桐乡市426例痰分枝杆菌培养阳性标本的菌种鉴定和耐药检测分析

目的：通过对426例临床诊断为肺结核且痰分枝杆菌培养阳性的标本进行分枝杆菌菌种鉴定和菌株对异烟肼、利福平的耐药检测,以评估本市非结核分枝杆菌的发病率和肺结核患者的耐药情况。方法在门诊1746例患者中,筛选426例痰分枝杆菌培养阳性的标本进行分枝杆菌菌种鉴定和异烟肼、利福平的耐药检测。结果痰分枝杆菌培养阳性的患者有26例（6.1%）为非结核分枝杆菌,在400例痰分枝杆菌培养阳性且鉴定为结核分枝杆菌的有37例为耐异烟肼和（或）利福平的耐药菌株,其中耐多药结核分枝杆菌（MDR-TB）为12例。结论分枝杆菌菌种鉴定有助于减少肺结核误诊误治,通过药敏检测可以及早发现、治疗耐多药结核病,从而控制耐多药结核病的广泛传播。     

应用基因芯片检测系统诊断结核分枝杆菌感染及耐药基因突变的临床研究

目的探讨基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用价值。方法应用基因芯片技术,对患者的痰液、穿刺脓液、胸腹水、脑脊液等标本进行分枝杆菌属DNA检测,并进一步对结核分枝杆菌(MTB)阳性标本进行耐药性分析。同时采用抗酸染色检测标本,比较两种方法检出率。采用MTB感染T细胞IFN-γ释放试验(TB-IGRA)技术对部分患者进行结核感染检测。结果 4 402例患者标本中检出分枝杆菌148例,检出率为3.36%(148/4 402)。其中MTB复合群137例,非结核分枝杆菌(NTM)11例,NTM占分枝杆菌总检出例数的7.4%(11/148)。检出率较高的标本为穿刺脓液、肺泡灌洗液和组织。进一步对137例MTB阳性标本进行耐利福平基因rpoB及耐异烟肼katG、inhA基因检测,共有22例检测到了突变的耐药基因;基因芯片法检测痰液、脑脊液和胸腹水分枝杆菌检出率明显高于抗酸染色法(P0.05)。基因芯片检测结核感染的检出率明显低于TB-IGRA(P0.05)。结论基因芯片检测系统可以直接进行分枝杆菌属鉴定及耐药性分析,尤其适用于痰液、胸腹水和脑脊液。该方法简便快速,灵敏度较高,特异性好。     

环介导等温扩增技术(LAMP)在肺结核诊断中的应用研究

目的探讨环介导等温扩增技术(LAMP)在肺结核病的诊断中的应用。方法收集140例本院临床诊断为肺结核病或者怀疑为肺结核患者的痰液标本,分别用涂片抗酸染色法、LAMP法和改良罗氏培养法检测痰标本中结核分枝杆菌的阳性检出率、敏感性和特异性。结果 140份痰标本中涂片抗酸染色法、LAMP法和改良罗氏培养法的阳性检出率分别是25.71%(36/140)、43.57%(61/140)和41.43%(58/140)。LAMP法的阳性检出率明显高于涂片法,差异有统计学意义(P0.05)。以改良罗氏培养法为金标准,并结合临床诊断及患者使用抗结核药物的反应性综合判断,LAMP法的敏感性是87.93%(51/58),特异性是87.80%(72/82),两种方法检测结果的一致性κ=0.752,说明LAMP法在检测结核分枝杆菌方面与罗氏培养法有较好的吻合性。结论 LAMP法在检测痰标本中的结核分枝杆菌方面有着比较高的敏感性和特异性,在结核病的快速诊断上具有优势。     

环介导等温扩增技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌

目的建立环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测肺结核患者痰标本和分枝杆菌阳性培养物中的结核分枝杆菌(MTB)。方法选择临床可疑肺结核患者痰标本121份、MTB阳性分离物14份,非结核分枝杆菌(NTM)阳性分离物14种共31株,用涂片抗酸染色镜检、罗氏固体培养基培养、LAMP技术分别进行检测,用LAMP技术对人MTB标准菌株H37Rv及卡介苗(BCG)进行检测,判断LAMP检出限并评价敏感性和特异性。结果涂片法抗酸杆菌检出率为38.02%(46/121),培养法MTB检出率为42.15%(51/121),LAMP法MTB检出率为49.28%(56/121),差异无统计学意义(χ2分别为3.146和1.247,P均>0.05)。对121例可疑肺结核患者痰标本进行MTB检测,以罗氏固体培养基培养结果为金标准,LAMP检测结果的敏感性为92.16%(47/51),特异性为87.14%(61/70),二者无显著性差异(χ2=1.247,P>0.05),且一致性强(kappa=0.78,P<0.01)。LAMP能准确分辨MTB和NTM阳性分离物,对H37Rv、BCG检测结果均为阳性;对H37Rv菌株的检出限为120 CFU/mL。结论 LAMP检测MTB敏感性和特异性高,操作简便易行、快速准确,不需要昂贵的检验设备,适于基层医院结核病诊断的推广和应用。     

萍乡地区44株结核分枝杆菌药物敏感试验结果分析

目的探讨萍乡地区结核分枝杆菌的药物敏感性特点,更好地为临床结核病诊疗和流行病学调查提供科学依据。方法选用改良罗氏培养基,对痰标本结核分枝杆菌培养阳性菌株标本进行药物敏感试验。结果分离出结核分枝杆菌44株,其中耐药株34株、敏感株10株,耐药率77.3%。结论本地区结核耐药菌已普遍存在并已出现耐多药菌株,应重视结核分枝杆菌培养并根据药物敏感试验结果对结核病进行合理用药治疗。     

快速浓集法与直接涂片法抗酸杆菌检测结果的比较

痰结核分枝杆菌检查不仅是确诊肺结核的重要手段，也是制订治疗方案、考核疗效的主要依据。我们对1014例患者的痰标本分别用直接涂片法和快速浓集法检测痰结核分枝杆菌，用结核病病原学诊断的“金标准”结核分枝杆菌的分离培养作对照，对结果进行了比较分析。     

西宁地区252例噬菌体快速培养结核分枝杆菌临床诊断

目的：探讨噬菌体裂解法进行结核分枝杆菌快速培养的特异性以及该方法与传统方法的同源性。方法：应用噬菌体裂解法进行快速培养结核分枝杆菌。结果：该方法临床痰涂阳性标本147例，本法阳性133例，检出率为90．4％，涂阴培阳标本105例，本法阳性49例，检出率为46．7％。结论：噬菌体裂解法具有较高的敏感性和特异性，同时与传统抗酸染色法比较具有较高的检出率。     

聚合酶链反应检测结核分枝杆菌的临床应用价值

目的探讨用聚合酶链反应(PCR)荧光定量法检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法对189例临床确诊的结核病患者(结核病组)和45例非结核呼吸系统疾病患者(对照组)的痰或支气管灌洗液标本,分别应用PCR实时荧光定量法、涂片抗酸染色法和结核杆菌培养法检测,然后对3种方法的阳性检出率进行统计学分析。结果 PCR法检测结核病组标本的阳性检出率为74.1%(140/189),明显高于涂片抗酸染色法的24.9%(47/189)及结核杆菌培养法的43.9%(83/189)。3种方法检测45例对照组患者的结果均为阴性,特异度为100.0%(45/45)。结论 PCR荧光定量法的敏感度和特异度明显高于涂片抗酸染色法和结核杆菌培养法,用于结核分枝杆菌的鉴定简便、快速、特异,适于在卫生检疫系统和临床实验室应用。对于结核病的及早诊断、预防和疗效监测具有良好的临床应用前景。     

应用MTD试剂盒对结核分枝杆菌复合群进行快速检测的评价

目的应用结核分枝杆菌直接检测（MTD）试剂盒对临床痰液样本及分离的结核分枝杆菌复合群，进行检出率和常规菌型鉴定法符合率的比较和评价。方法将10株标准菌种（其中1株为H37Rv、9株为非结核分枝杆菌）、94株临床分离菌株（其中48株经常规生化方法分型鉴定为结核分枝杆菌，46株分型法鉴定为非结核分枝杆菌）和40份临床痰标本分别用法国生物梅里埃公司生产的AMPLIFIED—MTD试剂盒进行检测。结果结核分枝杆菌复合群检测均呈阳性，非结核分枝杆菌检测均呈阴性，符合率均达到100％。临床痰标本用MTD检测的阳性检出率为65％（26／40），明显高于直接涂片法的12％（5／40）、培养方法的12％（5／40）、集菌涂片法的25％（10／40）。结论MTD试验是一套新的生物学检测技术，具有快速、灵敏的特点。     

荧光定量PCR分析法在结核病诊断中的应用

为了探讨荧光定量PCR(FQ PCR)技术检测结核分枝杆菌的临床应用 ,本文采用FQ PCR技术检测 14 5例标本 ,并与培养法、抗酸染色法和PCR 电泳法进行比较。结果 :在 115例来自结核病人的高度怀疑有结核分枝杆菌的标本中 ,FQ PCR法检出阳性为 5 3例 ,其检出率高于PCR 电泳法检出率(4 8/ 115 )、培养法检出率 (4 3/ 115 )和抗酸染色法检出率 (31/115 ) ,30例非结核病的病人标本 ,四种方法均未检出结核分枝杆菌。FQ PCR法的阳性检出最低值为 10 3 拷贝 /ml,PCR 电泳法为 10 4拷贝 /ml。结果表明 ,FQ PCR技术是高度灵敏、高度特异的快…     

Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的准确性与结核病患者痰细菌载量的相关性：一项天津市的回顾性研究

目的 分析Xpert MTB/RIF不同细菌载量(1+、2+、3+、4+)检测结核分枝杆菌利福平(RIF)耐药的准确性,为有效临床药敏结果判断提供参考。方法 回顾性收集2020年1月至2021年12月天津市结核病控制中心参比室接收的1 936份结核病疑似患者痰标本的液体BACTEC MGIT960培养阳性检测结果,排除16份非结核分枝杆菌后,1 158份XpertMTB/RIF阳性标本的结果纳入分析,对Xpert MTB/RIF检测阳性且液体BACTEC MGIT960培养阳性的1 142例结核分枝杆菌(MTB)菌株进行常规培养法体外药物表型药敏试验(DST)。应用SPSS 19.0软件进行统计学分析,结果采用配对χ²检验,P<0.05为差异有统计学意义;两种检验方法的一致性采用Kappa检验。结果 1 936份液体BACTEC MGIT960培养阳性标本中XpertMTB/RIF检测结核的阳性筛查率为59.81%,XpertMTB/RIF检测结核的细菌载量1+～4+中,RIF耐药的检出率分别为8.88%、14.91%、11.37%、15.15%。以表型DS...     

肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌检查结果分析

[目的]评价肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌的直接涂片显微镜检和培养检查的临床效果。[方法]采用直接厚涂片萋-尼氏法抗酸染色显微镜检和BACTEC-TB960快速培养系统对1340例肺结核病人痰标本进行检测。[结果]快速培养法检测的阳性率为36.6％，直接涂片镜检的阳性率为24.6％，两种检测法的阳性率有显著性差异（P〈0.01）；两种方法联合检测的阳性率为4l％，高于培养法阳性率（P〈0.05）。痰标本的留取时间对培养法检出率有很大影响，晨痰检出率高于即时痰（P〈0.05）。[结论]提高肺结核病人痰标本中结核分枝杆菌检出率的有效方法是采用直接涂片镜检与培养法联合进行检测，同时应重视痰标本留取时间对检出率的影响。     

结核分枝杆菌快速培养基临床应用研究

目的 评价分枝杆菌变色液体培养基快速检测痰标本结核分枝杆菌的可靠性.方法 将230例疑似肺结核患者痰标本接种于分枝杆菌变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养,进行对照平行测定.结果 230例痰涂片标本检出阳性率为27.8%;变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养阳性率分别为47.4%,47.0%,两种方法阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 分枝杆菌变色液体培养基检测结核分枝杆菌具有特异、快速、可靠等优点,对结核病患者的早发现、早治疗具有积极意义.     

三种检测方法在肺外结核病诊断中价值的探讨

目的探讨结核分枝杆菌DNA检测、血清结核抗体检测及结核菌素试验3种方法在肺外结核诊断中的价值。方法采用病例对照研究方法,将所观察对象分为两组,非结核病组121例及肺外结核病组132例,各组诊断采用双盲法,且有可比性。对非结核病组的血标本或痰标本及肺外结核组血标本或/和结核性胸膜炎的胸水标本、结核性腹膜炎的腹水标本、结核性脑膜炎的脑脊液标本和泌尿系结核的尿液标本、部分颈淋巴结结核干酪坏死分泌物标本进行PCR扩增及ABI-7 300仪器荧光检测结核分枝杆菌DNA定量。应用统计学分析敏感性、特异性。对所选病例均同时做血清抗结核抗体检测及结核菌素试验。结果结核杆菌DNA检测肺外结核病的敏感性34.85%、特异性85.12%;血清抗结核抗体敏感性62.88%、特异性52.07%;结核菌素试验敏感性65.15%、特异性65.15%。结论结核分枝杆菌DNA分子生物学检测技术快速准确、特异性高、假阴性低、需时短,缩短了肺外结核诊断的检测时间,为早期诊断、早期治疗提供有效支持。血清结核抗体检测及结核菌素试验的敏感性和特异性均较高,阳性结果提示感染结核分枝杆菌。3种方法是诊断肺外结核病必要的辅助方法。     

斑点杂交法检测结核分枝杆菌的初步报告

目的建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法。方法异硫氰酸胍裂解、酚-氯仿抽提、异丙醇沉淀法直接抽提结核分枝杆菌rRNA,地高辛标记探针斑点杂交,酶呈色观察结果检测结核分枝杆菌,用该法检测76例临床标本。结果该法至少可检测1.6×102/m l个结核分枝杆菌;20种其它分枝杆菌和9种非分枝杆菌检测结果均为阴性;两份强阳性和弱阳性标本抽提结核分枝杆菌rRNA重复杂交5次,结果完全一致;46例肺结核病人痰标本检出阳性26例,30例非结核病人痰标本检测结果均为阴性。结论斑点杂交法检测结核分枝杆菌方法简便,无需特殊仪器,有较高的敏感度、特异性和良好的重复性,适合在基层医院推广使用。     

直接杂交法检测痰液中结核分枝杆菌

目的 建立了一种高度灵敏、特异、快速和简便的探针杂交检测技术，以解决临床上结核病快速诊断的难题。方法 采用简易的方法处理标本，以对结核分枝杆菌特异的生物素标记188bpDNA探针进行点杂交，与链霉亲合素标记的辣根过氧化酶偶联后，以化学发光自显影方式记录检测信号。结果 此法的第三性可检出200个菌，较PCRI地为高，对20种分枝杆菌和9种非分枝杆菌检测时发现只有结核分枝杆菌呈阳性，以本法检测104例临床标本。结果发现，对其中45例结核病人痰涂片阳性标本。41例结核病人痰涂片阴性标本和18例非结核标本。检测阳性率分别为100%、65.9%和0.0%。结论 本法简便，特异。     

两种抗酸染色法对麻风分枝杆菌和结核分枝杆菌染色结果分析

目的 比较Ziehl-Neelsen加热抗酸染色法和快速抗酸染色法(TAAS)在麻风分枝杆菌和结核分枝杆菌染色的应用结果.方法 用加热抗酸染色法和TAAS法同时检测17例现症多菌型(MB)麻风病患者和157例肺结核初诊阳性患者标本,对检测结果进行分析.结果 两种染色方法在结核病痰检中符合率为100%;加热法和TAAS法在麻风分枝杆菌中阳性率分别为100%和71.36%,加热法阳性率高于TAAS法,差异有统计学意义(P<0.05).结论 两种染色方法在结核病痰检中符合率一致;加热法在麻风分枝杆菌中阳性率高于TAAS法.     

LAMP法在肺结核患者痰标本中的应用评价

目的评价环介导等温扩增技术(LAMP)在肺结核患者痰标本中的应用。方法收集该院2016年12月至2017年4月门诊及住院诊断为肺结核且抗结核治疗涂片阳性的患者痰标本75份、涂片阴性患者痰标本72份,每份痰标本同时进行LAMP法结核分枝杆菌复合群核酸快速检测、罗氏固体(L-J)培养,分别计算LAMP法及L-J培养的阳性率。结果 75份痰涂片抗酸染色阳性标本中,LAMP法检测阳性75份,L-J培养阳性64份,LAMP法阳性检出率[(100%)75/75]显著高于L-J培养阳性检出率[(85.3%)64/75],且差异具有统计学意义(χ2=9.09,P0.05)。72份痰涂片抗酸染色阴性标本中,LAMP法检测阳性23例,L-J培养阳性12例;与痰涂片阴性标本比较,LAMP阳性检出率[31.9%(23/72)]显著高于L-J培养阳性检出率[16.7%(12/72)],且差异具有统计学意义(χ2=6.67,P0.05)。结论 LAMP法具有较高的灵敏度及特异度,对结核分枝杆菌的阳性检出率高于痰涂片和L-J培养,且LAMP法具有快速、简便、准确的特点,可用于临床上早期发现结核病患者。     

免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌方法的建立

目的:建立一种基于免疫磁性微球富集的检测结核分枝杆菌的新方法 ,以提高其临床阳性检出率。方法:提取结核分枝杆菌H37Rv抗原,并免疫新西兰白兔,制备兔抗结核分枝杆菌H37Rv血清。分离纯化抗血清,采用酶联免疫吸附试验和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术鉴定抗体的效价和纯度。将抗结核分枝杆菌抗体与生物素标记,并与结合有链霉亲和素的磁性微球进行连接获得免疫磁性微球,优化反应条件,建立免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌的方法。以培养结果作为判断金标准,比较免疫磁性微球富集方法与常规涂片镜检方法的检出率。结果:制备的抗结核分枝杆菌抗体浓度为14 mg/mL,最终效价为1∶20 000。检测158例临床标本,免疫磁性微球富集方法可使涂片镜检阳性率从5.1%提高到13.9%。22例免疫磁性微球富集后涂片镜检阳性的标本培养均为阳性,其特异度为100%。结论:建立的免疫磁性微球富集方法简便、有效,能显著提高结核分枝杆菌镜检的灵敏度和特异度。     

PCR—微孔板反向杂交法在结核分枝杆菌检测中的应用

目的　评价PCR 微孔板反向杂交法检测临床标本中结核分枝杆菌 (MTB)的应用价值。方法　应用集菌涂片镜检法、培养法、PCR法、PCR 微孔板反向杂交法分别对 5 5份肺结核病患者和 30份非结核呼吸系统病患者痰标本平行检测。结果　涂片法对结核病患者临床标本中MTB检出率为 2 1.82 % ,培养法检出率为2 5 .4 6 % ,PCR法检出率 36 .36 % ,PCR 微孔板反向杂交法检出率 4 7.2 7%。对 30例非结核呼吸系统疾病患者检测MTB ,PCR法出现 2例假阳性 ,其余 3种方法均阴性 ,PCR 微孔板反向杂交法比单纯PCR法灵敏度高、特异性强。结论　PCR 微孔板反向杂交法具有简便、快速、抗污染、灵敏度高、特异性强的优点 ,缺点是存在假阴性 ,应改进标本前处理方法 ,在对结核病的辅助诊断中应与细菌学方法相结合 ,以提高检出率