多重PCR检测肠源性脓毒症常见病原菌的方法构建及初步临床应用北大核心CSCD

目的构建多重PCR反应体系检测肠源性脓毒症常见病原菌的快速可靠的方法,并初步探索其临床价值。方法选择2013年6月-2015年7月医院42例肠源性脓毒症患者,随机分为多重PCR组及对照组,各21例;根据10种肠源性脓毒症常见病原菌(以下简称目标细菌)的16sRNA特异性片段设计互补序列的引物和探针;优化多重PCR反应体系并进行特异性实验及浓度梯度敏感性实验。结果多重PCR体系检测10种目标细菌的标准菌株均呈现阳性结果;浓度梯度敏感性实验提示本项目设计的多重PCR反应体系可检测的最小细菌浓度为1×103 CFU/ml,最适宜检测浓度范围1×103~1×106 CFU/ml;多重PCR组检出率显著高于对照组,多重PCR组患者SIRS持续时间、抗菌药物费用与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论本项目建立的多重PCR反应体系具备高通量、精准检测脓毒症患者感染的常见病原菌的能力;初步的临床研究提示该方法在指导肠源性脓毒症患者的抗微生物治疗中有一定的应用价值。     

多重PCR检测肠源性脓毒症常见病原菌的方法构建及初步临床应用

目的构建多重PCR反应体系检测肠源性脓毒症常见病原菌的快速可靠的方法,并初步探索其临床价值。方法选择2013年6月-2015年7月医院42例肠源性脓毒症患者,随机分为多重PCR组及对照组,各21例;根据10种肠源性脓毒症常见病原菌(以下简称目标细菌)的16sRNA特异性片段设计互补序列的引物和探针;优化多重PCR反应体系并进行特异性实验及浓度梯度敏感性实验。结果多重PCR体系检测10种目标细菌的标准菌株均呈现阳性结果;浓度梯度敏感性实验提示本项目设计的多重PCR反应体系可检测的最小细菌浓度为1×103 CFU/ml,最适宜检测浓度范围1×103~1×106 CFU/ml;多重PCR组检出率显著高于对照组,多重PCR组患者SIRS持续时间、抗菌药物费用与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论本项目建立的多重PCR反应体系具备高通量、精准检测脓毒症患者感染的常见病原菌的能力;初步的临床研究提示该方法在指导肠源性脓毒症患者的抗微生物治疗中有一定的应用价值。     

恒温扩增核酸法检测沙门菌属效果分析

目的 观察核酸恒温扩增商品试剂盒对沙门菌属的检测效果.方法 对商品销售的两种恒温扩增检测试剂与普通PCR试剂盒进行检测灵敏度、特异性及操作简便性的比较.结果 常规PCR法A、恒温扩增试剂B及C检测沙门菌属的灵敏度分别为约4×103 CFU/ml、4×103 CFU/ml和约4×104 CFU/ml;对21株临床分离的沙门菌属的检测阳性率分别为76.2％、28.6％和100.0％;用11株非沙门肠道菌株直接检测的特异性均为100.0％;检测过程除常规的核酸提取外,核酸扩增常规法、试剂B、C的核酸检测和结果观察的时间约为2、2、2.5h,以常规法及试剂C的结果观察方式比较方便.结论 试剂C操作时间短、使用方便、检测敏感度及特异性比较好,是一种适用于对沙门菌属快速检测的恒温扩增试剂;对待商品试剂应做好试用工作,以选择好真正适用的产品.     

全自动血培养仪的应用评价

目的 评价全自动血培养仪（miniVITAL）的应用情况。方法 采用前瞻性分析方法,用不同浓度的22种细菌,对血培养仪报警时间及报警率的评估。结果 设定的92瓶标本在 52 h内全部报警,最短报警时间为4h,最长报警时间为52 h。细菌浓度为1.0×106CFU/ml的标本,24h内全部报警;浓度为1.0×104CFU/ml的标本,24 h内报警率90％;浓度为1.0×102CFU/ml标本,24h内报警率82％;浓度为1.0×10CFU/ml标本,24h内报警率为69％。结论miniVITAL无论是从报警时间、报警率（包括营养要求高的苛养菌的报警率）都较理想,而且操作简单、结果快速准确。     

FFA-3纤维抗菌作用观察

采用容器振荡法、浸渍法观察FFA-3纤维抗菌作用.结果经5%纤维含量振荡过夜孵育后,大肠杆菌(ATCC25922)活菌由2×106降到0 CFU/ml;表皮葡萄球菌由6.8×105(对照)降至3.56×103CFU/ml;2株厌氧菌(类杆菌)经2h振荡孵育后菌数略减少;当纤维含量为0.7%时,大肠杆菌存活菌数仍为0.大肠杆菌和金葡萄与FFA-3纤维作用10min后,活菌数分别由109降至108CFU/ml和105降至103CFU/ml.     

高危人群HIV急性期/早期感染检测策略应用研究

目的 探索适合于高危人群HIV急性期/早期感染的检测策略,减少窗口期漏检。方法 收集来自广西的MSM人群专项调查样本,分别利用抗体诊断试剂（ELISA）、抗原抗体诊断试剂（ELISA）、抗原抗体诊断试剂（胶体金）、蛋白免疫印迹试验（WB）以及核酸检测建立四种检测策略,对常规策略与四种检测策略的检测结果进行对比和分析。结果 3253份调查样本中,策略一检测出抗体阳性、核酸阳性分别为304例、10例;策略二检测出抗体阳性、核酸阳性分别为304例、14例;策略三检测出抗体阳性、核酸阳性分别304例、17例;策略四检测出抗体阳性、核酸阳性分别为304例、20例。策略一至四的检测敏感性分别为96.91%、98.15%、99.07%、100.00%,四种策略对HIV急性期/早期感染者的检测能力优于常规策略。确证结果不确定或阴性而核酸结果阳性的病毒载量值均大于5000拷贝/ml,提示可能为HIV急性期/早期感染。结论 在HIV感染率较高的高危人群中,采用抗原抗体诊断试剂结合核酸检测方法可以检出HIV急性期/早期感染者,提高阳性检出率,四种检测策略各有优缺点,应根据实验室条件、样本量和目的选择使用。     

基于上转换发光技术的空气中病原生物快速检测技术的研究

目的探讨上转换发光技术(up-converting phosphor technology, UPT)检测空气中病原生物的应用。方法基础研究, 以金黄色葡萄球菌、鼠疫菌和大肠杆菌O157作为模拟菌株, 对UPT的性能进行验证, 包括稳定性、特异度、敏感度与响应时间试验;采用空气粒子采样器采集现场微环境试验舱中的空气样本, 并使用UPT进行检测, 同时与传统的培养法进行比较, 验证UPT的实用性。结果性能验证中, UPT检测107 CFU/ml、108 CFU/ml浓度的金黄色葡萄球菌稳定性时, 实验室内变异系数分别为9.62%和8.02%, 检测结果小于允许目标, 检测系统具有较好的稳定性。用金黄色葡萄球菌验证UPT的特异度, 结果显示非金黄色葡萄球菌均未检出, 不同种类金黄色葡萄球菌阳性检出率均为100%, 检测系统特异度较好。UPT检测不同细菌的敏感度不同, 其中金黄色葡萄球菌的检测敏感度≥104 CFU/ml, 鼠疫菌的检测敏感度≥103 CFU/ml;大肠杆菌O157的检测敏感度≥103 CFU/ml, UPT对细菌类的响应时间为15 min内(均为10 min 15 s)。用...     

2011年京杭大运河台儿庄段水质卫生状况调查

[目的]了解京杭大运河台儿庄段水质卫生状况。[方法]采取分时段、多布点的方式对运河水进行监测。[结果]2011年3、6、9、12月合计检测水样32份,细菌总数均值为2.4×103 CFU/ml,大肠菌群均值为109（MPN/100ml）;每月均检出病原菌,合计检出23种致病菌;除浑浊度超出《生活饮用水卫生标准》的卫生标准外,其他理化指标均达到《生活饮用水卫生标准》的卫生标准要求。[结论]京杭大运河台儿庄段水质卫生状况优于Ⅱ类集中式生活饮用水地表水源地水质检测指标。     

大肠杆菌O157∶H7双重荧光PCR方法的建立与应用

摘要:目的　建立快速检测食品中大肠杆菌O157︰H7的双重荧光PCR 方法。方法　针对大肠杆菌O157︰H7菌体抗原O和鞭毛抗原H的特异性基因rfbE（O157）和fliC（H7）筛选设计引物和探针,优化反应条件,建立可特异性检测大肠杆菌O157︰H7的双重荧光PCR方法,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行评价,对模拟样品和实际样品进行初步验证。结果　利用建立的方法对2株大肠杆菌O157︰H7及12株非大肠杆菌O157︰H7进行检测,O157︰H7菌株检测结果均为rfbE和fliC阳性,非O157︰H7菌株检测结果均为阴性,rfbE和fliC基因的特异性均为100%;2基因的检测灵敏度可达1.16×102 CFU/ml;批内、批间变异系数均小于3.5％;模拟样品立即检测,2个基因的最低检出限（2.7×102 CFU/ml）和细菌纯培养时接近;实际样品检测结果与我国检验检疫行业标准（SN/T 0973-2010）的检测结果一致。结论　建立的荧光定量PCR 方法特异性及重复性好,灵敏度高,可快速准确鉴定大肠杆菌O157︰H7菌株。     

血液透析室透析液及透析用水的细菌学监测

目的了解血液透析室透析液及透析用水细菌污染的原因及对策. 方法检测血液透析液及透析用水中细菌的含量及细菌种类. 结果透析器入口处透析液的平均菌落数为486 CFU/ml,透析器出口处透析液的平均菌落数为490 CFU/ml,反渗水的平均菌落数为103 CFU/ml,常见细菌为枯草杆菌、类白喉杆菌及某些革兰阴性杆菌. 结论透析液在配制的过程中,有多种环节可能造成污染,应加强透析液的监测工作,并建议修改透析液细菌监测的标准.     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

Correlates of stages of change of smoking among inhabitants of deprived neighbourhoods

BACKGROUND: This study examines the prevalence and correlates of stages of change of smoking, in terms of psychosocial, structural and sociodemographic factors, among inhabitants of deprived neighbourhoods. METHODS: Cross-sectional data were obtained from a survey on health related behaviour. Subjects were 2009 current and former smokers, aged 20-46, living in deprived neighbourhoods in Rotterdam, the second largest city in the Netherlands. Three groups of smokers were formed according to the stages of change-definitions of the Transtheoretical Model: smokers not planning to quit (precontemplators), smokers planning to quit (contemplators/preparators) and former smokers (actors/maintainers). Smokers planning to quit and smokers not planning to quit were compared regarding psychosocial factors (attitude, social norm, self-efficacy), structural factors (neighbourhood problems, material deprivation, financial problems, employment status) and sociodemographic factors (age, gender, marital status, cultural background, educational level). Former smokers were compared with smokers planning to quit regarding structural and sociodemographic factors. Logistic regression was used to assess correlates of stages of change. RESULTS: Smokers planning to quit (prevalence = 19%) reported a more positive attitude, stronger social norms and higher self-efficacy expectations in quitting smoking than smokers not planning to quit (prevalence = 57%). Smokers planning to quit less often were Dutch-born, more often had attended higher vocational schooling or university and more often reported experiencing two or more neighbourhood problems compared to smokers not planning to quit. Former smokers (prevalence = 24%) were older, more often Dutch-born, married, employed and higher educated, compared to smokers planning to quit. Furthermore, former smokers less often reported material deprivation and financial problems than smokers planning to quit. CONCLUSION: Among people living in deprived neighbourhoods, different factors correlate with different stages of change of smoking. Implications for health promotion are discussed.     

Choice of measures of vaccination and estimates of risk of pediatric pertussis

BackgroundVaccination uptake at the individual level can be assessed in a variety of ways, including traditional measures of being up-to-date (UTD), measures of UTD that consider dose timing, like age-appropriate vaccination, and risk reduction from individual doses. This analysis compared methods of operationalizing vaccination uptake and corresponding risk of pertussis infection.MethodsCity-wide case-control study of children in Philadelphia aged 3 months through 6 years, between 2001 and 2013. Multiple logistic regression was used to isolate the independent effects of each measure of vaccination uptake and the corresponding relative odds of pertussis.ResultsBeing UTD on vaccinations was associated with a 52% reduction in risk of pertussis (OR 0.48, 95% CI: 0.34, 0.69). Evaluation of delayed receipt of vaccine versus on-time UTD yielded similar results. There was a decrease in risk of pertussis for each additional dose received with the greatest reduction in pertussis infection observed from the first (OR 0.48, 95% CI: 0.28, 0.83) and second dose (OR 0.17, 95% CI: 0.08, 0.34). Additional doses conferred minimal additional protection in this age group.ConclusionExamining vaccination status by individual doses may offer improved predictive capacity for identifying children at risk for pertussis infection compared to the traditional UTD measure.     

两种不同肌瘤剔除术治疗子宫肌瘤的临床疗效比较

目的:比较腹腔镜子宫肌瘤剔除术与腹式子宫肌瘤剔除术的临床疗效。方法:回顾分析63例腹腔镜子宫肌瘤剔除术与61例腹式子宫肌瘤剔除术的临床资料,比较2种手术方式的手术时间、术中出血量、肛门排气时间、使用抗生素时间、术后感染率、体温恢复正常时间、住院时间等情况。结果:两组患者接受子宫肌瘤剔除术顺利完成,腹腔镜组手术时间长于开腹组(P0.05),腹腔镜组术中出血量及剔除肌瘤个数均少于开腹组(P0.05),术后腹腔镜组体温恢复正常时间、肛门排气时间、抗生素使用及住院时间均短于开腹组,两组患者最多随访6个月,腹腔镜组平均康复时间较开腹组短(P0.05),两组随访B超均未发现明显肌瘤结节。结论:腹腔镜子宫肌瘤剔除术损伤小,恢复快,住院时间短,是值得推广的微创手术。     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。     

性发育异常发病机制的研究进展

正常的性腺分化可分为3个过程：原始性腺形成、性别决定和卵巢/睾丸发育。在任一环节中,基因表达或调控发生异常均有可能导致性发育异常疾病的发生。性发育异常是指染色体、性腺和解剖性别不典型。随着分子生物学技术的发展,不断地发现新的基因或信号通路参与性腺分化和发育,如SRY、SF1、WT1、Sox9等基因与睾丸发育密切相关,Wnt/Rspo1/B连环蛋白通路、Dax1、Foxl2等基因在卵巢分化中发挥着重要作用,一些非编码RNA和转化生长因子也有重要的调节功能,且睾丸和卵巢发育均为主动过程,即使在出生后因某些基因的改变两者间也可出现横向分化。这些为揭示性分化异常的发病机制提供了可能。     

尘肺病患者145例死因调查

目的分析汉中市尘肺病的发生、发展和死亡原因，以提高尘肺病患者的生存质量。方法对145例尘肺病患者的死因进行回顾性分析，计算其平均发病年龄、死亡年龄及患尘肺病后的存活年限。结果矽肺的平均发病年龄和死亡年龄均早于煤工尘肺和石棉肺，尘肺病的主要死因为患肺部疾患，患尘肺病后的平均存活年限为12a。结论加强职业健康体检工作，对尘肺病人做到早发现早治疗和预防并发症的发生。     

One-year stability of the Measure of Processes of Care

BACKGROUND: The Measure of Processes of Care (MPOC) is a 56-item self-administered measure designed to examine what parents of a child with a chronic health problem think of the services they and their child receive, and to measure the extent to which these services are family-centred. Reliability and validity of the MPOC were established in prior studies. The aim of the present study was to assess the 1-year stability of the MPOC to justify its use as an evaluative tool. METHODS: Nine paediatric rehabilitation centres in the Netherlands participated in this short longitudinal survey study. Subjects were 205 parents (response rate 74.8%) of children aged 1-18 years who received care in one of the participating paediatric rehabilitation centres. All subjects filled out two MPOCs with a 1-year interval. RESULTS: All correlations between the scale scores of the MPOC at the first and second administration were relatively high and significant (range: 0.443-0.609, all P < 0.001), demonstrating high inter-individual stability. However, all mean scale scores, except for Providing General Information, significantly reduced after 1 year. CONCLUSIONS: The MPOC has a moderate 1-year stability. However, because of its tendency to score lower when repeated after 1 year, its use as an evaluative follow-up instrument to assess the effectiveness of a programme intervention is restricted.     

儿童皮质发育畸形的MRI诊断

目的探讨儿童皮质发育畸形(MCD)的MRI表现特点,为MCD的早期诊断提供依据。 方法选择2010年1月至2012年12月在四川省医学科学院·四川省人民医院放射科经MRI检查确诊为MCD的44例患儿为研究对象。回顾性分析及总结其MRI影像学特征。本研究遵循的程序符合四川省医学科学院·四川省人民医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,征得受试对象及其监护人知情同意,并与监护人签署临床研究知情同意书。 结果本组44例经MRI确诊为MCD患儿中,巨脑回-无脑回为17例,多小脑回为14例,灰质异位为9例,脑裂畸形为4例。MCD的MRI特点中,巨脑回表现为脑回增宽、皮质增厚及白质变薄;无脑回表现为正常脑沟、脑回消失,皮质增厚及白质变薄;多小脑回表现为脑回增多、细小;灰质异位表现为皮质下及侧脑室周围深部白质区结节状、团块状或带状病灶,信号与灰质信号相同;脑裂畸形表现为从侧脑室到脑表面贯穿大脑半球的裂隙,表面覆盖灰质。 结论MRI是诊断儿童MCD的可靠影像学方法。     

244株真菌鉴定结果分析

目的 了解某院2000～2001年各类真菌的检出率。方法 用酵母样真菌同化试验编码鉴定板TH-15进行编码鉴定。结果 真菌分离率为8．85％；244株真菌分为10种，其中以白色念珠菌和热带念珠菌较高，分别占真菌总数的75．41％和11．47％；检出真菌的主要标本是痰和阴道分泌物。结论 及时进行真菌培养，有利于合理使用抗菌药物和控制真菌感染。