结果:头孢吡肟对不产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠克雷伯菌、肠杆菌属、变形杆菌有良好的抗菌活性,优于头孢他啶。结论:头孢他啶和头孢吡肟对常见革兰阴性杆菌均有良好的体外抗菌活性,头孢吡肟稍优于头孢他啶,尤其对于易产Bush-I头孢菌素的肠杆菌属抗菌活性明显高于头孢他啶[1]。     

Amp C酶及其耐药性

本文叙述了Amp C酶的定义、Amp C酶的基因结构与功能、Amp C酶的合成、Amp C酶的耐药性及其耐药机制，以及Amp C酶的检测方法。Amp C酶是由肠杆菌科细菌和铜绿假单胞菌等产生的一类头孢菌素酶，可水解头孢菌素类抗生素，导致细菌对这类抗生素产生耐药性。编码产生Amp C酶的基因包括结构基因-amp C和四种调控基因-ampR、ampD、ampE以及ampG,但其具体的转录、调控机制目前尚未完全明了。Amp C酶的合成具有明显的诱导性，其诱导有菌种依赖性、抗生素依赖性和生长条件依赖性。Amp C酶的耐药机制主要是作用于头胞菌素的β-内酰胺环上的羰基，形成酰化酶中间体，然后在水分子的作用下导致β-内酰胺环开环而失活。大部分Amp C酶都是由细菌染色体所介导，但近年来陆续在质粒上发现这些基因，并在肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、产气肠杆菌和沙门菌中持续高水平的表达，还可以通过质粒在细菌间相互传播，导致耐药菌的广泛传播。产Amp C酶菌株的检测以改良的酶提取物三维试验法较佳。     

马斯平对医院常见致病菌活性实验研究及前景展望

目的　验证马期平 (头孢吡肟 )的抗菌谱 ,研究其在临床应用中的前景及意义。方法　用浓度梯度法E test法测定头孢吡肟对临床分离菌 4 0株的最低抑菌浓度 ,并与其他抗生素体外抗菌活性进行比较。结果　头孢吡肟对肠杆菌科抗菌活性强于第 3代头孢菌素 ,对铜绿假单胞菌的抗菌活性也较强 ,与亚胺掊南相当。对苯唑青霉素敏感的金黄色葡萄球菌较敏感 ,(MIC90 为 3mg/L)。 结论　头孢吡肟对革兰阴性杆菌的抗菌活性比第 3代头孢菌素强 ,且低诱导、低选择、高稳定 ,对革兰阳性球菌也有较强的抗菌覆盖     

肺炎克雷伯氏菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药性研究

目的:了解四川省泸州市地区肺炎克雷伯氏菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及产ESBLs菌株的耐药性及耐药特点。方法:按NCCLS规定的初筛及表型确认试验检测是否产ESBLs,用K-B法作药敏试验。结果:确认有28株产ESBLs,占总数的35.4%;产ESBLs菌对氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、氨曲南、头孢泊肟、头孢曲松、头孢噻肟、头孢唑啉、哌拉西林的耐药率与非产ESBLs菌相比差异有统计学意义(P<0.01);产ESBLs菌对头孢吡肟、头孢他啶的耐药率与非产ESBLs菌相比差异有统计学意义(P<0.05);对哌拉西林/三唑巴坦、头孢西丁的耐药率与非产ESBLs菌相比差异无统计学意义(P>0.05);产ESBLs与非产ESBLs菌对亚胺培南全部敏感。结论:本地区肺炎克雷伯氏菌产ESBLs菌株流行严重;产ESBLs菌对常用抗生素的体外抗菌活性明显高于非产ESBLs细菌,对青霉素类、大部分第三代头孢菌素类抗生素耐药率很高,对喹诺酮类及氨基糖苷类耐药率也较高;相当部分对第四代头孢菌素敏感,大部分对头霉素类、β-内酰胺酶抑制剂复合制剂敏感;对碳青霉烯类高度敏感。     

68株洋葱假单胞菌对12种抗生素及10种喹诺酮类抗生素的体外敏感性及耐药性的探讨

目的观察洋葱假单胞菌对10种抗生素的耐药性及其它各种抗生素耐药现状,以指导临床合理用药。方法采用纸片扩散法测定临床标本中分离的68株洋葱假单胞菌对各种抗生素的体外抗菌活性,并比较10种喹诺酮类药物的敏感性。结果洋葱假单胞菌对大多数β-内酰胺类抗生素耐药,对青霉素类、头孢他啶、头孢吡肟、头孢噻肟、安曲南高度耐药,对亚胺培南97％耐药,含酶抑制剂的β-内酰胺类复合制剂如头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦敏感率较单用相应β-内酰胺类抗生素有所提高,阿莫西林／克拉维酸则无显著性变化,氨基糖苷类抗生素庆大霉素和阿米卡星敏感率最高,复方新诺明的体外抗菌活性低于喹诺酮类。结论洋葱假单胞菌感染治疗首选喹诺酮类抗生素,严重感染可选用B一内酰胺I酶抑制剂复合制剂与喹诺酮类联合用药。     

阴沟肠杆菌耐药性观察

目的：监测阴沟肠杆菌的耐药性，探讨其变化规律，为有效控制感染和临床治疗提供依据。方法：对2001至2004年本院分离的革兰阴性杆菌使用VITEK2系统鉴定菌种，并用K-B纸片扩散法及微量肉汤稀释法（VITEK2系统测MIC）检测阴沟肠杆菌的体外耐药情况。结果：4年间阴沟肠杆菌的耐药率明显增高，头孢哌酮／舒巴坦、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟等耐药率均有不同程度增高。到2004年底，亚胺培南仍保持着对阴沟肠杆菌的100％敏感率。结论：阴沟肠杆菌耐药现象日趋严重，须引起高度重视。     

一株耐碳青霉烯阴沟肠杆菌金属β-内酰胺酶的检测

目的初步探究一株耐碳青霉烯阴沟肠杆菌的耐药机制。方法采用K-B法检测该菌株对碳青霉烯类及其他常用抗菌药物的耐药性,采用改良Hodge实验和EDTA双纸片协同试验对碳青霉烯酶进行初筛,并用4对金属酶基因引物进行PCR扩增,同时进行AmpC酶的检测。结果药敏试验显示,该菌株对碳青霉烯和三代头孢耐药,并不被传统β-内酰胺酶抑制剂所抑制(对阿莫西林-克拉维酸和头孢哌酮-舒巴坦耐药),但对单环类的氨曲南敏感。改良Hodge试验和组合纸片法金属酶的初筛试验均为阳性,PCR检测结果显示该菌株携带Vim-2及Vim-5型金属酶基因。AmpC酶检测结果表明受试菌产诱导型AmpC酶。结论产Vim-2和Vim-5型金属酶是此株阴沟肠杆菌对碳青霉烯类耐药的重要原因,产诱导型AmpC酶可能参与其多重耐药机制,同时提示碳青霉烯类耐药性有向肠杆菌科扩散的趋势。     

超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的 :了解产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL)肺炎克雷白杆菌、大肠埃希氏杆菌、阴沟肠杆菌的发生率、耐药性及耐药特点 ,指导用药。方法 :应用双纸片协同试验法对从临床感染标本中分离出的 2 1 5株革兰氏阴性菌作 ESBL的检测 ,比较亚胺培南等 1 4种抗生素对产 ESBL耐药菌体外抗菌作用。结果 :产 ESBL耐药菌占全部分离菌的 3 4.4% ,其中 ,大肠埃希氏杆菌占 47.3 % ,肺炎克雷白杆菌占 2 8.4% ,阴沟肠杆菌占 2 4.3 %。各类细菌中产 ESBL所占的比例分别是 ,大肠埃希氏杆菌为 3 1 .8% (3 5 /1 1 0 ) ,肺炎克雷白杆菌为 3 9.6% (2 1 /5 3 ) ,阴沟肠杆菌为 3 4.6% (1 8/5 2 )。在产 ESBL菌中 ,有 3株大肠埃希氏杆菌及 2株肺炎克雷白杆菌均同时对头孢噻肟和头孢他啶敏感。亚胺培南对产 ESBL耐药菌均表现出最强的抗菌作用 ;头孢西丁对产 ESBL肺炎克雷白杆菌及大肠埃希氏杆菌呈现出较好的抗菌作用。产 ESBL耐药阴沟肠杆菌对头孢西丁全部耐药 ;氨基糖苷类、氟喹诺酮类及磺胺类药物对产 ESBL肺炎克雷白杆菌、大肠埃希氏杆菌、阴沟肠杆菌有较高的交叉耐药性。结论 :对产 ESBL耐药菌感染不容忽视 ,对此类感染的治疗亚胺培南可作为首选。     

超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶细菌下呼吸道感染调查、耐药性监测

目的了解我院呼吸内科病区下呼吸道标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶细菌检出及耐药情况,以指导临床医生合理使用抗生素.方法收集我院呼吸病房2000年1月～2002年1月期间,下呼吸道标本中分离出的肠杆茵科的细茵,用纸片扩散法检测细茵的耐药性,三维试验的方法检测ESBLs及AmpC酶.结果共分离201株肠杆茵科的细茵,产ESBLs细茵32株,占16%,产AmpC酶细茵19株,占9.5%,药敏结果显示产ESBLs及AmpC酶细茵对11种抗菌素的耐药率均高于非产ESBLs及AmpC细茵.结论呼吸病区下呼吸道标本小肺炎克雷伯杆茵ESBLs检出率最高,达13%,阴沟肠杆菌AmpC酶的检出率较高.亚胺培南头霉素以及酶抑制剂是对产ESBLs细菌较为有效的药物,对产AsmpC酶的细菌,亚胺培南、头孢吡肟效果较好,对于氨基糖苷、喹诺酮、磺胺类抗茵素多重耐药呈上升趋势.     

表型筛选试验检测阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶及耐药分析

目的:对近年耐三代头孢的阴沟肠杆菌进行β-内酰酶(主要是ESBLs与AmpC酶)监测以进行流行病学调查,同时作相关统计以指导实验室检测及临床用药。方法:收集来自各种标本对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌45例表型筛选试验检测ESBLs与AmpC酶。结果:产ESBLs 42株,占93.33%,产AmpC酶8株,占17.78%,两种酶均产的有8株。结论:对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌主要产ESBLs,体外实验对亚胺培南敏感率为97.66%,对其他抗菌药物敏感性差。     

医院感染阴沟肠杆菌产金属酶及耐药性分析

目的:了解临床分离的阴沟肠杆菌的耐药性及产金属β内酰胺酶的基因分布状况。方法:临床分离的40株阴沟肠杆菌用法国梅里埃公司的V ITEK-2全自动微生物分析系统鉴定,K-B法进行抗生素敏感试验,采用纸片协同法检测金属酶,PCR法扩增金属酶基因,并对PCR产物进行电泳后纯化,测序比对确定基因型。结果:阴沟肠杆菌对头孢他啶、头孢西丁、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率分别为52.5%、92.5%、7.5%、5.5%、65.0%、12.5%、85.0%。其中40株阴沟肠杆菌中产金属酶的3株,3株菌中有2株扩增出金属酶IMP基因。结论:院内感染标本分离的阴沟肠杆菌对临床常用的多种抗生素耐药,由于金属酶菌株的存在,阴沟肠杆菌对亚胺培南等碳青霉烯类药物的耐药性增加。     

159株阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析

目的分析和探讨2007～2009年阴沟肠杆菌的临床分布及耐药情况,以指导临床合理用药,防止耐药菌株的产生及传播。方法 2007～2009年住院患者标本中分离的159株阴沟肠杆菌,VITEK-32自动微生物鉴定及药敏分析系统鉴定菌种并药敏试验,对阴沟肠杆菌的分布状况及药敏结果行分析。结果 159株阴沟肠杆菌主要分布在痰液及伤口分泌物;阴沟肠杆菌对青霉素、第一、二代头孢菌素高度耐药（〉80%）,对第三、四代头孢菌素及喹诺酮类抗菌素耐药率逐年上升,对碳青霉烯类、氨基糖苷类低度耐药。结论阴沟肠杆菌的临床检出率和耐药率日趋严重,应加强耐药性监测,指导临床合理使用抗菌药物,控制阴沟肠杆菌引起的医院感染。     

临床分离阴沟肠杆菌中新型氨基糖苷类乙酰转移酶基因的检测

目的 了解临床分离阴沟肠杆菌中新型氨基糖苷类乙酰转移酶基因[aac(6')-Ib-cr基因]的分布.方法 PCR检测aac(6')-Ib-cr基因并将阳性扩增产物进行测序分析;纸片扩散法测定aac(6')-Ib-cr基因阳性菌株对13种抗菌药物的敏感性;改良三维试验检测高产AmpC酶和ESBLs; ERIC-PCR法进行aac(6')-Ib-cr基因阳性菌株同源性检测.结果 81株阴沟肠杆菌中,3株aac(6')-Ib-cr基因阳性(3.7%); aac(6')-Ib-cr基因阳性菌株对氟喹诺酮类,氨基糖苷类,氯霉素,氨苄西林,头孢西丁,第2、3代头孢菌素等显示多重耐药2株产ESBLs和AmpC,1株产ESBLs;ERIC-PCR电泳图谱型显示,3株aac(6')-Ib-cr基因阳性细菌均不属于同一型别.结论 临床分离阴沟肠杆菌中存在aac(6')-Ib-cr基因阳性菌株,为多重耐药、非克隆传播菌株,临床应加强检测和监测.     

阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析

目的了解医院阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae,ECL）的临床分布情况及其对常用抗生素的耐药率,为临床合理使用抗生素提供依据。方法对医院2010年4月~2011年8月检出的55株阴沟肠杆菌进行药敏和超广谱β-内酰胺酶（extended spectrumβ-lactamase,ESBLs）检测,抗生素敏感测定采用K-B琼脂扩散法,产ESBLs的检测采用双纸片确认法。结果 55株阴沟肠杆菌在临床的分布以痰液为主,占49.0%,感染主要发生在重症监护病房、泌尿外科和呼吸内科。阴沟肠杆菌对美罗培南（美平）和亚胺培南（泰能）无耐药,对头孢哌酮/舒巴坦有较低的耐药率,耐药率为7.27%,对头胞噻肟、氨苄青霉素和头孢唑啉有较高的耐药率,耐药率为80.0%、100%和100%。ESBLs阳性株耐药率在头胞噻肟、头孢吡肟、头胞他啶（复达欣）、庆大霉素和头孢西丁比ESBLs阴性株高,差异有统计学意义（P〈0.05）;在头孢哌酮/舒巴坦、丁胺卡那、哌拉西林/他唑巴坦和环丙沙星的耐药率,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论应加强对阴沟肠杆菌,特别是ESBLs阳性株耐药性的监测,根据药敏试验结果合理选用抗生素是非常重要。