生大黄防治新生鼠缺氧肠损伤的初步研究

【目的】为寻找新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)更好的临床防治方法,对生大黄防止新生鼠缺氧性肠损伤的效果进行了观察。【方法】选用新生1日龄Wistar大鼠,将其制成缺氧肠损伤模型,然后喂生大黄(A组),4 d后取肠组织作病理评分检查,并检测肠组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量。同时设皮下注射肠三叶因子(B组)及对照组(C组为未给药组、D组为未行缺氧实验组)。【结果】AB两组动物肠组织病理损伤程度轻,病理评分相近,均低于C组(P<0.01)。A、B两组MDA及TNF-α含量低于C组,差异有非常显著性(P<0.01),与D组比较无差别(P>0.05)。【结论】生大黄具有与肠三叶因子相同的防治NEC的效果,能减少缺氧肠损伤组织中TNF-α及MDA的产生。因其价廉易得,且已在新生儿临床应用,故比肠三叶因子具有更好的应用前景。     

新生大鼠高氧肺损伤肺组织超微结构及VEGF蛋白表达变化

【目的】探讨高氧对新生大鼠肺组织超微结构的影响及其血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor VEGF)蛋白表达的变化。【方法】新生SD大鼠48只随机分为高氧试验组和空气对照组,高氧试验组吸入95%以上高氧建立高氧肺损伤模型。采用透射电镜和免疫组化观察新生大鼠3、71、4 d肺组织超微结构和VEGF蛋白表达变化。【结果】吸入高氧3 d新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC-II)出现板层小体结构松散,部分血管内皮细胞肿胀,随着高氧吸入时间的延长,14 d时AEC-II、血管内皮细胞产生了致死性损害作用,出现了类似早产儿支气管肺发育不良的肺组织形态学特征。VEGF蛋白在高氧吸入3 d时出现降低,7 d明显降低,到14 d时进一步降低。【结论】持续高氧吸入可造成新生大鼠肺肺泡Ⅱ型上皮细胞和血管内皮细胞损害。高氧可抑制VEGF蛋白在新生大鼠肺内的表达,VEGF可能在新生鼠肺发育和高氧肺损伤发病机理中起重要作用。     

地塞米松对新生鼠高氧肺损伤的作用机制探讨

【目的】探讨地塞米松在新生鼠高氧肺损伤中的作用及其作用机制,为临床合理用药提供参考。【方法】将3 d SD新生鼠随机分为高氧(95%左右氧7 d)、高氧+地塞米松和空气氧组;HE染色观察肺组织形态结构,做辐射状肺泡计数(radical alveoli count,RAC);免疫组化检测TGF-β1表达。【结果】①高氧组可见肺泡壁较薄、结构简单化、肺泡大小不均,有些肺泡融合、体积增加,地塞米松组除具有上述高氧组特征外,肺组织结构明显紊乱,部分肺泡壁及间隔破坏;高氧组(9.50±1.05)和地塞米松组(10.03±3.26)RAC值较正常组(13.00±1.79)减少(P均<0.05)。②TGF-β1免疫组化阳性细胞主要分布在肺间隔,较厚肺泡壁也有散在分布;正常组表达较少,散在分布,偶见靠近支气管部位的集中显色;高氧组阳性细胞明显增多,可见明显集聚,地塞米松组阳性显色也明显多于正常组,但多为散在分布。高氧组、地塞米松组和正常组表达积分分别为1.76±0.66、1.62±0.60和1.28±0.64,两组均高于正常组(P值均<0.05)。【结论】新生鼠3~10 d暴露于高氧环境(95%),可使肺组织TGF-β1表达明显增高,导致肺泡化停滞,地塞米松可加重这一病理改变。     

高氧加重通气机所致肺损伤及地塞米松的防护作用

目的观察高浓度氧对通气机所致肺损伤的影响,以及地塞米松的防护作用。方法将36只健康雄性SD大鼠随机分为A、B、C三组。A组实施空气大潮气量通气,B组实施高氧大潮气量通气,C组为地塞米松干预组。每小时进行1次动脉血气分析,计算氧合指数。测定左肺湿/干(W/D)值,支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞及中性粒细胞计数,肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-2含量与肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果B组大鼠氧合指数较A组显著下降(P<0.01);左肺W/D值,BALF中白细胞及中性粒细胞计数,TNF-α、IL-1β、MIP-2、肺组织MDA水平较A组显著增高(P<0.01);SOD水平较A组显著下降(P<0.01)。C组大鼠氧合指数较B组显著增高(P<0.01);左肺W/D值,BALF中白细胞及中性粒细胞计数,TNF-α、IL-1β、MIP-2、肺组织MDA水平较B组显著下降(P<0.01);SOD水平较B组显著增高(P<0.01)。结论高浓度氧能加重通气机所致大鼠急性肺损伤,地塞米松对高氧加重的通气机所致肺损伤有较明显的防护作用。     

川芎嗪对高体积分数氧肺损伤新生大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨高氧性肺损伤新生大鼠肺损伤过程中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达情况,并观察川芎嗪对高氧性肺损伤的干预作用。方法 96只出生12 h内的清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠作为研究对象。随机分成4组(每组24只):Ⅰ组:空气对照组;Ⅱ组:空气+川芎嗪组;Ⅲ组:高氧组;Ⅳ组:高氧+川芎嗪组。Ⅲ组、Ⅳ组新生大鼠高氧暴露(氧体积分数850 mL/L),Ⅱ组、Ⅳ组予每日腹腔注射溶于9 g/L盐水的川芎嗪30 mg/kg,Ⅰ组、Ⅲ组予等量9 g/L盐水注射。在实验3、7 d和14 d每组随机选取8只处死,取其肺组织,采用HE染色观察其肺组织病理改变,免疫组织化学方法检测其血小板内皮细胞表面黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1)及VEGF水平的表达,以PECAM-1阳性染色的内皮细胞面积与肺实质细胞总面积的百分比代表肺微血管密度。结果 第3,7,14天Ⅲ组RAC值及微血管密度较Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅳ组均减少(P<0.05)。Ⅲ组新生大鼠第3,7,14 d时肺组织PECAM-1及VEGF蛋白表达明显低于Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅳ组。Ⅳ组新生大鼠第3,7,14 d时肺组织RAC值、肺微血管密度、PECAM-1及 VEGF蛋白表达和Ⅰ组、Ⅱ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 高氧暴露抑制新生鼠肺VEGF的表达,川芎嗪可改善肺发育,作用机制可能与上调VEGF的表达有关。     

异丙酚注射液和微量肝素对新生大鼠高氧肺损伤的影响

目的:探讨异丙酚注射液和微量肝素对新生大鼠高氧肺损伤的影响,为高氧肺损伤的临床治疗提供理论依据。方法:选取Wistar乳鼠120只,随机分为空气对照组、高氧模型组、异丙酚治疗组和微量肝素治疗组,每组各30只。实验开始第3、7及14天各处死10只动物,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),采用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(MDA)水平,取肺组织测定肺湿/干质量比(W/D),观察肺水肿情况,采用HE染色观察肺组织的病理变化,采用免疫组化染色观察肺组织中TNF-α的表达和Clara细胞的数量。结果:异丙酚治疗组BALF中MDA水平、肺W/D、肺组织中TNF-α的表达强度明显低于高氧模型组,Clara细胞数明显高于高氧模型组,差异均有统计学意义(P均<0.01);但各药物之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:异丙酚注射液及微量肝素可以减轻新生大鼠高氧肺损伤程度,对高氧环境下的肺组织具有一定的保护作用。     

前列腺素E_1对新生大鼠高氧肺损伤的影响

目的:探讨前列腺素E1(Prostaglandin E1,PGE1)对高氧诱发新生大鼠肺损伤的影响。方法:选用新生Wistar乳鼠90只,随机均分为3组(空气对照组,高氧模型组和PGE1治疗组)。每组大鼠于第3、7及14天分别处死各10只,采用硫代巴比妥酸法及考马斯亮蓝方法检测丙二醛(MDA)及总蛋白(TP)水平;光镜下观察肺组织的病理变化,采用免疫组化染色观察肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)、γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果:高氧模型组BALF中MDA水平、TP水平、肺组织中CTGF、IFN-γ及TNF-α的表达强度明显高于空气对照组,PGE1治疗组BALF中MDA水平、TP水平、肺组织中CTGF、IFN-γ及TNF-α的表达强度明显低于高氧模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:前列腺素E1对新生Wistar乳鼠高氧肺损伤有保护作用,其作用机制可能与抑制氧自由基和细胞因子的释放有关。     

氧化苦参碱对哮喘小鼠肺组织中TGF-β1及AngⅡ表达的影响

【目的】研究氧化苦参碱(oxymatrine,Oxy)对小鼠哮喘肺组织中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血管紧张素II(angiotensinII,AngII)表达变化的影响。【方法】选用6～8周龄BALB/c小鼠50只,随机分为哮喘组(A),地塞米松治疗组(B),氧化苦参碱20mg/kg组(C)、40mg/kg组(D)、80mg/kg组(E)干预治疗各组10只。采用卵白蛋白(ovalbumin,OVA)加氢氧化铝[AI(OH)3]佐剂致敏的方法制备小鼠哮喘模,HE染色观察肺织病理形态学改变,免疫组化法检测肺组织中TGF-β1、AngII的表达变化。【结果】HE染色显示,A组肺组织出现明显的炎症反应,其他各组干预治疗后气道炎症反应均轻于A组。A组肺组织中TGF-β1、AngII可见较多阳性表达,B组地塞米松干预后阳性表达明显降低(P0.01)。氧化苦参碱干预治疗后,C组、D组、E组的TGF-β1、AngII阳性表达均较A组降低(P0.01),氧化苦参碱40和80mg/kg组肺组织中TGF-β1、AngII表达减少更显著,C与D,E比较差异有统计学意义(P0.05)。【结论】氧化苦参碱能减轻哮喘气道炎症,并可抑制哮喘气道TGF-β1、AngII的表达,在哮喘治疗中有良好的作用。     

伊诺舒注射液对新生大鼠高氧肺损伤的影响

目的:探讨伊诺舒注射液(Ambroxol Hydrochloride Injection,AHI)对高氧诱发新生鼠肺损伤的影响。方法:选用新生Wistar乳鼠120只,随机分为3组(每组n=30),空气对照组、高氧模型组、AHI治疗组。空气对照组新生鼠暴露在室内空气中,其他各组新生鼠暴露在90%O2共14天,实验开始第2天治疗组腹腔内注射AHI(50 mg/kg),空气对照组和高氧模型组腹腔内注射生理盐水,实验开始第3、7及14天每组处死10只动物,取支气管-肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)检测丙二醛(MDA)水平。光镜下观察肺组织的病理变化,采用免疫组化染色观察肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达和Clara细胞的数量。结果:高氧模型组BALF中MDA水平、肺组织中CTGF及TNF-α的表达强度明显高于空气对照组,Clara细胞数明显低于空气对照组,均有显著性差异(均P<0.01);AHI治疗组BALF中MDA水平、肺组织中CTGF及TNF-α的表达强度明显低于模型组,Clara细胞数明显高于模型组,均有显著性差异(均P<0.01)。结论:AHI对新生大鼠高氧肺损伤有保护作用。     

谷氨酰胺对肺部感染肺炎克雷伯菌大鼠的保护作用

目的研究全胃肠外营养(total parenteral nutrition,TPN)中谷氨酰胺对肺部感染肺炎克雷伯菌大鼠的保护作用。方法将50只SD大鼠随机平均分成A、B、C、D、E 5个组,第1～2天,给予普通饮食,同时静脉泵入生理盐水80 ml/kg·d;第3～7天,A、B组大鼠给予普通饮食同时静脉泵入生理盐水160 ml/kg·d,C、D、E组大鼠禁食,C组静脉泵入不含谷氨酰胺的标准肠外营养液160 ml/kg·d,D、E组静脉泵入内含谷氨酰胺的标准肠外营养液160 ml/kg·d(D组谷氨酰胺按0.5 g/kg·d配制,E组按2.5 g/kg·d配制);第8天,A组大鼠气管内注入生理盐水0.3 ml,B、C、D、E组大鼠气管内注入肺炎克雷伯菌0.3 ml。48 h后,取外周血及肺泡灌洗液进行白细胞计数、总蛋白定量、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1-β(IL1-β)、白介素-8(IL-8)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、血胱抑素C(Cys C)检测;光镜下观察肺组织病理变化。结果实验结束时C组大鼠体质量低于A、B、D组(P<0.05); C组大鼠死亡只数多于D、E组(P<0.05); 5组大鼠白细胞计数、IL-1β、IL-8、TNF-α、CRP、PCT、Cys-C水平比较差异有统计学意义(P<0.05); C组白细胞计数及血清IL-1β、IL-8、TNF-α、CRP、PCT、Cys-C水平均高于D、E组,E组血清IL-1β、TNF-α、CRP、PCT、Cys-C高于D组(P<0.05);光镜下C组大鼠肺组织损伤程度重于D、E组。结论谷氨酰胺对接受肠外营养的大鼠有保护作用,可以提高肺的抗感染能力,减轻严重感染造成的损伤。