ELISA检测显色结果影响因素的分析

随着酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)检测技术的不断完善和发展 ,越来越多的基层医疗单位开展了这项检测技术 ;但由于部分检验人员对ＥＬＩＳＡ法检测原理缺乏了解 ,在实际工作中因为实验技术或其它影响因素 ,导致检测中出现了一些异常显色结果而影响报告发出。现将 1997～ 2 0 0 0年 34 5批次ＥＬＩＳＡ检测法结果显色情况进行调查和分析 ,报道如下。1　材料与方法1.1　材料　 1997～ 2 0 0 0年采用ＥＬＩＳＡ法共检测临床标本与质控血清标本 34 5批 ,试剂盒由华美生物工程公司提供。仪器为由北京华林公司生产的ＺＳ - 2Ａ型酶标仪。1.2　方…     

标本因素对酶联免疫吸附试验测定的影响

<正>酶联免疫吸附试验即ELISA,是一种常用的固相酶免疫测定方法。其广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:标本因素;试剂因素;操作因素。     

含粉防己碱生物材料对体外培养软骨细胞的影响

[目的]研究含粉防己碱生物材料对体外培养关节软骨细胞的影响。[方法]制备空白对照聚乳酸膜和含粉防己碱的聚乳酸膜。在两种材料表面培养软骨细胞,测定载粉防己碱聚乳酸膜和空白对照聚乳酸膜表面培养软骨细胞的增殖和细胞活性。利用全细胞酶联免疫吸附试验(CellELISA)测试溴代尿苷在DNA合成过程中的掺入量和软骨细胞的Ⅱ型胶原分泌量,测定不同材料表面培养软骨细胞的差别。通过MTT试验测试细胞活性,测定糖胺聚糖分泌量评价软骨细胞功能表达。[结果]细胞形态、活性和组织化学分析结果都表明含有粉防己碱的聚乳酸材料能够促进软骨细胞的增殖和细胞功能表达。[结论]含有粉防己碱的聚乳酸生物材料适用于软骨组织的修复重建和软骨组织工程。     

酶联免疫吸附试验HBsAg后带现象的解决方法

在血清免疫学检验中 ,抗原抗体需有一定的比例才出现可见的反应 ,如果比例不适则发生抑制反应的现象 (抑制带 )。抗体过剩称抑制带为前带 ,抗原过剩则称后带 ［１］。现在酶联免疫吸附试验检测ＨＢｓＡｇ 的方法已广泛应用于临床 ,特异性、敏感性均很好 ,且方法更趋向快速简便 ,但也带来某些弊端 ,即出现高滴度ＨＢｓＡｇ标本表现假阴性结果 ,即后带现象［２］现探讨解决方法。１材料与方法１．１材料乙型肝炎Ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性伴乙型肝炎核心抗体（抗—ＨＢｃ）阳性血清标本２７８份 ,乙型肝炎Ｅ抗体（抗—ＨＢｅ）阳性血清标本１９…     

输血前检测定性试验中临界值验证的必要性与方法

目的:对输血前检测常用的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂的临界(cut-off)值进行验证,判断试剂盒提供的cut-off值设置是否适合。方法:根据试剂盒说明书及相关标准操作程序(SOP)进行各验证项目的检测,统计其结果的均值、标准差,并计算出X±3sd,再与试剂盒提供的cut-off值进行比较,如果该项目的X±3sd接近试剂盒提供的cut-off,则认为该项目试剂盒提供的cut-off是合适的。结果:HBsAg、艾滋病毒抗体(抗-HIV),丙型肝炎病毒抗体IgG(抗-HCV-IgG),抗-TP验证结果为:0.0554、0.0552、0.1753、0.1382,与试剂盒提供的方法计算出的结果有差异。结论:项目验证结果与试剂盒提供的cut-off值相差很远,cut-off值设置是不适合的。     

风疹患儿及育龄妇女风疹病毒感染的血清学研究

用酶联免疫吸附试验(ELISA)对沈阳市1988年临床诊断为风疹的患儿,有致畸史或早孕感冒的育龄妇女及1986年正常产妇血清做风疹病毒抗体的测定。风疹患儿急性期血清54份,抗风疹病毒IgM抗体阳性率为27.78%,IgG抗体阳性率为24.07%,与对照组差别有高度统计学意义(P<0.01);2份恢复期血清IgM抗体均阳性,IgG抗体1份阳转,1份效价增高4倍。提示1988年沈阳市确有风疹流行。流行期有致畸史或早孕感冒的育龄妇女血清36份,抗风疹病毒IgM抗体阳性率为16.67%,非流行期正常产妇血清60份,IgM抗体阳性率为1.67%,两者差别有高度统计学意义(P<0.01)。提示流行期有致畸史或早孕感冒的育龄妇女与风疹感染有关。正常产妇血清的抗风疹病毒IgG抗体阴性率为13.33%。说明我国育龄妇女中风疹易感者较多。     

全自动酶联免疫分析系统的应用

目的对比酶联免疫吸附试验(ELISA)的全自动酶联免疫分析仪法和手工方法的性能评价。方法分别应用全自动酶联免疫分析仪法和手工方法的孔间精密度和板间精密度。结果全自动酶联免疫分析仪法检测HBsAg的孔间cv%为8.5%,板间cv%为20.7%,抗-HCV的孔间为cv%为14.5%,板间cv%为24.1%;手工方法检测HBsAg的孔间cv%为5%,板间cv%为20.8%,抗-HCV的孔间为cv%为8%,板间cv%为24.5%。结论应用全自动酶联免疫分析仪比手工方法有较好的精密度和灵敏度。     

酶联免疫吸附试验在梅毒患者检测中的应用价值

①目的　评价酶联免疫吸附试验 (ELISA)在梅毒患者血清学检测中的应用价值。②方法　对 78例梅毒患者和 2 0例系统性红斑狼疮患者血清分别进行苍白螺旋体血球凝集试验 (TPHA)、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验 (TP -ELISA)和甲苯胺红不加热血清试验 (TRUST) ,对TRUST结果进行OD值分布分析 ,并对 2 0例梅毒患者进行治疗前后变化进行比较分析。③结果　 78例梅毒患者阳性率分别是 1 0 0 %、1 0 0 %、84.6 % ,TRUST阳性标本的TP -ELISAOD值 90 %以上 >1 .0 ,而TRUST阴性的标本其TP -ELISAOD值 90 %以上 <1 .0 ,治疗后TPUST滴度下降 1 7例 ,无变化 2例 ,升高 1例 ,其中有 5例经治疗后完全转为阴性 ,而ELISA测定结果治疗前后均为阳性。④结论　TP -ELISA的敏感性、特异性均优于TRUST ,与TPHA符合率高 ,是梅毒检测和筛查的一种良好方法。     

ELISA法检测旋毛虫特异性IgM,IgG抗体的探讨

ELISA法检测旋毛虫患者血清特异性IgM和IgG抗体,作为早期诊断和临床确诊,对临床和流行病学调查均有实际应用价值。本文报道经病理确诊的6例患者检测全为阳性;病理活检阴性的5例患者用本法检测反为阳性;对门诊疑诊为旋毛虫病的61例患者进行检测,30例为阳性,使之明确了诊断。本检测方法特异性强,敏感性高,稳定性好,方法简便宜于推广。     

神经系统疾病的弓形虫感染情况调查

目的 :了解我院门诊和住院部分患者感染弓形虫的情况。方法 :应用 EL ISA法对 5 30例患者进行弓形虫循环抗原(CAg)、Ig M、Ig G抗体检测。结果 :中枢神经感染性疾病 (脑炎、结脑 )弓形虫的感染率 (15 .2 2 % ,14 / 92 )与非中枢神经感染性疾病 (7.4 8% ,2 4 / 32 1)比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;非神经系统疾病组弓形虫的感染率 (4.2 7% ,5 / 117)与神经系统疾病组 (9.2 0 % ,38/ 4 13)比较 ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。所有 5 30例受检者以壮、汉族 ,农村、城镇居民分组 ,其感染率分别对比 ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。屠宰职业者或密切接触猫、狗及猪者 ,其弓形虫的感染率 (16 .95 % ,10 / 5 9)高于其它受检者 (7.0 1% ,33/ 4 71) (P <0 .0 1)。结论 :在神经系统 ,不明原因中枢神经感染性疾病可能具有较高的弓形虫感染或患病率 ,同时某些特殊工作和生活环境也是弓形虫的易感因素。     

广州市2001-2005年血吸虫病监测结果分析

目的了解广州市辖区内的增城、花都原血吸虫病区在阻断流行后的疫情动态。方法设假螺点进行查螺;水下诱螺;对7～14岁的低年龄组人群及外来流动人员进行酶联免疫吸附试验(ELISA)监测;捕杀野鼠解剖,制作压片镜检。结果螺情监测未能查到钉螺,低年龄组人群检测1021人,结果为阴性,检查外来人员356人,阳性者17人(4.7%),阳性者经粪检复查没有发现血吸虫病人。结论广州市血吸虫防治成果是巩固的,但随着经济的发展,人口、货物流动大,而邻近几省血防形势仍较严重,而且随着人们生活的不断好转,外出旅游人员增多,接触疫区疫水机会亦不断增大,随时会威胁广州市。因而提示,阻断后的监测不但不能放松,而且要继续加大监测力度,特别是输入性外来人员的监测。     

HBV ELISA连续两次显色结果对比评价

目的:对HBV ELISA方法学研究。方法:用ELISA法采用连续两次显色,对219份血清标本进行HBV定性试验,观察结果颜色反应。结果:经连续两次显色结果,发现所有阴性反应孔先后两次显色反应一致,结果完全相同。而第一次显色反应的阳性孔,经第二次显色反应,其中3.9％由阳性转为阴性,由第一次显色反应的弱阳性孔,经第二次显色反应其中33.3％由弱阳性转为阴转。结论:通过ELISA两次显色结果对比,可以排除因洗板不当或其他原因而造成标本污染或反应孔之间污染,所出现的假阳性结果反应,从而保证ELISA定性试验结果的可靠性。     

孕妇血清风疹病毒抗体IgM的检测与分析

目的：了解孕妇风疹病毒感染情况。方法：应用ELISA间接法检测120例孕妇血清中风疹病毒抗体IgM(RV-IgM)。结果：120例中,RV－IgM阳性15例,阳性率为12．5％;RV－IgM阳性检出率在＜25a,25-30a和＞30a年龄组分别为13．11％、12．20％、11．11％。多次妊娠者RV－IgM阳性检出率明显高于初次妊娠者（P＜0．05）。结论孕妇风疹病毒感染与孕次有一定的关系,与孕龄无关。     

精神病90例血清抗脑抗体测定

目的 :观察精神病患者血清中抗脑抗体 (ABAb)水平。方法 :应用 EL ISA法测定患者血清中 ABAb水平。结果 :精神病 90例 ABAb阳性率为 30 .0 %,>30岁与 <30岁两年龄组之间、男女性别组之间 ABAb水平无显著性差异。结论 :实验提示 30 %左右的精神病患者有脑组织自身免疫性改变。     

不同ELISA方法对检测HBsAg结果的影响

传统的 EL ISA方法学设计中 ,待测标本和酶结合物的加入均是依序而行 (竞争抑制法除外 )的 ,待测物与固相抗体或抗原的结合以及酶标抗体的随后结合 ,分两步完成 ,即所谓的二步法 ,后来人们为了节省时间简化步骤 ,在加入待测标本的同时加入酶结合物一起反应 ,所为一步法 ,后法由于“钩状效应”(带现象 )的影响 ,可致 EL ISA反应曲线呈钟型 ,特别是当标本中待测物浓度增高时 ,易导致显色变浅 ,检测结果呈假阴性 ,本文选择运城市传染病院 15 0例疑似乙肝的门诊与住院病例 ,用EL ISA的上述两种方法测定期 HBs Ag,结果报告如下。1　材料…     

乙肝两对半指标一孔检测法

目的 :建立方便的乙肝指标检测法。方法 :将乙肝五项指标集中在一个大孔中 ,通过一次加样得到五项结果。结果 :用本方法对 196份血清进行检测 ,并和科华试剂公司产品比较 ,符合率为 92 .3%～ 97.4% ;对 5 76份血清检测并和上海传染病医院试剂比较 ,符合率为 93.1%～ 96 .5 % ,P >0 .0 5。结论 :对大批血清检测比较 ,本法和其它常规试剂结果相近。     

溶血对ELISA一步法检测HBsAg阴性结果的影响及抗溶血因素干扰的研究

目的探讨样本溶血对酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法检测阴性乙肝表面抗原(HBsAg)结果的影响及抗溶血因素干扰的研究。方法将60例HBsAg阴性的样本人为造成溶血,通过对溶血标本增设试验孔,酶标仪检测该孔的吸光度值(OD值),用溶血标本孔的OD值减去该孔的OD值,比较溶血前后样本OD值的变化差异以及误判率,分析试验孔是否达到抗溶血因素干扰的目的。结果轻度溶血时溶血前后样本OD值差异有显著性(P<0.05),11例假阳性结果均得到纠正,经试验孔纠正后轻度溶血样本孔OD值与溶血前相比较差异无显著性;重度溶血时溶血前后样本OD值差异有高度显著性(P<0.01),7例假阳性结果得到纠正,15例未能纠正,经试验孔纠正后重度溶血样本孔OD值与溶血前相比较差异有高度显著性。结论通过对溶血样本增设一试验孔的方法能纠正轻度溶血时血红蛋白(Hb)对试验结果的干扰,能纠正部分重度溶血时Hb对试验结果的干扰。     

CA125测定对卵巢癌的诊断及预后的临床价值

目的:研究血清中CA125对卵巢癌诊断及预后的临床意义.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA),测定124例各种妇科疾病治疗前后的血清CA125,其中包括19例经病理确诊的卵巢癌患者,24例子宫肌瘤,29例卵巢良性畸胎瘤及42例其他妇科疾病,以CA125>35 ku/L判断为阳性.结果:卵巢癌阳性率为94.7 %(18/19),子宫肌瘤、卵巢良性畸胎瘤及其他妇科疾病的阳性率分别为17.6 %(6/34)、24.1 %(7/29)和14.3 %(6/42).19例卵巢癌患者经化疗或手术治疗后有15例CA125<35 ku/L,其余良性妇科疾病经治疗虽然有不同程度的降低,但降低的幅度不大.结论:提示血清CA125测定对卵巢癌的诊断、治疗评价及预后有较高的价值.     

免疫酶斑点试验(Dot-ELISA)诊断斯氏肺吸虫病的研究

用Dot-ELISA检测了30份斯氏肺吸虫抗原皮试阳性的患者血清,其中,斯氏肺吸虫循环抗体(CAb)呈阳性反应的血清有12份,阳性率为40％(12/30),同时检测的80份正常人血清,全部呈阴性反应。检测结果与间接ELISA法的相同。在实验动物血清的检测方面,斯氏肺吸虫免疫的兔血清,效价达1 :6400,而人工感染血吸虫、华枝睾吸虫、弓形虫溶组织内阿米巴的兔血清及正常兔血清均为阴性。实验表明,Dot-ELISA法具有较高的特异性、敏感性,其检测结果可作为临床诊断的可靠依据。     

酶联免疫吸附试验法检测延吉市婴幼儿轮状病毒结果分析

近年来,国内外有检出轮状病毒的报告。我们于1985年9月至12月在吉林省延吉市收集腹泻婴幼儿的粪便145份,以酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测了轮状病毒,其结果如下: 材料和方法 1.标本来源:1985年9月至12月在延边医学院附属医院、延吉市医院、延边妇婴医