丙泊酚对肝癌细胞侵袭能力的影响

目的探讨丙泊酚对肝癌细胞株SMMC-7721侵袭特性和MMP-2、MMP-9的影响。方法不同浓度的丙泊酚处理SMMC-7721细胞,用Transwell小室模型测定SMMC-7721对细胞外基质Matrigel的侵袭力,明胶酶谱法检测培养上清液中MMP-2、MMP-9的变化。结果经过5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL的丙泊酚处理后,SMMC-7721侵袭力均明显下调,培养上清液中MMP-2、MMP-9的含量也明显下降。结论丙泊酚可抑制肝癌细胞株SMMC-7721的体外侵袭力,同时明显降低SMMC-7721细胞分泌基质金属蛋白酶。     

肝癌细胞株SMMC-7721中CD147和MMP-9的表达及意义

目的研究肝癌细胞系SMMC-7721中CD147与基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达及意义。方法用流式细胞仪检测正常肝细胞L-02与肝癌细胞SMMC-7221中CD147的表达；用免疫组化法检测两种细胞产生的MMP-9的表达。结果正常肝细胞L-02中CD147表达阴性，SMMC-7721中CD147表达呈强阳性（阳性率为98．1％）；MMP-9在正常肝细胞及肝癌细胞中均有表达，但在肝癌细胞中表达明显增高。结论肝癌细胞系SMMC-7721中CD147与MMP-9表达明显增高，与肝癌的侵袭转移潜能有关。     

模拟气腹对肝癌SMMC-7721细胞侵袭的影响

目的：通过体外模拟气腹环境,观察不同压力CO2对肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力的影响。方法：建立体外气腹模型,将人肝癌细胞株SMMC-7721分别在5mmHg、10mmHg、15mmHg不同压强CO2气腹环境及常规培养环境中暴露2h,然后继续常规培养。用Transwell侵袭小室检测细胞体外侵袭能力的变化;黏附试剂盒及免疫细胞化学方法检测不同时间点细胞黏附能力及基质金属蛋白酶9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达。结果：肝癌SMMC-7721细胞侵袭、黏附能力及MMP-9蛋白表达在15mmHg组中比在对照组中显著提高（P〈0.05）;VEGF蛋白表达在10mmHg组和15mmHg组中比在对照组中均显著提高（P〈0.05）;细胞黏附表达及MMP-9、VEGF蛋白表达在CO2气腹作用后逐渐升高,36h达高峰,随后下降。结论：较高压力CO2气腹环境对肝癌SMMC-7721细胞的侵袭能力有显著促进作用,可能与CO2气腹显著促进肝癌SMMC-7721细胞MMP-9及VEGF蛋白表达有关。     

Mfn-2沉默对肝癌细胞侵袭及PITPNM3表达的影响

目的探究Mfn-2沉默对肝癌细胞侵袭的影响及其潜在的分子机制。方法用Mfn-2-siRNA和siRNA转染SMMC-7721细胞,为Mfn-2-siRNA组和siRNA组,以未经转染的细胞作为对照组。转染48 h后,采用荧光倒置显微镜检测转染效率,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SMMC-7721细胞中Mfn-2的表达情况,Transwell小室检测SMMC-7721细胞侵袭能力,免疫组化和Western blot检测SMMC-7721细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和磷脂酰肌醇转移蛋白3(PITPNM3)蛋白表达情况。结果荧光倒置显微镜检测结果显示,转染效率约85%;siRNA组SMMC-7721细胞中Mfn-2 mRNA的表达水平与对照组相比无显著差异(P0.05),Mfn-2-siRNA组SMMC-7721细胞中Mfn-2 mRNA的表达水平显著低于对照组(P0.05);siRNA组SMMC-7721细胞侵袭能力、以及MMP-2和PITPNM3的表达水平与对照组相比无显著差异(P0.05),Mfn-2-siRNA组SMMC-7721细胞侵袭能力、以及MMP-2和PITPNM3的表达水平显著高于对照组(P0.05)。结论 Mfn-2沉默能够增强肝癌细胞SMMC-7721的侵袭能力,推测这一作用是通过上调MMP-2和PITPNM3的表达水平实现的,上述结果为肝癌的治疗和靶向药物的开发提供了一定理论基础。     

多核白细胞弹性蛋白酶对人角膜基质细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

目的观察多核白细胞弹性蛋白酶与白细胞介素-1α对人角膜基质细胞表达的MMP-2、MMP-9的影响,进而探讨角膜溃疡的发生机理。方法体外培养人角膜基质细胞,在培养液中添加或不添加多核白细胞弹性蛋白酶或白细胞介素-1α,培养5天,通过明胶酶谱分析的方法测定培养上清中的MMP-2和MMP-9的表达。结果体外培养的人角膜基质细胞无任何刺激下可释放MMP-2;白细胞介素-1α可加强并激活MMP-2的表达,同时可诱导MMP-9前体的释放;多核白细胞弹性蛋白酶在白细胞介素-1α诱导下可完全激活前体MMP-9转化为活化形式。结论多核白细胞弹性蛋白酶和白细胞介素-1α协同作用参与角膜溃疡的发生。     

BMP-2对人肝癌SMMC7721细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

目的:探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对肝癌SMMC7721细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达及分泌的影响.方法:分别采用半定量逆转录聚合酶链反应、Western blot及ELISA法检测BMP-2干预SMMC7721细胞后MMP-2、9 mRNA、蛋白表达和浓度水平的变化.结果:BMP-2呈剂量和时间依赖性促进人肝癌SMMC7721细胞MMP-2、9 mRNA、蛋白表达和分泌.结论:BMP-2可以上调MMP-2、9在肝癌SMMC7721细胞的表达水平,从而促进肝癌细胞的生长和侵袭能力.     

基质金属蛋白酶2,9在高氧所致急性肺损伤实验中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,MMP-9)在高氧所致急性肺损伤发病过程中的作用.方法将54只小鼠置于密闭的氧气室暴露于＞95%的高氧,另取18只小鼠置于呼吸室内(空气)作为对照组.分别于24,48和72 h取出小鼠评价肺损伤程度,以基质金属蛋白酶谱分析调查支气管肺泡灌洗液中MMP-2及MMP-9的释放及活性.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学法测定肺组织MMP-2及MMP-9的表达及组织分布.结果高氧能引起急性肺损伤伴支气管肺泡灌洗液MMP-2及MMP-9释放及活性增加,RT-PCR结果显示高氧组动物肺组织MMP-2及MMP-9的mRNA表达增高,免疫组织化学研究显示MMP-2和MMP-9蛋白主要表达于气道上皮细胞、血管平滑肌细胞和炎性细胞的胞浆中,它们在气道上皮细胞的表达在高氧环境下明显升高.结论基质金属蛋白酶2,9在高氧所致的急性肺损伤过程中发挥重要作用.     

MMPs／TIMPs在卵巢癌细胞中的表达

[目的] 了解卵巢癌患者肿瘤细胞中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)和金属蛋白酶的组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases，TIMPs)蛋白的表达水平，探讨MMPs/TIMPs与卵巢癌之间的相互关系。[方法] 应用ELISA方法，检测卵巢癌细胞培养上清中MMP-2、MMP-9以及TIMF-1、TIMP-2的分泌水平；采用MTS掺入试验，检测在rhMMP-2，或抗MMP-2中和抗体的作用下，卵巢癌细胞的增殖水平。[结果] 卵巢癌细胞能自发的分泌一定水平的MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2。MMP-2与TIMP-2的比值对于卵巢癌的转移具有重要的意义。MMP2对卵巢癌细胞有明显地促增殖作用，抗MMP-2单抗能够明显的抑制卵巢癌细胞的生长。[结论]MMP-2与TIMP-2的比值有望作为卵巢癌发生转移、预后判定的一项检测指标。     

ARK5、MMP-2和MMP-9在胃癌中的表达及与侵袭转移的关系

目的:探讨ARK5、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在胃癌组织中的表达及与胃癌侵袭转移的关系。方法:免疫组织化学方法检测66例胃癌组织及20例正常胃组织中ARK5、MMP-2、MMP-9的表达;脂质体介导法将ARK5-siRNA转染入胃癌细胞株SGC-7901(siARK5/SGC7901细胞组),以SCRsiRNA转染组(scr/SGC7901细胞组)作为对照组,Western blot检测转染后ARK5、MMP-2、MMP-9蛋白表达;Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力。结果:ARK5、MMP-2、MMP-9在胃癌组织中的阳性表达率分别为68%、76%、68%,三者之间差异具有统计学意义(P<0.05);ARK5的表达与胃癌的浸润深度、细胞分化程度、TNM分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05);转染后siARK5/SGC7901细胞组表达ARK5、MMP-2和MMP-9蛋白水平降低,体外侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论:ARK5、MMP-2和MMP-9在组织中的表达有相关性,ARK5与胃癌的侵袭和转移密切相关,可作为判断预后的指标和化学治疗的靶点。     

金雀异黄素抗人肝癌SMMC-7721细胞侵袭作用的研究

目的 研究金雀异黄素用于抑制肝癌浸润、转移的可能性。方法 用Western blot法检测人肝癌SMMC-7721细胞在金雀异黄素作用下侵袭能力的改变。结果 金雀异黄素可降低SMMC-7721细胞的侵袭能力,抑制MMP-2、MMP-9、NF-κB的分泌,促进TIMP-2的分泌。结论 金雀异黄素通过调控人肝癌细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-2、NF-κB表达,在一定程度上可以抑制人肝癌细胞的浸润与转移。     

低密度脂蛋白循环免疫复合物对U937细胞基质金属蛋白酶-1及其抑制物的作用

目的探讨低密度脂蛋白循环免疫复合物(LDL-IC)对U937细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响。方法分别采用不同浓度的天然低密度脂蛋白(N-LDL)、氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)及其免疫复合物作用U937细胞,通过半定量RT-PCR分析U937细胞中MMP-1和TIMP-1基因表达的变化。结果正常U937细胞几乎不表达MMP-1,而高表达TIMP-1。N-LDL对细胞MMP-1和TIMP-1 mRNA表达没有影响。Ox-LDL能引起MMP-1轻度表达,但显著地下调TIMP的表达;而天然、氧化LDL的循环免疫复合物均非常显著地增加MMP-1和降低TIMP-1的mRNA表达(P<0.001),且较Ox-LDL对MMP-1的作用更为显著(P<0.001),并具剂量效应。结论N-LDL-IC和Ox-LDL-IC增强U937细胞MMP-1 mRNA表达,下调其抑制物TIMP-1的表达。     

MMP-9和CD44V6在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-9和CD44V6在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌侵袭,转移的关系。方法采用免疫组化S-P方法对92例乳腺癌(20例导管内癌,72例乳腺浸润癌),20例乳腺增生组织MMP-9,CD44V6进行标记和分析。结果MMP-9和CD44V6在乳腺增生组织中几乎不表达,导管内癌,乳腺浸润癌表达率显著增高,各组间差异有显著性(P<0·05),而且MMP-9与CD44V6过表达与淋巴结转移有关。结论MMP-9和CD44V6的过表达在乳腺癌侵袭和转移中发挥重要,可作为乳腺癌侵袭和转移的重要分子学标志。     

口腔疣状癌基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制因子-2的表达及其相关性的研究

目的:研究口腔疣状癌中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-2)的表达.探讨其在口腔疣状癌发生发展过程中的作用和意义.方法:取25例口腔疣状癌,10例正常口腔黏膜,25例口腔鳞癌(高、低分化鳞癌各为15、10例),应用免疫组织化学法检测上述标本中MMP-2、MMP-9及,TIMP-2的表达和分布.结果:正常口腔黏膜组织TIMP-2为阴性表达:MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为10.00%、20.00%.口腔疣状癌MMP-2阳性表达率为28.00%.MMP-9阳性表达率为44.00%,TIMP-2阳性表达率为72.00%.口腔疣状癌、口腔高分化鳞癌、口腔低分化鳞癌MMP-2、MMP-9、TIMP-2表达均高于正常口腔黏膜(P<0.05).结论:在口腔疣状癌,口腔高分化鳞癌、口腔低分化鳞癌中.MMP-2与MMP-9的阳性表达率呈正相关,与TIMP-2呈负相关;相关分析发现,MMP-2、MMP-9和TIMP-2的袁达两两相关,同时3者的表达可能单独或共同参与.     

幽门螺杆菌感染与不同胃粘膜病变中基质金属蛋白酶-9表达的关系

目的　探讨基质金属蛋白酶9(MMP 9)在胃癌及不同胃粘膜病变发生过程中的表达,及其与幽门螺杆菌的相互作用。方法　选择2 0 9例病例,包括慢性胃炎2 0例、肠上皮化生18例、轻度不典型增生4 1例、中重度不典型增生76例及胃癌5 4例;HP检测采用Giemsa染色、快速尿素酶试验或14 C尿素呼气试验;SP法检测MMP 9的表达。结果　慢性胃炎粘膜组未见MMP 9表达,肠上皮化生粘膜组MMP 9阳性率为4 4 .4 % ,轻度不典型增生粘膜组MMP 9阳性率为4 8.9% ,中、重度不典型增生粘膜组MMP 9阳性率为71.1% ,胃癌组MMP 9阳性率为83.3% ,明显高于慢性胃炎粘膜组(P <0 .0 1) ,高于不典型增生粘膜组(P <0 .0 1)。MMP 9在不典型增生及胃癌的HP阳性组中的表达率明显高于HP阴性组(P <0 .0 5 )。结论　MMP 9在胃癌中有较高的阳性率,与HP感染密切相关,可作为诊断胃癌的一个参考指标。     

MMP-2，TIMP-2，MMP-9的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的检测胃癌组织以及癌旁胃组织中MMP．2、TIMP．2、MMP．9的表达差异,并分析其对胃癌侵袭转移能力的影响及其可能机制。方法将97例胃癌组织以及89例癌旁胃组织制作成组织芯片,用免疫组织化学半定量的方法检测MMP-2、TIMP-2、MMP-9在胃癌组织及癌旁胃组织中的表达程度并分析其与临床病理参数的关系。结果MMP-2、TIMP-2、MMP-9在89例胃癌组织和配对的癌旁胃组织中的表达均有显著差异（P〈O．01）,其中MMP-2在胃癌组织的表达大于其在癌旁非肿瘤胃组织,而TIMP．2、MMP．9在胃癌组织的表达小于其在癌旁非肿瘤胃组织。MMP-2的高表达率与胃癌组织的临床分期,浸润深度,淋巴结转移显著正相关（P〈0．01）;TIMP．2与胃癌组织的临床分期,浸润深度（P〈0．01）,淋巴结转移（P〈0．05）显著负相关。MMP．9在肠型胃癌的表达要显著高于弥漫型胃癌（P〈O．05）。MMP-2的高表达与TIMP-2的高表达显著负相关（P〈O．01）。结论MMP-2可促进胃癌的侵袭转移,在胃癌组织高表达;TIMP-2抑制胃癌的侵袭转移,在胃癌组织低表达;MMP-2的表达与TIMP-2的表达显著负相关。MMP-9在胃癌组织表达低,．在肠型胃癌中的表达显著高于弥漫型胃癌,与TIMP-2的表达无显著相关性。     

Angiogenesis extent and expression of matrix metalloproteinase-2 and -9 correlate with upgrading and myometrial invasion in endometrial carcinoma

BACKGROUND: Changes in angiogenesis and expression of extracellular matrix-degrading enzymes have been substantiated during tumour changeover and progression. METHODS: Tissues from 64 biopsies of endometrial carcinoma (EC) and 15 biopsies of normal (control) endometrium were investigated immunohistochemically to determine their microvessel number, and by in situ hybridisation to determine the expression of mRNA of the matrix metalloproteinase-2 (MMP-2, gelatinase A) and metalloproteinase-9 (MMP-9 gelatinase B). EC were grouped according to both histological grade (G) G1 to G3 and depth of myometrial (M) invasion M1 to M3. RESULTS: EC as a whole gave significantly higher counts over control endometria. Counts of the G1 group overlapped those of the control group, increased significantly in the G2 and even more in the G3 group. G3 biopsies in particular also displayed most microvessels widely scattered in the tumour tissue, in close association with tumour cells, and as winding and arborized tubes, often dilated in microaneurysmatic segments. Counts also increased in M2 and M3. Expression of the MMP-2 and MMP-9 mRNA, evaluated as percentages of positive biopsies and intensity of expression, were upregulated with the transition from control and G1 groups to G2 and G3, and in relation to advancing depth of invasion. In EC, MMP-2 and MMP-9 mRNA were also expressed by host stromal cells, including microvascular endothelial cells, fibroblasts and macrophages. In the control biopsies, poor expression of MMP-2 mRNA in few endothelial cells and no expression of MMP-9 mRNA were detected. CONCLUSION: These in situ data suggest that angiogenesis and degradation of extracellular matrix occur simultaneously with EC upgrading and advancing depth of invasion, and that EC cells and some host stromal cell populations cooperate in tumour progression.     

复方藤梨根制剂抑制胃癌转移与MMP-9、TIMP-1和E-cad表达的关系研究

目的观察复方藤梨根制剂对胃癌细胞MMP-9、TIMP-1和E—cad蛋白表达的影响,探讨其抗胃癌细胞转移的作用机制。方法以SGC-7901胃癌细胞株建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,将裸鼠随机分为0．9％氯化钠溶液组（对照组）、复方藤梨根制剂低剂量、中剂量及高剂量组,接受连续21d灌服治疗。待裸鼠衰竭或死亡后解剖观察肿瘤转移等情况;用免疫组化方法检测肿瘤组织中MMP-9、TIMP-1和和E—cad蛋白表达的变化。结果根据胃癌裸鼠动物模型的转移部位进行赋值评分,氯化钠溶液与中、高剂量组比较差异有统计学意义（F=5．15,P〈0．05）,与低剂量组之间比较差异无统计学意义（F=1．27,P〉0．05）。经免疫组化法检测．对照组的胃癌细胞的MMP-9明显高于中、高剂量复方藤梨根制剂组（B3．86,P〈0．05）;对照组的胃癌细胞的,TIMP-1蛋白表达明显低于中、高剂量复方藤梨根制剂组（止4．30．P〈0．05）：而E—cad表达各组之间差异无统计学意义（F=0．41。P〉0．05）。结论复方藤梨根制剂可能是通过下调MMP-9和上调TIMP-1的途径发挥抗胃癌转移作用：而对E—cad的异常表达没有明显调节作用。     

莫索尼定及贝那普利对肾组织细胞外基质调节因子影响的研究

目的应用交感神经抑制剂莫索尼定及贝那普利干预阿霉素肾病大鼠,比较二者对肾组织细胞外基质及其调节因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白组织抑制因子-1(TIMP-1)的影响。方法大鼠右肾摘除加尾静脉注射阿霉素,随机分为模型组、莫索尼定组、贝那普利组、对照组。12周测血、尿生化指标及血压;光镜及电镜观察肾组织形态学改变;免疫组化检测肾组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达;原位杂交测MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠蛋白尿、血浆NE、AngⅡ水平、血压、肾损害指标均上升;肾组织内MMP-9、TIMP-1蛋白及mRNA表达均明显上调;两治疗组与模型组比较,MMP-9蛋白及mRNA进一步上调,生化指标及TIMP-1都被显著抑制。贝那普利较莫索尼定更明显降低蛋白尿及血浆AngⅡ水平。结论莫索尼定及贝那普利均具有肾保护作用,部分机制可能是通过抑制交感神经活性,调节细胞外基质降解而起作用。     

缺血性脑损伤基质金属蛋白酶-9的表达与梗死面积研究

目的观察大鼠脑缺血再灌后基质金属蛋白酶 9(MMP 9)的表达情况 ,探讨该酶在短暂性局灶脑缺血损伤中的作用。方法线栓法制作大鼠脑缺血 /再灌注不同时点模型 ,采用免疫组化法观察MMP 9的表达 ,同时测定梗死面积。结果MMP 9主要在缺血神经元、血管内皮细胞、嗜中性粒细胞中表达 ( 6h开始表达 ,2 4— 48h表达最强 ,P <0 .0 1)。结论脑缺血再灌后诱导MMP 9表达增加 ,且与脑梗塞面积紧密相关。     

CCR3在肾透明细胞癌中的表达及对肾透明细胞癌细胞侵袭、转移能力的影响

目的研究CCR类趋化因子受体3(CCR3)在肾透明细胞癌中的表达及对肾透明细胞癌细胞侵袭、转移能力的影响。方法回顾性选取2019年4月至2020年4月在湖南中医药高等专科学校附属第一医院就诊的肾透明细胞癌组织标本50例,选取50例癌旁组织为对照,进行免疫组化染色。选取人肾透明细胞癌细胞系786-0和人肾透明细胞癌细胞系A498,细胞培养,检测CCR3 mRNA表达水平。构建CCR3沉默慢病毒载体作为CCR3抑制组,对照组中加入一段无义序列,空白组只加生理盐水。细胞迁移、侵袭实验观察细胞迁移、侵袭能力,蛋白质印迹(Western blotting)检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平。结果CCR3在肾透明细胞癌组织中阳性表达比率(48.00%)低于癌旁组织阳性表达(12.00%),差异有统计学意义(P <0.05)。A498人肾透明细胞癌细胞系中CCR3 mRNA表达量高于786-0人肾透明细胞癌细胞系中表达量,差异有统计学意义(P <0.05)。与空白组相比,对照组癌细胞迁移、侵袭数量增加,CCR3抑制组癌细胞迁移、侵袭数量减少(P <0.05);与对照组相比,CCR3抑制组癌细胞迁移、侵袭数量减少,差异有统计学意义(P <0.05)。与空白组相比,对照组p-ERK1/2、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平升高,CCR3抑制组p-ERK1/2、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低(P <0.05);与对照组相比,CCR3抑制组p-ERK1/2、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 CCR3在肾透明细胞癌细胞中显示高表达,抑制CCR3表达通过调控p-ERK1/2、MMP-2、MMP-9蛋白,从而抑制肾透明细胞癌细胞侵袭和迁移。