瑞香素调节Shh/Gli1信号通路对乳腺癌增殖、凋亡和化疗敏感性的影响

目的 探究瑞香素调节音猬因子(Shh)/胶质细胞瘤转录因子1(Gli1)信号通路对乳腺癌增殖、凋亡和化疗敏感性的影响。方法 将人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞分为对照组、瑞香素组(40μmol/L瑞香素)、GANT61组(10μmol/L GANT61)、瑞香素+GANT61组(40μmol/L瑞香素和10μmol/L GANT61);CCK-8实验检测MDA-MB-231细胞增殖;划痕试验检测MDA-MB-231细胞迁移情况;在上述各分组细胞中加入1 mg/L阿霉素(Dox)处理48 h后CCK-8实验检测细胞化疗敏感性;流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡情况;Western blot检测MDA-MB-231细胞Shh/Gli1通路及凋亡相关蛋白表达水平。结果 与0μmol/L比较,随着瑞香素的剂量增加MDA-MB-231细胞存活率显著降低(P<0.05),而与40μmol/L比较,50μmol/L瑞香素处理MDA-MB-231细胞存活率无差异(P>0.05),因此选择40μmol/L瑞香素作为后续实验的干预条件;与对照组比较,瑞香素组和GANT61组OD4...     

刺槐素通过调控LZTFL1表达抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨刺槐素对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法用浓度分别为4、8、16 μmol/L的刺槐素处理A549细胞,作为低、中、高浓度组,不作任何处理的细胞作为对照组;将pcDNA、pcDNA-LZTFL1转染至A549细胞中,记为pcDNA组、pcDNA-LZTFL1组;将si-NC、si-LZTFL1转染至A549细胞中再用16 μmol/L的刺槐素处理,记为刺槐素+si-NC组、刺槐素+si-LZTFL1组。四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞增殖抑制率;Western blotting法检测LZTFL1、CyclinD1、p21、MMP-2、MMP-9蛋白表达;Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测LZTFL1 mRNA表达水平。结果与对照组比较,刺槐素低、中、高浓度处理的肺癌A549细胞中细胞增殖抑制率显著升高,细胞迁移、侵袭数显著降低,CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低,p21蛋白表达水平显著升高,LZTFL1 mRNA和蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。过表达LZTFL1抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。干扰LZTFL1表达逆转了刺槐素对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论刺槐素可能通过上调LZTFL1的表达抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

氯化钴低氧对黑色素瘤细胞系迁移能力及FSTL1表达分泌的影响

目的 探讨氯化钴（CoCl2）化学模拟低氧对黑色素瘤细胞系B16F10迁移的影响,以及Follistatin-like 1（FSTL1）蛋白在此过程中的转录、表达和分泌情况。方法 CoCl2模拟低氧作用于小鼠B16F10细胞,实验分为3组：0 μmol/L CoCl2对照组、50 μmol/L和100 μmol/L CoCl2处理组。用MTT法测定细胞活力;用Transwell法测定细胞迁移能力;qRT-PCR检测Fstl1 mRNA表达;Western blot检测细胞内外FSTL1蛋白表达。结果 CoCl2模拟低氧可以导致B16F10细胞存活率显著下降,并呈浓度和时间依赖性;50 μmol/L CoCl2处理组（0.158±0.006）、100 μmol/LCoCl2处理组（0.203±0.002）B16F10细胞迁移能力均明显高于对照组（0.107±0.001,均P<0.05）;50 μmol/L CoCl2处理组（1.573±0.114）、100 μmol /L CoCl2处理组（2.219±0.085）Fstl1 mRNA表达均显著高于对照组（0.962±0.054,均P<0.05）,而胞内FSTL1蛋白表达与Fstl1 mRNA表达趋势一致。同时也发现,CoCl2处理组细胞外FSTL1蛋白表达均低于对照组,且100 μmol/L CoCl2处理组几乎检测不到FSTL1表达。结论 CoCl2模拟低氧促进黑色素瘤细胞迁移,可能与FSTL1的表达和分泌有关,但其功能和作用机制还需进一步探讨。     

羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞生物学行为的影响

目的 探讨羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌（NSCLC）NCI-H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 将体外培养的NCI-H1299细胞分为正常对照（NC）组（未处理）、低剂量组（12.5μmol/L羽扇豆醇）、中剂量组（25μmol/L羽扇豆醇）、高剂量组（50μmol/L羽扇豆醇）、miR-NC组（转染miR-NC）、miR-100-5p组（转染miR-100-5p）、anti-miR-NC+高剂量组（转染anti-miR-NC后用50μmol/L羽扇豆醇处理）、anti-miR-100-5p+高剂量组（转染anti-miR-100-5p后用50μmol/L羽扇豆醇处理）。CCK-8和克隆形成实验检测NCI-H1299细胞增殖;Transwell法检测NCI-H1299细胞迁移和侵袭。荧光定量PCR(q PCR)检测miR-100-5p表达;Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP9蛋白的表达。结果 与NC组比较,低、中、高剂量组NCI-H1299细胞活力、细胞克隆数、迁移数、侵袭数、CyclinD1、...     

飞燕草素对HER-2阳性乳腺癌的抑制效应及分子机制研究

目的 探讨飞燕草素（Dp）对HER-2阳性乳腺癌的抑制效应及分子机制。方法 以HER-2阳性乳腺癌细胞（MDA-MB-453和BT-474）为研究对象，经不同浓度Dp（10、20、40、80及160 μmol/L）处理48 h，同等浓度的DMSO为溶剂对照（Control），采用CCK-8法检测Dp对细胞活性的影响，计算半数抑制浓度（IC50），以确定后续实验浓度；以不同浓度Dp（20、40及80 μmol/L）处理细胞48 h，运用HE染色观察细胞形态学变化，流式细胞术检测细胞周期分布，原位细胞凋亡检测试剂盒（TUNEL）检测细胞凋亡率，采用Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白磷酸化水平。结果 在 10、20、40、80 及 160 μmol/L 浓度范围内，Dp 能抑制 MDA-MB-453 和 BT-474 的增殖，IC50分别为 41.02 和 60.97 μmol/L；20、40及80 μmol/L浓度范围内，与Control组相比，Dp处理组部分细胞脱落漂浮，裂解，细胞体积减小，G2/M期细胞比例增加，细胞凋亡率增加；与Control组相比，40及80 μmol/L Dp处理组胞内p-NF-κB/p65、p-IκBα、pIKKα/β、p-PKCα表达水平显著降低，IκBα、IKKα、IKKβ、PKCα表达水平增加（P＜0.05）。结论 Dp通过阻断NF-κB信号通路，诱导MDA-MB-453、BT-474细胞G2/M期周期阻滞和凋亡，从而抑制乳腺癌增殖。     

分泌型丛生蛋白通过抑制线粒体自噬缓解H2O2诱导的心肌细胞损伤 #br#

目的 探讨分泌型丛生蛋白（sCLU）对心肌细胞氧化损伤的影响及其机制。方法 采用大鼠心肌细胞 H9C2。实验1分为Control组（仅更换培养基）和H2O2组（100 µmol/L H2O2处理）。实验2分为Control组、pcDNA3.1组 （转染 pcDNA3.1 对照空质粒）、pcDNA3.1-sCLU 组（转染 pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒）、H2O2组（100 µmol/L H2O2处 理）、H2O2+pcDNA3.1 组（pcDNA3.1 对照空质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）、H2O2+pcDNA3.1-sCLU 组 （pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）。实验 3 分为 DMSO 组（加入 1% 体积分数 的 DMSO）、Mdivi-1 组（10 µmol/L 的 Mdivi-1 处理）、H2O2+DMSO 组（加入 1% 体积分数的 DMSO 处理 30 min 后加入 100 µmol/L的H2O2处理）、H2O2+Mdivi-1组（10 µmol/L的Mdivi-1处理30 min后加入100 µmol/L的H2O2处理）、H2O2+ pcDNA3.1-sCLU 组（pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）、H2O2+pcDNA3.1-sCLU+ Mdivi-1组（pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入10 µmol/L的Mdivi-1处理30 min,再加入100 µmol/L H2O2 处理）。采用MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二 醛（MDA）水平。DFCH-DA荧光探针测定细胞活性氧（ROS）水平。实时定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验 检测细胞中sCLU表达,Western blot法检测CLU、PINK1、Parkin和LC3蛋白表达水平。结果 （1）实验1。与Control 组比较,H2O2组细胞中sCLU mRNA、细胞培养上清中sCLU蛋白及细胞中CLU蛋白相对表达水平均降低（P＜0.01）。 （2）实验2。与Control组比较,H2O2组细胞活力、SOD水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低,细胞凋亡率、ROS水平、MDA 水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均升高（P＜0.05）;与H2O2组比较,H2O2+pcDNA3.1-sCLU组细胞活力、SOD水平、 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均升高,细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均降低（P＜0.05）。（3） 实验3。与DMSO组比较,Mdivi-1组细胞活力与细胞凋亡率差异无统计学意义;H2O2+DMSO组细胞活力下降,细胞 凋亡率升高（P＜0.05）。与H2O2+DMSO组比较,H2O2+Mdivi-1组、H2O2+pcDNA3.1-sCLU组和H2O2+pcDNA3.1-sCLU+ Mdivi-1 组细胞活力均升高,细胞凋亡率均下降（P＜0.05）。与 H2O2+Mdivi-1 组比较,H2O2+pcDNA3.1-sCLU 组和 H 2O2+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组细胞活力差异无统计学意义,细胞凋亡率降低（P＜0.05）。结论 sCLU对氧化应 激条下的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与线粒体自噬的抑制有关。     

阿仑膦酸钠在地塞米松诱导C2C12细胞自噬中的作用机制探讨#br#

摘要：目的　探讨阿仑膦酸钠（ALN）在地塞米松（Dexa）诱导C2C12细胞自噬中的作用及机制。方法　以C2C12细胞为研究对象,设对照组（DMSO处理）,Dexa组（100 μmol/L Dexa处理）,Dexa+ALN组（100 μmol/L Dexa+1.0 μmol/L ALN处理）。分别以0、0.1、0.5、1.0 μmol/L ALN处理C2C12细胞48 h后,采用CCK-8法检测C2C12细胞增殖水平,筛选ALN合适剂量;HE染色法检测C2C12细胞分化;采用Image J统计肌小管直径和融合指数;Western blot检测C2C12细胞肌蛋白肌球蛋白重链（MHC）、肌肉特异性环指蛋白1（MuRF1）和自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Beclin-1的表达变化;免疫荧光标记检测C2C12细胞MHC表达水平。结果　选取ALN合适剂量1.0 μmol/L进行后续实验。HE染色和Image J结果显示ALN剂量为1.0 μmol/L时,肌小管直径和融合指数显著增加（P＜0.01）。Western blot结果显示,与对照组相比,Dexa组细胞MuRF1蛋白表达水平升高;而与Dexa组相比,Dexa+ALN组MuRF1蛋白表达水平显著下调,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达增多（P＜0.01）。免疫荧光结果显示,与对照组相比,Dexa组MHC蛋白荧光表达强度（红光）明显降低;与Dexa组相比,Dexa+ALN组MHC蛋白荧光表达强度表达显著升高。结论　1.0 μmol/L ALN能有效促进C2C12细胞增殖分化,改善Dexa对C2C12细胞分化的抑制作用,抑制肌降解蛋白MuRF1表达,其机制可能与适度激活自噬信号通路有关。     

葛根总皂苷调控NAMPT-Sirt1轴诱导BMSCs向髓核样细胞分化#br#

摘要：目的　研究葛根总皂苷（TSPL）对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向髓核样细胞分化的影响及其作用机制。方法　体外建立大鼠腰椎间盘退变模型,分为假手术组、模型组、30 mg/kg TSPL治疗组和50 mg/kg TSPL治疗组。原代培养的BMSCs分为BMSCs组,BMSCs-TSPL（10、20、30、40、50 μmol/L）组,BMSCs-TSPL（30 μmol/L）-FK866［烟酰胺磷酸核糖转移酶（NAMPT）特异性抑制剂,2.5 μmol/L］组,BMSCs-TSPL（30 μmol/L）-SRT2104（Sirt1激活剂,10 μmol/L）组。二甲基亚甲基蓝比色法检测细胞和组织中糖胺聚糖含量,qPCR和Western blot检测髓核样细胞COL2A1、Aggrecan、Sox9、Tie2以及Sirt1的mRNA和蛋白表达量。WST-8法检测细胞中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测腺苷三磷酸（ATP）和NAMPT水平。结果　与假手术组相比,模型组大鼠椎间盘L5~S1组织中糖胺聚糖含量减少（P＜0.05）;与模型组相比,TSPL治疗组大鼠糖胺聚糖含量增加,且50 mg/kg TSPL效果优于30 mg/kg TSPL（P＜0.05）;与BMSCs组相比,TSPL单独或联合SRT2104处理增加BMSCs中糖胺聚糖、COL2A1、Aggrecan、Sox9和Sirt1的mRNA和蛋白表达量及NAD+、ATP和NAMPT含量,而降低Tie2的mRNA和蛋白表达量（P＜0.05）;与BMSCs-TSPL组相比,BMSCs-TSPL-FK866组COL2A1、Aggrecan、Sox9和Sirt1的mRNA和蛋白表达量及糖胺聚糖、NAD+、ATP和NAMPT含量降低,而BMSCs-TSPL-SRT2104组上述指标水平增加（P＜0.05）。结论　TSPL可通过NAMPT-Sirt1轴诱导大鼠BMSCs向髓核样细胞分化。     

大麻素受体2激动剂AM1241对TGF-β1诱导的HSC-T6增殖、活化及凋亡的影响

目的 探究大麻素受体2激动剂AM1241对转化生长因子（TGF）-β1诱导的大鼠肝星状细胞（HSC-T6）增 殖、活化与凋亡的影响及其作用机制。方法 体外培养HSC-T6,采用CCK-8法检测AM1241对空白对照组（空白培 养基）、阴性对照组（未加药品）、TGF-β1 组（5 μg/L TGF-β1）及 20、40、80、160 μmol/L AM1241 组（5 μg/L TGF-β1+ 20、40、80、160 μmol/L AM1241）HSC-T6增殖的影响,计算半数抑制浓度（IC50）。采用流式细胞术检测阴性对照组、 TGF-β1组、30 μmol/L AM1241组、60 μmol/L AM1241组HSC-T6凋亡情况;采用Western blot检测阴性对照组、TGF- β1 组、27 μmol/L AM1241 组 α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、凋亡相关蛋白 Bax、 cleaved caspase-3、JNK及磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）蛋白表达水平。结果 与TGF-β1组比较,AM1241可 抑制HSC-T6增殖能力,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。AM1241的IC50为27 μmol/L。30、60 μmol/L AM1241组HSC-T6 凋亡率较TGF-β1组明显上升,且60 μmol/L AM1241组高于30 μmol/L AM1241组（P＜0.05）。27 μmol/L AM1241组 α-SMA 和 bFGF 蛋白表达水平较 TGF-β1 组降低,Bax、cleaved caspase-3、p-JNK 蛋白表达水平较 TGF-β1 组升高 （P＜0.05）。结论 大麻素受体2激动剂AM1241能抑制TGF-β1诱导的HSC-T6的增殖与活化,并促进其凋亡,其作 用机制可能与JNK通路有关。     

槲皮素对宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响

目的 观察槲皮素对人宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响,初步探讨其相关作用机制。方法 用不同浓度槲皮素（空白对照、20、40、80 μmol/L）,顺铂（空白对照、5、10、15、20 μg/mL）以及两者联合（槲皮素40 μmol/L+顺铂 10 μg/mL）分别作用于C33A细胞24 h和48 h后,噻唑蓝（MTT法）检测细胞活力的变化;流式细胞术检测槲皮素对C33A细胞周期的影响;Western blot检测槲皮素对C33A细胞Cyclin D1、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,经过槲皮素处理24 h后,各组细胞活力分别为86.92±3.953）%（20 μmol/L组）、（66.54±3.932）%（40 μmol/L组）和 （52.21±2.970）%（80 μmol/L组）,均低于空白对照组的（98.35±1.230）% ;经过槲皮素处理48 h后,各组细胞活力分别为（65.19±7.071）%（20 μmol/L组）、（47.04±8.881）%（40 μmol/L组）和 （29.71±6.505）%（80 μmol/L组）,均低于空白对照组的（96.97±1.788）%。;此外,槲皮素40 μmol/L+顺铂 10 μg/mL联合作用于C33A细胞24h后,细胞活力下降为（31.12±2.835）%; 48 h后,细胞活力下降为（17.86±3.182）%,同空白对照组相比均出现了明显的下降,（31.12±2.835）%; 48 h后,细胞活力下降为（17.86±3.182）%（P<0.05）。细胞周期检测结果显示,槲皮素可增加C33A细胞G₀/G₁期数量,减少S期数量。Western blot结果显示,槲皮素可下调C33A细胞Cyclin D1蛋白的表达,还可上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结论 槲皮素通过下调Cyclin D1蛋白的表达可以抑制C33A细胞的活力和增殖,槲皮素通过上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,可以诱导C33A细胞的凋亡。     

人参皂苷Rh2与P13K/AKT信号通路抑制剂LY294002对乳腺癌细胞转移和侵袭的影响

目的：研究人参皂苷Rh2（GensenosideRh。）与磷脂酰肌醇-3-激酶／丝苏氨酸蛋白激酶（P13K／AKT）信号通路抑制剂LY294002对乳腺癌细胞转移和侵袭的影响。方法：试验分为对照（空白培养液）组、人参皂苷Rh2（80μmol／L）组、LY294002（50gmol／L）组与人参皂苷Rh2（80gmol／L）＋LY294002（50gmol／L）组。人参皂苷Rh：与LY294002体外作用于人乳腺癌细胞MCF7／Adr,Westernblot法检测细胞基质金属蛋白酶（MMP）2、P-糖蛋白（P-gP）、丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）、磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶（p-AKT）蛋白表达;黏附试验观察细胞与基底膜的黏附力,Transwell法观察细胞侵袭能力和迁移能力。结果：与对照纽比较,人参皂苷Rh2组、LY294002组与人参皂苷Rh2＋LY294002组p—AKT、P—gP、MMP．2蛋白表达显著减弱,细胞与基底膜的黏附力、细胞迁移能力与侵袭能力显著减弱（P〈0．05）;人参皂苷Rh2＋LY294002组与人参皂苷Rh2组、LY294002组比较以上指标差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：抑制P13K／AKT信号通路可有效降低MCF7／Adr侵袭迁移能力,P13K／AKT通路是调控乳腺癌侵袭迁移的重要信号通路之一。     

煤焦沥青提取物对BEAS-2B细胞Keap1-Nrf2/ARE通路的作用机制

目的研究煤焦沥青烟提取物对BEAS-2B细胞Nrf2、Keap1、NQO1的基因及其蛋白表达的影响,以探讨煤焦沥青烟提取物在造成细胞氧化损伤过程中Nrf2-Keap1/ARE通路的作用机制。方法设立未处理对照组、0.1%DMSO溶剂对照组、5μg/ml B(a)P阳性对照组、6μmol/L全反式维甲酸组、6μmol/L全反式维甲酸预处理0.5 h后5μg/ml CTP染毒组和CTP染毒组(1、5、10和20μg/ml),染毒3、6、12和24 h后提取总RNA;RT-PCR检测Nrf2、Keap1、NQO1 mRNA的相对表达量;Western blot测定Nrf2、Keap1、NQO1蛋白的相对表达量。结果不同CTP染毒剂量作用后各个基因mRNA相对表达量差异无统计学意义(P0.05),而不同时间点相对表达量差异有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,随着CTP烟提取物染毒浓度的增加,Keap1蛋白无明显变化,NQO1蛋白表达量逐渐上升;Nrf2蛋白在5μg/ml染毒浓度时表达最高,在5μg/ml CTP染毒浓度作用下,BEAS-2B细胞Nrf2蛋白表达量随时间逐渐升高,在染毒6 h后达到最高,之后表达量又呈下降趋势。结论煤焦沥青烟提取物作用于BEAS-2B细胞后,代谢酶NQO1表达上调,推测Keap1-Nrf2/ARE通路可能通过上调细胞保护性基因NQO1的表达而对抗煤焦沥青毒性作用,降低细胞氧化损伤。     

新化合物OSU-03012对结肠癌细胞增殖、迁移以及凋亡的影响

摘要： 目的 在细胞水平上初步探讨新化合物OSU-03012抗结肠癌的机制。方法 分别用1、 3、 5和10 μmol/L OSU-03012化合物干预的人结肠癌细胞株HCT-116作为研究对象, 以等体积二甲基亚砜 （DMSO） 处理的HCT-116 细胞作为对照组。CCK-8法检测各组细胞干预24、 48、 72 h时的抑制率, 划痕实验和Transwell实验检测各组细胞迁移能力, 流式细胞术检测各组细胞凋亡情况, 免疫荧光、 Western blot检测各组细胞Bcl-2、 Caspase-3蛋白表达情况, Real-time PCR检测各组细胞Bcl-2、 Caspase-3 mRNA表达情况。结果 对照组、 1 μmol/L组、 3 μmol/L组、 5 μmol/L 组和10 μmol/L组的细胞抑制率、 凋亡率呈逐渐升高趋势, 而细胞迁移距离、 细胞迁移数目呈逐渐减小或降低趋势, 组间多重比较差异均有统计意义 （均P＜0.05）; 3、 5、 10 μmol/L组Bcl-2 mRNA和蛋白表达量低于对照组, 而Caspase-3 mRNA和蛋白表达量高于对照组 （均P＜0.05）。结论 新化合物OSU-03012可抑制结肠癌细胞增殖与迁移, 并促进结肠癌细胞凋亡, 且呈剂量依赖效应。     

维生素B2在胃癌中的作用及机制研究

摘要：目的　探讨维生素B2（Vit B2）在胃癌中的表达及其生物学意义。方法　选择39例胃癌患者（胃癌组）和40例健康体检者（对照组）,检测2组血清Vit B2水平,分析其与胃癌患者临床病理特征的关系。培养人胃癌MGC-803细胞,并取对数生长期细胞分别给予0、10、25、50、100 μmol/L Vit B2处理,检测细胞氧化磷酸化（葡萄糖、乳酸和琥珀酸脱氢酶）水平。实时荧光定量PCR（qPCR）检测己糖激酶Ⅱ（HKⅡ）、丙酮酸激酶M2（PKM2）和葡萄糖转运体1（GLUT1）mRNA水平。CCK-8法检测胃癌MGC-803细胞的增殖活性。流式细胞术检测胃癌细胞的凋亡情况。结果　胃癌患者血清Vit B2水平低于对照组［（207.85±39.71）μg/L vs. （246.07±45.43）μg/L］,且血清Vit B2水平与胃癌患者的TNM分期和分化程度有关;与0 μmol/L Vit B2组相比,25、50、100 μmol/L Vit B2组细胞葡萄糖消耗量和乳酸生成量均降低,琥珀酸脱氢酶含量均升高,HKⅡ、PKM2和GLUT1 mRNA水平均降低（均P＜0.05）;且50 μmol/L Vit B2组变化最明显。对照组、Vit B2组、阿帕替尼组和联合用药组胃癌细胞增殖活性依次降低,细胞凋亡率依次升高,组间多重比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论　胃癌患者血清Vit B2水平降低,Vit B2和阿帕替尼联合用药可提高其对胃癌的抗肿瘤效果。     

多西紫杉醇对人鼻咽癌CNE-2细胞辐射敏感性及侵袭转移相关因子表达的影响

目的：研究多西紫杉醇（docetaxel）对人鼻咽癌CNE-2细胞放疗敏感性的作用及对侵袭转移相关因子MMP-2、MMP-9表达的影响。方法：采用CCK-8法检测多西紫杉醇对CNE-2细胞增殖能力的影响,克隆形成实验测定多西紫杉醇对细胞放疗敏感性,化学发光法检测MMP-2启动子质粒转染细胞后双荧光素酶活性,荧光定量PCR法检测细胞MMP-2、MMP-9mRNA表达,Westernblot法检测细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果：多西紫杉醇对GNE-2细胞增殖有明显的抑制作用,24、48、72h的IC50值分别为30．6、25．4、12．8gmol／L;无毒剂量（5gmol／L）多西紫杉醇处理CNE-2细胞后,其对放疗的敏感性明显增强（P〈0．05）,MMP-2启动子活性比未处理组显著降低;MMP-2和MMP-9基因rnRNA和蛋白表达均较未处理组下降。结论：多西紫杉醇联合放疗能显著提高人鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性,其作用机制可能与其抑制细胞内MMP-2、MMP-9基因转录,下调细胞内MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。     

下调 HER2 降低自噬活性抑制人肺癌细胞增殖 转移作用的体外研究

目的 探讨下调 HER2 表达是否抑制细胞自噬活性, 从而影响人肺癌细胞的增殖、 迁徙和侵袭。方法 采用浓度 5 μmol/L 自噬抑制剂 3-MA、 10 μmol/L HER2 抑制剂 Neratinib 分别作用人肺癌细胞 A549。Western blot 检测肺癌细胞 A549 中 HER2、 Beclin-1 及 LC3B （Ⅱ/Ⅰ） 蛋白表达水平; Wound healing 和 Transwell invasion 实验检测 细胞迁徙、 侵袭能力; 四甲基偶氮唑盐 （MTT） 检测细胞的增殖能力。结果 Neratinib 和自噬抑制剂 （3-MA） 作用 24 h 后, 细胞 HER2、 Beclin-1 及 LC3B（Ⅱ/Ⅰ）蛋白表达水平显著低于阴性对照组; Neratinib、 自噬抑制剂（3-MA）处理组 的细胞增殖、 迁徙和侵袭能力显著低于阴性对照细胞。结论 下调 HER2 能降低人肺癌细胞 A549 的自噬活性并抑 制其增殖、 迁徙和侵袭     

五味子乙素对HK-2细胞缺氧损伤的保护作用

卢爱龙 1, 谭小月 2, 张勉之 3△, 吴银娜摘要： 目的 探讨五味子乙素 （Sch B） 对氯化钴 （CoCl2） 诱导的人类近端肾小管上皮 （HK-2） 细胞缺氧损伤的保护作用及其可能机制。方法 取离体培养 HK-2 细胞, 随机分为 4 组。对照 （C） 组： 细胞未经任何处理。CoCl2组 （化学乏氧组）： 加入 600 μmol/L 的 CoCl2 处理 24 h。Sch B 预保护（CoCl2+ Sch B）组： 分别加入终浓度为 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 预处理 2 h 后, 其余操作同 CoCl2 组。Sch B 组： 分别加入终浓度 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 处理 2 h。CCK-8 试剂盒检测各组细胞活性; AnnexinV-FITC/PI 双标记流式细胞仪检测各组细胞凋亡率; Western Blot 检测各组缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白表达; RT-PCR 检测各组 HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶（iNOS） mRNA 表达。结果 与对照组相比, CoCl2组细胞活性明显降低, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量和 iNOS mRNA 表达量显著增加, HIF-1α mRNA 表达量差异无统计学意义; Sch B 预保护组较 CoCl2组细胞活性显著增加, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量、 HIF-1α及 iNOS mRNA 表达量均显著减少; Sch B 组与对照组细胞活性、 细胞凋亡率差异无统计学意义, Sch B 组几乎不表达 HIF-1α蛋白。结论 Sch B 可能通过抑制 HIF-1α蛋白和 iNOS mRNA 的表达减少 HK-2 细胞的凋亡, 从而对 HK-2 细胞缺氧损伤起保护作用。     

黄芩苷干预肺腺癌细胞前后肿瘤细胞侵袭能力的变化

目的研究黄芩苷(baicalin)对人肺腺癌细胞株A549侵袭能力的影响,探讨baicalin抑制肺腺癌细胞侵袭能力的相关机制。方法分别用0、0.5、1、2、4、8mg/Lbaicalin处理A549细胞株,对照组加等量0.5%DMSO,孵育48h后,细胞划痕试验测定细胞迁移抑制率;分别用上述浓度的baicalin处理A549细胞株16h,Transwell小室侵袭试验测定细胞侵袭抑制率;2mg/Lbaicalin处理细胞48h,RT-PCR方法分别测定基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、细胞间黏附分子(ICAM)-1的mRNA表达。结果 baicalin可明显抑制人肺腺癌细胞株A549的迁移和侵袭,与对照组(0mg/Lbaicalin)比较,baicalin处理组MMP-2、MMP-9、ICAM-1mRNA表达和活性均显著下降(均P<0.05)。结论 baicalin对人肺腺癌细胞的侵袭能力有明显抑制作用,其机制可能与下调MMP-2、MMP-9、ICAM-1表达有关。